烟草培养细胞中钙离子,钙调素与细胞质流的关系

烟草愈伤组织的培养细胞中,当钙离子载体将Ca~(2 )导入细胞时,细胞质流停止.CaM拮抗剂试验表明,高钙使细胞质流停止的效应可能与CaM无关,除W7外的多种CaM拮抗剂都明显而且可逆地抑制细胞质流。酶联免疫吸附分析(ELISA)检出培养细胞中存在有CaM。间接酶标免疫组织化学分析进一步证明CaM存在于胞质条纹中。     

细胞外钙调素对烟草悬浮培养细胞蛋白质磷酸化作用的影响

用液体闪烁计数法研究了细胞外钙调素对烟草悬浮培养细胞质蛋白质磷酸化的作用。结果表明：烟草细胞细胞质蛋白质磷酸化活性在细胞培养过程中逐渐增加,达到最高峰后又开始下降。在细胞质蛋白质磷酸化强度高峰时,加入抗CaM血清后,细胞质蛋白质磷酸化活性受到了部分抑制。加抗CaM血清后再补加CaM能够部分解除抗CaM血清对细胞质部分与细胞核部分蛋白质磷酸化的抑制作用。外加纯化钙调素可以引起烟草悬浮培养细胞细胞质蛋白质磷酸化的活性增强,并且这种增强作用具有时间（高峰为70min）与剂量（最适为CaM10^-7mmol/L）依赖性。CaM引起的细胞质蛋白质磷酸化变化与红光所引起的细胞质蛋白质磷酸化变化在时间进程上是不相同的。     

细胞外钙调素对烟草悬浮培养细胞蛋白质磷酸化作用的影响

用液体闪烁计数法研究了细胞外钙调素对烟草悬浮培养细胞质蛋白质磷酸化的作用。结果表明烟草细胞细胞质蛋白质磷酸化活性在细胞培养过程中逐渐增加,达到最高峰后又开始下降。在细胞质蛋白质磷酸化强度高峰时,加入抗CaM血清后,细胞质蛋白质磷酸化活性受到了部分抑制。加抗CaM血清后再补加CaM能够部分解除抗CaM血清对细胞质部分与细胞核部分蛋白质磷酸化的抑制作用。外加纯化钙调素可以引起烟草悬浮培养细胞细胞质蛋白质磷酸化的活性增强,并且这种增强作用具有时间（高峰为70min）与剂量（最适为CaM10-7mmol/L）依赖性。CaM引起的细胞质蛋白质磷酸化变化与红光所引起的细胞质蛋白质磷酸化变化在时间进程上是不相同的。     

钙和钙调素对机械刺激诱导的烟草悬浮培养细胞耐热性的调控

机械刺激（mechanical stimulation,MS）可提高烟草悬浮培养细胞的钙调素（calmodulin,CaM）活性,诱导烟草悬浮培养细胞耐热性的形成,外源Ca2＋可加强,而Ca2＋螯合剂EGTA、质膜Ca2＋通道阻塞剂La3＋和胞内Ca2＋通道阻断剂钌红（RR）,以及CaM拮抗剂氯丙嗪（CPZ）和三氟拉嗪（TFP）则削弱这种耐热性的形成。这些暗示Ca2＋和CaM参与MS诱导的烟草悬浮培养细胞耐热性形成的调控。     

细胞转化过程中胞内钙离子浓度的变化

使用钙离子荧光探针Ｆｌｕｏ－３ＡＭ和ＤＮＡ荧光染料Ｈｏｅｃｈｓｔ３３３４２联染细胞的方法,利用显微分光光度计ＭＰＶⅡ测量了两种温度敏感细胞—６Ｍ２和ｔｓＲＳＶＮＩＨ３Ｔ３－ＬＡ９０细胞及Ｃ３Ｈ１０Ｔ１／２和转化Ｃ３Ｈ１０Ｔ１／２细胞在不同细胞周期时相内钙的浓度,发现从Ｇ１期到Ｓ期到Ｇ２期,６ｍ２细胞当在３３℃培养时（转化状态）胞内钙的浓度〔Ｃａ＾２＋〕ｉ分别为８５．０,１３８．４２３９．０ｎｍｏｌ     

烟草表皮细胞薄层培养系统中多种组织器官发生的研究

利用烟草表皮细胞薄层培养系统,研究了离体培养下表皮毛和气孔的发生,发现斜向分裂和不均等分裂是与脱分化细胞再分化相关的分裂方式,并观察了愈伤组织气孔的适应性分化现象,此外,在茎表皮细胞薄层上成功地发生了不定根,利用花茎表皮细胞薄层也在其愈伤组织上发生了花芽。     

细胞外钙调素对百合花粉细胞内钙离子浓度的影响

以川百合（Lilium davidii Duchartre)花粉为材料,利用低温装载法在完整花粉粒中成功地装置了酯化形式的钙离子荧光指示剂fluo-3AM,利用激光共聚焦显微技术研究了细胞外钙调素对细胞内游离钙离子浓度的影响,结果发现外源纯化钙调素可以使细胞内游离钙离子的浓度升高,在一定范围内促进效果与钙调素浓度呈正相关。不能透过细胞膜的钙调素拮抗剂Ｗ７－agarose和植物钙调素抗血清处理都可 使花粉细胞质中游离钙离子浓度降低,表明内源细胞外钙调素可能在维持和促进花粉细胞质中游离离子方面具有重要作用。     

测定植物细胞质中游离Ca^2＋浓度的荧光指示剂法

本文介绍测定胞质游离Ｃａ＾２＋浓度最常用的荧光指示剂法在测定植物细胞质游离Ｃａ＾２＋浓度上的应用。     

细胞核,细胞质基因与光合作用的关系

光合作用受细胞核及细胞质基因组垢共同控制。参与叶绿素,类胡萝卜素合成和光合作用过程的许多酶都由核基因控制,而光合电子传递体大部分受核基因控制,少部分受细胞质基因控制。光合作用过程包括光反应与暗反应两个阶段。光反应发生在类囊体膜上,而类囊体膜４个组成部分细胞核,持基因共同编码。在暗反应中,催化ＣＯ２固定的关键酶核酮糖二磷酸羧化酶／加氧酶由大,小亚基组成,大亚基由叶绿体基因编码;小亚基由核基因控制。     

与烟草细胞质雄性不育相关的线粒体基因atp9的mRNA研究

已知导入未编辑atp9 mRNA的烟草表现细胞质雄性不育(CMS),因此认为线粒体基因atp9是引起高等植物CMS的主要基因。为了解atp9在CMS中的作用机制,从3对烟草不育系及其同型保持系中提取atp9,利用实验与理论结合来分析其mRNA在编辑前后以及在不育系及其同型保持系中的一维、三维信息差别。结果表明,atp9mRNA一维信息方面的差异,更重要的是二级结构的差异和稳定性,可能是影响ATP合成而导致CMS的根本原因。     

烟草NC89叶肉细胞原生质体培养再生植株及影响因素的研究

生长１２０天的ＮＣ８９无菌苗叶片在Ｏｎｏｚｕｋａ Ｒ－１０和Ｍａｃｅｒｏｚｙｍｅ Ｒ－１０的混合酶液中,酶解、收集、纯化,在修改的ＮＴ培养基上,应用液体－固体双层培养,原生质体经生长、分裂,形成愈伤组织,在多种分化培养基上,分化成再生植株。试验中对传统的酶解、收集方法进行了改进并对原生质体的分裂和愈伤组织的分化条件作了研究,对影响分化的多种因素作了深入的比较和探索,同时,本试验表明,叶片的生长状态     

机械刺激诱导的烟草悬浮细胞一氧化氮产生途径及其与C矿和钙调素的关系

通过提高摇床转速对烟草细胞施加机械刺激（Ms）可诱导其胞内一氧化氮（No）的快速产生和一氧化氮合酶（Nos）活性的提高,这种MS诱导的NO产生可被N0清除剂cPTIO和NOS抑制剂L-NMMA显著抑制。此外,Ca2＋螯合剂EGTA、质膜Ca＋通道阻断剂La3＋、胞内Ca2＋通道拮抗剂钌红,以及钙调素抑制剂CPZ和TFP预处理均不同程度地抑制了机械刺激诱导的烟草细胞NO的产生,而机械刺激过程中钙调素活性显著上升并与NOS活性和NO含量的变化相一致。这些结果暗示着（类）Nos酶催化的精氨酸依赖途径可能是机械刺激诱发烟草细胞NO产生的主要途径,Ca2＋／CAM可能通过调节（类）NOS活性来调控No的产生。     

外源钙调素与拟南芥悬浮培养细胞结合位点的观测及其胞外效应

以拟南芥悬浮培养细胞为实验体系,借助外源荧光及同位素标记钙调素,研究结果表明外源钙调素不能被主动内吞入细胞内,而是主要以完整分子形式结合在细胞外表面;外源纯化钙调素可促进正向型质膜囊泡中的鸟苷酸三磷酸水解酶活性升高,也可引起拟南芥悬浮细胞质游离钙离子浓度的特异升高,表明外源钙调素可能通过细胞表面位点跨膜信号转换为细胞内信号,从而调节生物学活性。     

一种改进的烟草悬浮细胞继代方法

在植物细胞悬浮培养过程中,对影响细胞系均一性和质量的细胞团块形成的克服方式一般有2种。一是分级过滤继代,即用不同目数的细胞筛除去大的细胞团块和细胞碎片,将小细胞团和单细胞转移到新培养基中作继代培养。此方法操作     

机械刺激诱导的烟草悬浮培养细胞耐热性及其与过氧化氢的关系

机械刺激可诱发烟草悬浮培养细胞中H2O2的积累,提高烟草悬浮培养细胞在高温胁迫下的存活率和再生能力,缓解高温胁迫下的细胞活力丧失和膜伤害,外源H2O2预处理也可提高烟草悬浮细胞的耐热性。这些暗示H2O2作为信号分子可触发机械刺激诱导的烟草悬浮细胞耐热性形成。