利用制霉菌素浓缩处理高频率地检出黑曲霉营养缺陷型突变株

以亚硝酸诱变处理黑曲霉Ｎ３４３和黑曲霉ＵＶ－１１的分生孢子,然后将它们培养在完全培养基平板上至第二代分生孢子长出,收集这些孢子以制霉菌素浓缩处理,结果以３．８～０．３％的高频率得到１９株稳定的营养缺陷型突变株：从黑曲霉Ｎ３４３获得３株维生素类的缺陷型,它们分别为双缺或叁缺;从黑曲霉ＵＶ－１１获得１６株特殊的脯氨酸营养缺陷型,进一步分析表明这是由于从谷氨酸合成脯氨酸或精氨酸的代谢阻断所致。所有以上突变株形态与各自原养型相似,但在产酶活力方面均为负突变     

利用原生质体融合技术提高黑曲霉产酶活力的研究

以黑曲霉Ｎ３４３和ＵＶ—１１为出发株,分别经亚硝酸诱变处理,再以制霉菌素浓缩处理,从中筛得３株维生素缺陷型和１株氨基酸缺陷型的突变株。选取来自Ｎ３４３的突变株ＮＢ_３（Ｂ_１^－,ＰＰ^－,ＦＡ^－）和来自ＵＶ—１１的突变株ＵＢＩ（Ｐｒｏ^－）为融合亲本,在研究其原生质体释放和再牛条件的基础上,以ＰＥＧ诱导进行了原生质体融合。用直接选择法检出９８个融合子,经过筛选得到两株稳定的融合子：Ｆ     

营养缺陷型酵母的鉴定技术

营养缺陷型酵母的鉴定技术张明（安徽农业大学生物工程系，合肥２３００３６）王元君，潘仁瑞（中国科学技术大学生物系，合肥２３００２６）通过固体法和液体法鉴定酵母营养缺陷型的实验，证明了液体法较固体法精确，并用液体法成功地鉴定了粟酒裂殖酵母（ｓｃｈｉｚｏｓ...     

沙门氏菌的营养缺陷型菌株——琼雷株的鉴定

从海南岛和霄州半岛的自毙鼠体内分离到两株沙门氏菌,经鉴定为无动力的营养缺陷型,定名为琼雷株。该菌株在普通肉膏汤琼脂上生长不良,在Davis’基本培养基上不生长,不能利甩无机铵作为氮源。经试验,为谷氨酸营养缺陷型,仅能在加有0．5 mg／ml谷氨酸的基本培养基内生长,在加入其他氨基酸和B族维生素的基本培养基内则不能生长。但可在加入组氨酸、缬氨酸、蛋氢酸和脯氨酸4种混合氨基酸的基本培养基内生长。维生素B·有促进生长的作用。两菌株的生化特性相同,符合肠杆菌科和沙门氏菌属的定义,能被沙门氏菌O一‘噬菌体裂解,血清学试验证明为ct群沙门氏菌,抗原式为615 625 7：一：一。     

高等担子菌双重营养缺陷突变菌株的分离

带有单一营养缺陷的凤尾菇和裂褶菌的单核体菌株经亲和性交配,各自交配产生后代,从中分离出遗传特性稳定,生理特征表型正常的双重缺陷营养害变型菌株,为原生质体融合育种研究提供了可靠的亲本菌株。     

结合缺陷型菌株显色法采用离子束诱变筛选高产L-精氨酸突变株

为快速高效筛选L-精氨酸高产突变株,建立一种缺陷菌株平板显色法并采用低能N+离子束对L-精氨酸生产用菌株钝齿棒杆菌SYPA5-5进行诱变处理,通过上述平板显色法筛选获得高产突变株.对突变株进行摇瓶发酵实验,最终选育出一株L-精氨酸产量较高且产酸性能比较稳定的突变菌株钝齿棒杆菌SYPA5-5-36.该菌株摇瓶发酵L-精氨酸产量可达35.85 g/L,比出发菌株提高了19.5％.因此,缺陷型菌株平板显色法可以用于快速、高效筛选高产L-精氨酸突变株.     

一种快速、精确构建大肠杆菌组氨酸营养缺陷型的方法

将表达Red体内重组蛋白的质粒pKD46转化大肠杆菌：DH5α,用5′端与组氨酸基因同源,3′端与卡那霉素抗性基因同源的引物获得具有卡那霉素抗性基因的PCR产物,然后电击转化DH5α,在λRed重组系统的帮助下,通过卡那霉素抗性基因两侧的组氨酸基因序列在体内与大肠杆菌染色体上的组氨酸基因发生同源重组,置换了DH5α组氨酸操纵元中的hisDCB基因,最后利用卡那霉素抗性基因两端的FRT位点,通过FTP位点专一性重组将卡那霉素抗性基因去除,最终获得了不具抗性的大肠杆菌组氨酸营养缺陷型菌株。为在大肠杆菌及其他菌株中快速、精确的构建营养缺陷型菌株提供了有益的参考。     

营养缺陷型福氏志贺氏菌口服活菌苗的研制

<正> 细菌性痢疾是一种波及世界的疾病。近几年据估计菌痢患者每年有数千万,且呈上升趋势。尽管人们已认识到了志贺氏菌在儿童中引起的临床症状是严重的,但其在儿童腹泻病因中的主要地位过去却被大大低估了。这一现象的解释有好几个方面,其中特别是这一疾病主要发生在6个月至5岁之间的儿童。而且与许多其它的肠道病原菌不一样,其主要并发症不是可用口服补液进行处理的脱水。估计每年因志贺氏菌腹泻而死亡的约60万人,大多数为5岁以下的儿童。     

自絮凝工业酒精酵母营养缺陷型的筛选和鉴定

运用紫外诱变方法成功获得了自絮凝酵母的营养缺陷型突变体,并且优化了诱变方法,证明了通过紫外诱变也可获得自絮凝酵母的营养缺陷型突变体。实验证明,较低的致死率更容易获得突变体,利用制霉菌素的富集可明显减少非缺陷型背景。本实验获得了组氨酸和尿嘧啶营养缺陷型各一株,其中组氨酸缺陷型茵株失去絮凝特性,而尿嘧啶缺陷型保持了良好的絮凝特性。继代实验表明,二株突变体均可以稳定遗传。并利用交配型PCR方法证明了絮凝酵母及其两株突变体与其酿酒酵母亲本类似,均为交配型杂合体。     

灵芝尿嘧啶营养缺陷型菌株的筛选和分子鉴定

【背景】营养缺陷型是一种应用广泛的分子标记,但是目前在灵芝中还未有研究和应用报道。【目的】为灵芝遗传转化研究、杂交育种和菌种鉴别提供亲本材料和技术支持。【方法】采用紫外光诱变、单单杂交、孢子单核化的方法从灵芝单核体菌株出发得到尿嘧啶营养缺陷型双核体菌株。【结果】获得8株稳定的尿嘧啶营养缺陷型单核体突变菌株和7株尿嘧啶营养缺陷型双核体菌株。【结论】灵芝尿嘧啶营养缺陷型菌株在添加外源营养物的基础上可恢复正常生长,可以为灵芝遗传转化体系的构建和灵芝育种提供材料。     

一种快速、精确构建大肠杆菌组氨酸营养缺陷型的方法*

将表达Red体内重组蛋白的质粒pKD46转化大肠杆菌DH5α,用 5′端与组氨酸基因同源 ,3′端与卡那霉素抗性基因同源的引物获得具有卡那霉素抗性基因的PCR产物 ,然后电击转化DH5α,在λRed重组系统的帮助下 ,通过卡那霉素抗性基因两侧的组氨酸基因序列在体内与大肠杆菌染色体上的组氨酸基因发生同源重组 ,置换了DH5α组氨酸操纵元中的hisDCB基因 ,最后利用卡那霉素抗性基因两端的FRT位点 ,通过FTP位点专一性重组将卡那霉素抗性基因去除 ,最终获得了不具抗性的大肠杆菌组氨酸营养缺陷型菌株。为在大     

光木耳和琥珀木耳种间营养缺陷型原生质体融合研究

利用~(60)Co—γ射线辐照木耳担孢子,获得了9株营养缺陷型突变体。采用光木耳[Auricularia auricula(L,ex Hook.)Underw.]组氨酸缺陷型菌株Aa-γH-9和琥珀木耳[Auricularia fuscosucinea(Mont.)Farlow]腺嘌呤缺陷型菌株Af-γH-1进行种间原生质体融合实验,根据营养互补原理,在基础培养基(MM)上检出融合子,获得了稳定的融合子,融合子频率为3.34×10~(-4)—3.76×10~(-4)。初步遗传分析表明:融合子细胞核为单核,是单核异核体,融合子氨基酸含量、酯酶同功酶酶谱均与双亲不同。     

用赖氨酸和泛酸营养缺陷型的结核分枝杆菌减毒株预防结核病

随着人类免疫缺陷病毒（HIV）与结核分枝杆菌（简称结核杆菌）共感染的情况日趋严重,急需一种安全有效的疫苗。在BCG比结核杆菌缺少的100多个开放阅读框架（ORF）中,有一些已被证明是具有保护作用的ORF,而这些缺失的区域可能编码潜在的抗原决定簇,因此结核杆菌减毒疫苗可能具有更高的免疫原性。