免疫重建荷人膀胱癌-SCID鼠模型的建立

目的：探讨建立稳定的荷人膀胱癌SCID 鼠人化复合模型的方法,为在人免疫重建荷人膀胱肿瘤SCID 鼠模型检测重组BCG 的免疫刺激和免疫保护中打下基础。方法：经SCID 鼠腹腔内注射人PBL、皮下接种RT4 膀胱癌细胞,于接种后4 周检测SCID 鼠体内人免疫细咆水平（IgG 和CD^3＋、CD^4＋、CD^8＋ T 细胞）及脾脏重量,观察皮下成瘤潜伏期及成瘤率。结果：模型组100％成瘤,病理类型为移行细胞癌;检测SCID 鼠血中人IgG 均一定水平存在,与对照组间差异有统计学意义（P〈0.01）;人CD^3＋、CD^4＋、CD^8＋T 细胞在鼠血及脾中均有表达,而对照组均未检出（P〈0.05）;4 周鼠脾重平均（178.9± 45.2）mg。较对照组（40.6± 14.8）mg 差异有统计学意义（P〈0.01）。结论：采用腹腔注射人PBL、皮下接种RT4膀胱癌细胞的方法可以有效地建立人化荷人膀胱癌SCID 鼠模型,较好地模拟人浸润性膀胱癌体内生物学特性,是膀胱癌免疫基因治疗的较理想模型。     

人免疫重建SCID小鼠的研究

４２只不渗漏ＳＣＩＤ小鼠分别腹腔注射经冷冻、复苏的胎肝或胎肝加胎胸腺细胞,每鼠２×１０７活细胞,建立人胎肝细胞ＳＣＩＤ小鼠模型Ⅰ和Ⅱ,研究人免疫系统。用人肝癌细胞（ＨＨＣＣ）免疫,ＳＣＩＤ鼠出现初始免疫答应,血清人ＩｇＧ平均滴度分别达到５１３．０±８４．２ｎｇ／ｍｌ和７１９．７±２０１．６ｎｇ／ｍｌ,ＩｇＧ峰值分别出现在免疫重建后１０～１２和１０～１４周,特异性抗ＨＨＣＣ抗体滴度分别达到１∶７０．４±３５．０５和１∶２９４．４±１６８．５２,免疫重建后７～８周龄,ＡＢＣ法免疫组化染色,免疫鼠模型肝、脾中可检出标记人的ＣＤ３＋、ＣＤ２０＋Ｔ和Ｂ淋巴细胞克隆和细胞岛。流式细胞仪检测了抗原免疫组和模型组外周血、脾脏、肝脏的人ＣＤ３＋、ＣＤ４＋、ＣＤ８＋、ＣＤ１９＋、ＣＤ２０＋标记的淋巴细胞数,其中标记ＣＤ２０＋淋巴细胞平均值外周血３．１２±３．０３％、脾脏１．４±０．２０％、肝脏２．３２±１．４９％。而无抗原免疫的模型组在肝脏仅有微量或检测不到人标记淋巴细胞。     

高原鼠兔红细胞免疫功能的研究

本文应用免疫花环试验法测定了封闭群中高原鼠兔红细胞Ｃ３ｂ受体和红细胞免疫复合物的花环率,并比较了不同年龄高原鼠兔红细胞的免疫功能。研究结果表明,高原鼠兔红细胞在自身免疫系统中具有重要的免疫功能;随年龄增长,其红细胞免疫功能逐渐减弱。与人、兔和大白鼠等动物相比,高原鼠兔红细胞免疫粘附活性高,因此适宜作红细胞免疫实验的动物模型。     

鼠伤寒沙门氏菌诱导昆明小鼠肠道感染模型的建立

目的:建立鼠伤寒沙门氏菌诱导昆明小鼠肠道感染模型。方法:先用5 mg/mL链霉素预处理2 d,提高小鼠对鼠伤寒沙门氏菌的敏感性,然后正常饲养1 d,攻毒前禁水禁食4 h,再分别以不同剂量灌胃攻毒2次,间隔24 h。观察小鼠临床症状,并通过组织病理切片、透射电镜和免疫组织化学的方法,分别观察小鼠肠道组织病理变化、小肠上皮细胞超微结构变化及肠道淋巴细胞增殖状况。结果:攻毒后昆明小鼠会出现昏睡、食欲不振、寒颤,甚至死亡的现象,解剖后发现小鼠肠道充血膨胀。组织病理切片显示小鼠肠粘膜受损,小肠绒毛肿胀,排列杂乱,炎性细胞浸润;透射电镜观察超微结构显示小肠上皮细胞线粒体空泡化,嵴和膜发生融合消失,粗面内质网发生扩张;免疫组织化学的方法显示肠道感染后,淋巴结肿大,T淋巴细胞大量增殖。结论:该模型对探索鼠伤寒沙门氏菌引发肠炎的发病机制、病理生理、免疫等方面作用具有重要意义,并为特异性卵黄抗体被动免疫保护效果的后续评价奠定基础。     

评价艾滋病治疗药物鼠模型的研究进展

理想的动物模型,特别是小动物模型,对于发展和评价艾滋病的治疗药物是非常重要的。近年来,有关艾滋病动物模型的研究取得了一些进展。本文仅就评价艾滋病治疗药物中常用的鼠模型研究的进展作一综述。大动物模型研究的进展请参考有关文献［‘－’］。l鼠白血病病毒模型鼠白血病病毒（Murineleukemiavirus,MuLV）属于反转录病毒科。将它接种于敏感鼠后,可以导致牌和淋巴结增大,免疫抑制和机会性感染等症状。有人称其为鼠艾滋病（MurineAcquiredImmunodeficiencySyndrom,MAIDS）14］。近年来MuLV／MAIDS模型系统已经被应用于发…     

艾滋病免疫重建治疗策略的研究进展

获得性免疫缺陷综合征( AIDS) 是由人类免疫缺陷病毒( HIV) 侵犯并破坏机体免疫系统引起的疾病。20 世纪90 年代前, 人们普遍认为免疫系统的破坏是不可逆转的, 但自高效抗反转录病毒疗法出现以后, 发现受损的免疫功能可以获得重建并成为研究的热点。免疫功能重建是指患者受损的免疫功能恢复到正常水平或接近正常水平, 从而降低机会性感染和肿瘤的发生, 降低发病率和病死率。随着各项技术的发展和改进, AIDS 的发病机制和免疫重建机制得到进一步研究, 改善调节患者CD4⁺细胞的数量和免疫功能及细胞毒性T细胞( CTL) 的杀伤功能是最重要的保护性免疫机制。目前一些治疗新策略和手段, 如细胞因子治疗、HIV 特异性疫苗的研制已进入试验或临床阶段, 以期进一步改善患者的免疫功能。     

T、B淋巴细胞联合免疫缺陷615-SCID导入近交系小鼠的培育及其一般生物学特性的研究

目的　建立T、B淋巴细胞联合免疫缺陷同源导入近交系 6 15 SCID小鼠。方法　利用经典遗传学的杂交 互交方法 ,将SCID小鼠携带的T、B淋巴细胞联合免疫缺陷基因 (scid基因 ) ,导入我国自己培育的 6 15近交系小鼠中。育种过程中采用白细胞计数分类及ELISA检测Ig含量方法 ,筛选每个M循环中的纯合子 ;再用蛋白质和同工酶电泳方法 ,分析纯合子位于 11个染色体上的 2 5个生化标记基因位点。结果　第 7个M循环中 ,所得纯合子与 6 15小鼠的 2 5个生化标记基因位点完全一致 ,表明M7循环的纯合子具有 6 15小鼠的全部标记基因。结论　M6、M7循环的纯合子小鼠表达scid基因 ,具有放射敏感性和T、B淋巴细胞联合缺陷的特征 ,且T细胞比例显著低于亲代SCID小鼠     

Cox A16型手足口病BALB/c乳鼠模型的建立

目的 建立3日龄BALB/c乳鼠CoxA16型手足口病动物模型,并进行免疫、病理学研究.方法 3日龄BALB/c乳鼠腹腔注射感染Cox A16型毒株,测定其50％致死剂量(LD50),观察其14 d内存活天数、临床症状打分.采用3LD50病毒攻毒,并观察其14 d内感染程度、体重变化、死亡数,计算平均存活天数、死亡率,...     

大鼠原位膀胱癌模型的建立与CT诊断价值

目的研究N-甲基亚硝基脲诱导大鼠原位膀胱癌模型的构建过程以及计算机断层扫描对大鼠原位膀胱癌的诊断价值。方法50只SD大鼠随机分为两组,对照组A组15只,实验组B组35只。B组大鼠经尿道膀胱内灌注MNU每两周一次,每次2 mg,共4次。A组大鼠用生理盐水以同样的方法灌注。于第14周末对两组大鼠进行膀胱CT扫描诊断,并且处死后取膀胱组织行病理学观察。结果B组28只大鼠CT扫描膀胱均见明显异常,表现为局部肿块突起或膀胱壁不规则增厚、密度不均,病理诊断均为膀胱癌。A组13只大鼠经CT扫描未发现膀胱肿瘤,病理检查未见肿瘤组织。结论MNU可以诱导大鼠原位膀胱癌模型的建立。CT扫描可作为大鼠原位膀胱癌诊断的可靠方法,并能为肿瘤的化疗或放疗等后续实验提供更好的大鼠模型。     

滴鼻途径建立鼠结核病模型的探讨

目的 探讨滴鼻途径建立BALB/C小鼠结核分枝杆菌感染的模型的可行性.方法 人型Mtb H_(37)Rv标准株经腹腔接种小鼠,取小鼠腹腔冲洗液100 μl接种改良罗-琴氏培养基.刮取上述培养基上生长4周已恢复毒力的结核分枝杆菌H_(37)Rv标准株,加0.05%Tween80生理盐水磨菌制成悬液,菌落计数,计数后稀释悬液为5×10~3 CFU/50 μl、5×10~4 CFU/50 μl、5×10~5 CFU/50 μl及50 μl生理盐水分别感染4组Balb/c小鼠,制作结核分枝杆菌感染模型.结果 滴鼻感染小鼠4周后,所有小鼠肺、脾组织中均可见抗酸阳性菌,在感染小鼠肺、脾组织匀浆均培养出Mtb.肺组织病理改变明显,正常肺泡结构消失,以充血实变、淋巴细胞、巨噬细胞浸润为主,增生性改变不明显,未见明显的组织坏死.脾组织病理改变主要是巨噬细胞和淋巴细胞增生.结论 滴鼻感染途径建立小鼠结核病模型简便、可行,为进一步研究开发重组BCG疫苗对鼠结核病的防治打下良好的基础. 0~4 CFU/50 μl、5×10~5 CFU/50 μl及50 μl生理盐水分别感染4组Balb/c小鼠,制作结核分枝杆菌感染模型.结果 滴鼻感染小鼠 周后,所有小鼠肺、脾组织中均可见抗酸阳性菌,在感染小鼠肺、脾组织匀浆均培养出Mtb.肺组织病理改变明显,正常肺泡结构消失,以充血实变、淋巴细胞、巨噬细胞浸润为主,增生性改变不明显,未见明显的组织坏死.脾组织病理改变主要是巨噬细胞和淋巴细胞增生.结论 滴鼻感染途径建立小鼠结核病模型简便、可行,为进一步研究开发重组BCG疫苗对鼠结核病的防治打下良好的基础. 0~4 CFU/50 μl、5×10~5 CFU/50 μl及50 μl生理盐水分别感染4组Balb/c     

人子宫内膜异位症裸鼠模型的建立

目的建立人子宫内膜异位症裸鼠模型。方法通过开腹手术方法将人子宫内膜组织块种植于裸鼠盆腹腔,观察其生长情况,并进行病理检查。结果成功建立人子宫内膜异位症裸鼠模型,种植病灶能保持原有内膜组织的形态结构,并可见血管生成明显。结论子宫内膜异位症裸鼠模型的建立是子宫内膜异位症早期临床研究的理想模型。     

胰腺癌裸鼠皮下异种移植动物模型建立研究

目的:用人体胰腺癌细胞株,建立小鼠胰腺癌细胞株(pGHAM-1)移植性胰腺癌模型,并研究其生物学特性。方法:将pGHAM-1细胞培养后配成1×107/ml,取0.2mL接种于小鼠皮下。于接种后20、30、40天观察肿瘤的生长、转移及腹水量。接种40天后处死动物,解剖取出移植瘤,用游标卡尺测量肿瘤大小,再进行HE染色的组织病理学检查,免疫组织化学检测血管内皮细胞生长因子(VEGF)及肿瘤转移相关蛋白(nm23-H1)的表达。结果:分别于20、30、40天测量肿瘤体积为84.1±21.9 mm3,413.7±208.4 mm3,2187.3±1882.8 mm3,后者与10 d前比较差异均具有统计学意义(P<0.01)。HE染色结果显示肿瘤组织呈条索状或小梁状排列,肿瘤组织与正常组织交界处有少量淋巴细胞浸润,肿瘤组织中血管生成罕见。免疫组织结果显示VEGF和nm23-H1蛋白在肿瘤组织中均呈阴性表达。结论:异位裸鼠人胰腺癌移植瘤模型易复制,时间短,成功率高,为胰腺癌体内研究提供了理想的动物模型。     

大鼠代膀胱模型的建立

目的建立用于肠黏膜处理研究的大鼠代膀胱模型。方法雌性SD大鼠2组,实验组以4cm末段小肠重新构建大鼠膀胱,对照组行假手术。术后1月测量代膀胱容量,代膀胱内黏液残留量,观察代膀胱黏膜对水、电解质的吸收、分泌功能等。结果术后1月,实验组大鼠膀胱容量增加（P〈0．01）;黏液残留量：0．907±0．193g;代膀胱黏膜对水、K^＋、NH4^＋表现为吸收,对Na^＋、Cl^-、HCO3^-表现为分泌。结论此模型适用于肠黏膜处理的研究。     

免疫性血小板减少性紫癜动物模型建立方法与应用评价

免疫性血小板减少性紫癜(immune thrombocytopenic purpura,ITP)是血液系统自身免疫性疾病,临床以皮肤、黏膜自发性出血为主要症状。鉴于ITP发病机理目前尚不清晰,因此,探讨人类ITP发病相近或相似的动物模型有助于对ITP发病机制的认识与治疗效果的评估。但就目前状况分析,被动型与主动型的ITP造模方法虽对研究ITP发病机制与药理学研究提供了研究工具,但也存在一些尚待解决的实际问题。因此,系统回顾ITP动物模型复制方法,并给予适当评价,有助于发现、应用并完善现有的动物模型,也能更好的探索新的ITP动物模型来研究发病过程与药物治疗的效应机制。     

应激致免疫功能降低动物模型的建立

目的为探讨应激对免疫系统损伤的作用机制,建立了两种不同的应激导致机体免疫功能降低的动物模型。方法将小鼠分为三组,束缚应激组、热应激组和正常对照组,分别用束缚和高温刺激使小鼠处于应激状态,应激结束后将各组小鼠均分为两部分,一部分感染细菌,比较两种应激状态下小鼠与正常小鼠的死亡率,另一部分摘取脾脏,计算脾脏重量指数,制作脾脏病理切片,观察其组织病理学变化。结果注射大肠埃希菌后束缚应激组和热应激组小鼠死亡率显著高于正常对照组小鼠(P<0.005),束缚应激组和热应激组小鼠死亡率无明显差异(P>0.05)。束缚应激组小鼠和热应激组小鼠脾脏重量指数均较正常对照组明显降低(P<0.05),组织病理学观察显示束缚应激组和热应激组小鼠脾脏切片病理学改变相似,白髓比例减小,脾小体有不同程度的缩小、分布及结构不规则。结论本实验建立的应激导致小鼠免疫功能降低的动物模型,其免疫功能降低与脾脏变化间存在构效关系,与应激的类型关系不大。     

通过酒精饲养小鼠建立小鼠酒精模型

研究通过酒精饲养小鼠建立小鼠酒精成瘾模型的方法。使用6周龄SPF级Balb/c雄性小鼠15只,随机分为3组(n=5),即灌胃和酒水喂养组(A)、灌胃组和水喂养组(B)、对照组(C)。3组固体饲料正常给予,A、B两组每日灌胃11%酒水200μL,A组酒水溶液自由摄取并作为唯一饮水来源,B组水自由摄取,C组不做处理。饲养8周后进行24 h酒精戒断,并进行矿场实验,强迫游泳实验。处死小鼠取肝脏、肾脏和结肠制作石蜡切片并观察。造模过程中3组小鼠进食、饮水、体重、内脏重量出现了不同程度的变化。行为学结果显示,矿场实验中A、B两组小鼠戒断酒精后相对对照组小鼠焦虑水平明显升高;强迫游泳实验中,A、B两组相对C组绝对不动时间显著加长,表现出精神抑郁。显微镜观察小鼠内脏石蜡切片,A组小鼠肝脏切片明显出现肝细胞排列紊乱,肾脏中肾小球上皮细胞轻度萎缩,空泡变性,肾小管无明显病变,结肠石蜡切片肠绒毛出现破损,肠绒毛顶端完整性降低。B组肝、肾、结肠石蜡切片与对照组相比无明显变化。     

大鼠动脉粥样硬化动物模型的建立和评价

目的利用免疫损伤和高脂喂养结合的方法建立大鼠动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）动物模型。方法5周龄Wistar大鼠腹腔注射卵清白蛋白和尾静脉注射牛血清白蛋白佐以灌喂维生素D3,高脂饲料喂养大鼠,FeSO4加入到饮水中。检测大鼠不同时间的血脂水平、血液生化指标和病理变化。结果（1）AS模型组的TC、HDL、LDL显著高于正常对照组（6.1±2.52比1.3±0.10;2.46±1.01比1.02±0.13;3.76±1.67比0.52±0.063;P〈0.05）。（2）模型组的C反应蛋白（CRP）、心肌激酶（CK）、心肌激酶同工酶（CK-Mb）显著高于正常对照组（4.99±2.26比0.183±0.160;996.3±82.8比293.8±167.1;669.5±128.1比177.5±86.5;P〈0.05）。（3）采用HE染色发现模型组大鼠的主动脉出现斑块的沉积,而正常大鼠无病变的产生。结论该方法能够诱导大鼠产生高血脂症状,随着时间的延长心肌发生损伤,同时出现炎症症状,并在动脉壁上形成斑块。     

小鼠结直肠自发肿瘤模型的建立

目的:建立小鼠结直肠自发肿瘤模型。方法:用雄性Ap~(Mn/ )基因突变小鼠与雌性BubR1~( /-)基因敲除小鼠交配。得到的子代小鼠,按基因型分为Wild Type,BubR1~( /-),Apc(Mn/ ),和BubR~(1 /-)Apc(Mn/ 4)组,每组7只,观察各组肠组织肿瘤数目、大小和位置,行HE染色后观察病理学改变,并用免疫组化染色法研究各组结直肠β-catenin的表达。结果:①BubR1~( /-)Apc(Mn/ )组小鼠结直肠肿瘤的发病率显著增加,较Apc(Mn/ )组有显著差异(P=0．008)。②BubR1或Apc单独缺失组小鼠结直肠中β-catenin蛋白除在细胞膜表达外,在细胞质也有弱阳性表达;而BubR1~( /-)Apc(Mn/ )组小鼠结直肠β-catenin的表达水平明显增高,且多为细胞质表达和(或)膜浆共表达,部分合并细胞核表达。结论建立小鼠结直肠自发肿瘤模型对于筛选抗肿瘤药物和研究肿瘤发生机制具一定的应用价值。     

两种人乳腺癌裸鼠移植模型的建立

目的建立简便的人乳腺癌裸鼠移植模型,并探讨其部分生物学特性。方法采用雌激素受体阴性的MDA-MB-231和SK-BR-3人乳腺癌细胞株,分别接种于10只裸鼠左侧腋窝皮下,移植细胞总数为1×107/只。观察肿块生长情况,第42天处死荷瘤鼠,切除肿块作病理切片。结果 MDA-MB-231接种后第5d在接种部位可见结节,成瘤率为90%（9/10）,接种42 d肿瘤体积426.6±333.8,瘤重0.417±0.276,病理学检查为浸润性导管癌;SK-BR-3接种后第11天在接种部位可见结节,成瘤率为80%（8/10）,接种42 d肿瘤体积357.5±246,瘤重0.325±0.167,病理学检查为浸润性导管癌。结论该方法建立的人乳腺癌裸鼠移植模型,皮下移植方法简单,易于操作,成功率较高,肿瘤可部分保持人乳腺癌生物学特性,为研究人乳腺癌提供了重要工具。