植物超微结构中核酸的细胞化学方法比较研究

随着电子显微镜技术的广泛应用,植物超微结构的研究日益与生理功能密切地结合起来。为了在超微结构水平上对某种特殊的化学成分(如核酸、蛋白质、酶或多糖等)鉴定或定位,发展了诸如酶的细胞化学、核酸的细胞化学等各种细胞化学方法。电镜的细胞化学尚处于初期阶段,对植物组织尤其如此,已用于动物组织方面的许多化学反应不能用于植物材料。核酸的细胞化学方法已有许多报导,但都是以动物组织为材料发     

核酸分析技术与植物的分子分类

植物分子分类学应用收集的分子生物学资料进行植物系统研究,主要通过研究植物蛋白或核酸(RNA或DNA)的组分和系列,系统分析植物间的亲缘关系并分类排定它们在植物系统中的位置。在分类学中应用最早的是蛋白质电泳技术,由于蛋白质易变性,组成蛋白的氨基酸种类多,蛋白的分离纯化和序列分析比较繁琐,蛋白操作技术的应用局限性较大。由于核酸操作技术的发展,近几年来不少研究者利用植物的细胞核、叶绿体或线粒体基因组的某些特征,对不少植物进行了系统分类。本文旨在介绍核酸分析技术     

烟草精细胞两个群体的分离

高等植物的倾向受精是一个非常吸引人的研究课题,目前对其机理还不清楚。要想探索高等植物倾向受精现象,前提之一是要分离出一定数量的两个精细胞群体作为分子生物学研究方法的材料。以前的研究表明, 烟草(Nicotiana tabacum L.)花粉管中的两个精细胞体积差异明显。这种异型性的精细胞可能与倾向受精有关。烟草是二胞型花粉,生殖细胞只在体内生长的花粉管中才分裂形成两个精细胞。用体内/体外技术培养出花粉管后,爆破花粉管即可释放出花粉管内含物,其中包括两个精细胞。用微量酶液可使两个精细胞分开。然后用显微操作器可挑选出两个大小不同、数量上千的精细胞群体。这种单一纯化的精细胞群体为用分子生物学方法区分两个精细胞的DNA和蛋白质差异打下基础。本研究是高等植物的第二例、二胞花粉植物中的第一例分离两个特定精细胞群体的尝试,为构建烟草两个精细胞的cDNA文库创造了条件。     

烟草精细胞两个群体的分离

高等植物的倾向受精是一个非常吸引人的研究课题,目前对其机理还不清楚.要想探索高等植物倾向受精现象,前提之一是要分离出一定数量的两个精细胞群体作为分子生物学研究方法的材料.以前的研究表明,烟草(Nicotiana tabacum L.)花粉管中的两个精细胞体积差异明显.这种异型性的精细胞可能与倾向受精有关.烟草是二胞型花粉,生殖细胞只在体内生长的花粉管中才分裂形成两个精细胞.用体内/体外技术培养出花粉管后,爆破花粉管即可释放出花粉管内含物,其中包括两个精细胞.用微量酶液可使两个精细胞分开.然后用显微操作器可挑选出两个大小不同、数量上千的精细胞群体.这种单一纯化的精细胞群体为用分子生物学方法区分两个精细胞的DNA和蛋白质差异打下基础.本研究是高等植物的第二例、二胞花粉植物中的第一例分离两个特定精细胞群体的尝试,为构建烟草两个精细胞的cDNA文库创造了条件.     

依赖于DNA的RNA聚合酶研究 Ⅶ.玉米胚RNA聚合酶B性质的研究

真核细胞的RNA聚合酶的研究已经有很多报道。但是以高等植物为材料研究RNA聚合酶远不如其他真核生物多,在植物细胞中RNA聚合酶B(或Ⅱ)的含量比RNA聚合酶A和C要丰富,而且性质也比较稳定,这对研究RNA聚合酶B的性质和它在结构基因表达中     

生物大分子和亚细胞结构的分离

分离和纯化生物大分子及亚细胞结构是细胞生物学和生物技术学的基本研究手段之一。由于亚细胞方法学(Subcellular methodology)的建立和从分子水平及亚细胞水平去探索生命现象,使关于细胞结构与功能的研究更加紧密地结合起来了。不仅如此,在深入认识生物信息传递的基础上,采用分子生物学技术和亚细胞分部(Subcellular fraction)的方法,发展了生物工程或生物技术学,使生物学进入一个崭新的阶段。这就使     

植物遗传工程 五.高等植物遗传工程的载体

这一讲是关于高等植物遗传工程的载体,这是目前最为活跃的研究领域。推测和设想还远远多余实际所得到的结果。载体对于把我们所需要的一段DNA引入到植物细胞以及高等植物中去是必不可少的。作为遗传工程的载体,它必须能使我们把所需要的DNA组入;必须能进入植物细胞,能在植物细胞中复制,并能通过有丝分裂和减数分裂而不丢失;还必须能使组入的基因得意表达,能够转录,翻译和调控。现在,在高等植物体系中已经有了一些有可能城为遗传工程载体的材料。     

植物4.5SrRNA的分离纯化和序列分析研究

<正> 植物4.5S rRNA是近年来发现的高等植物叶绿体核糖体上独立的小分子RNA成份,大约由80—106个核苷酸组成,不含稀有碱基。在蛋白质的生物合成中具有重要功能。 研究表明,不同来源的4.5 SrRNA序列有相当大的保守性,而且保守性的大小与植物种类的亲缘远近有直接关系。因此研究不同植物4.5SrRNA序列,对在分子水平上研究植物的演化与分类有指导意义。 我们以多种植物叶为材料,对其4.5SrRNA进行了分离纯化和序列分析研究。 4.5SrRNA在植物细胞内含量低,且较不稳定,因此,纯化有一定的困难。以前人们一     

高等植物突变细胞系的研究

一、引言植物组织培养研究与应用的进展,吸引多种学科工作者的参与;它在生产上的作用也日益明显。Carlson等人开拓性的研究展示出有可能用分子生物学的知识,以高等植物细胞为实验系统,来扩充对高等植物的认识与改良植物的性状。可以像对微生物材料那样设计各种实验,用单倍体、二倍体以至多倍体植物细胞,在比田间试验小得多的空间和较短的时     

应用离子选择性电极研究植物组织及根部的离子运转

以往研究高等植物的组织或根部的离子运转,采用化学分析方法测定植物材料或外部溶液内离子浓度的变化,来观察离子运转的情况。60年代以来,发展了离子选择性电极。Hinke(1959)用玻璃微电极测定细胞内Na~+、K~+的活度。Bowling(1971)用K~+选择性的玻璃微电极插入玉米根皮层细胞的液     

生物工程技术讲座(三)

向植物细胞内引入微生物在应用细胞融合技术进行植物细胞杂交育种的同时,近年来人们试图把遗传信息直接引入细咆内。如用转化方法把带有某种遗传信息(植物的固氮、产生某些生物活性物质以及植物的抗性等功能)的DNA 引入植物细胞,但都未能获得肯定的结果。尽管到目前为止基因工程技术进步很快,但对高等植物来讲还远不能广泛应用基因工程像在微生物那样取得成果。高等植物强韧的细胞壁是进行生物工程的一大障碍。自从应用酶处理细胞壁,把植物细胞变成原生质体的方法开展以后,才     

依赖于DNA的RNA聚合酶研究 VII.玉米胚RNA聚合酶B性质的研究

真核细胞的RNA聚合酶的研究已经有很 多报道〔3,41。但是以高等植物为材料研究RNA 聚合酶远不如其他真核生物多，在植物细胞中 RNA聚合酶B（或11）的含量比RNA聚合酶A 和C要丰富，而且性质也比较稳定IS]，这对研究 RNA聚合酶B的性质和它在结构基因表达中 的作用是很有利的。我们以玉米自交系黄早4 为材料，提取了RNA聚合酶B。本文将报道植 物RNA聚合酶B的分离和纯化，并研究这种酶 的性质和功能。     

磁性微球的制备及在生物分离应用中的研究进展

磁性微球是一类新型的功能材料,在生物医学工程、细胞生物学和环境工程具有广泛的应用。本文从磁性微球的结构、特性和制备方法进行了探讨,并详细介绍了磁性微球在细胞分离、蛋白质以及核酸的制备纯化领域中的应用。     

磁性微球的制备及在生物分离应用中的研究进展

磁性微球是一类新型的功能材料,雀生物医学工程、细胞生物学和环境工程具有广泛的应用。本文从磁性微球的结构、特性和制备方法进行了探讨,并详细介绍了磁性微球在细胞分离、蛋白质以及核酸的制备纯化领域中的应用。     

植物细胞程序性死亡(PCD)的研究进展

细胞死亡是动、植物生长发育过程中常见的一种生命现象 ,而细胞程序性死亡 (PCD)是细胞遵循自身生命活动程序 ,并受多种因子调控的一种积极的死亡方式。近年来随着动物中PCD研究的深入 ,植物PCD亦得到相应的研究。植物细胞程序性死亡研究不仅可揭示植物衰老、死亡的内部变化规律 ,而且可为其生长发育的调控提供依据和技术。该文试对有关PCD的特点、研究意义及近年来的研究概况与方法进行简述与评价。     

香蕉不同组织中总RNA的有效分离

从植物组织中提取总ＲＮＡ是进行植物分子生物学某些方面研究的必要前提。如进行Ｎｏｒｔｈｅｍ杂交分析,纯化ｍＲＮＡ以用于体外翻译或建立ｃＤＮＡ文库,ＲＴ－ＰＣＲ及差示分析等分子生物学实验,都需要高质量的总ＲＮＡ。因此,从植物组织中提取高质量的总ＲＮＡ是顺利进行上述研究的关键所在。目前常用于植物材料ＲＮＡ提取的方法有脱法［１～４］苯酚法［５,６］和ＣＴＡＢ［７,８］法等。这些方法对于提取某些植物的总ＲＮＡ是有效的,但对另外一些植物来说,却并不一定是好的方法。因为不同植物组织的细胞内外成分复杂多变,在使…     

玻璃粉吸附核酸及其在植物核酸提取中应用的研究

为研究玻璃粉在植物核酸提取中的应用,比较了玻璃粉颗粒大小、离液盐种类及浓度、pH等条件对玻璃粉吸附核酸的影响,得出玻璃粉吸附核酸的各种最佳条件。结果表明,普通玻璃粉吸附核酸能力强于硅胶和硅藻土,玻璃粉颗粒的直径以83 μm为佳,pH 4.0时吸附效果达到最大。提取DNA时,NaCl浓度应大于3 mol/L,而提取RNA时,异硫氰酸胍大于2 mol/L就能取得很好的效果,此外,在玻璃粉吸附RNA前,需要加入50%以上的无水乙醇才能更好地吸附。利用玻璃粉制作简易纯化柱,可用于植物组织核酸提取纯化,所提取的核酸纯度高、完整性好,可用于酶切、杂交和PCR等实验。与传统方法相比,采用玻璃粉简易离心柱提取植物核酸,效果好、环保、快速、经济。     

高等植物雄性不育的细胞生物学研究进展

高等植物的雄性不育有多种类型,发生的原因复杂。对高等植物雄性不育机理的探索一直是一个活跃的研究领域。近年来采用多种细胞生物学方法对植物雄性不育的研究取得了一些新的成果,从绒毡层细胞结构与功能的分析以及Ca^2＋、ATP酶的分布特征、细胞骨架的排列方式、细胞程序性死亡等不同的细胞生物学研究角度探索了雄性不育花药的败育过程。雄性不育的细胞生物学研究结果起到了将分子水平研究与个体水平研究结果相联系的纽带作用,有助于全面地了解高等植物中各种雄性不育的发生机理。     

植物细胞与细胞间物质转运及其对生长发育的调控

细胞与细胞之间的物质运输和信号传递对于多细胞生物的生长发育非常重要．一些内源的大分子物质如蛋白质、核酸或核酸蛋白质复合体可以选择性地通过植物特有的亚细胞结构即胞间连丝（PD）在细胞之间运输．小分子物质主要以被动的形式在细胞间通过PD进行扩散．PD对蛋白质和核酸的运输具有选择性,这种运输受到严格调控．大分子物质在细胞间的运输对植物的生长和发育有极其重要的调控作用．KN1,STM,SHR,TRY和WER等转录因子在细胞之间的转运对于维持植物的茎尖分生组织、根尖分生组织和表皮细胞功能起重要作用．另外,某些小分子RNA也能够在植物细胞间进行选择性运输,并通过在不同细胞中降解或抑制靶mRNA的翻译来调节植物组织的生长发育．     

高等植物体内的肌动蛋白

植物肌动蛋白是植物细胞生物学领域发展起来的热点,它涉及植物细胞的分裂机制。细胞运动,细胞器运动,细胞的极性,细胞空间形状的维持,物质运输等,对高等植物肌动蛋白的性质,功能,研究方法及分子生物学领域的研究作了综述。并对该领域存在的问题及应用前景作了展望。