3′，5′-环化腺苷酸与遗传基因活性的调节

关于3′,5′-环化腺苷酸(以下简写为cAMP)作为激素的第二信使物质,国内已有不少介绍。近几年来许多研究表明,cAMP的作用已远远超过了激素传导物的含意,而具有相当广泛的生理作用。 cAMP的生理作用,大多是通过对酶的影响实现的。而cAMP对酶的影响,又有两个不同途径。其一表现为对酶活性的影响,例如在     

菊芋组织培养中cAMP-磷酸二酯酶的组织化学观察

在高等动物细胞中作为激素第二信使的cAMP早已引起人们的重视,其作用及其重要性已有不少的研究资料可以来说明,但在高等植物细胞中,此项研究工作开展甚少。cAMP在动物体内分布甚广,它具有广泛的生物学效应,它直接地影响许多酶的活性以及细胞内的生理生化过程。然而在植物细胞中cAMP分布情况如何?其生理生化效应又表现在哪些方面?不仅对cAMP的研究是需要的,而且对直接对cAMP起调节作用的腺苷环化酶(adenylate cyclase)和cAMP一磷酸二酯酶(3', 5'-cyclic adenylic acid-phosphodiesterase)的研究也同样是非常需要的。     

15甲基前列腺素F_(2α)对兔卵巢环磷酸腺苷和孕酮含量的影响

于假孕第7天的家兔,分別静脉注射15-甲-PGF_(2α)、HCG、HCG 15-甲-PGF_(2α),茶碱,茶碱 15-甲 PGF_(2α),观察用药后卵巢内 cAMP 和孕酮含量的变化。结果表明15-甲-PGF_(2α)能使卵巢内孕酮相 cAMP 含量明显下降,HCG 能促进孕酮合成,使卵巢内孕酮和cAMP 含量增加。HCG 和15-甲-PGF_(2α)联合应用则卵巢中孕酮和 cAMP 的含量与对照组比较均无显著差别,这表明15-甲-PGF_(2α)对 HCG 增加细胞内 cAMP 含量和促进孕酮合成均有颉颃作用,以上结果提示15-甲-PGF_(2α)的溶黄体作用与降低卵巢内 cAMP 水平是相关的。注射茶碱后卵巢内 cAMP 和孕酮含量均较对照组显著增加,茶碱是磷酸二酯酶抑制剂,表明茶碱增高孕酮的合成可能与提高卵巢细胞内 cAMP 水平是有关的,也表明磷酸二酯酶促进 cAMP转变为5′AMP 的过程也参与假孕兔卵巢孕酮合成的调节。茶碱与15-甲-PGF_(2α)合并应用后卵巢中 cAMP 和孕酮含量均不增加,与对照组比较无明显差別,表明15-甲-PGF_(2α)有颉颃茶碱使卵巢细胞内 cAMP 含量增加和促进孕酮合成的作用,实验结果进一步支持了15-甲-PG-F_(2a)溶黄体作用机制可能与细胞内 cAMP 水平降低有关。     

胰岛素和肾上腺素对家兔血浆及组织cAMP和cGMP含量及代谢的影响

本文以家兔为实验对象,观察了胰岛素和肾上腺素对血浆cAMP,cGMP,血糖和血浆甘油三酯(TG)的影响以及对肝组织,脂肪组织和肌肉组织中cAMP和cGMP含量及有关酶——腺苷酸环化酶(AC),cAMP-磷酸二酯酸(A-PDE),cGMP-磷酸二酯酶(G-PDE)活力的影响。 材料和方法     

脑室注射氨茶碱或咪唑对大鼠电针镇痛的影响

我们曾经报道,给大鼠脑室注射 cAMP,外源性地提高脑内 cAMP 水平,引起大鼠的电针镇痛效应显著减弱,并有明显的剂量效应关系。已知裂解 cAMP 的磷酸二酯酶(PDE)抑制剂茶碱能提高脑内 cAMP 含量,而 PDE 激活剂咪唑则能降低脑内 cAMP 水平。因此本文用脑室注射 PDE 抑制剂氨茶碱或 PDE 激活剂咪唑的方法以图改变中枢内源性 cAMP 的水平时对电针镇痛的影响。结果表明氨茶碱能拮抗电针镇痛,而咪唑则对电针镇痛有加强作用。这与外源性注射 cAMP 的结果一致,说明脑内 cAMP 可能是对抗电针镇痛的一个重要因素。     

依赖cAMP的蛋白激酶的一些进展

在激素作用机制的研究中,早就认为cAMP是蛋白多肽类激素发挥生物学作用的第二信使。但是cAMP为什么能引起生物学变化?依靠什么力量诱导反应发生?酶是细胞内调节代谢的关键性物质,两者间又有什么关系?七十年代以来,更深入探讨这一系列问题就发现了依赖cAMP的蛋白激酶。本文仅就手边所得资料对此进行简要综述。     

依赖cAMP的蛋白激酶的一些进展

在激素作用机制的研究中,早就认为cAMP是蛋白多肽类激素发挥生物学作用的第二信使。但是cAMP为什么能引起生物学变化? 依靠什么力量诱导反应发生? 酶是细胞内调节代谢的关键性物质,两者间又有什么关系? 七十年代以来,更深入探讨这一系列问题就发现了依赖cAMP的蛋白激酶。本文仅就手边所得资料对此进行简要综述。     

神经毒性杀虫药剂对家蝇头部环腺苷酸含量的影响

本文报道用七类20种神经毒性杀虫药剂处理家蝇(Musca dcmestica vicina),发现引起环腺苷酸(cAMP)增加的药剂有:DDT、菊酯类和甲脒类,而BHC、狄氏剂、有机磷、氨基甲酸酯、沙蚕毒素均没有影响.并做了DDT、溴氰菊酯和杀虫脒中毒0—8小时内cAMP变化的时间曲线,以及DDT中毒0—8小时内腺苷酸环化酶(ACE)活性的时间曲线.结果表明:DDT中毒1小时引起cAMP达一峰值,2小时后回到原位;2—8小时内持续而缓慢的上升;乙酰胆碱酯酶活性曲线与此基本一致,但2—8小时内活性增加不大.溴氰菊酯中毒引起cAMP变化的时间曲线与DDT的基本一致,只是第二次cAMP上升更高二些.杀虫脒引起cAMP的时间变化曲线是0.5小时达一峰值,1小时基本回到原位,2—4小时有一个上升较快、较高的峰.我们认为,DDT引起cAMP值的第一次上升是激活了ACE造成的,第二次上升可能与钙调蛋白和磷酸二酯酶有关.杀虫脒引起cAMP值上升,是因为激活了章鱼胺激性的ACE.     

环腺苷酸及其相关化合物的氧化铝薄板层析

使用极性不同的溶剂系,研究了3',5'-环腺苷酸(cAMP)及其相关化合物在国产中性氧化铝薄板上的层析行为,发现正丁醇:乙醇:水(30:10:13)系统能把cAMP与腺嘌呤、腺苷、3',5'-环鸟苷酸、二腺苷焦磷酸、AMP(GMP GTP ATP)等分离开来。磷酸盐和柠檬酸盐的中性水溶液能定量地洗脱cAMP斑点。从而使方法达到分离定量的目的,用于cAMP化学合成反应液的分析和环核苷酸磷酸二酯酶活力的测定。     

环化腺苷酸对两株人食管癌上皮细胞作用的初步观察

用环化腺苷酸(cAMP)或其衍生物二丁酰环化腺苷酸(dbcAMP)加茶碱(theophylline)处理两株长期培养的人食管癌上皮细胞。观察到细胞的生长增受到明显抑制,细胞形态变得较为瘦长,并难于被胰酶及EDTA混合液所消化。表明cAMP对人食管癌上皮细胞有一定“逆转”作用。     

注射依赖cAMP的蛋白激酶催化亚基加速胚胎内细胞间连接通讯的发育(英文)

本研究以爪蟾胚胎内胚层细胞间连接通讯发育的时程为指标,观察了cAMP和依赖cAMP的蛋白激酶催化亚基对这一发育的影响。将依赖cAMP的蛋白激酶催化亚基注射入爪蟾胚胎四细胞期的每一个细胞可使该胚胎内胚层细胞间连接通讯的发育明显加快,提示在正常状态下这一发育的进程是受细胞内依赖cAMP的磷酸化水平的制约。但用双丁酰cAMP和磷酸二酯酶抑制剂对胚胎进行培育,或将cAMP和磷酸二酯酶抑制剂注射入胚胎细胞,对这一发育并无影响,可能是由于这些胚胎细胞内依赖cAMP的蛋白激酶的实际有效含量较低而cAMP含量较高所致。注射这种蛋白激酶催化亚基所诱导的胚胎细胞间连接通讯在注射后约8.5小时出现。这一时间比前人在哺乳动物细胞培养中用cAMP或必需的信使RNA诱导出细胞间连接通讯所需要的时间(2—4小时)长得多,提示在胚胎中依赖cAMP的磷酸化对细胞间连接通讯发育的作用是从RNA转录的水平上开始的。     

人体内cAMP与cGMP动态平衡机理的探讨

cAMP(环磷酸腺苷)与cGMP(环磷酸鸟苷)作为“第二信使”参与激素的作用。 Goldberg等根据在一些分化的细胞(心肌、平滑肌、血小板和中枢神经细胞)中观察到cAMP和cGMP对细胞代谢反应和生理功能的調节作用是相反的,浓度的变化是相反而相关的,提出了双向控制学说和阴阳学说,似乎和我国中医学的“阴阳”相符。他们认为这一对阴阳物质能调节细胞的酶反应和细胞的生理效应。正常代谢和生理反应就是这一对阴阳物质的动态平衡的结果。为了探讨cAMP与cGMP     

高等植物中cAMP信号的作用

环化腺苷酸(adenosine 3′, 5′-cyclic monophosphate, cAMP)是生命活动中发挥重要作用的第二信使。高等植物中cAMP的存在及其生理作用曾引起人们长时期的争议。随着电生理学、生物化学和分子生物学等研究证据的不断增加,cAMP已被认为是高等植物信号途径网络的重要组成部分。高等植物中既存在催化cAMP合成的腺苷酸环化酶(adenylyl cyclases,AC),也存在引起其降解反应的磷酸二酯酶(phosphodiesterases, PDE)活性,它们共同维持细胞内cAMP水平。与哺乳动物相比,高等植物中cAMP一般表现较低的浓度水平,它却可以对许多刺激因素作出瞬时反应而显著升高,从而诱导产生信号作用。已有证据表明,cAMP在高等植物中参与环化核苷酸门控离子通道(cyclic nucleotide-gated channels, CNGCs)和蛋白激酶(protein kinases)等介导的信号级联反应,也与钙离子/钙调素(calcium/calmodulin, Ca~(2+)/CaM)、水杨酸(salicylic acid,SA)、茉莉酸(jasmonic acid, JA)和一氧化氮(nitric oxide, NO)等信号途径相连,以及能够与高等植物中的脱落酸(abscisic acid, ABA)、生长素(auxin)、赤霉素(gibberellin, GA)等许多激素的效应发生相互作用。cAMP信号能够对高等植物的离子运输、细胞周期、有性生殖、温光反应、光合作用、衰老、生物与非生物胁迫反应等产生显著影响,从而在植物的生长发育与环境适应性中发挥广泛的作用。本文比较系统地综述了有关的研究进展,并对其归纳提出高等植物cAMP信号作用模型,以及讨论和展望未来的研究方向。     

高淀粉膳食对血浆胰岛素、cAMP含量及组织cAMP代谢的影响

对高淀粉膳食(糖占总热量80％)对大鼠血脂、胰岛素及cAMP代谢的影响进行了研究。大鼠摄取高淀粉膳食3天,空腹血浆岛素及甘油三酯含量明显高于对照组(P<0.01;P<0.01)。6天后血浆甘油三酯含量增高近四倍(P<0.01),而血浆、肌肉和脂肪组织cAMP含量低于对照组,分别减低38％,45％和32％(P<0.05;P<0.05,0.1相似文献   

显示腺苷环化酶的细胞化学技术方法的建立和发展

腺苷环化酶(Adenylate cyclase)存在于多种细胞膜中,某些激素系通过刺激膜上的腺苷环化酶而使 ATP 生成 cAMP。细胞内cAMP 水平,常是由腺苷环化酶所调节的。采用生物化学方法进行腺苷环化酶的研究,已提供了该酶在许多组织中的定量资料。但是,由于生化测定方法不易区分酶活性是某种细胞或     

β3受体激动剂对培养的大鼠心肌细胞搏动频率和细胞内环-磷酸腺苷水平的影响

目的：观察β3受体激动剂(BRL-37344)对培养的大鼠心肌细胞搏动频率和细胞内环-磷酸腺苷(cAMP)水平的影响,以探讨β3受体在心肌细胞中的作用。方法：分离培养乳鼠心肌细胞,随机分为八组：对照组、ISO组、Nadolol ISO组、BRL组、PTX BRL组、L-NAME BRL、Nadolol BRL组和Buprandol BRL组,观察心肌细胞搏动频率,并应用酶联免疫方法测定cAMP含量,逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)方法测β3受体mRNA表达。结果：ISO(非选择性β受体激动剂)可显著增加心肌细胞搏动频率和升高cAMP水平,这种作用可被Nadolol(为β1,β2受体抑制剂)阻断。BRL-37344可显著降低心肌细胞搏动频率和cAMP含量,这种作用可被PTX(Gi蛋白抑制剂)和Bupranolol(非选择性β受体阻滞荆)完全阻断,同时可被L-NAME(一氧化氮合酶抑制剂)部分阻断,不受Badolol影响。RT-PCR方法测出心肌细胞中有β3受体mRNA表达。结论：心肌细胞中存在β3受体,它在心肌表现为负性变力作用,β3受体的效应不受β1,β2受体抑制剂影响。心脏β3受体信号途径中可能有Gi蛋白的参与,并且经过一氧化氮合酶途径发挥其作用。     

β_3受体激动剂对培养的大鼠心肌细胞搏动频率和细胞内环一磷酸腺苷水平的影响

目的 :观察 β3 受体激动剂 (BRL 37344 )对培养的大鼠心肌细胞搏动频率和细胞内环 -磷酸腺苷 (cAMP)水平的影响 ,以探讨 β3 受体在心肌细胞中的作用。方法 :分离培养乳鼠心肌细胞 ,随机分为八组 :对照组、ISO组、Nadolol+ISO组、BRL组、PTX +BRL组、L NAME +BRL、Nadolol+BRL组和Bupranolol+BRL组 ,观察心肌细胞搏动频率 ,并应用酶联免疫方法测定cAMP含量 ,逆转录多聚酶链反应 (RT PCR)方法测 β3 受体mRNA表达。结果 :ISO(非选择性 β受体激动剂 )可显著增加心肌细胞搏动频率和升高cAMP水平 ,这种作用可被Nadolol(为 β1,β2 受体抑制剂 )阻断。BRL 37344可显著降低心肌细胞搏动频率和cAMP含量 ,这种作用可被PTX(Gi 蛋白抑制剂 )和Bupranolol(非选择性 β受体阻滞剂 )完全阻断 ,同时可被L NAME(一氧化氮合酶抑制剂 )部分阻断 ,不受Nadolol影响。RT PCR方法测出心肌细胞中有 β3 受体mRNA表达。结论 :心肌细胞中存在 β3 受体 ,它在心肌表现为负性变力作用 ,β3 受体的效应不受 β1,β2 受体抑制剂影响。心脏 β3 受体信号途径中可能有Gi 蛋白的参与 ,并且经过一氧化氮合酶途径发挥其作用。     

腺苷三磷酸和环腺苷单磷酸对丝状真菌纤维素酶合成的调节

以虫荧光素酶法检验了四株丝状真菌在葡萄糖—无机盐液体培养过程中的胞内ATP含量。结果表明,只有当胞内ATP浓度低于10~(-S)mg/ml时,真菌才开始合成胞外纤维素酶(FPA)。以不同浓度的各种碳源培养时,菌体胞内ATP含量只要超过10~(-1)mg/ml,FPA的合成即发生阻遏。菌体胞内ATP含量与FPA合成呈显著负相关。以高效液相色谱(HPLC)法检测了菌体培养液中的cAMP含量。在非阻遏条件下,外源cAMP可以提高FPA的合成水平。但外源cAMP不能解除已经发生的酶合成阻遏。菌体ATP和cAMP水平是调节真菌纤维素酶合成的重要因子。     

溴氰菊酯中毒引起家蝇神经系统环腺苷酸(cAMP)含量的改变

环腺苷酸(cAMP)可在神经传递物刺激腺苷酸环化酶的作用下产生,而坏腺苷酸又可促成神经传递物的产生.用溴氰菊酯(deltamethrin)处理家蝇后,发现酪胺大量增加,主要由于酪氨酸脱羧酶受到诱导、活性增高所致.处理后一小时,cAMP也有增加,并与酶活性的增加相平行,但酪氨酸脱羧酶活性增高的曲线与cAMP量增加的曲线,实际上并不平行,因酪氨酸脱羧酶的活性是先增加,然后下降,而cAMP的量则是在开始时有一个小的下降,接着一直上升,而此时酶的诱导已下降,cAMP含量在诱导开始时出现下降的原因尚不明,可能与环鸟苷酸(cGMP)有关.但随后的上升显然是由于酪胺或章鱼胺的增加所造成.目前已证实,酪胺可经β-羟化作用形成章鱼胺,后者再刺激章鱼胺受体,而使腺苷酸环化酶活化,产生大量的cAMP.酪胺本身也可能就是章鱼胺受体的激活剂.     

变铅青链霉菌广谱胁迫蛋白对氧化压力响应的研究

【目的】广谱胁迫蛋白(USP)是一种古老的蛋白家族,在链霉菌属细菌中其功能研究尚未报道。以变铅青链霉菌USP蛋白为对象对其功能进行解析。【方法】使用序列比对的方法分析同源性及保守结构域。纯化USP蛋白,用圆二色谱分析蛋白与环腺苷酸(cAMP)的结合对usp(SLI_7517)进行基因中断。检测野生型和usp基因缺失株对偶氮二甲酰胺造成的氧化压力的耐受能力。使用qPCR荧光定量分析技术,检测野生型菌株与usp缺失株在氧化环境中谷胱甘肽过氧化物酶及巯基过氧化物酶基因转录量的差异。【结果】同源序列分析表明链霉菌属来源的USP蛋白序列相互之间相似性较高,USP-like结构域高度保守。USP蛋白在体外结合cAMP引起CD谱的变化。usp基因缺失株对偶氮二甲酰胺更耐受,同时菌株中谷胱甘肽过氧化物酶基因转录量上升。【结论】变铅青链霉菌中USP蛋白能够结合cAMP。usp参与菌体应对氧化环境的调控,对谷胱甘肽过氧化物酶基因的转录有阻遏作用。