植酸在水稻(Oryza sativa L.)细胞培养中的促进作用

植酸(C_6H_(18)O_(24)P_6)添加到固体和液体培养基中,能显著降低多酚氧化酶活性,稳定培养基中pH值和mV值,并能促进水稻细胞生长,增强细胞抗褐化和水渍化能力,从而改善细胞状态。在培养基中植酸的最佳添加量为0.1%,配合使用MES可以增强其稳定pH值的效果。     

高山红景天细胞悬浮培养中pH值对红景天甙胞外释放及细胞活性…

高山红景天细胞悬浮培养中,通过降低培养基ＰＨ值能有效地诱导培养细胞中红景天甙的胞外释放。红景天甙的跨膜运输是一个有与Ｈ对运的动态过程,培养基ＰＨ值决定了红景天甙在胞内外含量的分布。细胞组织在ＰＨ值大于３的培养基中处理３ｈ以内,对细胞活性的影响不大。将诱导释放处理过的细胞转入到新鲜的生产培养基中,细胞仍具有合成红景天甙的能力。     

植酸对红豆杉细胞悬浮培养影响作用的研究

针对红豆杉细胞培养中经常遇到的褐变问题,以植酸做抗氧化剂,添加到悬浮细胞培养基中,能提高细胞鲜重,明显抑制细胞多酚氧化酶和过氧化物酶活性,从而有效地控制细胞褐变,促进红豆杉悬浮细胞生长。以005%浓度的添加效果最好。     

河蟹MTXO细胞的离体培养和细胞学研究

对河蟹眼柄神经分泌细胞的细胞学进行了研究,建立了河蟹眼柄视神经节终髓Ｘ器官（ＭＴＸＯ）细胞原代培养的实用方法。ＭＴＸＯ神经分泌细胞在添加了谷氨酰胺和常量抗菌素的Ｌ－１５培养基中表现出快速的再生生长,细胞生长可保持３～５天,维持存少约８天。在ＰＨ６．８～７．８,温度２０℃～２８℃及渗适压９５０～１１００ｍＯｓｍ条件下,均能存活和生长,但在无Ｃａ＾２＋或添加Ｃａ＾２＋通道阻ｄＣｌ２的培养基中不能生长     

植酸钠对黑曲霉柠檬酸发酵产酸的促进效应

研究了植酸钠对黑曲霉柠檬酸发酵产酸的促进效应。在葡萄糖全合成培养基中添加１％的植酸钠,可使产酸比对照提高２．４倍;在薯粉、玉米粉等天然培养基中添加１％植酸钠,柠檬酸产量分别提高１．７倍和１．３倍。酶活性测定分析表明,植酸钠对柠檬酸代谢途径中的几种关键酶的活性有影响。     

聚β—羟基丁酸产生菌Z5—GⅡ发酵条件的研究

对聚β－羟基丁酸（ＰＨＢ）产生菌Ｚ５－ＧⅡ的发酵培养基及发酵条件进行优化研究;结果表明：该菌株在蔗糖１％,酵母粉０．３％,酵母浸汁０．３％,Ｋ２ＨＰＯ４０．２％;ｐＨ７．２￣７．４的优化发酵培养基中,接种量８％,种２８ｈ,发酵培养３６ｈ,细胞干重为６．８７ｇ／Ｌ,ＰＨＢ产率可达的细胞干重的６１．８６％。该菌株还可利用葡萄糖生产废液为碳源生产ＰＨＢ,具有实现工业化生产的潜力。     

植酸钠对酿酒酵母乙醇发酵的促进效应

本文研究了植酸钠对酿酒酵母发酵乙醇生成量的促进效应。在酿酒酵母（ＡＳ２．４３１）的合成培养基中添加０．０８％本室自制的植酸钠后,发现其乙醇生成量提高３５．４％。植酸钠使该菌耐酒精能力增加,但对生物量影响不显著。植酸钠促进效应的有效成分为其植酸根。植酸钠对Ｋ酵母天然培养基发酵的乙醇生成量亦有极显著的促进效应,使其提高达８７．９％。     

多孔菌液体发酵的研究

多孔菌Ｐｏｌｙｐｒｏｕｓｅｌｅｇａｎｓ（Ｂｕｌｌ）Ｆｒ。是一种新开发的真菌类中药材资源,经对其几个主要液体发酵培养条件的筛选研究,初步得出多孔菌深层发酵的基础参数：ＰＨ５．６～０．１;温度２４～２８℃;培养基为麦麸２．５％,蔗糖４％,ＮＨ４ＮＯ３０．０５％,ＫＨ：ＰＯ４０．０５％,ＭｇＳＯ４·７Ｈ２Ｏ０．０２５％。另外,摇瓶种子培养条件是：ＰＨ５．６～６．１;温度２８℃;培养基为ＰＤＡ＋ＶＢ１,添加３‰琼脂,时间为９６ｈｒ。     

分泌重组抗体的CHO细胞体外培养条件的优化

目的：对生物反应器细胞培养时培养时培养基组成进行优化。方法：以稳定转染了抗CD3人源化抗体的CHO细胞为模型,以无血清培养基经生物反应器高密度细胞培养后分子量小于50kDR的超滤液为基础培养基,在细胞培养板中考察添加氨基酸、丁酸钠、柠檬酸铁等多种成分对细胞生长状态和蛋白表达量的影响、结果：2mmol/L丁酸钠可以有效地诱导蛋白的表达,丁酸钠和柠檬酸铁对于促蛋白表达有协同作用,适量添加培养过程中消耗较快的氨基酸可提高细胞数和蛋白的表达量。结论：利用所述方法可快速优化培养基成分,显著提高生物反应器中细胞的蛋白表达量。     

鱼类HGPRT缺陷型细胞的诱变和筛选

草鱼卵巢细胞ＧＣＧ经乙基甲磺酸（ＥＭＳ）诱变,稳定表达３代以后,采取逐步提高培养基中６－疏基嘌呤（６－ＭＰ）的方法,获得对６－ＭＰ稳定抗性的细胞,暂定名ＦＭＲ－１．本文比较了ＧＣＧ细胞及ＦＭＲ－１细胞在含６－ＭＰ（２０μｇ／ｍｌ）和不含６－ＭＰ的培养基中生长曲线的特点,并对上述两种细胞的染色体数目和葡萄糖－６－磷酸脱氢酶电泳图谱进行了比较分析。最后对两种细胞在ＨＡＴ培养基中的生长特点进行了平行对照实验,根据实验结果,可以判定ＦＭＲ－１细胞为草鱼ＨＧＰＲＴ缺陷型细胞。本义还讨论了进一步研究草鱼ＨＧＰＲＴ缺陷型细胞的途径及草鱼ＨＧＰＲＴ缺陷型细胞在鱼类细胞遗传学上的应用前景。     

培养基初始pH值对木聚糖酶合成的影响

本文探讨了培养基三种初始ｐＨ值对木聚糖酶合成的影响。试验结果表明,培养基初始ｐＨ值对木聚糖酶的合成有重大影响,低ｐＨ有利于提高木聚糖酶活力。在碳源为７ｇ／Ｌ条件下,初始ｐＨ值为４．０时合成的木聚糖酶活力高达３２．８７ＩＵ／ｍｌ,酶产率和得率分别为６５７４．０ＩＵ／Ｌ·ｄ和４６９５．７ＩＵ／ｇ木聚糖。酶活力和酶产率是初始ＰＨ５．０的１．７倍,分别是初始ＰＨ６．０的３．８倍和２．３倍。进一步研究表明,     

pH值、激素对新疆紫草悬浮培养细胞生长及紫草宁衍生物合成的影响

报道了不同ｐＨ值、激素对新疆紫草悬浮培养细胞生长及紫草宁衍生物合成的影响。结果表明,新疆紫草细胞具有自我调节其培养液ｐＨ值的功能。适合于细胞生长及紫草宁衍生物形成的ｐＨ值为５．６±０．４０。ＢＡＰ、２,４－Ｄ、ＮＡＡ或ＩＢＡ对细胞生长无显著的促进作用,且都会抑制紫草宁衍生物的形成。在生长培养基中添加１．０ｍｇ／ｌ　ＩＡＡ和０．５ｍｇ／ｌＫＴ可促进细胞生长,而在生产培养基中附加０．１ｍｇ／ｌＫＴ和０．７５─１．０ｍｇ／ｌＩＡＡ则有利于紫草宁衍生物含量及产量的提高。     

神经束路电镜追踪中影响HRP—TMB反应产物因素的分析

采用ＨＲＰ－ＴＭＢ－ＳＴ法,对小鼠延髓下橄榄核下端外侧风状核细胞的ＨＲＰ－ＴＭＢ反应产物影响因素分析表明：（１）较高的ＰＨ值是反应产物消失的关键因素;０．２ｍｏｌ／ＬＰＢ,ＰＨ５．０－６．０对ＨＲＰ－ＴＭＢ反应灵敏度、反应产物的稳定性组织超微结构的保存是适宜的;当ＰＨ值相同时,缓冲液浓度不同,反应产物消失的程度和程度也不相同。（２）酒精有稳定反应产物的作用。（３）反应前的预浸、灌注液的成分、浓度和     

不同繁殖状态雌性黑线仓鼠对植物血凝素的反应模式

由植物血凝素（Phytohemagglutinin,ＰＨＡ） 诱导产生的肿胀反应是生态免疫学中被广泛使用的免疫学参数,通过注射部位的肿胀程度大体上可反映细胞介导的免疫和天然免疫的综合变化情况。为探讨小型哺乳动物不同繁殖状态对ＰＨＡ 的反应模式,以非繁殖期、妊娠期、哺乳期和断乳期的雌性黑线仓鼠为研究对象,测定了注射ＰＨＡ 和生理盐水前（０ ｈ）及注射后６ ｈ、１２ ｈ 和２４ ｈ 注射部位皮肤组织的增厚程度。结果显示：（１）黑线仓鼠对ＰＨＡ 的反应有两种模式：非繁殖期、妊娠期和断乳期对ＰＨＡ 的反应模式相似,都在注射后６ ｈ 最高,１２ ｈ 和２４ ｈ 后逐渐下降;哺乳期对ＰＨＡ 的反应在注射后６ ｈ、１２ ｈ 和２４ ｈ 接近,彼此间的差异均不显著。（２）哺乳期黑线仓鼠的ＰＨＡ 反应高峰值有下降趋势,但与非繁殖期、妊娠期和断乳期高峰值之间的差异不显著。结果表明,黑线仓鼠在哺乳期对ＰＨＡ 的反应模式不同于其他繁殖阶段,且反应的高峰值被延迟,这对其存活可能有害,但有助于繁殖进程的延续和后代的生长发育。     

变灰青霉固态发酵降解植酸的初步研究

从发霉植酸钠溶液中分离到一株产植酸酶的变灰青霉（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍｃａｎｅｓｃｅｎｓ）Ｐ４。以麸皮：玉米面：黄豆饼粉＝７：２：１为主要培养基成份,用优选法确定最适培养基为在上述基本培养基中添加４％（ＮＨ４）２ＳＯ４,１％葡萄糖,１．５倍水,自然ｐＨ。发酵过程的动态分析表明,该菌在上述条件下２８℃恒温培养６ｄ后植酸降解率可达９０％;无机磷含量由０．１３％增至０．５７％;可溶性蛋白含量由３．８０％增至７．６０％。用４％ＣａＣｌ_２·２Ｈ_２Ｏ水溶液抽提     

葡萄细胞悬浮培养体系的建立和优化

为了利用葡萄愈伤组织建立快速稳定的葡萄细胞悬浮体系,以无核白和黑比诺葡萄无菌幼苗的茎段、叶片以及叶柄为外植体,通过基本培养基、不同植物生长调节剂配比及其浓度、PVP等优化疏松型愈伤组织的诱导方法并建立稳定的细胞悬浮培养体系。结果表明,以无核白和黑比诺葡萄茎段为外植体,在添加2.0 mg/L NAA和0.3 mg/L 6-BA的MS培养基上适合疏松型愈伤组织的诱导。以B5为基本培养基添加1.0 mg/L 2,4-D和0.5 mg/L 6-BA以及0.2%PVP的优化培养条件下,建立了快速稳定的无核白葡萄悬浮培养体系。葡萄悬浮培养细胞生长曲线呈S形,接种后6-18 d处于对数生长期,第21天细胞增长量达到最大值。细胞活力测定与TTC染色结果一致表明,接种后培养9 d细胞活力最强。建立了快速稳定的无核白葡萄悬浮培养体系,选择细胞活力最强且细胞快速增值的对数期7-9 d的细胞进行葡萄悬浮细胞遗传转化,效率较高。     

大鼠甘氨肽α—羟化单氧酶在昆虫细胞中的活性表达

将编码大鼠甘氨肽α－羟化单氧酶（ＰＨＭ）ｃＤＮＡ基因,插入昆虫杆状病毒转移表达载体ｐＢａｃＰＡＫ８,构建成表达质粒ｐＢａｃＰＨＭ２,与修饰的银纹夜蛾核多角体病毒ＢａｃＰＡＫ６线性化ＤＮＡ共转染秋粘虫细胞Ｓｆ２１,通过同源重组,得到在核多角体蛋白基因启动子控制下的ＰＨＭ基因的重组病毒ＢａｃＰＨＭ。用ＢａｃＰＨＭ感染Ｓｆ２１细胞,无血清培养上清在７２小时后检测到酰胺化酶最高活力;用细胞免疫组化法和免疫     

影响 培养基PH值变化的因素

植物组织培养基的ＰＨ值一旦外植体植入就开始发生改变,直到达到某一平衡点,不同种的植物有其各自的ＰＨ平衡点。用６种植物（ＰｉｌｏｔｕｓｅｘａｌｔａｔｕｓＤｅｓｓｅｘＬｅｈｍ,ＬｅｃｈｅｎｎｕｌｔｉａｆｏｍａｓｕｓＲ．ＢＲ．,ＲｏｓａｃａｎｉｎａＬ．,Ｍｅｌａｌｅｕｃａａｌｔｅｒｎｉｆｏｌｉａ（Ｍａｉｄｅｎ＆Ｅ．Ｂｅｔｃｈｅ）Ｃｈｅｅｌ,ＡｎｉｇｏｚａｎｔｈｏｓｆｌａｔｉｄｕｓＤＣ．,Ｚｉｅｒｉａｃｙ     

CHO细胞法检测百日咳毒素毒性的影响因素

目的考察不同培养基、不同牛血清、血清灭活与否及生产过程中添加的各外源物质对百日咳毒素(pertussis toxin, PT)在中华仓鼠卵巢细胞(chinese hamster ovary cell, CHO)簇集试验中的影响。方法分别使用3种培养基F-12K、DMEM/F12和1640培养CHO细胞,并进行CHO细胞簇集试验,观察细胞生长状态及PT引起细胞簇集的敏感性;分别选取2个厂家的牛血清(对2种血清进行灭活和不灭活处理)培养CHO细胞,观察4种牛血清对细胞生长及簇集的影响;选用生产过程中添加的物质进行CHO细胞簇集试验,观察细胞生长状态及是否出现簇集,确定不影响细胞生长的最高浓度,同时使用不影响细胞生长的各添加物质最高浓度进行小鼠组胺致敏试验,观察与CHO细胞簇集试验结果是否一致。结果 3种培养基对CHO细胞生长及CHO细胞簇集存在明显差异,F-12K培养基培养的细胞形态规则、典型,其他2种培养基培养的细胞生长缓慢,且对PT的敏感性均低于F-12K培养基;4种牛血清中胎牛血清培养的细胞生长最快且形态规则,簇集试验敏感性优于其他3组血清;添加的各外源物质均会导致细胞生长缓慢或死亡,在稀释至一定浓度后可以排除添加物质对CHO细胞簇集试验的影响,同时在小鼠组胺致敏试验中不会引起动物死亡。结论 F-12K培养基最适宜实验室CHO细胞生长,不同血清对细胞生长和簇集的敏感度有一定差异,添加的外源物质残留量应进行控制以保证试验结果的稳定可靠。     

产β—甘露聚糖酶地衣芽孢杆菌的分离筛选及发酵条件

从土样中分离筛选出产β－甘露降糖酶的地衣芽孢杆菌,经紫外线诱变处理后获得高酶活力ＮＫ－２７菌株,在以魔芋粉、豆饼粉为碳氮源添加无机盐的发酵培养基中,β－甘露聚糖酶活力达１１０．４９ｕ／ｍｌ。初始ＰＨ值、装液量、培养温度和培养时间对产酶有一定影响。