蛋白质芯片SELDI-TOF MS技术的研究进展及其在临床中的应用

蛋白质芯片为新一代的蛋白质组研究技术,由美国Ciphergen生物系统公司引进,表面增强激光解吸电离-飞行时间质谱(SELDI-TOFMS)提供一个高通量和高灵敏度的检测平台。投放至今虽短短10来年,但卓越的成果已广为医学科学界重视,尤其在恶性肿瘤的早期诊断、监控和预后研究上。蛋白质是细胞内执行生物功能的最终分子,蛋白质组学研究让人类更深入了解疾病和生命的本源,不断发现的特异性肿瘤标志物更为攻克癌症带来新希望。这里除对表面增强激光解吸电离-飞行时间质谱作较详尽的介绍外,更重点阐述其近年来蛋白质芯片近期的研究进展和在临床中的应用,并就其优劣和发展前景作出评估。     

差异蛋白质组学在筛选肿瘤标记中的应用

目前,利用差异蛋白质组技术对肿瘤早期标记蛋白的筛选已在世界范围内形成热潮。介绍了蛋白组学、差异蛋白质组学、肿瘤标记、常用的差异蛋白质组学技术及其在筛选肿瘤标记中的应用．最后指出了研究中存在的问题,并对前景进行了展望。     

通过检测血清中hTERT的mRNA能诊断出早期癌症

日本鸟取大学医学部药物治疗学专业的三岛典正先生与研究生院医学系研究科基因医疗学专业的汐田刚史先生等人的研究小组成功开发了检测血清中hTERT的mRNA的高灵敏度定量方法[hTERT是和癌的发生、进展有关的端粒酶（telomerase）的催化单位]。并且在对多个医疗机构对临床样品的血清中hTERT的mRNA进行评估的过程中，发现在肝细胞癌的诊断上这个方法的灵敏度和特异性均优于其他肿瘤标记物．是一个能够更早期查出癌症的标记物。[第一段]     

新的癌症治疗与诊断技术

一代全新的癌症诊疗手段初见端倪,将造福于千千万万的肿瘤患者。如果一名病人被诊断患有癌症,医生将采用新的诊断方法进行一系列检测,确定是癌基因过度表达还是发生了基因突变,其结果将指导治疗。其中新开发出的一种检测方法是检测ＨＥＲ－２／ｎｅｕ生长因子受体。在３０％～５０％的转移性乳腺癌患者中,ＨＥＲ－２／ｎｅｕ生长因子受体被ＨＥＲ－２／ｎｅｕ癌基因过度表达。ＨＥＲ－２／ｎｅｕ检测法可使专家们通过检测尿或血样中的ＨＥＲ－２／ｎｅｕ片段对病人治疗后和非侵润性肿瘤缓解后的病情进行监控。诊断和治疗缺陷性成视网膜…     

成像技术在阿尔茨海默病诊断中的应用

阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease, AD)是最常见的神经退行性疾病,目前临床尚缺乏有效的治疗方法。由于AD的病理变化发生在临床症状之前几十年,早期诊断和干预有助于缓解疾病进展。目前,研究正在从基于症状的临床诊断转向基于病理标志物的生物学诊断。本文综述了AD最常用的早期诊断成像技术,介绍其成像原理、局限性和最新研究进展,并展望了AD早期诊断未来可能的发展方向。预测多模态成像和诊疗一体化可能是未来AD研究和临床实践的最佳方案。     

重组抗体工程及其在肿瘤靶向及癌症治疗中的应用

在过去的十几年中,重组抗体工程在基础研究、医学和药物生产上已经成为最有希望的领域之一。重组抗体及其片段在正在进行诊断和治疗的临床试验中占所有生物蛋白的30％以上。研究集中在抗体作为理想的癌症靶向试剂方面,最近由于FDA批准使用第一个工程化治疗抗体而使热度达到极点。过去的几年中,在设计、筛选及生产新型工程化抗体方面已经取得了重大进展。改革的筛选方法已经能够分离出高亲和力的癌－靶向及抗病毒的抗体,后能够抑制病毒用于基因治疗。癌症诊断和治疗的另一个策略是将重组抗体片段与放射性同位素、药物、毒素、酶以及生物传感器表面进行融合。双特异性抗体及相关融合蛋白也已经生产出来用于癌症的免疫治疗,在抗癌疫苗以及T细胞补充策略上有效地增强了人免疫应答。     

DNA甲基化模式及其在癌症中的作用

随着对癌症研究的不断深入,表观遗传调控在癌症发生发展中的作用也越来越受到人们的关注。DNA基化作为一种重要的表观遗传修饰机制,在基因表达调控中起着十分重要的作用。该文对DNA基化模式及其在癌症中的作用作了综述,并对DNA甲基化作为癌症早期诊断的生物标记以及癌症表观治疗的新策略作了总结和展望。     

日本开发出新型癌症诊断技术

日本京都大学等机构研究人员联合开发出一种能定位癌组织的新型癌症诊断技术,并希望首先将这项技术应用于乳腺癌的检查。     

肿瘤标志物联合检测在乳腺癌早期诊断中的应用

目的:探讨肿瘤标志物癌胚抗原(CEA)、糖链抗原19-9(CA19-9)、糖链抗原15-3(CA15-3)联合检测在乳腺癌早期诊断中的应用价值。方法:检测87例乳腺癌患者,55例乳腺良性肿瘤患者和35例健康人血清中CEA、CA19-9、CA153等肿瘤标志物的水平及3种标志物不同组合对乳腺癌的阳性检出率。结果:乳腺癌患者3种肿瘤标志物显著高于正常对照组及乳腺良性肿瘤组(P<0.01)。3项标志物不同组合对不同分期乳腺癌检出的敏感性均高于单项标志物。其中CEA+CA199+CA153组合的检出敏感性较其他组合均高,特别是对早期患者检出率明显提高。结论:CEA+CA199+CA153联合检测能提高乳腺癌的早期诊断率。     

粪便RNA的检测在大肠癌早期诊断中的应用

大肠癌是胃肠道恶性肿瘤之一,在我国大肠癌的发病率和死亡率呈上升趋势。由于死亡率与大肠癌的诊断时间密切相关,因此早期诊断大肠癌尤为重要。但是目前临床常规诊断方法存在一定的局限性,难以实现大肠癌的早期诊断。粪便RNA检测技术是近年来发展的基于分子水平的早期无创检测大肠癌的技术,与常规检测技术包括结肠镜检测、大便隐血检测和粪便DNA突变检测相比,粪便RNA检测具有成本低和灵敏度高等优点,并可同时分析多种基因表达量和动态监测肿瘤进展。文章介绍了粪便RNA检测的可行性,系统阐述了用于粪便RNA检测的特异性基因、粪便RNA的提取方法和粪便RNA的检测技术,并对粪便RNA检测技术在大肠癌早期诊断中的进一步应用进行了展望。     

蛋白质芯片SELDI-TOFMS技术的研究进展及其在临床中的应用

蛋白质芯片为新一代的蛋白质组研究技术,由美国Ciphergen生物系统公司引进,表面增强激光解吸电离-飞行时间质谱(SELDI-TOFMS)提供一个高通量和高灵敏度的检测平台。投放至今虽短短10来年,但卓越的成果已广为医学科学界重视,尤其在恶性肿瘤的早期诊断、监控和预后研究上。蛋白质是细胞内执行生物功能的最终分子,蛋白质组学研究让人类更深入了解疾病和生命的本源,不断发现的特异性肿瘤标志物更为攻克癌症带来新希望。这里除对表面增强激光解吸电离_飞行时间质谱作较详尽的介绍外,更重点阐述其近年来蛋白质芯片近期的研究进展和在临床中的应用,并就其优劣和发展前景作出评估。     

肿瘤标志物联合检测在乳腺癌早期诊断中的应用

目的：探讨肿瘤标志物癌胚抗原（CEA）、糖链抗原19-9（CA19-9）、糖链抗原15-3（CA15-3）联合检测在乳腺癌早期诊断中的应用价值。方法：检测87例乳腺癌患者,55例乳腺良性肿瘤患者和35例健康人血清中CEA、CA19-9、CA153等肿瘤标志物的水平及3种标志物不同组合对乳腺癌的阳性检出率。结果：乳腺癌患者3种肿瘤标志物显著高于正常对照组及乳腺良性肿瘤组（P〈0.01）。3项标志物不同组合对不同分期乳腺癌检出的敏感性均高于单项标志物。其中CEA＋CA199＋CA153组合的检出敏感性较其他组合均高,特别是对早期患者检出率明显提高。结论：CEA＋CA199＋CA153联合检测能提高乳腺癌的早期诊断率。     

Optimized application of surface-enhanced laser desorption/ionization time-of-flight MS to differentiate Francisella tularensis at the level of subspecies and individual strains

Francisella tularensis, the causative agent of tularaemia, is a potential agent of bioterrorism. The phenotypic discrimination of the closely related F. tularensis subspecies and individual strains with traditional methods is difficult and time consuming, often producing ambiguous results. Surface-enhanced laser desorption/ionization time-of-flight MS (SELDI-TOF MS) was used in this study to discriminate the different species and subspecies of the genus Francisella. We tested 18 Francisella strains including at least one representative of each species/subspecies on four different types of chromatographic chip surfaces. Multivariate analysis (hierarchical clustering and principal component analysis) allowed grouping of the strains according to their designated subspecies. Furthermore, single strains within F. tularensis subspecies could be discriminated.     

Smart Amp快速检测技术及其应用

SmartAmp是一种新的DNA等温扩增技术,具有操作简单、快速、成本低、灵敏度高、特异性强、背景低等优点。目前已在临床基因多态性检测、感染性疾病诊断等方面初步应用,为临床快速诊断提供了帮助,在食品和环境中病原体检测领域也显示了极大的应用发展潜力。我们简要概述SmartAmp技术原理、特点及其应用前景。     

悬浮芯片技术应用进展

悬浮芯片技术(SAT)是一种新型、高通量的生物芯片技术,它是将流式细胞术、激光技术及应用流体学等技术结合在一起,利用悬浮在液相中的分类荧光编码微球作为检测载体,具有高通量、速度快、灵敏度高、特异性强及检测范围广等特点.近几年来,悬浮芯片技术在免疫学、基因组学、蛋白质组学及临床诊断检测等方面应用较广泛.就其原理、技术特点...     

环介导的恒温扩增技术及其在病毒性疾病诊断中的应用

环介导的恒温扩增（LAMP）是近年来新兴的一种快速DNA扩增技术,其基本原理在于利用4个特殊设计的引物和具有链置换活性的DNA聚合酶,在恒温条件下对靶序列进行扩增。LAMP技术具有特异性强、敏感性高、反应迅速、设备简单等特点,在人类病毒性疾病的诊断领域有着广泛的应用。     

AlphaLISA技术的发展及应用

AlphaLISA技术是一种基于微珠的化学发光的新型均相检测技术,与传统的ELISA技术相比具有更高的敏感性、精确性、均一性、背景低、广泛的动态检测范围,而且无需洗涤及样本需求量极少等特点.该技术可用于多种组织、细胞来源的生物分子的检测,如细胞因子、抗原抗体的检测、蛋白相互作用及蛋白质与核酸相互作用的检测以及药物分析等研究.随着AlphaLISA技术的发展,该技术已在医学及分子生物学领域得到了广泛的应用.     

SELDI-TOF MS analysis of the Cardiac Troponin I forms present in plasma from patients with myocardial infarction

The troponin (Tn) complex is composed of troponin T, troponin C and troponin I. The cardiac isoform of TnI (cTnI) is modified and released in blood of patients with cardiovascular diseases as a heterogeneous mixture of free, complexed and posttranslationally modified forms. With the aim to determine later, whether specific forms of cTnI could be associated with the different pathologies leading to cTnI release, the cTnI forms present in the plasma from 64 patients with acute myocardial infarction (AMI) have been analysed by SELDI-TOF MS using anti-TnI mAbs coupled to PS20 ProteinChips arrays. Upfront immunoaffinity enrichment using anti-cTnI 19C7 mAb allowed us to detect cTnI and bis-phosphorylated cTnI in 11/12 and 9/12 analyses respectively, as well as truncated cTnI in plasma with concentration of cTnI as low as 8 ng/mL. Cardiac troponin C (cTnC) and covalent TnIC complex were also found in pools of plasma with higher concentrations of cTnI. MAb 19C7-affinity SELDI-TOF MS analysis performed after immunopurification of one pool of AMI plasma with anti-free cTnI, anti-cTnC, and anti-phosphorylated cTnI mAbs indicated that intact and bis-phosphorylated cTnI were mostly under the free form. Besides, a 18 718 m/z peak could correspond to a truncated phosphorylated form initially complexed with cTnC.     

血浆中氨基酸检测技术探讨

在血浆中检测游离氨基酸含量是临床诊断的重要手段之一。本文讨论了液相色谱法、氨基酸分析法、液质联用技术等几种血浆中氨基酸的检测技术,并介绍这些技术在氨基酸检测中的应用,为建立血浆中游离氨基酸的分析方法提供参考依据。     

蛋白质组学研究技术及其在寄生虫学中的应用

介绍了蛋白质组学研究的核心技术 ,即蛋白质组分分离、蛋白质组分鉴定、利用蛋白质组信息学进行结构和功能预测 ,以及蛋白质组学技术在寄生虫学中的应用和研究进展。