溶组织内阿米巴培养的实验

从1925年伯克(Boeck)等创用洛克氏液蛋血清的阿米巴培养基以来,国内外对阿米巴培养作了诸多改进,使阿米巴培养阳性率得到不断的提高,故目前可作为阿米巴病诊断的一种较为理想的方法。作者对曾采用的马血清-洛克氏液培养基加以改良,即以蛋白胨水代替洛克氏液,制成改良的马血清-胨水培养基(Modified Serum Peptone,M-SP),用于阿米巴培养,取得较满意的结果。现报告如下。     

消化系统实验

(一) 淀粉的消化 1.材料 5个长10厘米,直径1.5—2厘米的透析袋;5支口径大于透析袋的试管和5个塞子;Lugol氏碘溶液(即I-KI溶液)100毫升;可溶性淀粉溶液100毫升;唾液(2毫升唾液加2毫升水混合);1米长的线;若干小试管;5支滴管;Benedict氏溶液(简称班氏液)20毫升;葡萄糖液15毫升;淀粉糖化酶溶液20毫     

介绍一种培养衣藻的新方法

最近,我用琼脂培养基培养衣藻效果很好,其配方如下:硝酸钾1克、氯化钾0.25克、硫酸镁0.25克、磷酸氢二钾0.25克、1％的硫酸亚铁0.2毫升、水1000毫升。以上各盐类溶于1000毫升水中,再加10克琼脂,加热溶解后,倒入试管中(占1/4)高压(1.5kg/cm)灭菌40分钟,取出摆成斜面,自然冷却后在无菌条件下,用接种环将衣藻接种在斜     

实验9 λ噬菌体DNA的提取

一、平板扩增抽提法 1.LB培养基上划线接种宿主菌,37℃培养过夜。 2.挑取单菌落接种在LB培养液中,培养液含0.2％麦芽糖。37℃振荡培养过夜。 3.0.5毫升菌液;0.1毫升 Mg~++Ca~++溶液(10mM MgCl_2/10mM CaCl_2);噬菌体[10~5pfu(噬斑生成单位)],混和,37℃水浴中保温15分钟。 4.加入4毫升42—45℃含0.7％琼脂粉的LB培养液,迅速混匀,铺在直径为8.5厘米的含1.5％琼脂粉的LB培养基上。37℃培养过夜。铺有上层培养基的一面朝上培养。     

蚤类室内简易饲养法

器皿和药品带盖圆台塑料桶(上口21厘米、下底14厘米、高17厘米)1个;结晶NaCl1瓶(500g);圆柱形搪瓷缸(9×9厘米)1个;试管若干。幼虫饲料洁砂:猪血粉:酵母粉=10∶1:1。饲养方法在饲养桶内加200毫升NaCl过饱和溶液,将采获的腹节膨大的活雌蚤置于     

观察食用菌菌丝生长和子实体发育的简便方法

为了让学生在学习“食用真菌”知识时,能观察到菌丝生长和子实体发育的过程,经过反复实验,采用金针菇培养皿平面培养法,可在较短时间内达到观察目的,效果良好。培养基配制去皮马铃薯煮出液20毫升,葡萄糖2克,硫酸镁0.05克,磷酸二氢钾0.1克,琼脂2克,水100毫升。把配制好的培养基装入三角烧瓶中,加棉塞外包牛皮纸,经1.5公斤/厘米~2高压灭菌25分钟,冷却备用。并将洗净的中号(直径9厘米左右)培养皿若干套也同时高压灭菌。     

稻瘟病菌孢子的简易培养方法

为了便于进一步开展稻瘟病的研究,通过实践摸索出一种简单易行的稻瘟病菌孢子的培养方法——叶片移植培养方法,具体作法介绍如下。将稻叶剪成短段(1—2厘米长),装入试管,加2—3毫升水,加压灭菌。接种后放在27—28℃下培养,待菌丝在叶片上长好后,再将叶片平贴于斜面培养基上,或将叶片展贴于培养液管管壁上,使其断面的一端接     

从猩猩肠道中分离的一株毛滴虫

1984年1月10日从上海动物园的猩猩(Ponge pygmaeus)粪便中检获一种鞭毛虫,即取其新鲜粪便接种于洛克液琼脂血清培养基中,共接种两管,每一培养管各加入青霉素2500单位,链霉素2.5mg;培养于35℃±0.5℃,三天后第一次移种时,培养管不加抗菌素,此后每周转种二次,至10月份连续培养80余代,该虫生长良好,说明这种鞭毛虫可适应于体外培养,所用的这种培养基也较合适。     

鸡蛋参的组织培养和移栽(简报)

通过筛选最适鸡蛋参初代培养基和生根培养基,研究影响试管苗移栽的条件,建立了鸡蛋参无菌培养体系。结果表明,鸡蛋参的初代培养基为：1/2MS + 6-BA 0.5 mg/ L + IBA 0.2 mg/ L;生根培养基为：1 /2MS + IBA 0.5 mg/L + NAA 1 mg/L + 活性碳10 mg/L;移栽混合基质为：粗纤维草碳土90%+蛭石10%,成活率为85%。     

以龙胆紫染硫酸酯多醣类的组织化学意义

甲、方法:1)固定于任何固定液皆可,但以酒精为最合适。石蜡切片,厚3微来。切片脱蜡,降酒精,至蒸馏水。2)以龙胆紫(gentian violet)水溶液1∶250,000或1∶1,280,000染色24小时(即0.25毫升0.1%龙胆紫贮存液加入100毫升蒸馏水内;或以0.1毫升0.1%龙胆紫液加入128毫升蒸馏水内)。3)滤纸吸干切片,然后在亚尼林二甲苯(anilinc-xylene)1∶1或1∶2液内脱色及脱水约5分钟(或稍长),直至紫色不再从切片上脱下为止。以二甲苯洗2—3次,用树胶封片。若染透明质酸(hyaluronic anid)可以甘油封片。     

用印片法制青霉和曲霉的永久封片

(一)材料和方法 1.菌种:青霉(Penicillium chrysogenum),黑曲霉(Aspergillus niger) 2.培养:将青霉和黑曲霉斜面制成悬液,吸0.1ml于马铃薯培养基(马铃薯200克,蔗糖20克,琼脂粉11克,水1000毫升,15磅/吋~2灭菌30分钟)平板上涂布,于28℃培养2天。 3.制片:取两块干净载玻片,在其中一块上涂一层薄胶层(胶为光学树脂),然后用解剖针在青霉或曲霉平板上挖一小块带菌琼脂(约0.5厘米~2),将琼脂块放在薄胶层上(培养面朝下),用另一块载玻片在琼脂块上轻轻按压,然后将琼脂块小心弃去。将印有菌迹的载玻片     

叶绿体中色素的提取和分离实验的改进

把剪碎的叶片放于研钵中加少许二氧化硅和碳酸钙,研磨,基本磨碎后再加1毫升丙酮,再迅速充分研磨。取干燥的定性滤纸剪成长10厘米、宽1厘米的条。在滤纸条的一端对称地剪去两小角,使两斜角边长1.5厘米,下端宽1.5毫米。此纸条插入层析液中不会因纸端太窄、湿软而难于     

定期转种法和低温冷冻法保藏致病真菌活性的能力比较

定期转种法和低温冷冻保存法是临床实验室最常用的两种真菌保存方法,为比较两种方法保藏致病真菌活性的能力,本研究使用两种保藏方法对实验室689株致病真菌保藏5年后进行检测。定期转种法是将菌落接种于马铃薯斜面培养基并将其储存在4℃冰箱,每6个月转种1次。低温冷冻法是挑取马铃薯斜面培养基上生长良好的菌落于无菌10%甘油中,放置在-80℃储存。保藏5年后,将两种方法保藏的菌株转种复苏,比较菌株的复活率。对于念珠菌属Candida、新生隐球菌Cryptococcus neoformans、毛癣菌属Trichophyton、曲霉属Aspergillus和孢子丝菌属Sporothirix真菌,两种方法的菌株复活率无统计学差异;对于小孢子菌属Microsporum真菌和马尔尼菲蓝状菌Talaromyces marneffei,使用低温冷冻法保藏的菌株复活率高于定期转种法保藏的菌株复活率;对于着色霉属Fonsecaea真菌,低温冷冻法保藏的菌株复活率低于定期转种法保藏的菌株复活率。因此,我们认为对于常见致病真菌的长期保藏,使用10%甘油作为保护剂的低温冷冻法优于定期转种法,但其不适用于着色霉属Fonsecaea真菌的长期保藏。     

枇杷实生苗的茎尖培养

1.植物名称枇杷(Eriobotrya japonica)。 2.材料类别当年生或一年生实生苗枝条的顶芽。取正在生长或芽已进入休眠(包括夏眠)的枝条的顶端1～1.5厘米,然后剥取2～5毫米长的茎尖。 3.培养条件基本培养基为MS培养基,促使茎尖转绿、展叶,需添加以下激素(毫克/升):BA0.5,NAA0.1,GA0.2;促其长成幼枝需添加BA0.25,IAA0.05;促使幼枝腋芽萌发增殖,则添加BA2。生根培养基为不加激素的1/2MS。试管苗经锻炼,先砂培然后土培。培养     

“固液双层”培养法诱导马铃薯‘米拉’试管薯的研究

该研究以马铃薯‘米拉’品种的脱毒试管苗为材料,采用"固液双层"的培养方式,通过正交试验对其试管苗壮苗生长阶段和试管薯诱导阶段的培养基进行优化,并通过单因素试验研究蔗糖浓度、光照条件和CCC浓度对试管薯结薯的影响。结果表明:在"固液双层"培养中,‘米拉’壮苗培养阶段优化的培养基为改良MS培养基(硝酸铵为2 000 mg·L~(-1)、硝酸钾为2 000 mg·L~(-1))+500 mg·L~(-1)CCC+0.1%活性炭+0.1mg·L~(-1)DA-6+1 mg·L~(-1)6-BA+0.1 mg·L~(-1)NAA+3%蔗糖+6 g·L~(-1)琼脂,pH 5.8。试管薯诱导及生长阶段优化的培养基为MS_1培养基(微量元素和铁盐的用量为MS培养基的2倍)+1.5%活性炭+4 mg·L~(-1)6-BA+8%蔗糖。在试管薯诱导阶段,弱光4 h·d~(-1)培养诱导的试管薯,结薯指数、大薯率、薯块重量均优于暗培养。"固液双层"培养是一种低成本的方法,在组织培养室内就可以大量繁殖‘米拉’试管薯,并且能增加原种的数量,这种方法也能用于马铃薯其他栽培品种试管薯的诱导。     

PP333对分蘖洋葱试管苗增殖和生根的影响

以MS 0.1 mg·L-1NAA 0.4 mg·L-1 6-BA为增殖培养基,1/2MS 1.5 mg·L-1IBA 0.01 mg·L-1NAA为生根培养基,添加不同浓度PP333的结果表明:增殖培养基中添加1.0 mg·L-1PP333对分蘖洋葱试管苗增殖生长有促进作用,减少超度含水态苗的发生;生根培养基中添加0.1 mg·L-1PP333对分蘖洋葱试管苗生根壮苗有良好效应.     

胃、肠两节教学演示实验点滴体会

一.同一节教学演示实验的方法 1.准备工作:在教这一节课的前一星期,从市场买回猪胃,最好不用水洗,切开胃,刮下粘液,或者切几小块胃壁肌肉片,然后放入广口瓶内,与适量的水馄合,并加入少量(2—3毫升)稀盐酸,经过两天以后,就可以进行实验。 2.结合教学:教师讲到胃液的作用时,结合演示实验,在上课前一天,把处理的胃液注入四个试管里(每试管5毫升),然后把煮熟的鷄蛋白切成小块(约o.5厘米),投入试管里。实验步骤如下:——第一试管:     

贯叶连翘的试管快繁研究

以贯叶连翘的茎节等为外植体 ,进行植株再生和快速繁殖研究。结果表明在BA、NAA、IBA和 2 ,4 -D不同组合的MS或 1/ 2MS培养基上 ,以茎段为外植体的愈伤组织和试管苗易于诱导 ;在 1/ 2MS BA 1～ 1.5 (mg/l) NAA 0 .1～ 0 .5 (mg/l)的培养基中增殖速度快 ,繁殖系数高 ;在 1/ 2MS NAA(IBA) 0 .5～ 1(mg/l)培养基中均能诱导生根。     

黄曲霉菌原生质体的制备和再生技术优化

黄曲霉菌的遗传转化是研究黄曲霉菌致病相关功能基因的前提和基础,而原生质体是研究和建立真菌遗传转化系统的重要工具。本文分别以黄曲霉孢子和菌丝为材料,研究不同条件下黄曲霉原生质体的形成和再生,结果表明,黄曲霉孢子在酶液浓度为纤维素酶∶蜗牛酶∶溶壁酶=1.5%∶1.5%∶1.5%,30℃酶解3 h,原生质体制备率高达97.3%,再生率达89.2%;黄曲霉菌丝在菌龄为42 h,酶液浓度为纤维素酶∶蜗牛酶∶溶壁酶=1.5%∶1.5%∶1.5%,30℃酶解1 h,可获得最高原生质体产量为2.0×10^6个/m L,再生培养基中以1 mol/L蔗糖作为渗透压稳定剂时,原生质体再生率达5.5%。故本实验条件下,黄曲霉孢子原生质体的形成和再生优于菌丝。     

湖北恒河猴体内恰氏内阿米巴的形态学观察

调查武汉动物园的恒河猴,发现自然感染恰氏内阿米巴(EntamoebachattoniSwellen-grebel,1914),采用生理盐水直接涂片法、卢戈氏碘液染色及铁苏木素染色封片,对滋养体和胞囊进行观察,并对滋养体、体核、包囊、囊核作了显微测量。恰氏内阿米巴滋养体大小为11—17μm,平均13.70±0.37μm(X±Sx),核为2.89±0.02μm,包囊为10.30±0.09μm和囊核2.83±0.03μm。双核型包囊少于1%,含有包涵体的包囊占50%,恒河猴自然感染恰氏内阿米巴为国内首次发现。