建兰与纹瓣兰种间杂种胚培养研究

采用人工授粉的方法,以‘小桃红’建兰为母本、纹瓣兰为父本进行杂交,获得了种间远缘杂交后代植株。杂交果苹与母本自交果荚的大小差异大小,但鲜重明显大于母本,果荚内的种子量却少于母本。杂种胚离体培养90d出现绿色原球胚,210d可萌发出大量植株;而‘小桃红’自交种子培养210d只形成少量绿色根状茎。杂种胚的萌发具有杂种优势,不仅萌发快,而且出苗率高,萌发时先形成原球胚,原球胚上长出大量小根毛,继而形成大量假鳞茎,假鳞茎经转瓶培养后,分化形成大量健壮植株,分化率高。     

濒危莲瓣兰杂交育种及原生地种子萌发的研究

以莲瓣兰'大雪素'(Cymbidium tortisepalum 'Daxuesu')和'剑阳蝶'(Cymbidium tortisepalum 'Jianyangdie')为亲本,研究莲瓣兰种间杂交育种、杂交种子在原生地播种共生萌发及植株形态发生过程,为莲瓣兰杂交育种新品种选育及杂交种子原生地播种种苗快速繁殖奠定基础.结果表明,莲瓣兰种间杂交结实率在90.0%～93.3%之间,杂交亲和性较强;莲瓣兰杂交种子在原生地播种6～12月后,能被萌发菌侵染、种胚突破种皮形成类原球茎,种子在原生地播种容易萌发;类原球茎转绿成根状茎、根状茎伸长成丛生型根状茎、丛生型根状茎顶端分生组织分化出原球茎、原球茎分化出叶和根、根状茎逐渐退化完成植株再生过程极其缓慢,需要4～6年的时间.     

47个建兰品种的SRAP遗传多样性分析

为了揭示建兰(Cymbidium ensifolium)品种的遗传多样性和亲缘关系,为建兰种质资源的有效利用和开发提供依据,本研究采用SRAP(sequence-related amplified polymorphism)分子标记技术对来自四川、台湾、广东的47个建兰品种的遗传多样性进行分析,应用NYSYS软件对SRAP-PCR结果进行聚类分析。结果从88对引物中筛选获得12对特异性强、稳定性好的引物进行SRAP分析,共扩增出188条带纹,其中147条为多态性位点,平均每组引物扩增出12条多态性带。聚类分析表明,47个品种可以分为4个类群:第Ⅰ群由来自四川的3个品种组成;第Ⅱ群的23个品种中有18个来自四川、3个来自广东、2个来自台湾;第Ⅲ群的12个品种中有11个品种源于台湾,1个源于四川;第Ⅳ群仅有1个来自四川,其他品种均来自台湾。结果表明,由于人工驯化,造成了建兰品种遗传背景的混乱,而SRAP分子标记技术能有效地分析建兰品种的遗传多样性和亲缘关系。     

17个建兰品种光合特性分析

以17个建兰(Cymbidium ensifolium)品种为材料,采用改良的丙酮法提取叶绿素,再通过Arnon丙酮法公式计算光合色素含量,利用捷克FluorCam开放式叶绿素荧光仪测定不同品种的叶绿素荧光参数。结果表明,17个建兰品种的光合色素和叶绿素荧光参数具有不同程度的差异,其中‘铁骨素’(C. ensifolium ‘Tiegusu’)、‘逸红双娇’(C. ensifolium ‘Yihongshuangjiao’)和‘闽南黄蝶’(C. ensifolium ‘Minnanhuangdie’)的光合色素含量高于其他品种,表明这3个品种具有良好的光合效率,吸收光能的能力较强;‘铁骨素’最大荧光产量(Fm)、Kautsky诱导效应最大荧光(Fp)、PS Ⅱ原初光能转化效率(Fv/Fm)和非光化荧光淬灭系数(NPQ)均为最高。综上可知,‘铁骨素’的光合生理特性优于其他品种,可作为优良建兰品种进行种植推广。     

菌根真菌感染墨兰与建兰根状茎对呼吸速率和几种氧化酶活性的影响

用从野生建兰部分离的菌根真菌P15菌株感染墨兰Cymbidium sinense和建兰Cymbidium ensifolium的根状茎后,使寄主的呼吸速率、细胞色素C氧化酶、过氧化物酶活性明显增高,而感染前后IAA氧化酶活性变化不明显。两个品种相比较,建兰根状茎的呼吸速率、细胞色素C氧化酶和过氧化物酶活性均比墨兰的高,但墨兰的根状茎IAA氧化酶活性则高于建兰。     

低温胁迫对建兰叶片内源多胺含量的影响

以素心建兰为材料,研究低温胁迫(5℃)对建兰内源多胺含量的影响。结果表明,在低温胁迫下建兰生长期的叶片多胺(PAs)总量和亚精胺(Spd)、腐胺(Put)含量都表现为先升后降的变化,精胺(Spm)含量则是下降然后上升最后稳定在比原来含量更高的水平上,说明有可能在低温胁迫下建兰通过调节内源多胺的总量和不同多胺种类的比例来抵御低温对生理的破坏作用;开花期的建兰叶片因受低温胁迫的影响未能合成足够的亚精胺(Spd),从而抑制了建兰的开花。     

建兰规模化生产体系规范化探讨

对建兰规模化生产体系,包括园区建设、繁殖与栽培、日常管理、病虫害防治等主要环节进行规范化探讨,以期为建兰商品化生产提供参考。     

Plant regeneration from callus culture of Cymbidium ensifolium var. misericors

Totipotent calli of Cymbidium ensifolium var. misericors, a locally grown orchid of high commercial value, were induced from sections of pseudobulbs, rhizomes and roots of seed-derived plantlets on 1/2-strength Murashige and Skoog medium plus 10 mg/l 2,4-dichlorophenoxyacetic acid and 0.1 mg/l thiadiazuron. The calli could be maintained by subculturing in the same medium. The calli could be induced to develop further along one of three distinct morphogeneic routes: (1) production of rhizomes, (2) production of shoot buds, or (3) development of granular embryoids. Efficient mass propagation was possible via rhizome proliferation and embryoid formation. Received: 28 May 1997 / Revision received: 19 August 1997 / Acceptance: 2 September 1997     

墨兰试管苗植株的发育解剖学研究

用石蜡切片和扫描电镜对墨兰试管苗植株的生长发育进行了研究。发现幼叶中脉附近的叶肉细胞类似栅栏组织,随着叶片的不断成熟,叶片基部中脉附近的叶肉细胞逐渐变为近圆形或椭圆形,而叶尖部和叶中部中脉附近的叶肉细胞仍似栅栏组织。茎的发育经历了原球茎、根状茎和假鳞茎3个阶段。原球茎的大部分细胞都含有淀粉粒,根状茎的皮层细胞含淀粉粒,而假鳞茎几乎不含淀粉粒。幼根没有髓,皮层细胞含淀粉粒：成熟根具含淀粉粒的髓。出瓶苗上即带有4个芽,一般只有最外侧叶腋的1个花芽和最内侧叶腋的1个叶芽发育。     

建兰叶艺品种光合色素含量及叶绿素荧光特性分析

以建兰栽培品种‘八宝奇珍’Cymbidium ensifolium ‘Ba Bao Qi Zhen’为材料,对其正常绿色叶片及黄化变异叶片的光合色素含量、叶绿素荧光参数进行比较。结果表明,‘八宝奇珍’黄化变异叶片的叶绿素总量、叶绿素a 和叶绿素b 含量均显著低于正常绿色叶片,且随着黄化面积的增大呈现递减趋势;黄化变异叶片的初始荧光量(Fo)、最大荧光产量(Fm)、Kautsky 诱导效应最大荧光(Fp)、稳态光适应光化学淬灭系数(qP)以及光适应稳态荧光产量(Ft_Lss)均显著低于正常绿色叶片;PSⅡ原初光能转化效率(Fv/Fm)与正常绿色叶片无明显差异;稳态非光化学荧光淬灭系数(NPQ)高于正常绿色叶片。     

Effects of Cytokinins on In Vitro Seed Germination and Early Seedling Morphogenesis in Lotus corniculatus L.

We determined the effects of zeatin (ZEA), isopentenyl adenine (2iP), kinetin (KIN), benzyladenine (BA), and thidiazuron (TDZ) on seed germination, elongation of seedling shoots and roots, frequency of regeneration, and the number of regenerants per seedling in Lotus corniculatus L. Sterilized seeds were cultured in vitro on Murashige and Skoog (1962) medium containing 3% sucrose, 0.7% agar, and various cytokinins (0, 0.08, 0.22, 0.35, 0.80, 2.20, and 3.50 μM). After 30 days, seedlings were transferred to cytokinin-free medium for another 60 days. All cytokinins stimulated the rate and percentage of seed germination at least twofold in optimum concentrations; TDZ and ZEA were the most active, followed closely by BA, whereas KIN and 2iP stimulated germination in higher concentrations only. Elongation of shoots and roots was strongly inhibited at the lowest TDZ and BA concentrations, whereas ZEA, KIN, and 2iP exerted moderate, dose-dependent inhibition. The frequency of regenerant-producing seeds was highest on ZEA and BA, whereas the greatest number of regenerants per seedling was found on TDZ. It is concluded that the culture of seeds on cytokinin-containing media, followed by transfer to cytokinin-free medium, is a suitable procedure for rapid production of a large number of uniform regenerants. The presumed role of particular cytokinins is discussed.     

不同浓度活性炭对墨兰离体培养的影响

以墨兰(Cymbidium sinense)地下根状茎段为外植体,探讨不同浓度活性炭对其离体培养的影响。结果表明,在MS+NAA 2.0 mg/L+10%椰汁的培养基中加入1.0 g/L活性炭对原球茎诱导效果最好;MS+BA 3.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+4.0 g/L活性炭适合于不定芽分化;在1/2 MS+NAA 1.0 mg/L+BA 0.5 mg/L+10%椰汁的培养基中加入0.5~3.0 g/L活性炭有利于提高成苗率。     

膀胱果种子离体萌发与植株再生

以膀胱果种子为外植体,通过对基本培养基、生长调节剂配比及移栽基质的筛选,初步建立其离体培养再生体系。结果表明,MS培养基是较适合膀胱果种子萌芽和幼苗生长的基本培养基;诱导下胚轴脱分化成愈伤组织的较佳培养基配方为MS + 2,4-D 0.5 mg/L + 6-BA 0.5 mg/L;顶芽增殖培养的最佳培养基为MS + KT 2.0 mg/L + NAA 0.2 mg/L;芽苗生根的最佳培养基为1/2MS + NAA 1.0 mg/L;以泥炭土作为移栽基质,成活率达70%,且幼苗生长健壮。     

基本培养基与生长调节剂组合对素心建兰根状茎增殖和芽分化的影响

以素心建兰茎尖诱导产生的根状茎为材料,研究不同基本培养基和几种生长调节剂组合对其增殖与芽分化的影响。结果表明,MS培养基为最佳增殖培养基,增殖的最适培养周期为40 d;NAA 0.2 mg/L+6-BA 2.0 mg/L组合最适于根状茎分化,芽分化率达445%。     

常绿阔叶林内和林窗中栲树的种子萌发和幼苗生长

对浙江天童地区常绿阔叶林林窗和林内两种生境下人工播埋的栲树（Castanopsis fargesii）种子的萌发和当年幼苗的生长进行了研究。在林窗和林内两种生境的栲树种子（单粒重约0.5-0.6g）的萌发率没有明显的差异,分别为31.7±7.1％和33.3±2.l％,一年龄幼苗的平均株高在生长季末分别为 6.56±1.2cm和 5.88±1.09cm,两者有明显差异,而平均叶长、平均叶宽以及平均根长等指标没有差异;幼苗的生物量也没有明显差异。但一年龄幼苗在生长过程中,其生物量分配有所变化,在林窗条件下,幼苗逐渐将较多的生物量分配于根,而林内幼苗则逐渐将生物量较多地分配于叶,生物量的分配反映出幼苗在不同生境下的适应性特征。     

云南火焰兰种子无菌萌发和试管育苗

对云南火焰兰进行无菌播种技术试验.结果表明,适宜萌动的培养基为1/4MS 椰子水20% 蛋白胨1 g L-1 蔗糖10 g L-1,播种30 d时萌动率可达93.1%;适宜萌发的培养基为VW 椰子水10%,培养75 d时萌发率达36.6%.盐浓度较高的MS培养基不适合种子萌发和原球茎生长,低盐的KC培养基上种子能较好地萌发和成苗;添加椰子水可明显提高种子萌动率,并有利于原球茎的生长和分化.光培养和暗培养对种子萌动的影响差异不明显,但暗培养3周会对种子后期发育不利.添加150 g L-1的苹果匀浆有利于幼苗生长.试管苗移栽成活率在95%以上.     

Asymbiotic Seed Germination and in vitro Seedling Rapid Development of Paphiopedilum spicerianum

In this paper, we studied the asymbiotic seed germination and seedling development of Paphiopedilum spicerianum, a wild plant with extremely small populations (PSESP) in China. By analogizing the influences of different media, seed maturity, pretreatments and lights on the seed germination, the results showed that the best germination condition is using the seeds at 270 days after pollination, pretreating with 1% NaOCl for 40 min, on the 1/4MS+10% coconut water medium under 24 hours darkness for 4 weeks. For seedling formation, 30g·L-1 Hyponex No 1 medium with 10mg·L-1 α naphthlene acetic acid, 05g·L-1 activated charcoal and 10% banana homogenate was the most effective. For seedling development, the same medium used for seedling formation with supplemented 10g·L-1 6 benzyladenine was most suitable.     

模拟酸雨对农作物种子萌发和幼苗生长的影响

研究模拟酸雨对3种农作物种子萌发年和幼苗生长的影响。结果表明：不同pH值(2．5,4．5,5．6)的模拟酸雨对水稻和小麦的种子萌发没有影响,但明显抑制了玉米种子萌发。模拟酸雨条件下,3种农作物幼苗的生长受到抑制,生物量减少,叶绿素和类胡萝卜素含量下降,而叶绿素a/b的变化却不明显。pH4．5和5．6的模拟酸雨对玉米Fv／Fm、光化学猝灭(qP)的影响较小,非光化学猝灭(NPQ)却明显下降,表明酸雨伤害了植物PSⅡ天线对激发能的非辐射耗散能力。     

玉米花粉体外萌发方法改进及其对花粉介导转基因的作用

超声波处理花粉介导植物基因转化方法由山西省农业科学院生物技术研究中心发明, 已被国家知识产权局授予发明专利(专利号ZL 99121152.9)。在该专利的基础上, 针对玉米(Zea mays)花粉取样、保存和处理条件等因素对其体外萌发的影响进行深入研究, 提出了改进玉米花粉体外萌发实验的方法。研究结果表明, 在不同时期对开花的玉米进行花粉培养时所需蔗糖溶液的浓度不同; 确定了玉米花粉的保存时间、条件及其对超声波处理后花粉萌发率的影响, 以提高该转化方法中花粉的活力, 并进一步验证了该转基因方法的可靠性; 讨论了玉米花粉体外萌发的操作技巧和各因子的参数, 对提高花粉介导植物基因转化效率有一定的参考价值。     

三峡地区柏木种子萌发和幼苗更新的研究

对三峡地区柏木(Cupressus funebris)林柏木种子的萌发、幼苗存活、幼苗生长进行了研究.结果表明,(1)柏木种子的萌动期约为10 d,播种35-45 d后进入萌发高峰期,柏木种子的平均萌发率为47.7%.土壤基质对种子萌发的影响是极显著的,光照对萌发则没有显著的影响.(2)幼苗平均死亡率为52.6%.土壤类型和光照强度对幼苗的存活都有显著影响,在林下土和80%光照条件下幼苗的存活率最高.(3)柏木幼苗生长初期茎的生长动态呈"S"型,而叶片数量的增长动态近于直线型.幼苗生长初期生物量形成主要受光照条件的影响,土壤类型的影响不显著.土壤和光照条件对柏木林柏木幼苗的更新都有显著影响,但是土壤条件主要影响种子萌发和幼苗的存活,而光照条件则主要对幼苗的生长和存活产生影响.