电针不同穴位对慢性炎症痛模型大鼠心理行为改变的实验观察

目的:观察电针不同穴位对慢性炎症痛模型大鼠行为学改变的影响,进一步探讨电针对慢性痛所致心理行为改变的调节规律。方法:将40只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、电针百会组、电针关元组、电针足三里组,每组各8只。除正常组外,其余各组均采用弗氏完全佐剂(CFA)制备佐剂性关节炎(AA,即慢性炎症痛)大鼠模型,于造模第2天各治疗组捆绑固定后给予电针20 min,正常组及模型组捆绑束缚20 min,隔日一次,共10次。于造模前、造模后、治疗5次、10次分别采用高架十字迷宫检测各组大鼠开放臂进入次数比例(OE%)及开放臂停留时间比例(OT%)的变化。结果:与造模前比较,电针百会穴组大鼠造模后OE%和OT%明显减少(P<0.05,P<0.05),且治疗5次后OT%、治疗10次后OE%与OT%均降低明显(P<0.01,P<0.01,P<0.05),而电针关元组大鼠治疗10次后OE%和OT%则明显升高(P<0.05,P<0.05),电针足三里组大鼠造模后OT%、治疗5次后大鼠OE%与OT%、治疗10次后OT%均明显降低(P<0.01,P<0.05,P<0.01,P<0.05);与造模刚结束比较,电针百会组大鼠在治疗5次、10次后OE%由升高逐步降低,而OT%由低逐渐升高(P>0.05),电针关元组模型大鼠治疗10次后模型大鼠OE%和OT%均明显升高(P<0.05,P<0.05),电针足三里组模型大鼠治疗10次后OT%升高明显(P<0.05);与治疗5次后比较,电针百会组大鼠在治疗10次后OE%降低、OT%升高(P>0.05),电针关元组与电针足三里组大鼠治疗10次后OE%和OT%均明显升高(P<0.05,P<0.05;P<0.01,P<0.01)。与电针百会组比较,电针关元组与电针足三里组大鼠在治疗10次时OE%均明显升高(P<0.01,P<0.01)。结论:电针不同穴位具有一定抗抑郁和抗焦虑作用,可改善慢性炎症痛所致大鼠焦虑、情绪行为的变化;不同穴位效应不同,关元穴与足三里穴具有综合调节、抗焦虑效应,且具有相对特异性。     

艾灸干预不同穴位对束缚应激模型大鼠心理行为改变的影响

目的:观察艾灸不同穴位对束缚应激模型大鼠行为学改变的影响,进一步探讨艾灸对束缚应激所致心理行为改变的作用规律。方法:将35只雄性Wistar大鼠按分层随机法分为正常组、束缚应激模型组、艾灸百会(GV20)组、艾灸关元(CV4)组、艾灸足三里(ST36)组,每组各7只。除正常组外,余各组均采用自制布袋束缚大鼠30 min,每日1次,共20次,制备束缚应激大鼠模型,于造模第2天各治疗组捆绑固定后给予艾炷灸3壮,正常组及模型组捆绑束缚20 min,隔日一次,共10次。于造模前、造模后,治疗5次、10次分别采用高架十字迷宫检测各组大鼠开放臂进入次数比例(OE%)及开放臂停留时间比例(OT%)的变化。结果:①与造模前比较,艾灸百会(GV20)组大鼠造模后、治疗10次后OE%均降低明显,治疗5次后OT%升高明显,均有显著性差异(P<0.05),艾灸关元(CV4)组大鼠造模后OT%降低明显,有显著性差异(P<0.05),艾灸足三里(ST36)组大鼠造模后OE%和OT%、治疗10次后OE%均明显降低,均有显著性差异(分别为P<0.05,P<0.05,P<0.01);与造模刚结束比较,艾灸百会(GV20)组大鼠治疗5次后OE%与OT%均升高明显,均有显著性差异(P<0.05),艾灸关元(CV4)组大鼠治疗10次后OT%升高明显,有显著性差异(P<0.01),艾灸足三里(ST36)组大鼠治疗5次后OE%、治疗10次后OT%均明显升高,有显著性差异(分别为P<0.01,P<0.05);与治疗5次比较,艾灸百会(GV20)组、足三里(ST36)组大鼠治疗10次后OE%明显降低,艾灸关元(CV4)组大鼠治疗10次后OE%和OT%升高明显,均有显著性差异(P<0.05)。②与艾灸百会(GV20)组比较,艾灸关元(CV4)组与艾灸足三里(ST36)组大鼠在治疗5次、10次后OE%和OT%呈不同程度的升高或降低趋势,未见显著性差异(P>0.05)。结论:艾灸不同穴位可一定程度改善慢性束缚应激所致大鼠焦虑心理行为的变化;关元(CV4)、百会(GV20)、足三里(ST36)三穴均表现出一定抗焦虑效应,百会(GV20)穴在治疗早期效果显著,足三里(ST36)穴的疗效肯定,而关元(CV4)穴在长期治疗中效应更为稳定、明显,具有相对特异性。     

不同电针方法对慢性应激抑郁模型大鼠下丘脑TRH表达的影响

目的:研究分析两种不同电针方法对慢性应激抑郁模型大鼠(CUMS)下丘脑中促甲状腺激素释放激素(TRH)表达的影响。方法:选取60只健康雄性SPF级SD大鼠编号后采用随机数字表法分为对照组(正常喂养)、模型组(仅建立CUMS模型,不予治疗)、观察组A(建立CUMS模型后,脉冲电针治疗)、观察组B(建立CUMS模型后,音乐电针治疗)、氟西汀组(建立CUMS模型后,氟西汀治疗)各12只,对除对照组之外的其他各组大鼠进行1只/笼的孤养结合方式建造CUMS模型,利用开野实验观察各组大鼠行为学改变,采用实时荧光定量(PCR)法测定各组大鼠下丘脑组织中TRH m RNA的表达,采用免疫组化法测定TRH蛋白的表达。结果:在刺激21 d后,模型组大鼠的水平运动次数、垂直运动次数显著的低于对照组、实验组A、实验组B、氟西汀组,且差异均具有统计学意义(P0.05),实验组A、实验组B、氟西汀组大鼠的水平运动次数、垂直运动次数显著低于对照组,且差异均具有统计学意义(P0.05),实验组A、实验组B、氟西汀组大鼠的水平运动次数、垂直运动次数差异无统计学意义(P0.05);模型组大鼠的下丘脑TRH m RNA、TRH蛋白水平低于对照组、实验组A、实验组B、氟西汀组,且差异均具有统计学意义(P0.05),实验组A、实验组B、氟西汀组大鼠的大鼠的下丘脑TRH m RNA、TRH蛋白水平显著低于对照组,且差异均具有统计学意义(P0.05);实验组A、实验组B、氟西汀组大鼠的大鼠的下丘脑TRH m RNA、TRH蛋白水平差异无统计学意义(P0.05)。结论:CUMS大鼠下丘脑中促甲状腺激素释放激素表达水平降低,脉冲电针与音乐电针能有效逆转这一现象,效果相当。     

电针干预慢性炎性痛的杏仁核潜在蛋白筛选

目的 本研究旨在对完全弗氏佐剂(complete Freund's adjuvant,CFA)诱导的慢性疼痛大鼠的杏仁核进行同位素标记的相对和绝对定量(isobaric tags for relative and absolute quantitation,iTRAQ)蛋白质组学分析,并对蛋白质表达进行综合分析,以探讨...     

奖赏记忆改善焦虑行为的小鼠模型及机制初探

焦虑是当今社会最普遍的精神障碍之一.药物疗法和心理疗法是焦虑症的主要治疗手段,后者因无副作用且不易反复而倍受重视.在焦虑症的心理行为疗法中,奖赏记忆缓解焦虑的模型及机制是一个重要的科学问题.对这一问题的研究将有助于理解其内在机制并开发更好的治疗焦虑症的方法.基于经典的小鼠焦虑行为评测工具——高架十字迷宫,我们首先考查了焦虑评测结合行为训练的可行性,发现小鼠在高架十字迷宫上反复评测后行为达到稳态,则可通过在开放臂末端设置食物奖赏来研究奖赏记忆对焦虑行为的影响;然后通过实验证明短期奖赏训练和无奖赏的强制开放臂暴露不能改善焦虑行为;进而确定并验证了奖赏训练改善焦虑行为的正确方式;最后在此行为模型中应用有致遗忘效应的蛋白激酶C的抑制剂白屈菜赤碱(chelerythrine),发现奖赏记忆形成被抑制伴随着焦虑行为改善的削弱.初步揭示了此行为模型涉及的细胞分子机制.     

小鼠动物实验方法系列专题(五) 应用高架十字迷宫分析小鼠焦虑行为

高架十字迷宫(the elevated plus maze,EPM)是研究小鼠焦虑行为的重要实验,本文介绍了EPM的原理和实验步骤。将小鼠置于开臂闭臂接合处,面向开臂,通过录像记录分析小鼠在EPM的表现。结果发现,两种小鼠均可成功完成实验,C57小鼠在EPM内较不活跃,闭臂滞留时间占总时间百分比显著高于129Sv小鼠。应用EPM可以简单直观地分析小鼠焦虑行为。     

反复电针对慢性痛的累加治疗作用及其机制研究

本研究从基础和临床两方面观察了反复电针对慢性痛的累加治疗作用,并结合疼痛患者及慢性痛动物模型中几种神经肽的放射免疫测定及相应受体拮抗剂的药理学研究结果,探讨了产生累加效应的可能机制。结果表明,在临床脊髓损伤性痉挛患者,１００Ｈｚ穴位体表电刺激有效地缓解痉挛并有累加效应;在临床慢性痛患者,２／１５Ｈｚ变频ＴＥＮＳ刺激有效地治疗疼痛并具有累加效应。在关节炎模型大鼠,电针刺激能产生明显的镇痛并具有累加效     

福尔马林引起的急性内脏炎症痛模型

目的：为深入开展内脏痛的研究,建立急性内脏炎症痛模型。方法：实验选用Ｗｉｓｔａｒ 大鼠,雌雄不拘,体重２４０～２７０ ｇ。本实验分两个部分：①大鼠乙状结肠壁粘膜下注射福尔马林（０ ．１ｍｌ,５ ％） 复制急性内脏炎症痛模型;②检测吗啡（１ ｍｇ／ｋｇ,２ ｍｇ／ｋｇ,４ ｍｇ／ｋｇ）对模型疼痛分数的影响。结果：①福尔马林具有显著的致痛效应,实验组的疼痛分数显著高于对照组（ Ｐ＜ ０．０１） ;②疼痛分数能够反映内脏疼痛程度;③吗啡对模型具有显著、剂量依赖的止痛效应（Ｐ＜ ０．０１） 。结论：①大鼠乙状结肠壁粘膜下注射福尔马林可作为急性内脏炎症痛模型;②疼痛分数能客观反映了内脏疼痛程度,可作为量化指标     

鞘内注射孤啡肽对大鼠足底注入蜜蜂毒诱致长时程自发痛、痛敏和炎症的不同效果

为进一步了解孤啡肽在脊髓水平是否具有抗伤害及抗炎作用,本实验在具有多种痛行为表现的蜜蜂毒模型上观察了鞘内注射孤啡肽对大鼠一侧后足底注入蜜蜂毒所诱致的同侧自发缩足反射、原发热和机械性痛敏以及注射部位炎症反应的影响,同时观察了新的高选择性孤啡肽受体拮抗剂CompB的作用.结果表明与生理盐水对照组比较,鞘内注射孤啡肽(3、10、30 nmol/10μl)对蜜蜂毒诱发的自发缩足反射次数的抑制作用随剂量提高而增大,抑制率分别为37±7,43±6and57±11%(三个剂量vs对照,P＜0.05);而对蜜蜂毒诱发的注射部位炎症反应(爪体积、爪背腹厚度和蛋白渗出的增加)无显著影响.CompB(30 nmo1)可完全翻转10 nmol孤啡肽对自发缩足反射的抑制作用.鞘内单次或重复注射孤啡肽(10 nmol/10μl)对蜜蜂毒诱致的原发性热和机械性痛敏的发生和维持均无作用.本实验结果提示,外源性孤啡肽在脊髓通过孤啡肽受体的介导产生一定的镇痛作用,但是它可能仅对持续性自发痛有抑制作用,而对热和机械性痛敏及炎症反应均无影响.     

电针通过抑制氧化应激和炎症反应减轻DSS诱导的大鼠结肠炎

目的探讨电针对葡聚糖硫酸钠(dextran sodium sulfate,DSS)诱导的大鼠结肠炎的治疗作用及机制。方法大鼠口服DSS诱发慢性结肠炎,接受为期21d的电针治疗后,剪取结肠并测量长度,同时检测血清中LDH的水平和结肠屏障功能;HE染色评估结肠组织的病理学改变情况;TUNEL染色和cleaved caspase-3免疫组织化学染色评估结肠组织损伤情况;试剂盒法检测结肠组织氧化应激指标MDA和GSH水平以及SOD和iNOS活性;ELISA法检测结肠组织中促炎因子IL-1β、IL-6和TNF-α水平;Western blot法检测结肠组织中claudin-3和ZO-1水平。结果 21d的电针治疗明显改善DSS引起的结肠缩短、结肠屏障破坏、血清LDH释放和病理学损伤。电针治疗能有效恢复DSS处理的大鼠结肠组织中claudin-3和ZO-1水平,以及降低结肠组织中TNF-α、IL-1β、IL-6水平,并抑制iNOS和MDA活性,同时增加GSH和SOD的活性。结论电针治疗可通过修复肠屏障功能、降低炎症反应和氧化应激来减轻DSS诱发的大鼠慢性结肠炎。     

川芎嗪对慢性压迫性损伤大鼠神经病理痛行为学的影响

目的探讨川芎嗪对慢性压迫性损伤（CCI）大鼠行为学的影响。方法建立大鼠坐骨神经CCI神经病理痛模型,取40只雄性大鼠随机分成4组,Ⅰ组为空白对照组,Ⅱ组为假手术组,Ⅲ组为CCI＋川芎嗪治疗组,Ⅲ组在术后第1天开始腹腔注射100 mg/kg川芎嗪注射液,Ⅳ组为CCI手术组。分别于术前（0 d）及术后1、3、5、7、91、1、14 d以von Frey细丝法和热辐射法测定机械缩足反射阈值（mechanical withdrawal threshold,MWT）和热缩足反射潜伏期（thermal withdrawal latency,TWL）,观察CCI大鼠神经病理痛的行为学变化。结果术后14 d,Ⅳ组和I、Ⅱ、Ⅲ组相比较,大鼠后爪的机械和热痛敏阈值明显降低（P〈0.01）;I、Ⅱ、Ⅲ组之间相比,大鼠后爪的机械和热痛敏阈值差异没有显著性（P〉0.05）。结论川芎嗪可以缓解CCI大鼠的慢性神经病理痛行为学表现。     

Behavioral and Electrophysiological Evidence for the Differential Functions of TRPV1 at Early and Late Stages of Chronic Inflammatory Nociception in Rats

We previously reported that vanilloid receptor type 1 (VR1, or TRPV1) was up-regulated in dorsal root ganglion (DRG) and the spinal dorsal horn after chronic inflammatory pain produced by complete Freund’s adjuvant (CFA) injection into the plantar of rat hind paw. In the present study, we found that subcutaneous or intrathecal application of capsazepine (CPZ), a TRPV1 competitive antagonist, could inhibit thermal hyperalgesia on day 1 and on day 14 but not on day 28 after CFA injection. With extracellular electrophysiological recording, the effect of CPZ on noxious electrical or heat stimulation evoked responses of wide dynamic range (WDR) neurons in the deep layers of the spinal dorsal horn was evaluated. Under noxious electrical stimulation to sciatic nerve, CPZ applied to the spinal cord produced an inhibition on Aδ- and C-fiber evoked responses of WDR neurons on day 1 and 14, but not on day 28. Under radiant heat stimulation to the receptive field skin, subcutaneous application of CPZ significantly inhibited the background activity and extended the response latency of WDR neurons on day 14. These results provide new evidence for the functional significance of TRPV1 at the early stage, but not the late stage, in the rat model of CFA-induced inflammatory pain. Special issue article in honor of Dr. Ji-Sheng Han. Hao Luo, Isabella Shi Xu, Yi Chen are Co-first authors.     

经皮神经电刺激联合布洛芬缓释胶囊对盆腔炎性疾病所致慢性盆腔疼痛患者血清炎症因子和致痛物质水平的影响

摘要 目的：观察经皮神经电刺激（TENS）联合布洛芬缓释胶囊治疗盆腔炎性疾病（PID）所致慢性盆腔疼痛（CPP）的疗效及对血清炎症因子和致痛物质水平的影响。方法：选择2020年6月～2021年6月期间河北省人民医院收治的120例PID所致CPP患者。根据随机数字表法分为对照组和研究组,各为60例,对照组患者接受布洛芬缓释胶囊治疗,研究组患者接受TENS联合布洛芬缓释胶囊治疗,对比两组疗效、症状评分、血清炎症因子、致痛物质水平和安全性情况。结果：研究组（91.67%）的临床总有效率高于对照组（75.00%）,差异有统计学意义（P<0.05）。治疗后,两组疼痛视觉模拟（VAS）评分、症状体征（McCormack）评分均下降,研究组低于对照组同期（P<0.05）。治疗后,两组血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-6（IL-6）、白介素-1β（IL-1β）、C反应蛋白（CRP）水平均下降,研究组低于对照组同期（P<0.05）。治疗后,两组血清5-羟色胺（5-HT）、P物质（SP）和强啡肽（DYN）水平均下降,研究组低于对照组同期（P<0.05）。两组不良反应发生率组间对比,未见差异（P>0.05）。结论：TENS联合布洛芬缓释胶囊治疗PID所致CPP,疗效确切,可促进症状缓解,降低炎症因子和致痛物质水平。     

不同浓度辣椒辣素对小鼠慢性膝关节炎疼痛模型的治疗效果分析

目的:观察不同浓度辣椒辣素对小鼠慢性膝关节炎疼痛模型的治疗效果。方法:选择健康成年雄性昆明小鼠50只,通过左膝关节腔内注射0.01 m L完全性弗氏佐剂(Complete Freund's Adjuvant,CFA)建立慢性膝关节炎疼痛模型,3周后建模成功。随后,将造模成功的小鼠随机分为五组(n=10):实验一组(生理盐水组)、实验二组(辣椒辣素赋形剂组)、实验三组(0.5%的辣椒辣素组)、实验四组(3%的辣椒辣素组)、实验五组(8%的辣椒辣素组)。观察注药后1、4、7小时的热缩足反射时间以及注药后60天内的热缩足反射时间。结果:(1)生理盐水组与辣椒辣素赋形剂组注药后1、4、7小时的热缩足反射时间以及注药后60天内的热缩足反射时间比较差异均无统计学意义(P0.05)。(2)实验三组注射辣椒辣素后产生的急性疼痛于注药后7小时恢复,实验四组小鼠的急性疼痛期于注药后4小时恢复,实验五组小鼠的急性疼痛期于注药后1小时恢复。(3)实验三组镇痛时间持续18.9±1.1天,实验四组镇痛时间持续33.7±1.0天,实验五组镇痛时间持续58.2±1.2天。结论:辣椒辣素对于CFA所致慢性膝关节炎疼痛模型具有镇痛作用,并且镇痛作用时间随着辣椒辣素的浓度增加而延长。     

Sigma-1受体在慢性疼痛中的调节作用及其神经机制

Sigma-1受体(sigma-1 receptor,Sig-1R)属于配基依赖性的分子伴侣蛋白质,广泛表达于神经系统的多个区域,并可通过结合多种类型的阳离子通道及G蛋白偶联受体(G-protein-coupled receptors,GPCRs)对它们介导的细胞内效应进行调控,或是在内质网和线粒体相关膜结构上对细胞内...     

Chronic Constriction of the Sciatic Nerve and Pain Hypersensitivity Testing in Rats

Chronic neuropathic pain, resulting from damage to the central or peripheral nervous system, is a prevalent and debilitating condition, affecting 7-18% of the population^1,2. Symptoms include spontaneous (tingling, burning, electric-shock like) pain, dysaesthesia, paraesthesia, allodynia (pain resulting from normally non-painful stimuli) and hyperalgesia (an increased response to painful stimuli). The sensory symptoms are co-morbid with behavioural disabilities, such as insomnia and depression. To study chronic neuropathic pain several animal models mimicking peripheral nerve injury have been developed, one of the most widely used is Bennett and Xie''s (1988) unilateral sciatic nerve chronic constriction injury (CCI)³ (Figure 1). Here we present a method for performing CCI and testing pain hypersensitivity.CCI is performed under anaesthesia, with the sciatic nerve on one side exposed by making a skin incision, and cutting through the connective tissue between the gluteus superficialis and biceps femoris muscles. Four chromic gut ligatures are tied loosely around the sciatic nerve at 1 mm intervals, to just occlude but not arrest epineural blood flow. The wound is closed with sutures in the muscle and staples in the skin. The animal is then allowed to recover from surgery for 24 hrs before pain hypersensitivity testing begins.For behavioural testing, rats are placed into the testing apparatus and are allowed to habituate to the testing procedure. The area tested is the mid-plantar surface of the hindpaw (Figure 2), which falls within the sciatic nerve distribution. Mechanical withdrawal threshold is assessed by mechanically stimulating both injured and uninjured hindpaws using an electronic dynamic plantar von Frey aesthesiometer or manual von Frey hairs⁴. The mechanical withdrawal threshold is the maximum pressure exerted (in grams) that triggers paw withdrawal. For measurement of thermal withdrawal latency, first described by Hargreaves et al (1988), the hindpaw is exposed to a beam of radiant heat through a transparent glass surface using a plantar analgesia meter^5,6. The withdrawal latency to the heat stimulus is recorded as the time for paw withdrawal in both injured and uninjured hindpaws. Following CCI, mechanical withdrawal threshold, as well as thermal withdrawal latency in the injured paw are both significantly reduced, compared to baseline measurements and the uninjured paw (Figure 3). The CCI model of peripheral nerve injury combined with pain hypersensitivity testing provides a model system to investigate the effectiveness of potential therapeutic agents to modify chronic neuropathic pain. In our laboratory, we utilise CCI alongside thermal and mechanical sensitivity of the hindpaws to investigate the role of neuro-immune interactions in the pathogenesis and treatment of neuropathic pain.