迷迭香酸烷基酯的来源及药理活性研究进展

迷迭香酸是一种广泛存在于唇形科植物中的天然水溶性酚酸化合物,由咖啡酸和3,4-二羟基苯基乳酸酯化缩合而成,其具有抗氧化、抗菌、抗炎、抗肿瘤等广泛的药理活性。迷迭香酸衍生物主要是通过对迷迭香酸侧链羧基进行结构改造所得到的一系列化合物,其中具有不同长度烷基链的迷迭香烷基酯,研究最为广泛。迷迭香酸烷基酯体外药理活性研究显示,其具有抗心血管疾病、抗氧化、抗菌、抗炎、抗过敏等药理活性,而且随着酯链长度的不同其活性强度及作用机理存在一定差异。本文主要对迷迭香酸烷基酯的来源及其药理活性进行综述,为迷迭香酸及迷迭香酸烷基酯在临床上的进一步开发利用提供理论依据。     

川白芷抑菌活性及对铜绿假单胞菌群体感应的抑制作用

为寻找更加有效的抑菌杀菌药物,本研究利用琼脂平板打孔法和倍比稀释法评价川白芷不同溶剂萃取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌以及肺炎克雷伯氏菌的抗菌活性;特别是通过对铜绿假单胞菌毒力表型的影响研究考察该药物对病菌群体感应是否具有抑制作用。研究结果表明:川白芷提取液对四种细菌均有不同程度的抑制效果,且随提取物浓度增大抑制效果增强;进一步分离发现,三氯甲烷、乙酸乙酯和正丁醇提取物对四种细菌均有一定的抑制效果,其中乙酸乙酯萃取物的抑菌效果最佳;对铜绿假单胞菌的四种毒力表型的影响研究结果表明川白芷具有抑制铜绿假单胞菌群体感应的能力。试验表明川白芷的活性成分可以作为一种新型的群体感应抑制剂,其具有抑制多种细菌能力的同时不易产生耐药性,表明白芷这一传统中草药在现代医疗中具有较好的应用潜力。     

赖氨酸酰化酶的重组表达及其催化合成ε-月桂酰-L-赖氨酸

来源于链霉菌的赖氨酸酰化酶Sm-ELA能催化赖氨酸和月桂酸在水相中合成月桂酰赖氨酸,避免了采用化学合成法所必需的高温和有机溶剂条件,是一种节能、环境友好的替代方法。构建了过表达链霉菌赖氨酸酰化酶基因的重组质粒pET28a-Sm ELA和pTrcOmpXK_(122)Sm ELA,分别实现了该酶在大肠杆菌胞内和细胞表面的活性表达。比较两种不同表达方式的效果后,将重组酶应用于催化合成月桂酰赖氨酸的反应中,结果显示,在赖氨酸浓度为50 mmol/L,月桂酸浓度为10 mmol/L时,反应24 h,月桂酸转化率最高达到31.1%。     

赖氨酸酰化酶的重组表达及其催化合成ε-月桂酰-L-赖氨酸

来源于链霉菌的赖氨酸酰化酶Sm-ELA能催化赖氨酸和月桂酸在水相中合成月桂酰赖氨酸,避免了采用化学合成法所必需的高温和有机溶剂条件,是一种节能、环境友好的替代方法。构建了过表达链霉菌赖氨酸酰化酶基因的重组质粒pET28a-SmELA和pTrcOmpXK₁₂₂SmELA,分别实现了该酶在大肠杆菌胞内和细胞表面的活性表达。比较两种不同表达方式的效果后,将重组酶应用于催化合成月桂酰赖氨酸的反应中,结果显示,在赖氨酸浓度为50 mmol/L,月桂酸浓度为10 mmol/L时,反应24 h,月桂酸转化率最高达到31.1%。     

蛇毒抗菌的比较性研究

目的 研究蛇毒粗毒的抗菌作用,并比较不同蛇毒对不同细菌的抑制效果.方法 采用抑菌环法测定蛇岛蝮、江浙蝮和短尾蝮蛇毒粗毒对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌以及白色念珠菌的抗菌作用,比较不同蛇毒粗毒的抗菌效果;加入过氧化氢酶(catalase),考察蛇毒抗菌作用的变化.结果 (1)3种蛇毒粗毒对5种细菌均呈现不同程度的抑制作用.(2)3种蛇毒粗毒对5种细菌的抑制作用大小依次为:金黄色葡萄球菌＞白色念珠菌＞大肠埃希菌或铜绿假单胞菌＞枯草芽孢杆菌.(3)加入catalase后,蛇毒的抗菌作用明显减弱.结论 (1)3种蛇毒粗毒均具有一定的抗菌作用,并具有明显抑菌选择性.(2)3种蛇毒的抗菌效果不同,蛇岛蝮蛇抗菌作用最强.(3) catalase能显著降低蛇毒的抗菌活性,表明L-氨基酸氧化酶是蛇毒起抗菌作用的主要成分.     

三尖杉酯碱抑制脱氧核糖核酸生物合成机制的研究——Ⅲ.三尖杉酯碱抑制作用动力学及其衍生物作用的比较

本文报告了三尖杉酯碱抑制艾氏腹水癌细胞DNA聚合酶α的动力学。三尖杉酯碱的抑制作用与反应体系中的模板DNA量有关,过量的DNA可降低药物的抑制作用,但不能完全消除药物的抑制。并证明三尖杉酯碱与模板DNA对DNA聚合酶α是混合型抑制,当三尖杉酯碱浓度为10μM时,其K_i值为9.5μM,K_m值为13μg DNA/100μl。三尖杉酯碱抑制DNA聚合酶α的能力不受反应体系中四种脱氧核苷三磷酸底物浓度的影响,通过同时改变四种底物浓度,或固定三种底物浓度只改变其中一种底物的量,或采用限制性DNA合成系统(Limited DNA Synthesis)即在完全体系中省略去某一底物,均证明三尖杉酯碱与四种底物对DNA聚合酶α为非竞争性抑制,当三尖杉酯碱浓度为4μM时,对dCTP、dGTP和dTTP的K_i值分别为12μM、11μM和12μM。本文也比较了三尖杉酯碱衍生物——高三尖杉酯碱、异三尖杉酯碱和表三尖杉酯碱对DNA聚合酶α的抑制作用。结果表明,当药物浓度相同时,高三尖杉酯碱的作用较三尖杉酯碱和异三尖杉酯碱强,而三尖杉酯碱和异三尖杉酯碱的作用相近;表三尖杉酯碱本身对DNA聚合酶α无抑制作用,也未见其在无细胞系统中对三尖杉酯碱的抑制能力有加强作用。以上药物对E.coli DNA聚合酶Ⅰ也有相似的抑制作用。     

精氨酸对牛胰核糖核酸酶氧化复性的时相性抑制作用

精氨酸常在重组蛋白的体外复性中,作为一种小分子添加剂用于抑制蛋白聚集。精氨酸对蛋白复性折叠过程本身的影响尚不清楚。首次以不易聚集的牛胰核糖核酸酶为研究对象,通过飞行质谱检测氧化复性中间体的变化,通过酶学活性检测蛋白活性的恢复过程,观察了精氨酸对氧化复性的直接影响。发现不同浓度精氨酸对牛胰核糖核酸酶的氧化复性有直接的抑制作用。特别在0.5 mol/L浓度时,精氨酸对牛胰核糖核酸酶氧化复性的抑制作用具有独特的时相依赖性:早期复性可持续至4 h,其活性恢复达30%后,晚期复性基本终止。这种抑制特征与脲的抑制作用有明显的不同,精氨酸没有完全抑制关键结构中间体的形成。结果说明,牛胰核糖核酸酶的氧化复性,除经关键结构中间体的主要通路外,还可能存在一个潜在复性通路,它是其氧化复性后期的关键限速通路。该复性通路可以被0.5 mol/L精氨酸完全阻断。     

江蓠内生真菌NSS1蛋白活性的初步研究

为促进江蓠内生真菌NSS1抗菌蛋白的应用研究,利用硫酸铵沉淀法制备抗菌蛋白,最佳硫酸铵饱和度为65%。采用滤纸片法检测其对细菌指示菌的抑菌活性,抗菌粗蛋白均能抑制五种细菌指示菌的生长,当浓度达到750 μg/mL时,抑制效果最好。采用邻苯三酚自氧化法测定蛋白对超氧阴离子自由基(O-2)的清除作用,MTT法检测蛋白对肿瘤细胞的影响。抗菌蛋白在100℃以下,pH中性时抑菌活性稳定,对紫外线照射不敏感,丙三醇、甲醇和胰蛋白酶对抗菌蛋白的抑菌活性没有影响。不同浓度的蛋白液对超氧阴离子均有清除效果。当蛋白浓度达到360 μg/mL时对肿瘤细胞的抑瘤作用最强。上述结果显示抗菌蛋白具有较强的抑菌活性、抗氧化活性和抗肿瘤活性。     

胜红蓟化感作用研究Ⅶ.胜红蓟素类似物的合成及其对植物与微生物的抑制作用

合成了5种胜红蓟素的结构类似物,将它们与胜红蓟素在对植物和微生物的抑制活性上进行了比较。结果表明,在100mg/l浓度时,对于萝卜和黑麦草两种受体,类似物6－甲酰基－7－甲氧基2,2－二甲基－2H－苯并吡喃和7－羟基－6－甲酰基－3,4－二氢－2,2－二甲基－2H－苯并吡喃较胜红蓟素有更强的抑制作用,尤其是对受体 根长的抑制作用达到显著,这两种类似物同时也具有较强的抗菌活性,在400mg/l浓度下,它们对两种真菌：水稻纹枯病菌和辣椒疫霉病菌的抑制率达到100％;在2000mg/l浓度下,7－羟基－6－甲酰基－3,4－二氢－2,2－二甲基－2H－苯并吡喃还对两种细菌：水稻白叶枯病菌和水稻基腐病菌有较强的抑制作用。研究揭示了构成胜红蓟素基本结构的2,2－二甲基－2H－苯并吡喃对植物无明显抑制作用,对微生物的抑制作用也不强,但当其6位或7位带有活性取代基后,对植物和微生物抑制作用都显著增强。     

天山堇菜提取物的抑菌活性研究

目的:研究天山堇菜提取物抗菌活性.方法:用85%乙醇采用回流浸煮提取天山堇莱生物碱,用超声法提取黄酮化合物,以此为供试液对4种细菌和5种真菌做抑菌实验.结果:供试液对供试细菌有不同程度的抑制作用,两种提取物对肺炎克雷伯菌的最小抑菌浓度是0.175g/ml;对臭鼻克雷伯菌的最小抑菌浓度分别是0.15g/ml和0.175g/ml;对类产碱似单胞菌和奇异变型杆菌的最小抑菌浓度是0.20g/ml,而对所选真菌抑制效果却不明显.结论:天山堇菜有一定的抗菌活性,是有研究开发价值的一种中草药.     

叠氮水杨酰胺类化合物对呼吸链琥珀酸-细胞色素c还原酶的抑制作用

合成了３－叠氮基－Ｎ－正癸烷基水杨酰胺和５－叠氮基－Ｎ－正癸烷基水杨酰胺并检测了它们对呼吸链酶系从琥珀酸到细胞色素ｃ段电子传递活性的抑制作用．两种化合物对琥珀酸－泛醌还原酶的抑制能力基本相同,而５位叠氮基取代物对泛醌－细胞色素ｃ还原酶的抑制能力较３位叠氮基取代物为强．它们与泛醌反应抑制剂３－硝基－Ｎ－正癸烷基水杨酰胺相比较,其抑制性质基本相似,只是抑制能力较后者为弱     

中药大黄的综合研究 Ⅶ.蒽醌衍生物抗菌作用机制 (1)对金黄色葡萄球菌呼吸的影响

(1)大黄酸、大黄素和芦荟大黄素对金黃色葡萄球菌在培养基中的呼吸有很強的抑制作用,1抑菌单位浓度,60分钟內,抑制率分别为42%、83%和75%。(2)大黄素对金黃色葡萄球菌氨基酸、糖和糖代謝中間产物的氧化和脫氫都有不同程度的抑制作用,其中以对谷氨酸和精氨酸的氧化抑制最強,其抑制率可达80%以上。(3)核黃素、烟酸及巯基化合物对大黄素抑制金黃色葡萄球菌的呼吸及氧化某些氨基酸和糖代謝中間产物有竞爭性拮抗作用。文中討論了大黄蒽醌衍生物抑制金黄色葡萄球菌呼吸的作用机制,可能是由于它影响了吡啶核苷酸、黄素核苷酸及必需巯基的酶系,尤其是前二者。     

几种杀虫剂对棉铃虫头部酯酶的联合抑制作用

测定了几种药剂及其组合对棉铃虫Helicoverpa armigera头部酯酶活性的独立与联合抑制作用。结果显示：久效磷、敌百虫、呋喃丹对酯酶活性抑制中浓度分别为:2.4443×10^-6、3.4562×10^-7、2.6302×10^-5mol/L。药代动力学分析结果显示:久效磷与呋喃丹对酯酶抑制方式为竞争性抑制,敌百虫为非竞争性抑制。久效磷+敌百虫与敌百虫+呋喃丹两种药剂组合处理后,对酯酶抑制均增强,抑制中浓度分别为:1.0846×10^-6、5.1786×10^-6mol/L,对酯酶的抑制作用属非竞争性抑制作用。而久效磷+呋喃丹组合对酯酶抑制活性相加,为竞争性抑制作用。结果说明杀虫剂与酯酶的药代动力学互作对混剂的酯酶的抑制作用方式和活性具有重要影响。     

具抗菌及乙酰胆碱酯酶抑制活性珊瑚真菌的筛选

为开发利用珊瑚真菌资源,以徐闻珊瑚保护区珊瑚样品中分离鉴定的43株海洋真菌为研究对象,采用双层平板法和Ellman法分别对其进行抗菌和乙酰胆碱酯酶（AChE）抑制活性筛选。结果显示,43株菌株至少对一种指示菌有抑制作用,且有12株菌株对革兰阳性菌和革兰阴性菌均表现出不同程度的抗菌活性,抗菌谱较广;当浓度为1 mg/mL时,有8株菌株的发酵液提取物对乙酰胆碱酯酶的抑制率达到50%以上。其活性菌株中曲霉属(Aspergillus)为优势属。     

甘氨酸脂肪醇酯盐酸盐抗菌作用的测试

本文用滤纸片琼脂弥散试验和活菌平板计数法比较了五种甘氨酸脂肪醇酯盐酸盐对不同细菌，霉菌的抗菌活性，认为甘氨酸癸酯盐酸盐表现出最高的抗菌活性，测试出杀死细菌繁殖体的较适浓度和时间，并讨论了抗菌能力不同的原因。     

六种微藻的抗MRSA活性筛选

本文以琼脂扩散法为体外抗菌活性测定方法,研究了六种微藻(两种绿藻,三种硅藻和一种蓝藻)的不同溶剂提取物对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的抑制活性.结果表明,每种微藻的提取物对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌具有不同程度的抑制活性.其中,蓝隐藻、牟氏角毛藻和青岛大扁藻的提取物具有良好的抗菌活性.结论:微藻是一种新的开发抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌物质的潜在资源.     

β-西柏三烯二醇对拟南芥的化感效应及其作用机理研究

以拟南芥幼苗为受体植物,研究了不同浓度二萜类化合物β-西柏三烯二醇对拟南芥生长的活性作用以及作用机理,以揭示萜类化感物质的作用机制。结果表明:(1)β-西柏三烯二醇对拟南芥幼苗的鲜重具有显著抑制作用,当处理浓度为50μmol/L时抑制作用达到显著水平,并对拟南芥鲜重的抑制率均大于30%。(2)经过β-西柏三烯二醇处理后,拟南芥叶片中叶绿素a、b含量显著下降,且抑制作用随处理浓度的增大和处理时间的延长而增加。(3)随着β-西柏三烯二醇处理浓度的增大,拟南芥中过氧化物酶(POD)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性逐渐显著降低,而过氧化产物MDA含量显著增加。可见,β-西柏三烯二醇通过抑制拟南芥体内抗氧化酶的活性,引起膜脂过氧化,从而抑制拟南芥幼苗的正常生长和生理过程,且这种抑制作用随浓度的升高而增强。     

四种中草药成分对醛糖还原醇和脂类过氧化的抑制作用

我们在体外研究了四种中草药提取物对醛糖还原酶及脂类过氧化的抑制作用。结果表明,四种中草药的提取物在不同浓度下,对醛糖还原酶活性及脂类过氧化作用均有不同程度的抑制作用,其抑制醛糖还原酶活性的作用属非竞争性抑制类型。对醛糖还原酶活性及脂类过氧化的抑制作用均随中草药提取物浓度的降低而降低。本实验的结果证明中草药中含有抗脂类过氧化及抑制醛糖还原酶的某些成分。     

山鸡椒植物源抑菌成分的筛选研究

以山鸡椒为植物材料,以活性追踪的方法测定了不同组分对几种植物病原菌的抑制活性,并从中分离纯化出一种有效抗菌物质L1。实验结果表明:粗提物不同萃取相中,乙酸乙酯相的抑制作用最好,其对杨树溃疡病菌和苹果霉心病菌抑制率达到75%以上;乙酸乙酯相各个组分对几种植物病原真菌均有一定的抑制活性,其中组分6和组分7抑菌效果强,组分6对苹果霉心病菌抑制率达到100%,组分7对番茄灰霉病菌抑制率达到100%;而对抑菌活性物质L1的抑菌活性研究中,随着L1浓度逐渐升高,对几种病原菌的抑制作用也依次增强,尤其是对苹果霉心病菌的抑制效果更加明显,在供试浓度为0.1 mg/mL时,抑制率达到100%;活性成分L1最终通过波谱学方法和文献对比确定为5,8-二羟基-67,-二甲氧基黄酮。     

没食子酸对美国白蛾幼虫营养效应及解毒酶活性的影响

美国白蛾是我国重大外来入侵害虫,寄主范围十分广泛。酚类物质是最广泛的植物次生代谢物之一,在植物抵御昆虫取食的化学防御中具有重要作用。本研究通过人工饲料添加没食子酸的方法,探究不同浓度的没食子酸对美国白蛾幼虫的营养效应及解毒酶和乙酰胆碱酯酶活性的影响。结果表明,各浓度(1.0%、1.5%、2.0%、2.5%、3.0%)没食子酸对美国白蛾4龄幼虫的近似消化率、食物利用率、相对取食量和相对生长率均具有显著影响(P<0.05),近似消化率和相对取食量不同程度下降,食物利用率和相对生长率则不同程度上升。不同浓度的没食子酸处理对美国白蛾幼虫的乙酰胆碱酯酶、羧酸酯酶、谷胱甘肽S-转移酶和细胞色素P450的活性均具有显著影响(P<0.05)。1.0%没食子酸作用时间不同,美国白蛾4龄幼虫的乙酰胆碱酯酶、羧酸酯酶、谷胱甘肽S-转移酶和细胞色素P450的活性差异显著(P<0.05)。没食子酸能够始终诱导细胞色素P450的活性,而羧酸酯酶的活性却受到抑制。不同浓度的没食子酸对乙酰胆碱酯酶作用总体上不明显,但较低浓度时(1.0%)对乙酰胆碱酯酶活性却随处理时间延长而抑制作用加强。较低浓度(1.0%~1.5%)的没食子酸对谷胱甘肽S-转移酶的活性有一定诱导作用,但随着没食子酸浓度提高谷胱甘肽S-转移酶的活性却受到一定程度的抑制。没食子酸能抑制美国白蛾幼虫的取食,并且对解毒酶和乙酰胆碱酯酶的活性表现出一定的时间效应和剂量效应,表明美国白蛾幼虫可能通过调节食物利用和解毒代谢等多种途径降低没食子酸的毒害作用,从而对含没食子酸的寄主植物产生适应。