红色毛癣菌的生物学特性研究

目的 观察红色毛癣菌在不同温度、不同培养基上的生长和产孢情况,并对其进行分子生物学鉴定.方法 ①大培养:采用沙堡葡萄糖琼脂(SDA)和马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)平皿,27℃、35℃黑暗培养,测量菌落直径,绘成生长曲线.②小培养(钢圈法):采用SDA、PDA、溴甲酚紫乳固体葡萄糖琼脂(BCP-MSG)、乳蜜琼脂(M)和复合维生素B(VitB)培养基,27℃、30℃黑暗培养,观察镜下菌丝生长、孢子产生情况.③进行rDNA 18S和ITS序列测定.结果 在SDA,PDA上,27℃条件下菌落生长速度较35℃快;在5种培养基上,SDA、PDA产孢较快较多,复合维生素B培养基产孢较慢,但产生大分生孢子较多.30℃产孢更丰富.对部分菌株rDNA ITS、18S PCR扩增产物纯化后直接测序,结果在GenBank中比对、分析,相似度为98%～100%,均鉴定为红色毛癣菌.结论 SDA、PDA均为鉴定和分离红色毛癣菌的合适培养基.5种培养基均可用来刺激红色毛癣菌产孢,其中SDA、PDA产孢较早、较丰富.红色毛癣菌rDNA 18S和ITS序列测定是一种快速准确的红色毛癣菌分子生物学鉴定方法.     

一株新的具有脱色能力的琼脂分解菌

本文报道了一株具有脱色能力的琼脂分解菌的分离、脱色现象及细菌学鉴定结果。该菌株分离自琼脂生产工厂周围的土壤中。它能在琼脂培养基上脱除废糖蜜的黑褐色色素,能分解淀粉和琼脂,利用纤维素生长,液化明胶。培养新分离菌不需要生长因子,不产生吲哚、硫化氢、荧光色素及扩散性色素。新分离菌是假单胞菌属的一个新种,定名为井式假单胞菌(Pseudo-monas wellantypicum n．Sp．)。     

土拉杆菌的鉴定

<正> McCoy于1910年发现在美国加利福尼亚州土拉尔地区(Tulare country)在击青和自毙的松鼠中有一种类似鼠疫损害的病症。McCoy和Chapin把引起这种病的细菌命名为上拉杆菌。 Francis(1919)在乌塔( Utah)地区调查野兔热病时发现一个被鹿蝇叮咬颈部而受感染的牧场工人的血液可使豚鼠引起鼠疫状疾病。随后,Francis陆续报导自美州长耳大野兔分离到土拉杆菌,本病由鹿蝇和兔虱叮咬感染传播,并报导了细菌培养用的新培养基和血清学诊断方法。 根据Bergey细菌鉴定手册(第八版),Francisella菌属包括两个种:F.tularensis和F.noviciba。 土拉杆菌为革兰氏阴性、不运动、无芽胞或荚膜。琼脂培养基表面生长呈多型性,有球形、卵园形、杆状、豆粒状、哑钤状等     

油梨童期茎切段试管培养发根的生物鉴定

材料与方法 种子的发芽 将去皮种子用含有0.5％次氯酸钠(“Purex”,用水稀释10倍)和0.1％吐温20乳化剂的溶液浸泡灭菌。将子叶分开,切下带有1—2厘米厚的子叶的胚轴(带有胚根和胚芽),移栽入营养管内。发芽培养基含有MS培养基的盐分和蔗糖3000(单位:毫克/升,下同)、肌醇100、盐酸硫胺素0.4、活性炭1000和“TC”琼脂8000。在加入琼脂前,pH调整到5.7。每个容积为25×150毫米的试管加入营养琼脂25毫升。试管用聚丙烯罩罩口,以1.05公斤/厘米~2压力消毒15分钟。每个培养管放入一     

高压蒸汽灭菌对麦康凯琼脂培养基质量的影响

目的探讨高压蒸汽灭菌对麦康凯琼脂培养基主要质量指标(p H、性能)的影响。方法配制p H为6.80、7.00、7.10、7.20、7.30、7.40、7.50、7.60、7.70、7.80的麦康凯琼脂培养基,经高压蒸汽灭菌后进行p H测定,并将大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙门菌和粪肠球菌接种于麦康凯琼脂培养基上,37℃培养24 h,观察不同p H对细菌生长的影响。结果高压蒸汽灭菌后麦康凯琼脂培养基p H降低0.30~0.50。p H为6.78~7.28时,大肠埃希菌生长率≥0.5;p H为6.93~7.39时,鼠伤寒沙门菌生长率≥0.5;不同p H的麦康凯琼脂培养基上金黄色葡萄球菌及粪肠球菌的生长指数均为0。结论高压蒸汽灭菌可影响麦康凯琼脂培养基的p H及性能。     

放线菌分离培养基筛选及杂菌抑制方法研究

采用平板涂抹分离法研究了培养基种类、土壤样品加热预处理及化学抑制剂对放线菌分离效果的影响。结果表明 :高氏 1号琼脂培养基 (GA)和秸秆腐解物琼脂培养基 (SDSA)的分离结果可以反映土壤中放线菌的基本状况 ;120℃×1.0h加热预处理土样能促进放线菌孢子萌发 ,增加放线菌的分离数量和种类。供试土样经 120℃×1.0h加热预处理后放线菌的数量和类型较对照处理分别增加了5.5 %～54.9%和 125%～100 % ,但加热处理对减少细菌数量作用不明显 ;在放线菌分离培养基中同时加入K_{2相似文献}   

橡胶研究工作报告

在营养培养琼脂培养基上培养不育的胚组织的方法得到发展。曾发现Murashige和Skoog适宜作培养基,在怀特(white)培养基或含有椰子汁(10%v/v)的营养基上没有生长,也发现高浓液的蔗糖(每升>40克)受到抑制。     

提取质粒的一些经验

在质粒DNA的提取过程中,尤其是那些不能扩增的质粒,常因拷贝数低而提取困难,收率不高,甚至发生质粒完全丢失的现象。而放线菌质粒的提取条件更是因菌而异,难度较大,现仅将我们试验中的一些经验介绍如下。1.培养基对质粒提取收率的影响一般来说微生物的遗传性是稳定的,有无质粒也是一种固有的属性,除了诱变剂之外培养基的改变不会对此有何重大的影响。但是,有的菌则不然,如创新霉素产生菌Actinophanes jinanesis R_4,斜面培养基中所用琼脂有较大的关系。当用青岛产海燕牌条状琼脂时,培养的菌可以提取到质粒,如用粉末状琼脂就不     

聚乙二醇小檗碱液对大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌生长的抑制作用

目的 明确聚乙二醇小檗碱液在琼脂培养基表面的抑菌特点,及其对大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌的标准菌株、抗生素敏感菌株与多重耐药菌株生长的抑制作用,研究评价药物在皮肤黏膜表面的抑菌作用的合理实验方法.方法 以大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌(标准菌株、抗生素敏感菌株和多重耐药菌株)为研究对象,用常量肉汤稀释法测定聚乙二醇小檗碱液的最低抑菌浓度(Minimum Inhibitory Concentration,MIC);用平皿琼脂培养法和试管肉汤培养法测定不同浓度聚乙二醇小檗碱液的抑菌作用.结果 在不同浓度的聚乙二醇小檗碱液的作用下,在琼脂培养基表面上或肉汤培养基中细菌的生长受到明显抑制,抑制作用与小檗碱浓度正相关,且对抗生素敏感菌株和多重耐药菌株的抑制作用差异无统计学意义;聚乙二醇小檗碱液在平皿琼脂表面和试管肉汤中对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌抑制100％菌株的浓度分别为1 500和375 mg/L、1 500和375 mg/L.聚乙二醇小檗碱液在琼脂培养基表面的抑菌作用明显低于在肉汤培养基中的抑制作用,在琼脂培养基表面的抑菌浓度是肉汤培养基中的抑菌浓度的4倍.并且金黄色葡萄球菌与大肠埃希菌之间差异无统计学意义.聚乙二醇小檗碱液必须达到肉汤培养基中4倍以上浓度时,才能获得抑制100％细菌在琼脂培养基表面生长的效果.结论 高浓度的聚乙二醇小檗碱液可以抑制皮肤黏膜表面的细菌,包括抗生素耐药菌株的生长;皮肤黏膜表面应用聚乙二醇小檗碱液的适宜浓度为1 500 mg/L.琼脂培养基法适用于评价药物在皮肤黏膜表面的抑菌作用.     

名词解释

菌落在固体培养基上,一个单细胞(孢子)经过一定时间培养后,在一局限的地方繁殖成为肉眼可见的细胞群体,称为菌落。因之,可用菌落数来代表活菌(孢子)的数目。不同成分的培养基上,菌落呈现的特征不同;不同的菌在相同成分的培养基上,菌落呈现的特征也各不相同;又由于各种菌在固定的培养基上菌     

微生物转化洛伐他汀条件的初步研究

以本实验室筛出的一株菌ST2710为出发菌,研究不同培养条件对转化率的影响。结果发现,菌株ST2710在种子培养基进行预培养,再转入转化培养基中培养2d后,加入洛伐他汀溶液1.0mL(10mg／mL)后再培养5d,产物的产率可达43．41％;就四种溶剂溶解底物条件进行了研究,结果发现用二甲基甲酰胺溶解洛伐他汀,产物产率为最高,并且转化作用不需要底物的诱导;以单独的菌丝体和上清液转化洛伐他汀时均低于培养液对洛伐他汀的转化作用。     

实验9 λ噬菌体DNA的提取

一、平板扩增抽提法 1.LB培养基上划线接种宿主菌,37℃培养过夜。 2.挑取单菌落接种在LB培养液中,培养液含0.2％麦芽糖。37℃振荡培养过夜。 3.0.5毫升菌液;0.1毫升 Mg~++Ca~++溶液(10mM MgCl_2/10mM CaCl_2);噬菌体[10~5pfu(噬斑生成单位)],混和,37℃水浴中保温15分钟。 4.加入4毫升42—45℃含0.7％琼脂粉的LB培养液,迅速混匀,铺在直径为8.5厘米的含1.5％琼脂粉的LB培养基上。37℃培养过夜。铺有上层培养基的一面朝上培养。     

抗酸菌L型TSA-L培养基的改进

前文已介绍,培养抗酸菌L型的胰胨大豆蛋白胨琼脂培养基(TSA-L)是培养抗酸菌L型的一种较适宜的培养基。但其中一些成份来源不方便,制作手续较麻烦,我们试以改进,结果如下。材料和方法1.菌种:强毒人型结核菌(H_(37)Rv)和无毒     

琼脂固体培养基培养蜜环菌菌索总DNA的提取

野外采集的蜜环菌[Armillaria mellea(Vahl.ex Fr.)Quel]在提取DNA前需要分离获得纯化的菌丝体。常规液体培养获得菌丝团的方法感杂率较高,采集固体培养基表面cellophane膜上形成的菌丝则难以获得足量的DNA提取材料。蜜环菌细胞内含有大量多醣类物质,也使得蜜环菌高质量DNA的提取存在一定的困难。本研究通过改进试验,提供一个直接从琼脂固体培养基培养的蜜环菌菌索中提取高质量DNA的方法。其中样品的预先冻融处理方法可以促使蜜环菌菌索与琼脂分离;而在裂解提取缓冲液裂解材料细胞后加入1.25 mol/L KAc溶液,则有利于除去蜜环菌细胞内的多醣类物质以及残留的少量琼脂。通过琼脂糖电泳、紫外分光光度计对DNA浓度及OD值的测定、ISSR引物的PCR扩增以及酶切产物的PCR扩增等方法的检测,结果均表明该方法提取的DNA质量较好,符合进一步进行分子生物学研究的要求。     

星球和鸾凤玉的组织培养与快速繁殖

1　植物名称　星球 (Astrophytumasterias)园艺种“超兜A” ,鸾凤玉 (A .myriotigma)园艺种“白云鸾凤玉”。2　材料类别　星球和鸾凤玉两年生实生苗 ,供试植株来源于日本カクタヌ专门家联盟。3　培养条件　 (1)启动培养基 :MS +KT 1mg·L- 1(单位下同 ) +2 ,4 D 1;(2 )分化培养基 :MS +6 BA 1+KT 2 ;(3)增殖培养基 :MS +6 BA 0 .5 +KT 0 .5+NAA 0 .1;(4 )复壮与生根培养基 :1/ 2MS +NAA0 .1。以上培养基均加入 3%蔗糖、0 .7%琼脂 ,pH5 .8。培养温度 (2 5± 2 )℃ ,光照 8h·d- 1,光照度为2 0 0 0lx。4　生长与分化情况4 .1…     

实验14 M13克隆和DNA顺序分析

一、制备感受态受体菌 1.配制M13(单链DNA噬菌体)宿主菌E.coliK12 JM103的基本琼脂培养基。JM103的基因型是[△(lac pro)thi,str A,supE,end A,sbc B15,hsdR4,F′tra D36,pro AB,lac I~qz M15]。基本琼脂培养基的配制如下: (1)2×Bacto琼脂:15克琼脂粉溶于450毫升水,高压蒸汽灭菌。 (2)2×盐溶液:K_2HPO_4 10.5克,KH_2PO_4 4.5     

洗衣粉S.S.琼脂培养基的初步应用报告

分离肠道病原菌的培养基种类繁多,但效果却不一致,其中效果较满意者当推3号胆盐S.S.琼脂及去氧胆酸钠-牛胆酸钠琼脂(简称郑氏S.S.琼脂)。我院试用的洗衣粉-去氧胆酸钠琼脂(简称洗衣粉S.S.琼脂)效果又较前者为优,这种培养基对肠道病原菌不但有很高的阳性检出率,而且痢疾杆菌在这种培养基上呈特殊的粘性菌落,可以在分离培养基上初步鉴别痢疾菌和沙门氏菌菌落,使肠道培养基更趋于完善。     

裂褶菌培养基形态学观察和DNA序列分析

目的通过观察裂褶菌在5种培养基上的生长状态、扫描电镜及DNA序列分析,了解该菌形态学及分子生物学等方面的特征。方法菌落转种于沙氏培养基(SDA),麦芽浸膏琼脂(MEA),马铃薯葡萄糖琼脂(PDA),玉米粉琼脂(CMA)和察氏琼脂(CZA)平皿培养基,27℃和37℃培养2周,观察菌落生长情况,进行扫描电镜检测及DNA序列分析。结果菌落在SDA,MEA和PDA上生长状态较好,呈蓬松白色羊毛状;尿素酶试验阳性,放线菌酮耐受试验阴性。光镜下见分支分隔菌丝、侧生的钉状突起及类水母体变异子实体。扫描电镜见菌丝分隔处闭锁联合、侧生钉状突起和泪滴状球形分泌物。经26S rDNAD1/D2区序列分析证实该菌株为裂褶菌。结论裂褶菌只有丝状型一种菌落形态;分支分隔菌丝及分隔处闭锁联合,侧生钉状突起和泪滴状球形分泌为其形态学特征;孢子由类水母状子实体产生。     

培养基琼脂用量计算的商榷

植物组织培养中,大多数采用固体培养基。固体培养基是以琼脂(又称洋菜)为支持物的。目前一些资料中一般报告用培养基琼脂的百分含量来表示培养基的硬度。笔者认为,这种提法不太科学,而应该用胨力强度(又称凝胶强度)来表示琼脂培养基     

屎肠球菌产生有机酸降低琼脂胶凝作用

目的探讨细菌破坏琼脂凝胶形成的原因和机制。方法利用细菌培养技术培养细菌;高压灭菌再融化琼脂-酵母培养基,室温下观察其是否凝固;利用硬度测量仪测量培养基硬度;pH测量仪测量pH值。结果首先,固体琼脂培养基在培养屎肠球菌之后再融化出现室温条件下不凝固现象;其次,pH是一个影响琼脂凝固性的主要因素;最后,屎肠球菌通过发酵产酸而降低pH,当pH值小于4时就破坏了琼脂的凝固性。结论细菌发酵产生酸性物质,降低了培养基pH,引起琼脂凝固点降低。