1,25（OH）2D3缺失对膜内和软骨内成骨影响的比较研究

目的:比较1,25(OH)2D3缺失对膜内成骨和软骨内成骨影响的不同。方法:用免疫组织化学染色、HE染色和Western-blot等方法检测6周龄的野生型(wild type,WT)和1琢(OH)ase-/-小鼠的颅骨和股骨干骺端骨组织中I型胶原和甲状旁腺素受体(parathyroid hormone receptor,PTHR)的表达水平。结果:和WT小鼠相比较,1 ase-/-小鼠颅骨的I型胶原阳性面积明显减少,但是干骺端I型胶原阳性面积明显增加,差异有显著性(P<0.01);1琢(OH)ase-/-小鼠颅骨成骨细胞计数明显减少,差异存在统计学意义(P<0.05);但是干骺端成骨细胞计数明显增加,差异有显著性(P<0.01);1琢(OH)ase-/-小鼠颅骨的PHTR表达水平明显减少,但是在干骺端PHTR表达水平明显增加,差异均有显著性(P<0.01)。结论:1,25(OH)2D3缺乏导致小鼠膜内成骨方式骨形成减少,而软骨内成骨骨形成增加。     

毛喉萜对大鼠成骨样细胞内Ca~（2＋）释出的影响

毛喉萜是一种二萜类化合物,为细胞中腺苷酸环化酶的激活剂。用毛喉萜处理大鼠成骨样细胞,发现它可即时激发细胞内Ｃａ~（２＋）水平的增高。当细胞经毛喉萜长期处理（１－２天）后,其对ＰＴＨ激发细胞内Ｃａ~（２＋）释出的效应也呈增高反应。但毛喉萜的即刻反应与其长期效应的作用机理可能并不相同。鉴于毛喉萜具有抑制增殖的作用,其对细胞内Ｃａ~（２＋）水平的调节作用或与其对细胞的抑增殖促分化有关。     

甲状旁腺素促进小鼠软骨细胞成软骨和抑制其终末期分化的实验研究

目的探讨甲状旁腺素(PTH)对小鼠软骨细胞成软骨性的促进作用和终末期分化的抑制作用。方法分离和培养新生小鼠胸骨软骨细胞,经PTH处理,倒置显微镜观察细胞形态的变化;Alcian蓝染色和碱性磷酸酶(ALP)染色方法检测软骨细胞蛋白多糖和ALP的分泌;RT-PCT法和Western blot方法检测细胞内成软骨因子和病理性肥大分化因子基因和蛋白的表达。结果新生小鼠胸骨软骨细胞具有自发成熟分化的特征,与对照组相比,经PTH处理的细胞更接近于软骨细胞形态;PTH明显提高软骨细胞Alcian蓝染色的强度,降低ALP染色的强度;PTH显著提高细胞内Sox9和Aggrecan基因和蛋白的表达,明显降低ALP和Runx2基因和蛋白的表达。结论 PTH具有促进小鼠软骨细胞成软骨和抑制其终末期分化的作用。     

甲状旁腺激素对成骨细胞中ClC-3 氯通道表达及成骨分化影响的研究

目的:观察甲状旁腺激素(PTH)对成骨细胞中Cl C-3氯通道表达及成骨分化影响,初步探索Cl C-3介导PTH在细胞成骨分化中的作用。方法:采用10-8M、10-9M、10-10M PTH持续刺激和间断刺激MC3T3-E1细胞72 h后,通过CCK-8试剂盒法检测MC3T3-E1细胞的增殖情况,Real-Time PCR法检测MC3T3-E1细胞中Clcn3及成骨相关基因Alp、Runx2的表达情况,免疫荧光法检测10-9M PTH不同给药方式下对Cl C-3蛋白表达的影响。结果 :经不同浓度PTH连续和间断处理72 h后,结果显示10-9 M PTH间断刺激的MC3T3-E1细胞的增殖能力最强,且其Alp、Runx2 m RNA表达均高于10-8 M组和10-10 M组(P<0.05),而相同浓度间断刺激的MC3T3-E1细胞成骨相关基因的表达均高于持续刺激组,以10-9M间断刺激组差异最显著(P<0.05),而10-8 M和10-10M均无统计学差异(P>0.05),10-9 M PTH刺激的MC3T3-E1细胞中Cl C-3蛋白表达也显著增加(P<0.05)。结论 :成骨细胞的Cl C-3氯通道能够响应PTH的刺激发生变化,并伴随着成骨相关基因Alp、Runx2表达的增强。     

外源H_2O_2和·OH对大麦幼苗根系线粒体膜脂和流动性的伤害

以大麦 (H ordeum vulgare L.)为材料 ,研究了外源 H2 O2 和· OH对大麦根系呼吸速率、线粒体膜流动性和膜脂脂肪酸组成的影响。结果表明 ,1 0 mmol/L H2 O2 或· OH处理 4d,大麦幼苗根系呼吸速率和线粒体膜脂不饱和脂肪酸含量及脂肪酸不饱和指数下降 ,线粒体膜脂荧光强度增加 ,膜流动性下降 ,且 H2 O2 或· OH处理浓度 (在 0 .1～ 1 0 mmol/L范围内 )越高 ,膜脂流动性下降越明显。 H2 O2 和· OH处理的同时加入同浓度的抗坏血酸 (As A)和甘露醇 ,膜流动性明显增强或恢复     

1,25-(OH)_2D_3诱导HL-60细胞分化后胞液Ca~(2+)浓度、磷酸化酶a和微粒体Ca~(2+)-ATP酶活性的改变

1,25-(OH)_2D_3对HL-60细胞具有促分化作用。本文报道了1,25-(OH)_2D_3在促进HL-60细胞分化前后胞液Ca~(2+)浓度、磷酸化酶a和微粒体Ca~(2+)-ATP酶活性的改变。结果表明,1,25-(OH)_2D_3加入HL-60细胞培养液后72小时,细胞NBT染色阳性率高于70％,形态向正常分化的细胞转化。同对,胞液Ca~(2+)浓度和微粒体Ca~(2+)-ATP酶活性明显降低,而磷酸化酶a活性显著升高。结果提示,在1,25-(OH)2_D_3作用下,HL-60细胞不仅杀菌功能增强,细胞内胞液Ca~(2+)浓度趋向正常,与钙恒稳有关的酶活性也同样发生改变。即1,25-(OH)_2D_3对HL-60细胞的诱导作用伴有钙恒稳的改变。这些变化与DMSO的作用相同。     

慢性鼻窦炎伴鼻息肉患者血清OPN、BAFF、25-（OH）D3的变化及对息肉组织分型的鉴别价值探讨

摘要 目的：探讨慢性鼻窦炎伴鼻息肉（CRSwNP）患者血清骨桥蛋白（OPN）、B细胞活化因子（BAFF）、25羟基维生素D3[25-（OH）D3]水平及其对息肉组织分型的鉴别价值。方法：选取2019年6月-2021年6月于延安大学附属医院治疗的87例CRSwNP患者为CRSwNP组,根据息肉组织嗜酸粒细胞浸润程度将其分为嗜酸性CRSwNP患者（ECRSwNP组,n=41）和非嗜酸性CRSwNP患者（nECRSwNP组,n=46）。选取同期于延安大学附属医院治疗的慢性鼻窦炎不伴鼻息肉患者（CRSsNP组,n=60）和健康体检者（对照组,n=60）。比较CRSwNP组、CRSsNP组和对照组患者血清OPN、BAFF、25-（OH）D3水平。采用多因素Logistic回归分析ECRSwNP发生的影响因素,采用受试者工作特征（ROC）曲线评估各指标对CRSwNP息肉组织分型的鉴别价值。结果：CRSwNP组、CRSsNP组血清OPN、BAFF水平高于对照组,25-（OH）D3水平低于对照组,且CRSwNP组血清OPN、BAFF水平高于CRSsNP组,25-（OH）D3水平低于CRSsNP组（P<0.05）。ECRSwNP组变应性鼻炎史、哮喘病史患者占比、外周血嗜酸粒细胞数量及比例、血清总IgE浓度、血清OPN及BAFF水平高于nECRSwNP组（P<0.05）,而血清25-（OH）D3水平低于nECRSwNP组（P<0.05）。多因素Logistic回归分析显示：外周血嗜酸粒细胞数量及比例、血清总IgE浓度、血清OPN及BAFF水平升高是ECRSwNP发生的危险因素（P<0.05）,25-（OH）D3水平升高是ECRSwNP的保护因素（P<0.05）。血清OPN、BAFF、25-（OH）D3对CRSwNP息肉组织分型单独检测的ROC曲线下面积（AUC）分别为：0.789、0.800、0.817,联合检测鉴别CRSwNP患者息肉组织分型的AUC为0.900,灵敏度、特异度分别为0.860、0.827,联合检测鉴别价值更高（P＜0.05）。结论：血清OPN、BAFF和25-（OH）D3水平在不同息肉组织分型中具有差异性,CRSwNP患者血清OPN和BAFF水平升高是ECRSwNP发生的危险因素,25-（OH）D3水平升高是保护因素,联合检测辅助临床鉴别CRSwNP息肉组织类型的价值更高。     

H2O2和.OH及其清除剂对大麦叶片液泡膜微囊质子转运活性的影响

大麦叶片液泡膜微囊经Ｈ２Ｏ２ 和·ＯＨ处理后,Ｈ＋ＡＴＰａｓｅ 和Ｈ＋ＰＰａｓｅ 水解活性和泵运质子活性下降, Ｈ＋ＰＰａｓｅ 对Ｈ２Ｏ２ 更敏感一些。同时加入与Ｈ２Ｏ２ 和·ＯＨ 相同浓度的抗坏血酸（ＡｓＡ） 或甘露醇可显著恢复两种酶的活性和质子转运活性。Ｈ２Ｏ２ 和·ＯＨ 处理后,Ｈ＋ＡＴＰａｓｅ 米氏常数（ Ｋｍ） 变大,Ｈ＋ＰＰａｓｅ 的最大反应速度（ Ｖｍａｘ） 减小     

槲皮素和芦丁抑制Fe~（2＋）和Cu~（2＋）诱导LDL氧化修饰的比较

槲皮素和芦丁抑制Ｆｅ￣（２＋）和Ｃｕ￣（２＋）诱导ＬＤＬ氧化修饰的比较阎道广,周玫,陈瑗（第一军医大学自由基医学研究室广州５１０５１５）关键词低密度脂蛋白的氧化修饰,桷皮素,芦丁,Ｆｅ￣（２＋）,Ｃｕ￣（２＋）黄酮类物质是自由基清除剂,能与超氧阴离子...     

NLR、25-（OH）D3、IL-6、PCT与重症肺炎支原体肺炎患儿免疫功能和预后不良的关系研究

摘要 目的：探讨中性粒细胞与淋巴细胞比值（NLR）、25-羟维生素D3 [25-（OH）D3]、白细胞介素-6（IL-6）、降钙素原（PCT）与重症肺炎支原体肺炎（MMP）患儿免疫功能和预后不良的关系。方法：选取2019年2月至2021年12月我院收治的106例重症MMP患儿作为重症组,同期收治的101例轻症MMP患儿（轻症组）作为对照。检测外周血中性粒细胞计数、淋巴细胞计数、T淋巴细胞亚群以及血清25-（OH）D3、IL-6、PCT水平,计算NLR。分析NLR、25-（OH）D3、IL-6、PCT与T淋巴细胞亚群的相关性。重症MMP患儿治疗后随访半年,根据重症MMP患儿的预后情况分为预后良好组（75例）和预后不良组（31例）,多因素Logistic回归分析影响重症MMP患儿预后的因素。结果：重症组NLR、IL-6、PCT水平,CD8⁺高于轻症组（P＜0.05）,25-（OH）D3水平、CD3⁺、CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺低于轻症组（P＜0.05）。NLR、IL-6、PCT水平与CD3⁺、CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺呈负相关（P＜0.05）,与CD8⁺呈正相关（P＜0.05）;25-（OH）D3与CD3⁺、CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺呈正相关（P＜0.05）,与CD8⁺呈负相关（P＜0.05）。多因素Logistic回归分析显示：肺大片实变影、NLR（较高）、IL-6（较高）、PCT（较高）是重症MPP患儿预后不良的危险因素（P＜0.05）,25-（OH）D3（较高）是保护因素（P＜0.05）。结论：重症MMP患儿NLR、IL-6、PCT水平升高,25-（OH）D3水平降低,且与细胞免疫功能低下以及预后不良有关,检测NLR、IL-6、PCT、25-（OH）D3有助于评估重症MMP患儿的预后。     

稀土Nd~（3＋）对植物叶绿体类囊体蛋白复合物影响的研究

Ｎｄ￣（３＋）对植物叶绿体类囊体蛋白复合物的影响,不仅表现在对叶绿体类囊体膜溶液的吸收光谱改变上,而且也表现在对色素蛋白复合物ＳＤＳ－ＰＡＧＡ电泳带扫描图谱吸收峰面积变化上;同时也对ＤＣＩＰ光还原活力表现出抑制作用,对Ｃａ￣（２＋）－ＡＴＰａｓｅ的活力表现出低浓度激活,高浓度抑制的作用。     

神经节苷脂（Gangliosides）对人红细胞膜Ca~（2＋）－Mg~（2＋）ATPase的影响

神经节苷脂（Ｇａｎｇｌｉｏｓｉｄｅｓ）是红细胞膜Ｃａ~（２＋）－Ｍｇ~（２＋）ＡＴＰａｓｅ的一种激活剂,这种激活作用也是依赖于Ｃａ~（２＋）存在。在２００μｍｏｌ／ＬＣａ~（２＋）存在的反应体系中,１００μｇ／ｍＬＧａｎｇｌｉｏｓｉｄｅｓ对Ｃａ~（２＋）－Ｍｇ~（２＋）ＡＴＰａｓｅ的激活作用最大,为基本酶活性的１５０％以上。实验还发现ＣａＭ拮抗剂三氟拉嗪（ＴＦＰ）、粉防已碱（Ｔｅｔ）等也同样抑制Ｇａｎｇｌｉｏｓｉｄｅｓ的这种激活作用。其抑制的ＩＣ_（５０）值为２５μｍｏｌ／Ｌ和３０μｍｏ１／Ｌ;而此浓度下抑制剂存在的反应体系中,对Ｃａ~（２＋）－Ｍｇ~（２＋）ＡＴＰａｓｅ的基本活性影响不大。     

肿瘤坏死因子α对大鼠成骨样细胞增殖与甲状旁腺素受体表达的影响

大鼠成骨样细胞ROS17／2．8经肿瘤坏死因子α处理后,发现其c－myc,c－fos,c－jun等原癌基因mRNA的表达降低,细胞增殖明显受到抑制;同时,其PTH受体的表达以及PTH受体经刺激后引起的胞内cAMP的增加也受到抑制．提示TNFα可抑制大鼠成骨样细胞ROS17／2．8的增殖和分化．     

精胺和Mg~（2＋）对tRNA~（Ile）圆二向色谱的影响

由于精胺（ｓｐｅｒｍｉｎｅ）能特异地刺激哺乳动物ｔＲＮＡ~（Ｉｌｅ）的氨基酰化,本文用纯化的牛肝ｔＲＮＡ~（Ｉｌｅ）观察了精胺和Ｍｇ（２＋）对ｔＲＮＡ~（Ｉｌｅ）ＣＤ光谱的影响。结果显示：Ｍｇ（２＋）可使牛肝ｔＲＮＡ~（Ｉｌｅ）ＣＤ光谱峰向短波方向偏移２ｎｍ,波峰为２６３ｎｍ,峰值被增大约１０％,ΔθＭｇ（２＋）＝２．３×１０３ｄｅｇ·ｃｍ２／ｄｍｏｌ;而精胺使牛肝ｔＲＮＡ~（Ｉｌｅ）ＣＤ光谱峰减少４０％,Δθｓｐｅｒｍｉｎｅ＝１×１０（－４）ｄｅｇ·ｃｍ２／ｄｍｏｌ;精胺和Ｍｇ（２＋）对肝ｔＲＮＡ~（Ｉｌｅ）－ＩｌｅＲＳ复合物或ＩｌｅＲＳ的ＣＤ光谱基本无影响。表明Ｍｇ（２＋）和精胺可影响牛肝ｔＲＮＡ~（Ｉｌｅ）的构象。实验同时以酵母ｔＲＮＡ（Ｐｈｅ）和Ｅ·ｃｏｌｉｔＲＮＡ~（Ｉｌｅ）作为对照。     

外源H2O2和·OH对大麦幼苗根系线粒体膜脂和流动性的伤害

以大麦(HordeumvulgareL.)为材料,研究了外源H2O2和*OH对大麦根系呼吸速率、线粒体膜流动性和膜脂脂肪酸组成的影响。结果表明,10mmol/LH2O2或·OH处理4d,大麦幼苗根系呼吸速率和线粒体膜脂不饱和脂肪酸含量及脂肪酸不饱和指数下降,线粒体膜脂荧光强度增加,膜流动性下降,且H2O2或·OH处理浓度(在0.1～10mmol/L范围内)越高,膜脂流动性下降越明显。H2O2和·OH处理的同时加入同浓度的抗坏血酸(AsA)和甘露醇,膜流动性明显增强或恢复。     

rhBMP-2对壳聚糖复合成骨细胞后的成骨活性影响

将重组人骨形态发生蛋白2(rhBMP-2)与壳聚糖为主要基质的支架材料相复合,γ射线辐射灭菌后接种上原代培养的大鼠成骨细胞。体外培养3天后扫描电镜观察细胞与材料的黏附情况,可见成骨细胞紧密黏附于材料孔隙内并保持良好的生长状态。将接种有成骨细胞的复合材料植入裸鼠背部皮下,植入8周后X-ray摄片、组织学染色观察植入部位骨形成及支架材料降解情况。X-ray下可见与植入物大小、位置相符的高密度影,组织学染色证实材料的降解及孔隙内硬骨的生成。     

1,25-(OH)2D3对去卵巢骨质疏松大鼠骨密度及OPG、RANKL表达的影响

目的:探讨1,25-(OH)2D3对去卵巢骨质疏松大鼠骨密度及OPG、RANKL表达的影响。方法选取6月龄雌性SD大鼠32只,随机分4组;空白组正常饲养,模型组制备去卵巢骨质疏松模型,假手术组按照模型组的流程给予开腹和缝线刺激,干预组在制备去卵巢骨质疏松模型的基础上给予1,25-(OH)2D3灌胃。分别于造模前后测定各组大鼠股骨BMD,并在造模最后一天取大鼠外周血和脊髓组织,采用Western Blotting检测OPG和RANKL的蛋白表达水平。结果:造模前,各组大鼠的体重和BMD无统计学差异(P0.05);造模后,与对照组相比,模型组大鼠体重显著升高,BMD显著降低;与模型组相比,干预组大鼠体重显著降低,BMD显著升高;各项组间差异均有统计学意义(P0.05)。与对照组相比,模型组OPG蛋白表达水平显著降低,假手术组无显著差异;与模型组相比,干预组大鼠OPG蛋白表达水平显著升高;RANKL变化趋势与OPG相反,且各项组间差异均有统计学意义(P0.05或P0.001)。结论:1,25-(OH)2D3能够改善雌激素降低引发的OPG/RANKL平衡失调,提高去卵巢骨质疏松大鼠的骨密度。     

黄体酮对3T3-L1脂肪前体细胞成脂分化后细胞中UCP2基因表达的影响

目的：观察体外培养条件下3T3-L1脂肪前体细胞诱导分化成的成熟脂肪细胞中解偶联蛋白2（UCP2）mRNA表达水平及黄体酮对其表达的影响。方法：体外培养3T3-L1脂肪细胞,在诱导3T3．L1脂肪细胞分化成熟后,经不同黄体酮浓度10μm／25μM／50μM／75μM/100μM刺激后,抽提总RNA,用RT—PCR检测UCP2mRNA的表达。结果：黄体酮会促进成熟脂肪细胞中UCP2mRNA的表达,（P〈0．05）其中25μM浓度刺激下UCP2mRNA表达量最高。结论：体外培养中,黄体酮对成熟脂肪细胞中UCP2mRNA的表达与调控具有一定的影响。