药物敏感试验药片法研究

药敏药片对国际三株标准菌试验,抑菌圈直径范围均符合判定标准。与进口药敏药片符合率为１００％。与药敏纸片片间差比较试验,药片抑菌圈＝１～２ｍｍ,精密度高,符合国际要求,而纸片抑菌圈＝９～１３ｍｍ,均匀度检测明显不合格。药片变异系数ＣＶ＝１．３１～２．９２,纸片ＣＶ＝１４．７８～２１．６７表明药片变量离散度小,片间差很小;而纸片变量离散度明显大,故纸片片间差很大。     

人卵巢癌裸鼠移植实体瘤模型的建立

目的建立人卵巢癌裸鼠移植实体瘤模型。方法将1例人卵巢癌组织移植裸鼠,建立人卵巢癌裸鼠原代移植实体瘤模型的基础上,再将实体瘤皮下移植、实体瘤原位移植、实体瘤细胞移植裸鼠。观察裸鼠实体瘤生长和转移情况,称量其体重、子宫卵巢重、瘤重及瘤的大小,并作病理、电镜、染色体检查。结果成功地建立人卵巢癌裸鼠移植实体瘤模型,并已传至第18代,传代移植成功率100％,组织学和超微结构形态均证明该实体瘤保留了原人卵巢癌特征,有人卵巢癌染色体特征,并出现肝、脾转移。结论本研究建立人卵巢癌裸鼠移植实体瘤模型与人相似,通过18代传代和实验观察方法稳定可靠。为人卵巢癌的研究提供了理想的动物模型。     

SRB法和MTT法抗肿瘤药物筛选结果相关性研究

为了探索抗肿瘤药物体外筛选中磺酰罗丹明B（SRB）法和四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法实验结果的相互验证作用,作者以PC-3、BGC-823、Bcap-37细胞系为研究对象,利用SRB法和MTT比色法对供试化合物行体外抑制活性考察,并用SPSS12．0对两种筛选方法得到的实验结果进行差异性分析。结果表明,SRB法和MTT比色法实验结果相关性好,可以相互验证实验结果的准确性和可靠性。     

DNA甲基化检测在实体瘤早期诊断中的研究进展

在恶性肿瘤的发生和发展过程中,早期诊断对于患者的生存期和预后具有重大意义,然而受当前检测手段的限制,我国肿瘤的早诊早治率还相对较低。大量研究表明,DNA甲基化检测是一种理想的肿瘤早期诊断方法,是发现最早、也是研究最深入的表观遗传调控机制之一。文章主要综述了DNA甲基化在实体瘤早期诊断中的最新研究进展,旨在为临床诊疗提供新的思路和策略。     

抑菌生的药物敏感试验

本文检测了BS_(224)菌对21种抗生素的药敏情况。结果,除对林可霉素、链霉素呈中度敏感外,其余均敏感,说明BS_(224)菌是抗生素敏感菌。     

人乳头瘤病毒引起裸鼠生殖系统病变的研究

重组的腺病毒Ad-CMV-E6/E7和Ad-K14-E6/E7在293细胞中包装后得到上清液,将Ad-CMV-E6/E7和Ad-K14-E6/E7病毒上清液以及做为对照的重组腺病毒空载体pAd-CMV和pAdtrack-K14的上清液,经过纯化后,通过裸鼠的尾缘静脉注射到裸鼠体内,每天注射0.05 mg雌激素给注射病毒的裸鼠,同时做对照。12周后给裸鼠注射2.5%的阿佛丁进行麻醉,取其子宫、阴道、卵巢、乳腺等组织,浸泡在3.75%的多聚甲醛中4℃固定过夜,做石蜡包埋切片、HE染色、免疫组化检测P53蛋白和Bcl-2蛋白的表达,取裸鼠的各个组织提取DNA、RNA和蛋白质,然后分别检测有无重组腺病毒的感染、病毒表达的情况及E6蛋白的表达。HE染色结果显示注射腺病毒Ad-K14-E6/E7的裸鼠(实验组2)子宫颈-子宫体移行组织增生明显。SP法免疫组化检测突变型P53和Bcl-2在该组裸鼠的子宫基质细胞表达增加,并且RT-PCR检测该组裸鼠子宫组织也有E6/E7的表达,Western Blot检测该组子宫组织也有E6蛋白的表达。动物实验结果表明K14启动子增加了E6/E7在裸鼠子宫组织的表达,同时也发现该组裸鼠的子...     

抗肿瘤药物筛选中MTT法和SRB法的比较

在抗肿瘤药物的体外筛选中 ,MTT法和 SRB法是常用的两种方法。我们用MTT法和 SRB法分别测定 3种已知植物抗癌药对 2 2株人肿瘤细胞的抗癌活性 ,对这两种方法进行了详细的比较。通过分析两种方法测出的细胞存活率 ( T/ C)的差异分布和相关系数以及 IC50 的二变量分布 ,比较了两种方法测定结果的异同 ;通过两种方法重复测定 3种药物对 7株人癌细胞的抗癌活性 ,比较了两种方法的重复性 ;通过分析两种方法测定结果 T/ C值随时间变化的程度 ,比较了两种方法测定结果的稳定性。实验结果表明 :MTT法和 SRB法的相关性较好 ,都可用于抗肿瘤药物的体外筛选 ,SRB法更适合于大规模筛选 ,3种抗癌药物的测定结果与临床资料基本一致。     

溶瘤病毒联合CAR-T细胞治疗实体瘤研究进展

嵌合抗原受体修饰的T细胞(chimeric antigen receptor T cells, CAR-T)疗法属于肿瘤免疫治疗的范畴。该疗法在血液系统恶性肿瘤治疗中表现优异,但在实体瘤治疗中存在诸多挑战。近年来,溶瘤病毒(oncolytic viruses, OVs)在针对黑色素瘤、脑胶质瘤等实体瘤适应证的临床试验中展现出良好的疗效。溶瘤病毒一方面选择性地在肿瘤细胞中复制杀伤肿瘤细胞,另一方面通过激活机体自身的免疫系统发挥抗肿瘤作用。因此,溶瘤病毒与免疫检查点抑制剂、肿瘤浸润淋巴细胞疗法(tumor infiltrating lymphocytes, TIL)等免疫疗法的联合应用也在广泛开展。目前研究表明,溶瘤病毒不仅能够增加CAR-T细胞的抗肿瘤活性,而且通过传递肿瘤相关抗原或特异性抗原来增强CAR-T细胞对肿瘤的杀伤作用,同时溶瘤病毒还可以帮助CAR-T细胞克服免疫抑制性的肿瘤微环境。两种疗法的联合应用在临床前研究中展现出了良好的疗效和安全性,能够解决CAR-T在实体瘤治疗领域的瓶颈,具有广阔的临床转化前景。本文就溶瘤病毒与CAR-T细胞联合治疗实体瘤的药效及相关机制研究展开论述...     

真菌药物敏感性试验的现状

随着真菌感染的增加及耐药现象的出现,借助真菌药敏结果合理选择抗真菌药物已受到临床医生的重视,以往真菌药敏试验普遍存在的问题是缺乏统一,标准和规范的方法,有关真菌标准化体外药敏试验方法的建立,以及一些更为简便,改良方法的发展,使各实验室能够为临床提供具有可比性准确的药敏结果,为制定敏感和耐药标准提供科学依据。本文综述了真菌药敏试验的标准化问题及其与临床的相关性。     

姜黄素和紫杉醇联用对前列腺癌PC3裸鼠移植瘤作用的研究

目的:探讨姜黄素和半量紫杉醇联用对前列腺癌PC3裸鼠移植瘤生长增殖的影响及其机制。方法:构建人雄激素非依赖性前列腺癌细胞系PC3裸小鼠皮下移植瘤模型,随机分为溶酶对照组,姜黄素组,紫杉醇组和姜黄素+紫杉醇(半量)组(n=6)。姜黄素每隔2天腹腔注射100mg/kg,紫杉醇每3天腹腔注射10mg/kg,联合组紫杉醇减半,对照组注射药物溶剂。每6天测量计算移植瘤体积并绘制肿瘤生长曲线。药物注射30天后,取移植瘤组织标本分别进行免疫组化和定量RT-PCR,检测金属基质蛋白酶2(MMP2),增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白及mRNA的表达。结果:移植瘤体积在24～30天时,姜黄素组和紫杉醇组肿瘤体积较对照组有不同程度的减小。姜黄素+紫杉醇(半量)组在第30天内肿瘤生长体积和紫杉醇组相近,30天后合用组肿瘤体积小于单纯紫杉醇组(P<0.05)。姜黄素和紫杉醇明显降低PC3移植瘤组织中PCNA和MMP2mRNA的表达(P<0.01)。姜黄素+紫杉醇(半量)组瘤组织中PCNA和MMP2的mRNA表达均低于紫杉醇组(P<0.05)。免疫组化染色显示PCNA和MMP2蛋白表达在治疗组均降低,和瘤组织中mRNA表达变化相一致。结论...     

Endostatin——抗实体瘤的作用

Ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ是一种新发现的细胞因子，它可以有效地抑制内皮细胞生长和血管生成，在抗实体瘤方面有显著的效果，其最大的特点是不产生抗药性，Ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ的出现，为人类战胜肿瘤开辟了一条新的可靠的途径。     

嵌合抗原受体巨噬细胞免疫疗法及其在实体瘤治疗中的应用

嵌合抗原受体T细胞（chimeric antigen receptor T-cell,CAR-T）疗法在血液肿瘤中取得了显著成功,但在实体瘤的治疗中收效甚微。相比之下,固有免疫细胞在癌症中的临床应用还没有得到广泛开发。巨噬细胞是肿瘤微环境中主要的固有免疫细胞并具有较强的吞噬和浸润能力,最近研究发现嵌合抗原受体巨噬细胞（chimeric antigen receptor macrophage,CAR-M）免疫疗法在多种实体瘤中发挥重要的抗肿瘤效应。本文总结了近年来CAR-M治疗肿瘤的相关研究,旨在探究其对实体瘤的潜在治疗价值,为其未来的临床应用提供参考。     

MTT法检测细菌细胞数的主要影响因素分析

MTT法是生物活细胞计数的灵敏、快速和便捷方法。报告对MTT法应用于细菌细胞数定量分析时的分析前培养时间、MTT反应时间、MTT剂量和检测波长等主要影响因素的分析结果,同时报告MTT反应产物溶解检测与直接检测,以及MTT法与平板菌落计数法定量检测的结果比较。结果如下：Formazan生成量与细菌活细胞数呈正相关,对数生长期变化最明显;MTT为0.25 mg/mL,反应2 h时吸光值与菌落数具有良好的线性关系（r=0.999 8）;Formazan的最大吸收波长为570～580 nm;MTT反应产物溶解检测和直接检测结果经统计学分析无显著性差异（P〉0.05）;细菌细胞数在107～109 cfu/mL范围内,MTT法与菌落计数法定量结果呈现良好的线性关系（r≥0.991 7）。     

水产病原菌抗菌药物敏感试验标准化探讨

病原菌药物敏感试验是临床微生物学研究的重要手段,相比人类和兽医临床,国内外水产养殖中细菌性病原的药敏试验还未有公认的标准化参考方法。概括近几年国外对水产病原菌药敏试验标准化方法建立的研究进展,探讨了试验中关键因子的影响,指出我国水产药敏试验中存在的不足及对未来发展提出展望。     

固本抑瘤Ⅲ号方联合吉西他滨对人胰腺癌裸鼠异位移植瘤的抑瘤作用

目的探讨固本抑瘤Ⅲ号方以及与吉西他滨联合治疗人胰腺癌裸鼠异位移植瘤的抑瘤作用。方法将40只荷瘤裸鼠随机分为对照组、吉西他滨组、固本抑瘤Ⅲ号联合吉西他滨组、固本抑瘤Ⅲ号组,每组10只。于接种后第8天开始给药,观察指标为瘤重、裸鼠体重、移植瘤体积。结果吉西他滨组、固本抑瘤Ⅲ号联合吉西他滨组、固本抑瘤Ⅲ号组的抑瘤率分别为49.2%、68.9%和28.0%。固本抑瘤Ⅲ号联合吉西他滨组较吉西他滨组抑瘤作用更强(P0.05)。吉西他滨组、固本抑瘤Ⅲ号联合吉西他滨组、固本抑瘤Ⅲ号组移植瘤体积均较对照组明显降低,差异有显著性。固本抑瘤Ⅲ号联合吉西他滨组体重下降明显,体重较对照组、吉西他滨组及固本抑瘤Ⅲ号组明显下降,差异有显著性。结论固本抑瘤Ⅲ号方具有增加吉西他滨化疗治疗人胰腺癌裸鼠腋下移植瘤疗效的作用。     

伊立替康联合替莫唑胺对儿童难治性实体瘤近期疗效的研究

目的:研究伊立替康(Irinotecan,CPT-11)联合替莫唑胺(Temozolomide,TMZ)对儿童难治性实体瘤的近期疗效;方法:选取了11名难治性儿童实体瘤患者并争取了家属同意,分别给予了伊立替康:60mg/m~2/d,ivgtt,连用5天;替莫唑胺:75mg/m~2/d,连用5天,在伊立替康前一小时口服;用药期间同时给予思密达或者头孢菌素类抗生素预防药物相关性腹泻,并定期复查血象以及肝肾功;28天一疗程,每疗程行复查CT或MRI进行疗效评定和药物安全性评价。结果:11例患者经过2-6个疗程的治疗;疾病控制率(DCR)达到54%;明显延长了患者的无疾病进展生存期,中位无疾病进展生存期3.3个月。用药期间不良事件主要包括0-Ⅲ级的药物相关性腹泻、呕吐、血小板减少、贫血等;结论:伊立替康联合替莫唑胺方案能明显延长儿童难治实体瘤患者未进展存活时间,且耐受性好、安全性高,可以作为儿童晚期实体瘤患者的首选治疗方案。     

伊立替康联合替莫唑胺对儿童难治性实体瘤近期疗效的研究

目的：研究伊立替康（Irinotecan,CPT-11）联合替莫唑胺（Temozolomide,TMZ）对儿童难治性实体瘤的近期疗效;方法：选取了11名难治性儿童实体瘤患者并争取了家属同意,分别给予了伊立替康：60mg／m2／d,ivgtt,连用5天;替莫唑胺：75mg／m2／d,连用5天,在伊立替康前一小时口服;用药期间同时给予思密达或者头孢菌素类抗生素预防药物相关性腹泻,并定期复查血象以及肝肾功;28天一疗程,每疗程行复查CT或MRI进行疗效评定和药物安全性评价。结果：11例患者经过2-6个疗程的治疗：疾病控制率（DCR）达到54％;明显延长了患者的无疾病进展生存期,中位无疾病进展生存期3．3个月。用药期间不良事件主要包括0-Ⅲ级的药物相关性腹泻、呕吐、血小板减少、贫血等;结论：伊立替康联合替莫唑胺方案能明显延长儿童难治实体瘤患者未进展存活时间,且耐受性好、安全性高,可以作为儿童晚期实体瘤患者的首选治疗方案。     

MTT法检测石刁柏悬浮细胞技术的研究

本研究确定了MTT法测定悬浮培养的石刁柏细胞活力所需的最适条件为:比色波长560nm,最适缓冲液为柠檬酸钠-Vc缓冲液,渗透促进剂为二甲基亚砜,洗脱剂为酸化异丙醇,0.133%浓度的MTT溶液适于对未知培养时期的细胞计数,0.267‰浓度的MTT溶液适于鉴定细胞活力;同时,本研究通过MTT对培养细胞的生长过程进行了测定,确定细胞活性最强时期为指数期;并研究了细胞数量与吸光值之间的关系以及培养时间对MTT染色的影响.     

MTT法和CCK-8法检测细胞活性之测试条件比较

利用HL60作为研究对象,对比了MTT法和CCK-8法在最佳检测时刻和检测波长等参数的差异。对于CCK-8法,最佳测试时刻在细胞液培养4 h后,最佳测试波长为490 nm。实验结果表明用CCK-8法检测的OD值与活细胞数的线性相关度要优于MTT法,是一种灵敏度较高、重复性好的的细胞活性检测方法。