掌跖脓疱病患者皮损糖皮质激素受体α和β表达的研究

目的:为了解掌跖脓疱病患者皮损中GR表达情况,我们利用免疫组化方法检测患者皮损和正常皮肤标本中GR-α和GR-β的表达,从而探讨其表达在发病中的作用。方法:选择25例临床诊断为掌跖脓疱病患者皮损,26例外科手术切取的健康皮肤作为正常对照。用免疫组化SP法(链酶卵白素-过氧化物酶法)检测掌跖脓疱病患者皮损与正常对照组皮肤GR-α、GR-β的表达数量和强度。结果:两组GR-α表达无显著差异,患者组GR-β表达阳性率及强度明显高于对照组。结论:GR-β在掌跖脓疱病的发病过程中起重要作用。     

RNA干扰技术抑制BAG-1在大鼠肺泡巨噬细胞表达及恢复GR抗炎效应的研究

目的利用RNA干扰技术,建立脂多糖(LPS)和地塞米松(Dex)作用大鼠肺泡巨噬细胞BAG-1基因阻断模型,并阐明BAG-1表达对糖皮质激素受体(GR)抗炎活性的影响。方法构建两个针对BAG-1的RNAi质粒表达载体,分别命名为SiBAG-1α和SiBAG-1β,经测序确认后,转染大鼠肺泡巨噬细胞。细胞免疫组织化学法检测细胞核中BAG-1表达变化;电泳迁移率改变分析法(EMSA)检测GR活性变化。结果经测序证实:成功构建两个针对BAG-1基因的RNAi(RNA干扰)质粒表达载体SiBAG-1α和SiBAG-1β;转染质粒SiBAG-1α可明显降低胞核内BAG-1蛋白表达(P<0.05),而转染质粒SiBAG-1β对胞核内BAG-1蛋白表达无明显影响;质粒SiBAG-1α转染组细胞GR活性明显明显增强(P<0.05)。结论成功地构建并筛选出一个特异而高效地阻断BAG-1表达的质粒表达载体SiBAG-1α,抑制BAG-1表达可恢复GR抗炎活性,逆转GR活性下降所致的糖皮质激素抵抗。     

糖皮质激素受体α在脑膜瘤的表达及意义

目的探讨糖皮质激素受体α(GRα)在脑膜瘤的表达及在脑膜瘤发生发展中的意义。方法应用流式细胞术(FCM)检测58例脑膜瘤的增殖指数(PI)、S期细胞比率(SPF)、DNA倍性以评价肿瘤细胞的增殖活性,应用RT-PCR法检测脑膜瘤与7例正常硬脑膜GRα的表达,比较脑膜瘤与正常硬脑膜GRα表达的差异,并分析GRα表达与脑膜瘤病理级别、PI、SPF、DNA倍性的关系。结果58例脑膜瘤的PI为9·32%±4·41%,SPF为2·79%±2·43%。其中二倍体51例,异倍体7例,异倍体率为12·1%。GRα“-”9例,“ ”13例,“”15例,“”9例,“”12例,总的阳性率为84·5%。而7例正常硬脑膜均为GRα阴性表达,脑膜瘤的GRα阳性率显著高于正常硬脑膜。GRα阴性、弱阳性、强阳性这三组脑膜瘤的PI、SPF均无显著差异,GRα阳性与阴性脑膜瘤的异倍体率也未见差异。结论脑膜瘤组织是糖皮质激素的靶组织,GRα在脑膜瘤的发生中具有一定的意义;在诸多影响因素之中,GRα不是调节脑膜瘤增殖的主要因素,它的表达对脑膜瘤细胞的增殖活性无显著影响。     

钙泊三醇倍他米松软膏联合NB-UVB对掌跖脓疱病患者血清TNF-α,IL-17水平的影响

目的:观察钙泊三醇倍他米松软膏联合窄谱中波紫外线(NB-UVB)治疗掌跖脓疱病的临床疗效及对患者血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-17(IL-17)水平的影响。方法:选取掌跖脓疱病患者63例,随机分为治疗组和对照组,治疗组外用钙泊三醇倍他米松软膏联合NB-UVB治疗,对照组单纯照射NB-UVB,两组患者的疗程均为8周,治疗4周及8周后观察临床疗效,并测定血清中TNF-α、IL-17的浓度。结果:治疗4周和8周后,治疗组症状积分较对照组明显下降,差异有统计学意义(P0.05);治疗4和8周时,对照组的有效率分别为22.58%和45.16%,治疗组为53.13%和78.13%,两组患者的有效率比较差异显著(P0.05);停药后3个月,对照组复发率为35.48%,治疗组复发率为12.50%,治疗组明显低于对照组;治疗后两组患者血清中TNF-α、IL-17的浓度均较前下降,且治疗组较对照组下降更明显,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:钙泊三醇倍他米松软膏辅助治疗可以更有效提高掌跖脓疱病患者的临床疗效,且安全性较好,这可能与其降低患者外周血中TNF-α和IL-17的水平有关。     

钙泊三醇倍他米松软膏联合NB-UVB对掌跖脓疱病患者 血清TNF-alpha, IL-17水平的影响

目的：观察钙泊三醇倍他米松软膏联合窄谱中波紫外线(NB-UVB)治疗掌跖脓疱病的临床疗效及对患者血清肿瘤坏死因子 -alpha(TNF-alpha)、白细胞介素-17(IL-17)水平的影响。方法：选取掌跖脓疱病患者63 例,随机分为治疗组和对照组,治疗组外用钙泊三醇 倍他米松软膏联合NB-UVB 治疗,对照组单纯照射NB-UVB,两组患者的疗程均为8 周,治疗4 周及8 周后观察临床疗效,并测 定血清中TNF-琢、IL-17 的浓度。结果：治疗4周和8 周后,治疗组症状积分较对照组明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);治疗4 和8 周时,对照组的有效率分别为22.58 %和45.16 %,治疗组为53.13 %和78.13 %,两组患者的有效率比较差异显著(P<0.05);停 药后3 个月,对照组复发率为35.48 %,治疗组复发率为12.50 %,治疗组明显低于对照组;治疗后两组患者血清中TNF-alpha、IL-17 的浓度均较前下降,且治疗组较对照组下降更明显,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论：钙泊三醇倍他米松软膏辅助治疗可以更 有效提高掌跖脓疱病患者的临床疗效,且安全性较好,这可能与其降低患者外周血中TNF-琢和IL-17 的水平有关。     

Dectin-1及相关细胞因子在足菌肿皮损中的表达

目的观察Dectin-1在真菌性足菌肿皮损中的表达,初步分析其在足菌肿发病中的作用。方法实验分为3组,A组8例足菌肿病例,B组为10例着色芽生菌病病例,A组和B组统称为感染组,C组为18例正常皮肤组织。应用免疫组化法检测3组病例的组织蜡块中Dectin-1、IL-4,IL-10,IFN-γ,TNF-α的表达。结果与正常组相比,感染组皮肤的Dectin-1、IL-4、IFN-γ、TNF-α、IL-10的积分光密度增高(P0.05)。A组与B组相比,两组间Dectin-1、IL-4、IFN-γ,TNF-α的积分光密度值比较无差异(P0.05)。结论真菌感染皮损中Dectin-1的表达上调,可能说明Dectin-1在足菌肿发病中具有一定作用。     

秋水仙碱联合窄谱中波紫外线治疗掌跖脓疱病的临床研究

观察秋水仙碱联合窄谱中波紫外线(NB-UVB)治疗掌跖脓疱病的疗效及对血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-8(IL-8)的影响。选择我院皮肤科2011年12月~2015年12月收治的掌趾脓疱病患者88例,按照随机表法将88例患者分为对照组(n=44)和观察组(n=44)。对照组采用NB-UVB照射,隔日1次;观察组采用NB-UVB照射,隔日1次,同时口服秋水仙碱片,两组均连续治疗6周。6周后评价两组临床治疗效果,治疗前后测定患者血清中TNF-α和IL-8的水平,并观察治疗的不良反应。结果显示,治疗6周后,观察组患者的有效率79.5%(35/44)明显高于对照组61.3%(27/44)(p0.05);两组患者治疗前的血清TNF-α、IL-8水平之间对比后无明显差异(p0.05),对照组患者治疗后的血清TNF-α、IL-8水平分别为(10.74±3.25)ng/L和(9.52±2.85)ng/L,观察组分别为(6.24±2.33)ng/L和(5.81±2.20)ng/L,以上指标较治疗前均有显著降低,与对照组相比观察组下降幅度更大(p0.05)。本研究结果表明,秋水仙碱联合NB-UVB照射治疗掌跖脓疱病疗效好,不良反应少,可减少血清中炎症因子TNF-α和IL-8的水平,为治疗掌趾脓疱病提供了新思路。     

Cd~(2+)处理后麻雀脑组织中糖皮质激素受体和盐皮质激素受体表达变化

目的检测在Cd~(2+)处理后糖皮质激素受体(GR)和盐皮质激素受体(MR)在麻雀Passer montanus脑组织中的表达变化。方法 6只麻雀随机分成2组,每组3只。处理组饮水中添加500μg·L~(-1)Cd~(2+),对照组不添加。用Clustal W2将麻雀的GR和MR氨基酸序列与其他物种氨基酸序列进行相似性比对分析。采用Real-time PCR检测基础水平下麻雀各组织中GR和MR基因的表达水平。Cd~(2+)处理后,测定GR和MR基因在脑组织中的表达变化。结果麻雀与斑胸草雀Taeniopygia guttata和原鸡Gallus gallus的GR和MR氨基酸序列的相似性大于90%;GR和MR基因在麻雀肝脏、肠、心脏、眼球、脑、肺、肌肉、肾脏和性腺9个组织中均有表达;Cd~(2+)处理后,处理组脑组织中GR和MR mRNA表达水平均上调,且显著高于对照组(P0.05)。结论 GR和MR在麻雀各组织中广泛表达;推测GR和MR基因在Cd~(2+)的应激反应中具有重要作用,具体作用还有待于进一步论证,同时该研究为野外工作提供了一定的实验依据。     

骨桥蛋白及其受体整合素αvβ3在子痫前期患者胎盘中的表达及意义

本研究旨在考察骨桥蛋白及其受体整合素αvβ3在子痫前期患者胎盘中表达,及其在子痫前期发病机制中的可能作用。选取2017年3月至2018年9月期间在我院治疗的30例子痫前期产妇(子痫前期组)和30例正常妊娠产妇(对照组)的胎盘组织样本进行研究,采用免疫组化、Western blotting和RT-PCR检测了产妇胎盘组织中骨桥蛋白和整合素αvβ3的表达情况。免疫组化分析显示,对照组健康产妇和子痫前期产妇的胎盘组织中均可检测到骨桥蛋白和整合素αvβ3的阳性表达,子痫前期组的骨桥蛋白和整合素αvβ3的阳性率分别为64%和48%,而对照组分别为86%和68%,两组阳性率差异均具有统计学意义(p0.05)。Western blotting结果显示,子痫前期组的骨桥蛋白和整合素αvβ3蛋白相对表达量均显著低于对照组(0.73vs 1.54,0.81 vs 1.42,p0.05)。RT-PCR结果显示,子痫前期组的骨桥蛋白、αv和β3 mRNA相对表达量均显著低于对照组(0.62 vs 1.26,0.70 vs 1.18,0.76 vs 1.04,p0.05)。本研究证实骨桥蛋白及其受体整合素αvβ3在子痫前期患者胎盘组织中明显下调,可能通过影响滋养层细胞的侵袭性和母胎界面免疫来参与子痫前期的发生发展。     

穹窿切断后海马神经元GR表达变化的研究

目的实施大鼠穹窿切断术研究海马神经元核受体GR(glucocorticoidreceptor糖皮质激素受体)表达的变化。方法建立大鼠穹窿切断模型,于穹窿切断术后0、4、7、10d取材;同时取材假手术组(非穹窿切断术)作为对照,应用免疫组化、WesternBlotting方法分别进行各组海马神经元GR表达变化的观察及定量检测。结果穹窿切断7d后,免疫组化和WesternBlotting结果显示海马神经元GR表达下调,10d下调更为显著。结论穹窿切断后,海马GR表达下调,提示可能减弱海马对HPA轴的抑制。     

细胞免疫缺陷对海马盐皮质激素受体和糖皮质激素受体表达的影响

目的探讨细胞免疫缺陷对海马盐皮质激素受体(MR)和糖皮质激素受体(GR)表达水平的影响及意义。方法随机选取不同年龄(1周,7周)的雄性裸小鼠(Balb/c-nu/nu)各6只作为实验组,另随机选取与实验组动物年龄、性别、数量相一致的正常Balb/c小鼠作为对照组;所有动物采用RT-PCR方法检测其海马中MR、GR的mRNA变化。结果与正常对照组相比,1周裸小鼠MR的mRNA表达无明显变化,7周裸小鼠MR的mRNA水平较正常对照组显著上调(P0.05);1周与7周裸小鼠GR的mRNA水平均较正常对照组显著上调(P0.05)。结论早期裸小鼠海马内GR和MR表达上调可能是引起认知减退的原因。     

在寻常型银屑病中HBD-2、MMP-9及TNF-α的表达与PASI评分的正相关关系

为了探讨寻常型银屑病患者皮损中β-防御素2(HBD-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白的表达情况及其临床意义。本研究选取在我院2014年8月至2016年12月皮肤科确诊的寻常型银屑病患者90例作为病例组,另选30例健康对象作为健康组,分别采用免疫组化检测两组HBD-2、MMP-9、TNF-ɑ蛋白的表达,分析其与患者银屑病皮疹面积和严重程度评分法(PASI)评分的关系。研究发现,病例组患者皮损中HBD-2、MMP-9、TNF-α蛋白光密度值显著的高于健康组皮肤,并且MMP-9指标最大;根据PASI将银屑病患者分组,皮损中HBD-2、MMP-9、TNF-α蛋白光密度值组间比较为轻度组中度组重度组,差异均具有统计学意义(p0.05)。因此,银屑病患者皮损中HBD-2、MMP-9、TNF-α蛋白光密度值与PASI评分均呈显著的正相关关系,HBD-2、MMP-9、TNF-α的表达水平可以作为辅助临床诊断和治疗寻常型银屑病的判断指标,也为进一步探究寻常型银屑病发病机制提供参考依据。     

肝泰对肝纤维化大鼠肝组织中神经递质受体作用的研究

目的研究肝泰对CCl4诱导的肝纤维化大鼠肝组织中神经递质受体的作用,探讨其抗肝纤维化的作用机制。方法将40只Wistar大鼠分为4组：正常对照组（N）10只、肝复乐胶囊对照组（G）10只、肝泰组（Z）10只及模型组（M）10只。采用光镜及电镜观察肝组织病理学改变;应用免疫组织化学法、逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和West-ern-blot方法检测各组肝组织α1肾上腺素能受体（α1A-AR）、β2肾上腺素能受体（β2-AR）的表达。结果肝泰组、肝复乐胶囊对照组病理改变较模型组明显改善;免疫组织化学、RT-PCR、Western blot三种不同层次水平的研究结果均表明：肝泰组和肝复乐胶囊对照组α1A-AR及β2-AR的表达较模型组显著降低（P〈0.05）。结论肝泰能通过抑制肝组织中α1A-AR及β2-AR的表达,从而调节神经递质在肝纤维化中的作用。     

桔梗皂苷对慢性支气管炎小鼠肺细胞中的IL-1β和TNF-α表达的影响

探讨炎性细胞因子在慢性支气管炎小鼠肺细胞中的表达及桔梗皂苷(kikyosaponin,KS)治疗慢性支气管炎的作用机制。将50只健康小鼠分成正常对照组、模型组和桔梗皂苷低、中、高剂量组,除正常对照组外,其余四组动物均采用烟熏加浓氨水吸入法建立慢性支气管炎模型,然后分别用药物进行治疗。实验结束后,取各组小鼠肺组织进行石蜡制片,HE染色光镜观察支气管和肺组织病理形态的变化;免疫组化分析肺细胞中IL-1β和TNF-α的表达。Western blot检测肺组织中IL-1β和TNF-α的表达。免疫组化检测显示,与正常对照组相比,模型组小鼠肺组织细胞中IL-1β和TNF-α的表达非常显著。在连续用药30天后,与模型组相比,各治疗组小鼠肺组织细胞中IL-1β和TNF-α的表达显著降低(P<0.05,P<0.01)。蛋白印迹术检测显示,模型组小鼠肺组织细胞中IL-1β和TNF-α的表达水平明显增加,与正常对照组比较,差异十分显著(P<0.01)。而连续用药30天后,各治疗组小鼠肺组织细胞中IL-1β和TNF-α的表达量明显下降,且呈较好的量效关系。结果表明,桔梗皂苷对慢性支气管炎小鼠肺组织中炎性细胞因子IL-1β和TNF-α的表达有明显的抑制作用。推测其作用机制可能是通过抑制肺组织中炎性细胞因子和自由基的生成而达到抗炎、止咳平喘作用的。     

TNF-α在宫颈息肉组织中的表达及意义

目的:检测宫颈息肉组织中肿瘤坏死因子TNF-α的表达,并探讨其在宫颈息肉发病机制中的作用.方法:对150例患者宫颈息肉组织及137例宫颈管内膜组织分别进行TNF-α免疫组织化学染色和免疫印迹检测.结果:免疫组化检查发现TNF-α主要表达在宫颈息肉组织中的浆细胞胞质内,与对照组的表达比较差异有统计学意义(t值分别为2.258,P值均＜0.05).而且免疫印迹检查发现TNF-α蛋白在宫颈息肉组织中特异性表达强度高于对照组.结论:TNF-α在宫颈息肉组织中表达增高,对其发病起着一定的作用.     

银屑病皮损中IL—10及IL—12 p35、p40 mRNA表达的研究

探讨IL－10和IL－12在银屑病发病机理中的可能作用,为应用基因治疗银悄病提供理论基础。采用逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）技术检测了12例银屑病患者及6例正常皮肤组织中IL－10和IL－12p35、p40mRNA的表达情况。研究结果表明：（1）与正常皮肤组织相比银屑病皮损中IL－10mRNA明显降低（P＜0.01）。（2）IL－12p35 mRNA在银屑病皮损和正常皮肤组织中均呈阳性表达,IL－12p40 mRNA只在银屑病皮损中呈阳性表达,而在正常皮肤中为阴性。推测IL－12在银屑病的发生和发展中可能起重要,而IL-10可能在银屑病消退中起一定作用。     

PTSD样大鼠海马MR和GR变化的研究

目的研究PTSD大鼠海马神经元核受体MR(mineralocorticoid receptor,盐皮质激素受体)和GR(glu-cocorticoid receptor糖皮质激素受体)表达的变化。方法采用国际认定的SPS方法刺激大鼠建立PTSD大鼠模型,分别取SPS处理后24h、7d、14d大鼠脑组织;同时取正常脑组织(非SPS刺激)作为对照,应用免疫组化、Western Blot方法分别进行各组海马神经元GR和MR表达变化的观察及定量检测。结果(1)经SPS处理后,免疫组化和Western Blot结果显示海马神经元MR表达呈现随着24h、7d、14d逐渐下调的趋势;(2)经SPS处理后,免疫组化和Western Blot结果显示海马神经元GR表达于24h时下调,而7d、14d时呈现逐渐回升趋势。结论大鼠经SPS处理后,海马MR表现为持续下调状态;而GR表达为短暂下调,随后回调,揭示PTSD大鼠海马神经元核受体—MR和GR的表达变化可能是引发海马功能降低的重要因素之一。     

NGF及其受体TrkA在子宫腺肌病中的表达及与痛经的关系

目的：研究NGF及其受体TrkA在子宫腺肌病患者的异位内膜与在位内膜组织的表达情况及与痛经的关系。方法：采用免疫组化MaxVision法检测子宫腺肌病异位内膜（30例）、在位内膜（30例）、正常子宫内膜（19例）标本中NGF、TrkA蛋白的表达,分析其表达差异及与痛经的关系。结果：①子宫腺肌病异位内膜组NGF、TrkA表达显著高于正常内膜组（P〈0.01）,在位内膜组NGF、TrkA表达显著高于正常内膜组（P〈0.01）,子宫腺肌病异位内膜组NGF、TrkA表达与在位内膜组无显著差异。②子宫腺肌病异位内膜组NGF、TrkA表达与痛经强度评分呈正相关（相关系数r=0.637,P=0.000;r=0.662,P=0.000）。结论：NGF及其受体TrkA在子宫腺肌病中高表达可能参与子宫腺肌病发病机制,而且可能与痛经有关。     

糖皮质激素对人绒毛膜滋养层细胞11β-HSD1的调节

目的：研究糖皮质激素对11β-羟基类固醇脱氢酶I型(11β-hydroxysteroid dehydiogenase type1,11β-HSD1)还原酶活性和mRNA表达的调节。方法：利用原代培养的人类绒毛膜滋养层细胞,运用免疫细胞化学染色方法、放射性酶活性测定及Northem印迹杂交技术,结合图像分析技术检测11β-HSD1 mRNA的表达量。结果：11β-HSD1和糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)免疫活性样物质共存于原代培养的人绒毛膜滋养层细胞中,人工合成的糖皮质激素——地塞米松对绒毛膜滋养层细胞11β-HSD1还原酶活性和mRNA表达具有诱导作用,此诱导作用可以被GR阻断剂RU486所阻断。结论：糖皮质激素与GR结合后上调绒毛膜滋养层细胞11β-HSD1酶活性和mRNA表达。