多巴胺D2受体拮抗剂、激动剂对SD大鼠条件化位置偏好的影响

通过慢性吗啡处理方式建立起SD大鼠吗啡依赖的条件化位置偏好(CPP)模型,用行为学手段研究多巴胺(DA)D2受体拮抗剂及激动剂对SD大鼠CPP的影响,探讨眶额叶DAD2受体在阿片精神依赖中的作用。通过腹腔注射吗啡同环境因素相结合,建立大鼠吗啡依赖的CPP模型;采用局部脑内微量注射法向额叶注射DAD2受体拮抗剂或激动剂或盐水(对照组),以得到SD大鼠在戒断期间的CPP的时间数据。CPP显示DAD2受体拮抗剂组与对照组相比,从戒断第2天起,前者表现出更明显的CPP增加现象,差异显著(P<0·05)。而DAD2受体激动剂组与对照组相比无显著差异(P>0·05)。采用腹腔小剂量注射吗啡,成功地建立了吗啡依赖SD大鼠的CPP模型;眶额叶微量注射DAD2受体拮抗剂增加了CPP时间,提示眶额叶多巴胺系统在吗啡依赖的过程中有着较为重要的作用;也提示了对于已经成瘾的动物,损伤其眶额叶,会使药物渴求增强。因而提示对于药物依赖患者进行手术干预治疗要极其慎重。     

褪黑素对谷氨酸钠致痫大鼠海马5-羟色胺水平的影响

目的观察褪黑素(Melatonin,MT)对谷氨酸钠(Glutamate,Glu)致痫大鼠海马5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)水平的影响,研究其抑制癫痫的作用机制。方法40只健康雄性SD大鼠随机分为4组(每组10只),分别为生理盐水对照组(NS组);谷氨酸钠致痫组(Glu组);褪黑素 谷氨酸钠组(MT Glu组);Luzidole 褪黑素 谷氨酸钠组(Luz MT Glu组)。观察并记录大鼠行为学及脑电图改变,用免疫组织化学方法检测大鼠海马内5-HT含量变化。结果行为学观察和EEG显示,NS组无痫样发作和痫样放电,Glu组和Luz MT Glu组痫样发作重(Ⅲ-Ⅴ级),脑电图显示频发高幅的痫样波,TM Glu组无或仅有轻微发作(0-Ⅱ级),脑电图上无或偶见散在单个微小痫样波;免疫组织化学分析结果显示,Glu组和Luz MT Glu组大鼠海马内5-HT含量与对照组比较均减少,差异性明显(P<0.05),MT Glu组较Glu组和Luz MT Glu组5-HT含量升高,差异性明显(P<0.05)。结论MT对谷氨酸钠致痫大鼠痫样发作程度、痫样放电有抑制作用,其机制之一是经由其特异性的膜受体,通过某种机制增强5-HT作用,进而发挥抑痫效应。     

腹腔和脑室注射促肾上腺皮质激素对大鼠不同脑区5-羟色胺含量的影响

本文应用荧光分光光度法测定脑内5-羟色胺(5-HT)含量,观察腹腔内注射(ip)或侧脑室内注射(icv)促肾上腺皮质激素(ACTH)对大鼠海马、下丘脑和中-桥脑内5-HT 含量的影响,结果如下:(1)ACTH(20.0U/kg)ip 可使海马、下丘脑和中-桥脑内5-HT 含量增多,1h达高峰,与对照组比较差异非常显著(P<0.01-0.001);ACTH ip 后3h,三脑区5-HT 含量基本恢复至对照水平。电解损毁中脑中缝核后,ACTH ip 使海马和下丘脑5-HT 含量升高的作用明显降低,摘除两侧肾上腺后,对 ACTH 增加三脑区5-HT 含量的效应没有影响。(2)ACTH(0.5U/10μl)icy 40min 后,也使三脑区5-HT 含量升高,与人工脑脊液 icv的比较,差异显著或非常显著(P<0.05-0.01);电解损毁中脑中缝核后,ACTH icv 使海马和下丘脑5-HT 含量升高的作用也显著下降。(3)ACTH ip 升高三脑区5-HT 含量的作用较 ACTH icv 的强,损毁中脑中缝核后,5-HT 含量的下降,前者却不如后者显著。上述结果提示:ACTH(ip 或 icv)之所以引起海马、下丘脑和中-桥脑5-HT 含量增多,很可能都与激活中脑中缝核有关,ACTH ip 尚可能有其它作用途径,但与肾上腺关系不大。     

咪达氟对兔脑5-羟色胺释放和多巴胺含量的影响

1.用~3H-5-羟色胺脑室灌流清醒动物的方法,测定了脑内5-羟色胺的释放。实验结果表明,给兔静注咪达氟(4mg/kg)后,因动物挣扎引起5-羟色胺释放加强,可能咪达氟不直接加强兔脑5-羟色胺的释放。因此,必须指出,在用清醒动物脑室灌流的方法研究药物对神经递质释放是否有影响时,必须考虑到清醒动物的活动状态。2.用荧光方法测定了多巴胺含量。实验结果表明,给兔静注眯达氟(4或8mg/kg)以后10分钟,颈部和前肢产生明显肌松时海马中多巴胺含量虽有增加的趋势,但无统计学意义,尾核中多巴胺含量基本不变。因此,可以认为咪达氟所引起的肌肉松弛可能与脑内多巴胺含量关系不大。     

不同剂量鱼藤酮对拟帕金森病模型大鼠行为学及纹状体多巴胺含量的影响

目的观察不同剂量鱼藤酮皮下注射对大鼠行为学及脑纹状体多巴胺含量的影响,探讨鱼藤酮拟帕金森病大鼠模型的适宜造模条件。方法Lewis大鼠分别给予鱼藤酮不同剂量（1．0、1．5和2．0ms／ks／d）皮下注射共28d。应用旷场实验和斜板实验分别测定大鼠的运动功能和协调性,高效液相色谱一电化学法检测大鼠纹状体内多巴胺含量。结果模型组大鼠存活率随鱼藤酮注射剂量的升高呈逐渐下降趋势。鱼藤酮2．0mg／kg组大鼠体重最先明显降低,随着注射时间的延长,各模型组大鼠均出现显著的体重降低。旷场实验结果显示,各剂量鱼藤酮组大鼠跨格次数和站立次数均明显下降。斜板实验结果显示,鱼藤酮1．5mg／kg组大鼠在斜板的停留角度较对照组显著减小。鱼藤酮I．5ms／kg组大鼠脑纹状体内多巴胺含量显著降低。结论鱼藤酮1．5ms／kg皮下注射28d,大鼠出现明显的运动功能障碍和脑内多巴胺含量减少,而死亡率相对较低,因此是建立帕金森病大鼠模型的适宜剂量。     

H3受体在5-羟色胺诱导大鼠瘙痒初级传入通路中作用

目的观察H3受体激动剂（R-α-甲基组胺）和拮抗剂（噻普酰胺）对5-羟色胺（5-HT）诱导大鼠搔抓行为的影响,并探讨H3受体在大鼠瘙痒初级传入通路中的作用。方法29只SD大鼠随机分为4组,分别在颈背部皮内注射生理盐水（生理盐水组）、2%5-HT（5-HT组）、R-α-甲基组胺＋5-HT（甲基组胺组）、噻普酰胺＋5-HT（噻普酰胺组）,摄像并计数注射后1 h内搔抓次数。取大鼠C3-C5及其相应节段的背根神经节（DRG）作H3R免疫组化染色。结果5-HT组大鼠的搔抓次数明显多于生理盐水组（P〈0.01）,而R-α-甲基组胺或噻普酰胺预处理可分别减少或增加大鼠搔抓次数（P〈0.01）。5-HT组大鼠脊髓后角浅层中H3受体表达与生理盐水组相比差异无显著性（P〉0.05）,而R-α-甲基组胺或噻普酰胺预处理可分别减少或增加H3受体表达（P〈0.01-0.05）。各组动物DRG内,H3受体阳性中、小型神经细胞的比值差异无统计学意义（P〉0.05）。结论在5-HT诱导大鼠急性瘙痒模型中,脊髓背角胶状质区内H3受体激活可减弱瘙痒,但DRG内中、小型神经细胞上H3受体表达可能不参与瘙痒信号的传导。     

D_1及α_2受体激动剂对卵母细胞表达的GABA_A受体的抑制

目的 :研究SKF38393及Clonidine对表达的DRG神经元GABAA 受体的调制作用 ,并与新鲜分离细胞相比较。方法 :实验在注射鼠DRG神经元mRNA的卵母细胞上进行 ,以双电极电压钳技术进行研究。结果 :①SKF38393及Clonidine对表达的DRG神经元GABAA 受体有明显的抑制作用 ,其作用呈浓度依赖性。②SKF38393及Clonidine的诱导电流之间有相互抑制作用。③SKF38393及Clonidine对GABAA 受体的抑制作用是非竞争性抑制 ,并且为非电压依赖性。结论 :实验结果提示SKF38393及Clonidine可通过胞内转导 ,由第二信使介导GABAA 受体的磷酸化而抑制GABAA 诱导电流     

5-羟色胺对大鼠腎上腺皮质功能的影响

5-羟色胺(5-HT)是一个具有广泛生理活性的重要体液因子,它与肾上腺的关系亦为许多学者所注意。Reid首先发现5-HT可以直接刺激肾上腺髓质释放肾上腺素。后来Halberg又发现它可以使小鼠循环血液中嗜伊红细胞的数目减少。1957年Moussatche等认为5-HT具有间接刺激肾上腺皮质,使其功能升高的作用。     

海马多巴胺D1受体激活抑制谷氨酸介导的大鼠慢性应激性抑郁

本文旨在探讨在慢性应激性抑郁发生过程中多巴胺D1受体对谷氨酸及其离子型受体的影响。实验通过建立慢性不可预见性温和应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)抑郁模型,结合海马微量注射多巴胺D1受体激动剂SKF38393、非竞争性N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartic acid,NMDA)受体拮抗剂MK-801和α-氨基羟甲基异恶唑丙酸(α-amino-3-hydroxy-5-methylisoxazole-4-propionic acid,AMPA)受体的拮抗剂NBQX,运用糖水偏爱测试、旷场实验和悬尾实验等方法检测动物的行为表现,采用高效液相色谱法(high-performance liquid chromatography,HPLC)和Western blot实验来检测海马内谷氨酸含量及其离子型受体关键亚基的表达。结果显示,与对照组相比,CUMS组大鼠表现出明显的抑郁样行为变化,且海马谷氨酸含量升高,其NMDA受体的NR1亚基与AMPA受体的GluR2/3亚基也明显下调;注射SKF38393后可明显改善应激引起的抑郁样行为,且海马谷氨酸含量显...     

竹节参对AD大鼠海马区Drd-2及GFAP、TNF-α表达的影响

探讨竹节参对AD大鼠海马区Drd-2及TNF-α、GFAP表达的影响。60只SPF级SD雄性大鼠,适应性喂养一周后,随机分为6组。除假手术组海马注射生理盐水外,其余5组均注射Aβ1-42以复制AD模型。然后对假手术组及模型组大鼠予以生理盐水灌胃,西药组大鼠予以脑复康悬浮液灌胃,竹节参高、中、低剂量组大鼠分别予以相应浓度竹节参水煎液灌胃,持续4周。完成水迷宫实验后,处死大鼠,取大鼠海马,切片、Western Blotting法检测各组大鼠海马Drd-2、GFAP和TNF-α表达量的变化。Western blotting法观察各组大鼠海马GFAP、TNF-α的表达水平,模型组较假手术组明显升高,各治疗组明显低于模型组,且竹节参高剂量组低于西药组。Drd-2的表达水平,模型组较假手术组明显降低,各治疗组明显高于模型组,且竹节参高剂量组要高于西药组。竹节参能通过提高AD大鼠海马形胶质细胞Drd-2活性,抑制炎症反应。     

帕金森病大鼠中缝背核5-羟色胺能神经元放电频率和放电形式的变化

实验采用玻璃微电极细胞外记录法, 观察了帕金森病(Parkinson’s disease, PD)大鼠中缝背核(dorsal raphe nucleus, DRN)5- 羟色胺(5-hydroxytrypamine, 5-HT)能神经元电活动的变化。结果发现, 对照组和 PD 组大鼠 DRN 中 5-HT 能神经元的放电频率分别为(1.61 ±0.56) Hz 和(2.61 ±1.97) Hz, PD 组大鼠的放电频率显著高于对照组(P<0.05)。在对照组大鼠, 79% 的神经元呈现规则放电, 21% 为爆发式放电;在 PD 组大鼠,具有规则、不规则和爆发式放电的神经元比例分别为 36%、16% 和47%, 爆发式放电的 5-HT 能神经元比例明显高于对照组(P<0.05)。结果表明,帕金森病大鼠 DRN 中 5-HT 能神经元的放电频率增高, 且爆发式放电增多。     

苦参碱对神经病理性大鼠背根神经节P2X3受体、疼痛行为学和疼痛阈值的影响

摘要 目的：探讨苦参碱对神经病理性大鼠背根神经节P2X3受体、疼痛行为学和疼痛阈值的影响。方法：选择Sprague-Dawley雄性大鼠30只,随机分为3组,包括模型组、试验组和假手术组。于大鼠造模成功1 d后,试验组给予30 mg/（kgod）的剂量在腹腔注射苦参碱溶液,1次/d;给予假手术组和模型组腹腔注射等量浓度为0.9 %的氯化钠溶液,1次/d,共14 d。进行自发疼痛行为学评分检测、机械痛阈值检测、热痛阈值检测、P2X2和P2X3mRNA相对表达量检测、P2X2和P2X3蛋白表达水平检测,以及氧化应激指标水平检测。结果：术后模型组与试验组自发性疼痛行为学评分与假手术组比均升高,自术后第5天起,与模型组比,试验组自发性疼痛行为学评分明显低于模型组（P<0.05）;自术后第3天起,相较于假手术组,模型组机械痛阈值、热痛阈值显著下降,相较于模型组,试验组自术后第5天起机械痛阈值、热痛阈值显著上升（均P<0.05）;术后第14天试验组与假手术组机械痛阈值、热痛阈值对比无差异（P>0.05）;模型组P2X2和P2X3mRNA、P2X2及P2X3蛋白比假手术组和试验组高（均P<0.05）,试验组和假手术组P2X2、P2X3mRNA、P2X2及P2X3蛋白比较无差异（P>0.05）;干预前及干预1、2周后模型组大鼠脊髓组织SOD比假手术组低,MDA比假手术组高;试验组大鼠脊髓组织SOD比模型组高,MDA比模型组低（均P<0.05）。结论：苦参碱可有效缓解神经病理性痛的所引发的机械痛觉和热痛觉,镇痛作用较好,机制可能在于其可使大鼠背根神经元中P2X2、P2X3受体下降相关,同时其在抑制神经病理性大鼠脊髓组织氧化应激反应方面有一定的作用,与其在对神经病理性痛大鼠脊髓组织神经元凋亡的抑制有密切关系。     

多巴胺D1和D2受体拮抗剂对针刺镇痛的增强

在兔K~+透入测痛模型上,应用高选择性的D_1或D_2受体拮抗剂、观察其对针刺镇痛的影响。结果表明,iv.D_2受体拮抗剂氟哌啶醇和氯氮平加强针刺镇痛,且与剂量有关。icv.D_2受体拮抗剂domperidone和舒必利及D_1受体拮抗剂SCH23390,亦能加强针刺镇痛。本文对D_1和D_2受体拮抗剂在针刺镇痛中的作用进行了讨论。     

甲基苯丙胺中毒大鼠纹状体COX-2、PGE2、EP2受体及小胶质细胞表达的研究

目的：通过研究COX-2、PGE2、EP2受体及小胶质细胞在甲基苯丙胺中毒大鼠纹状体内的表达变化探讨甲基苯丙胺中毒大鼠纹状体中COX-2／PGE2系统与小胶质细胞活化之间的关系。方法：将40只健康成年雄性SD大鼠,随机分成对照组10只和实验组30只（实验组分成三个亚组,分为末次给药后1天组、2天组和3天组,n=10）。实验组给予10mg／kg的MA腹腔注射,对照组给予同样剂量的生理盐水,每天注射两次,注射时间为8：00、20：00,连续注射4天。分别于末次给药后的第1天、第2天、第3天处杀。用免疫组化技术对中毒大鼠纹状体（CPU）中COX-2、EP2受体及Iba1（钙离子接头蛋白,小胶质细胞内一种特异性标记物）的表达进行检测,并进行图像分析。另外,取大鼠的纹状体运用酶联免疫法检测PGE2的含量。结果：COX-2、PGE2、EP2受体及小胶质细胞在各组均有表达。与对照组相比,实验组中：COX-2、PGE2、EP2受体的1天组表达均不同程度下降;2天组中COX-2表达水平大幅度上升,PGE2、EP2受体表达仍低于正常水平;3天组COX-2表达水平继续升高,而PGE2、EP2受体表达趋于正常组水平。而小胶质细胞表达水平则是三个实验组均高于正常组,且3天组高于2天组,2天组高于l天组。对照组与实验组有显著性差异（P〈0．05）。结论：COX-2／PGE2系统与甲基苯丙胺中毒大鼠纹状体内小胶质细胞活化无明显相关性;COX-2与甲基苯丙胺的神经毒性有关。     

大鼠NPY Y2受体基因的克隆及C端肽的表达和纯化

Y2受体亚型是早期发现的NPY的两种主要受体亚型之一,参与NPY所介导的多种生理和病理功能.为了制备Y2受体抗体和开展Y2受体的定位研究,用RT-PCR方法从大鼠海马的总RNA扩增NPY的Y2受体全长基因,接着PCR扩增Y2受体的C端片段,克隆入表达载体中,建立了重组NPY Y2受体C端肽的表达菌株,并对表达产物进行纯化.     

愤怒情绪模型大鼠不同脑区γ氨基丁酸B2受体表达的变化

目的通过检测愤怒情绪模型大鼠顶区皮质和海马γ氨基丁酸B2受体（GABABR2）表达的变化,探索愤怒情绪与GABABR2的关系,以及中药经前平颗粒的干预机制。方法采用居住入侵的方法复制愤怒情绪模型大鼠,然后用RT-PCR和Western Blot的方法检测GABABR2 mRNA和蛋白的表达差异。结果与正常组相比,模型组大鼠GABABR2 mRNA和蛋白的表达都明显降低;与模型组相比,经前平给药组大鼠GABABR2 mRNA和蛋白的表达都显著升高。结论大鼠顶区皮质和海马GABABR2表达降低可能是影响大鼠愤怒情绪的重要机制之一;中药经前平颗粒可对GABABR2表达异常变化起到调节作用。     

孕期饮用酒精对子代大鼠学习记忆及海马cdk5表达的影响

目的:研究孕期饮用酒精对子代大鼠学习记忆及海马细胞周期依赖性蛋白激酶5(cdk5)表达的影响。方法:建立大鼠孕期饮用酒精模型,子代成年后,Y-型迷宫测试学习记忆成绩;聚合酶链式反应(RT-PCR)分析海马组织cdk5mRNA的表达;免疫荧光法检测子鼠海马区cdk5蛋白表达。结果:学习记忆测试结果显示孕期饮用酒精组子鼠学习记忆成绩比正常对照组和饮酒对照组明显下降;RT-PCR结果表明孕期饮用酒精组子鼠海马组织cdk5mRNA表达较正常对照组和饮酒对照组明显上升;免疫荧光结果显示孕期饮用酒精组子鼠海马区cdk5蛋白表达明显增加。结论:孕期饮用酒精对子代大鼠的神经损伤可能与cdk5蛋白表达的上调有关。     

β3受体激动剂对培养的大鼠心肌细胞搏动频率和细胞内环-磷酸腺苷水平的影响

目的：观察β3受体激动剂(BRL-37344)对培养的大鼠心肌细胞搏动频率和细胞内环-磷酸腺苷(cAMP)水平的影响,以探讨β3受体在心肌细胞中的作用。方法：分离培养乳鼠心肌细胞,随机分为八组：对照组、ISO组、Nadolol ISO组、BRL组、PTX BRL组、L-NAME BRL、Nadolol BRL组和Buprandol BRL组,观察心肌细胞搏动频率,并应用酶联免疫方法测定cAMP含量,逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)方法测β3受体mRNA表达。结果：ISO(非选择性β受体激动剂)可显著增加心肌细胞搏动频率和升高cAMP水平,这种作用可被Nadolol(为β1,β2受体抑制剂)阻断。BRL-37344可显著降低心肌细胞搏动频率和cAMP含量,这种作用可被PTX(Gi蛋白抑制剂)和Bupranolol(非选择性β受体阻滞荆)完全阻断,同时可被L-NAME(一氧化氮合酶抑制剂)部分阻断,不受Badolol影响。RT-PCR方法测出心肌细胞中有β3受体mRNA表达。结论：心肌细胞中存在β3受体,它在心肌表现为负性变力作用,β3受体的效应不受β1,β2受体抑制剂影响。心脏β3受体信号途径中可能有Gi蛋白的参与,并且经过一氧化氮合酶途径发挥其作用。     

GnRH-a对大鼠海马和皮质部位parvalbumin表达的影响

目的:研究促性腺激素释放激素类似物(gonadotropin releasing hormone analogue,GnRH-a)对大鼠海马、皮质部位小白蛋白(parvalbumin,PV)表达的影响.方法:采用酶联免疫吸附试验测定血清激素水平,免疫组织化学和图像分析观察大鼠海马、皮质部位PV的表达.结果:①GnRH-a组大鼠血清雌二醇(estradiol,E2)、LH及FSH水平较正常对照组下降,差异有统计学意义(P<0.05);与OVX组比较LH、FSH较低,差异有统计学意义(P<0.05),但E2差异不显著.②正常情况下,大鼠海马、皮质部位可观察到PV神经元及纤维分布.③GnRH-a组PV细胞数及灰度值低于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05),与去卵巢组大鼠组相似;GnRH-a+E2联合用药后,PV细胞数及灰度值与正常对照组相似.结论:GnRH-a降低大鼠海马、皮质部位神经元中PV的表达,从而影响神经元的功能,这可能与其用药后神经精神副反应有一定关系.     

多巴胺D1和D2受体激动剂和拮抗剂对脑缺血/再灌注损伤的影响

实验应用开阔法、组织病理学方法、原位末端标记(in situ terminal deoxynucleotidyl transferase-metliated de-oxy-UTP mick end labeling,TUNEL)法及免疫组织化学等方法,探讨多巴胺D1、D2受体激动剂和拮抗剂对沙土鼠前脑缺血／再灌注损伤海马CA1区神经元凋亡及凋亡相关基因bcl-2、bax表达的影响。结果显示：前脑缺血5min可引起沙土鼠探索活动增加;再灌注3d,海马CA1区约95％的锥体细胞凋亡;再灌注7d,海马CA1区仅残存约2％—7％的存活锥体细胞;前脑缺血5min可抑制bcl-2的表达并诱导bax表达增高;预先应用D2受体激动剂培高利特可减轻缺血后沙土鼠行为学异常、抑制海马CA1区锥体细胞凋亡、提高锥体细胞存活数、显著诱导bcl-2的表达并抑制bax的表达。预先应用SKF38393、SCH23390及螺哌隆对以上结果无明显影响。实验结果提示,培高利特具有确切的脑保护作用,诱导bcl-2并抑制bax的表达可能是其脑保护作用机制之一。