犬细小病毒诊断与防制研究进展

犬细小病毒是严重危害野生动物驯养繁殖产业的重要病毒性传染病之一,具有感染高、发病急、病程短和死亡率高等特点,且随着病毒的不断变异,其宿主范围不断扩大,除感染狐狸、犬、狼等犬科动物外,还能感染猫、豹、熊、虎和果子狸等其它多种动物,对我国的野生动物保护、驯养繁殖和疫源疫病监测工作的影响越来越大。本文对犬细小病毒的诊断及其防制进行了概述,以期为野生动物感染犬细小病毒的防控提供科学依据。     

不同粗蛋白含量日粮对Beagle犬生产力的影响

用4种不同粗蛋白含量的日粮饲喂60条2～3岁Beagle犬种犬(♀48,♂12)和200条(♀,♂各半)1～8月龄生长犬,对种母犬2～3胎的主要繁殖性能和生长犬的生长性能(体重月平均增加)进行测定.结果 表明饲喂粗蛋白含量水平为28.6%的日粮,受试母犬表现出优良的繁殖性能:配怀率98.5%、平均产仔数6.3条/胎、仔犬成活率90.3%;1～8月龄生长Beagle犬饲喂粗蛋白含量水平为32.8%为最佳,平均月增重为1.41 kg.说明不同粗蛋白含量日粮对Beagle犬生产力有明显的影响.     

褪黑素调控动物繁殖功能的作用途径

褪黑素是由松果体分泌的一种多功能吲哚类激素,在动物繁殖过程中起了至关重要的作用.褪黑素可通过多条途径调控动物的繁殖功能,主要包括：G蛋白偶联受体途径;作为神经内分泌激素对动物繁殖进行调控;与其核受体结合在转录水平上调控动物繁殖;通过抗氧化作用调控卵泡发育.本文就褪黑素对动物繁殖功能的调控途径进行综述,旨在为褪黑素调控动物繁殖的相关研究提供帮助.     

褪黑素调控动物繁殖功能的途径

褪黑素是由松果体分泌的一种多功能吲哚类激素,在动物繁殖过程中起了至关重要的作用.褪黑素可通过多条途径调控动物的繁殖功能,主要包括:G蛋白偶联受体途径;作为神经内分泌激素对动物繁殖进行调控;与其核受体结合在转录水平上调控动物繁殖;通过抗氧化作用调控卵泡发育.本文就褪黑素对动物繁殖功能的调控途径进行综述,旨在为褪黑素调控动物繁殖的相关研究提供帮助.     

哺乳动物季节性繁殖的内源年生物钟及光敏神经环路研究进展

生活在温带和寒带的哺乳动物在长期的进化过程中形成了季节性繁殖的生活史特征。哺乳动物的繁殖功能主要受到下丘脑-垂体-性腺轴(hypothalamic-pituitary-gonadal axis,HPGA)的调控。视交叉上核(suprachiasmatic nucleus,SCN)能够自发振荡并响应光周期信号的变化,引发褪黑素分泌的改变,并介导下游通路中下丘脑甲状腺激素、Kisspeptin和RF酰胺相关肽(RF amide-related peptide,RFRP)的节律性表达变化,从而调控哺乳动物的季节性繁殖。本文综述了哺乳动物季节性繁殖的内源年生物钟调控,并强调了光敏通路中包括甲状腺激素、Kisspeptin和RFRP在季节性繁殖调控中的重要作用。     

猪microRNA组学研究进展

MicroRNA(miRNA)是一类长约22 nt的非编码小RNA,广泛存在于各种生物中,调节生物体生长、发育和凋亡等过程。研究表明,miRNA在猪肌肉、脂肪、生殖系统以及免疫系统等的发育过程中发挥着重要的调控作用。此外,高通量的新一代测序技术在猪miRNA的挖掘和差异表达研究中发挥着巨大的作用。文章综述了高通量的新一代测序技术在挖掘猪miRNA中的应用以及一些miRNA在猪脂肪代谢、肌肉发育、卵母细胞成熟和B、T淋巴细胞发育中的调控作用,旨在为猪miRNA的研究提供参考,为利用miRNA调控和改善猪肉品质、生长性能、繁殖性能以及免疫机能提供理论基础和研究思路。     

植物人工种子研究进展

建立并发展人工种子技术,是为了快速地繁殖优良品种或杂种,可适用于采用三系法或二系法生产的杂种一代种子。对一些难以用种子繁殖的品种或遗传性状不稳定、育性欠佳的植物种,也可用人工种子技术进行大量繁殖。尤其是一些通过遗传工程创造出的新型植物种如体细胞杂种或转基因植物,都可用人工种子技术进行繁殖或保持。另外,人工种子技术还可用于脱毒苗的保持和快速繁殖。与普通试管苗相比,人工种子成     

动物季节性繁殖分子调控机理研究进展

动物季节性发情繁殖涉及下丘脑-垂体-性腺轴系统复杂的神经内分泌过程,并受光照周期等环境因素的影响。褪黑激素则作为光周期信号分子调控动物季节性繁殖活动。近年来研究发现,对GnRH分泌有重要影响的Kiss1/GPR54系统既受褪黑激素的调控又受到性腺类固醇激素反馈调节,Kiss1/GPR54系统很可能是调控动物季节性繁殖的关键因子;同时动物季节性繁殖很可能还存在一条涉及TSH-DIO2/DIO3系统的逆向调控通路,该系统同样显著影响GnRH合成释放并受褪黑激素调控。文章就褪黑激素中心信号,特别是Kiss1/GPR54和TSH-DIO2/DIO3系统对繁殖季节性调控的最新研究进展进行综述。     

犬黑素皮质素受体-2基因的分子克隆及序列分析

目的分离犬MC2R基因cDNA5′末端,分析其启动区域特点。方法采用了RNA连接酶介导的RACE（RLM-RACE）技术分离了犬MC2R基因和局部序列比对工具（Basic Local Alignment Search Tool,BLAST）对CDS区进行了初步验证。结果新分离了犬MC2RcDNA的5′末端,并对其启动区序列作了初步分析。序列分析显示,该基因至少由两个外显子（exon1和exon2）组成,exon1和exon2的一部分编码5′非翻译区（5′-UTR）,exon2其余的部分编码整个编码区。结论克隆了犬MC2R基因的5′末端,在其启动区发现了inr、SF-1、SP1、CRE、PPRE、AP-1等多个顺式作用元件,为犬MC2R表达调控研究奠定基础。     

西双版纳地区降雨和食物资源可获得程度对犬蝠分娩时机的影响

繁殖是动物权衡不同自然选择压力和自身生理限制的结果。蝙蝠的繁殖受气候(温度、光周期和降雨量)和食物资源等非生物因素影响。本文通过野外调查犬蝠食物资源、设网捕捉和标志重捕的方法研究西双版纳地区降雨、食物资源可获得程度对犬蝠分娩时机的影响。研究发现,随着3 - 8 月降雨量逐渐增加(19.82 -41.13 kg/ m2 ),犬蝠取食的植物种类呈明显的增加趋势(4 - 9 种)。幼蝠捕捉量与植物资源可获得程度呈显著正相关关系(r = 0. 94,P = 0.01)。西双版纳犬蝠虽然具有一年两次动情和分娩的能力,但是绝大多数个体一年只分娩一次,且集中于3 -5 月。犬蝠分娩时机的选择使得幼蝠飞行学习和捕食时间与食物资源可获得程度高峰期相吻合,有利于提高幼体的生存适合度。     

富含半胱氨酸的分泌蛋白（CRISPs）在哺乳动物授精过程中的作用

雌雄配子间的结合与融合是哺乳动物授精成功的关键步骤,哺乳动物富含半胱氨酸的分泌蛋白CRISPs家族是一个进化上高度保守的蛋白家族,参与了精卵结合与融合过程,并在其中扮演了多种角色。目前从雄性小鼠生殖道中分离出4个CRISPs家族成员：附睾的CRISP1、睾丸的CRISP2、分布广泛的CRISP3以及与人CRISP1同源的CRISP4,对CRISPs家族蛋白成员的晶体结构分析揭示出CRISP蛋白含有两个功能域,一个是位于N末端的结构保守的CAP结构域,另一个是位于C末端的CRISP蛋白家族特有的CRISP功能域。CAP功能域中含有CAP基序,CRISP功能域由一个短的铰链区和一个离子通道调节区组成,并通过铰链区与CAP结构域相连接。简要回顾了各种CRISP蛋白的发现和特性鉴别过程,希望能从CRISPs的角度对哺乳动物精卵识别、结合与融合的分子机制有更好的了解。     

Canine Length in Wild Male Baboons: Maturation,Aging and Social Dominance Rank

Canines represent an essential component of the dentition for any heterodont mammal. In primates, like many other mammals, canines are frequently used as weapons. Hence, tooth size and wear may have significant implications for fighting ability, and consequently for social dominance rank, reproductive success, and fitness. We evaluated sources of variance in canine growth and length in a well-studied wild primate population because of the potential importance of canines for male reproductive success in many primates. Specifically, we measured maxillary canine length in 80 wild male baboons (aged 5.04–20.45 years) from the Amboseli ecosystem in southern Kenya, and examined its relationship with maturation, age, and social dominance rank. In our analysis of maturation, we compared food-enhanced baboons (those that fed part time at a refuse pit associated with a tourist lodge) with wild-feeding males, and found that food-enhanced males achieved long canines earlier than wild-feeding males. Among adult males, canine length decreased with age because of tooth wear. We found some evidence that, after controlling for age, longer canines were associated with higher adult dominance rank (accounting for 9% of the variance in rank), but only among relatively high-ranking males. This result supports the idea that social rank, and thus reproductive success and fitness, may depend in part on fighting ability mediated by canine size.     

三清山濒危植物天女花种群生殖对策研究

天女花是国家Ⅲ级保护植物,为了解其生存状况、生殖潜能、生态对策以及为该植物的保护提供理论依据,运用种群年龄结构、生殖力表和生殖值表,研究了三清山濒危植物天女花(Magnolia sieboldii)在三清宫和玉京峰4个样地中的种群动态及生殖策略.结果显示:(1)三清山天女花种群幼苗较少(8.8～12.3株/100 m2),中龄个体数量多(12.0～15.0株/100 m2);(2)4个样地种群生育力均较低,但生境较好的样地最低(177.0粒/株),而生境较差的样地最高(218.3粒/株),生殖适度与之相反;(3)生殖值Vx极大值出现的时间与群落的稳定性相反,较差的生境条件往往导致天女花最短时间内达到最大生殖阶段;(4)天女花种群生殖投资较少,生态对策总体属于k对策者,但在较差的生境中表现出增大生殖投资,即存在r对策种群特征;(5)海拔、郁闭度、坡向和岩石裸露率对天女花生殖产生显著影响,与天女花生殖指标表现为多元线性关系.     

犬瘟热病毒RT-LAMP检测方法的建立和初步应用

目的利用环介导等温扩增（LAMP）技术建立一种检测犬瘟热病毒感染的新方法。方法根据GenBank中NP基因序列,设计4条LAMP特异性引物,对反应条件、特异性、可视化效果和应用效果进行研究。结果在60℃等温的条件下、1 h内可完成RT-LAMP扩增过程;特异性和可视效果良好;对63份临床标本进行检测,阳性检出率为71.4%（45/63）,检出率高于RT-PCR的63.5%（40/63）。结论建立的RT-LAMP检测方法,显示了较高的特异性和敏感性,而且兼具高效、快捷、可视化的优势,为临床检测犬瘟热病毒感染提供了一种快速简便的新途径。     

苯甲基磺酰氟（PMSF）在犬精子4℃保存中的作用

目的探讨4℃保存的条件下,苯甲基磺酰氟（phenylmethylsulfonyl fluoride,PMSF）对犬精子的保护作用。方法犬精子以含不同浓度PMSF的Tris-卵黄液（Tris-egg yolk,EYT）处理后,于4℃低温保存,在24、48、72、96 h分别以伊红、瑞-吉和吖啶橙染色检测精子活率、顶体膜和DNA完整性。结果低温保存24 h后,吖啶橙染色检测DNA断裂率（%）：对照组（5.93±0.32）,实验组：20μg/mL（4.50±0.38）、40μg/mL（4.20±0.25）、80μg/mL（4.21±0.46）、160μg/mL（3.87±0.67）,P〈0.05;各浓度组之间没有明显差异;72 h后,犬精子活率仍〉30%;96 h内,对照组和实验组犬精子在活率、顶体膜完整性上未见明显差异。结论PMSF于4℃低温保存条件下对犬精子具有保护作用,24 h内能有效保护精子DNA双链的完整性,4℃低温保存72 h后,犬精子仍符合人工授精要求。     

Immunological studies of canine ovarian antigens

Studies were conducted to determine the feasibility of producing canine ovary antiserum in the rabbit and to characterize the antigenic composition of the canine ovary. Ovaries from dogs were obtained and corpora lutea (CL) macroscopically removed. Following homogenization of ovaries, adult male rabbits were immunized by injecting the ovarian preparation. Unabsorbed antiserum cross-reacted with canine ovarian extract and with other reproductive and non-reproductive organ extracts to form precipitin bands. Species cross-reactivity was also observed by testing the unabsorbed antiserum with extracts from organs of the cat and rat. Absorption of antiserum with canine liver and lung extracts removed antibodies not specific to the canine ovary. One band was observed when such absorbed antiserum was allowed to react with the canine ovarian extract. The absorbed antiserum produced no bands with extracts from other canine reproductive and non-reproductive organs tested. These experiments suggested that the canine ovary contained at least 1 organ-specific antigen. This organ-specific antigen was located in the isolated canine ovarian cells by the immunofluorescence technique.     

Effects of canine serum collected from dogs at different estrous cycle stages on in vitro nuclear maturation of canine oocytes

Canine oocytes are ovulated at prophase of the first meiotic division and undergo maturation in the distal part of the oviduct for at least 48-72 h. Because of these differences from other domestic mammals, the efficiency of in vitro maturation (IVM) of canine oocyte is very low. The present study was conducted to evaluate the effects of canine serum on IVM of canine oocytes recovered from ovaries in various reproductive states (follicular, luteal or anestrous stages). Oocytes were recovered by mincing ovaries from bitches presented for ovariohysterectomy at various stages of the estrous cycle. Heat-inactivated canine serum was prepared with blood taken from dogs at the anestrous, estrous or diestrous stage of the estrous cycle as determined by progesterone concentration and vaginal cytology. Oocytes were cultured for 72 h in tissue culture medium (TCM)-199 supplemented with 10% canine anestrous, estrous or diestrous serum or fetal bovine serum (FBS) (experiment 1), or supplemented with 0 (control), 5%, 10% or 20% canine estrous serum (experiment 2). In experiment 1, IVM of oocytes collected at the follicular stage of the estrous cycle to metaphase II (MII) stage was higher (p < 0.05) with canine estrous serum (14.2%) than with canine anestrous (5.2%) or diestrous serum (6.3%), FBS (2.2%) or in the control (2.2%). In experiment 2, oocytes collected at the follicular stage of the estrous cycle cultured in TCM-199 with 10% canine estrous serum showed a higher maturation rate to MII stage (13.5%, p < 0.05) compared with those cultured with 5% (1.3% MII) or 20% canine estrous serum (5.1% MII) or the control (2.7% MII). In conclusion, our results demonstrate that supplementing culture medium with 10% canine estrous serum improves IVM of canine follicular stage oocytes.     

新生幼犬的被动免疫研究

新生幼犬通过初乳获得的被动免疫,对它的生存非常重要,本研究用犬的多价免疫血清代替初乳作为幼犬保护性免疫球蛋白,对生后2 d内不能获得初乳的幼犬,以及虽然获得初乳但初乳中特异性免疫球蛋白含量较低的幼犬进行了被动免疫试验。对5窝35只幼犬在生后,随机分为吃初乳的对照组、口服血清组、皮下注射血清组、以及口服和皮下注射血清又吃初乳5个组,在幼犬出生时、及出生后48 h和第5天采血,测定犬细小病毒、犬传染性肝炎、和犬副流感的血凝抑制（HI）抗体效价。结果表明：对没有吃到初乳的仔犬,通过早期口服或皮下注射途径给予成年犬的血清,均能代替初乳供给幼犬免疫球蛋白。对吃到初乳的仔犬,能进一步提高幼犬体内特异性抗体水平,但以皮下注射途径最佳。     

不同去甲肾上腺素剂量下布氏田鼠非颤抖性产热比较

非颤抖性产热是小型哺乳动物的一种重要产热方式。关于其定量测定,一般采用注射去甲肾上腺素（norepinephrine,NE）诱导的最大耗氧量的方式获得。因此,去甲肾上腺素剂量的选择就显得很重要。我们利用常用的3 种经验公式计算剂量,即：（1）NE（mg / kg） = 2.53W^{- 0.4};（2）NE（mg / kg）= 3.3W^-0.458;和（3）NE（mg / kg）= 6.6W^{- 0.458},W 是体重（g）,以布氏田鼠为实验对象,测定了3 种剂量诱导的非颤抖性产热情况。结果表明,3 种剂量都能诱导出最大非颤抖性产热能力,在非颤抖性产热大小上没有显著性差异,分别为6.190±1.342（公式1）、6.166 ±0.852（公式2）和7.005 ±1.501（公式3）,但公式（3）剂量下体温增加程度显著高于前两个剂量,分别增加了1.9 ±0.9 ℃（公式3）、0.9 ±0.2 ℃（公式1）和0.7 ±0.2 ℃（公式2）。为了防止动物体温过高引起死亡,我们推荐公式（1）和（或）（2）。     

大绒鼠解偶联蛋白1基因部分序列扩增与分析

解偶联蛋白1（Uncoupling protein 1,UCP1）是位于褐色脂肪组织线粒体内膜上的一种解偶联蛋白,该蛋白可以诱导质子漏从而产热。通过设计简并引物进行RT-PCR从大绒鼠BAT中获得UCP1基因cDNA核心序列,RTPCR所得产物长约458 bp,包含的开放阅读框（open reading frame,ORF）为456 bp,编码151个氨基酸。通过BLAST搜索,所得大绒鼠UCP1基因cDNA氨基酸序列与黑线仓鼠、橙腹草原田鼠、金黄仓鼠、小家鼠和褐家鼠等哺乳动物的UCP1氨基酸序列同源性均在80%以上,而与鱼类和两栖类的氨基酸序列同源性在61%以下。研究结果表明UCP1在哺乳类中高度保守。同时,通过NJ方法以UCP1序列构建系统进化树表明大绒鼠与橙腹草原田鼠聚成一支,构成田鼠类分支。