桦褐孔菌三萜化合物提取工艺的优选

为了提高桦褐孔菌三萜化合物的产量,对其三萜化合物的提取工艺进行了初步优选。试验以桦褐孔菌发酵菌丝体为材料,齐墩果酸为标准品,用香草醛比色法测桦褐孔菌三萜化合物含量。通过单因素实验考察了不同提取剂、提取剂用量、提取温度、提取时间对桦褐孔菌三萜化合物提取的影响。结果表明,提取的最佳工艺为：以异丙醇为提取溶剂,用量为7倍,最佳提取温度为80℃,提取时间2h,在此条件下三萜化合物占菌丝体干质量的9．03％。该工艺的三萜桦褐物的提取率高,可用于桦褐孔菌中三萜化合物的提取。     

牛樟芝固态发酵菌丝体三萜及多糖提取工艺优化研究

为研究牛樟芝固态发酵菌丝体中三萜和多糖的最佳提取工艺，选取浸提时间、料液比和提取温度3个因素，分别设置3个水平，以三萜和多糖得率为指标，并采用正交试验法进行分析。结果表明，三萜的最佳提取工艺条件为：浸提时间3 h、料液比1∶30 (g·mL-1)、温度70 ℃，在此条件下，得率为3.43%；多糖的最佳提取工艺为：浸提时间2 h、料液比1∶20 (g·mL-1)、温度95 ℃，在此条件下得率为4.71%。研究结果为牛樟芝固态发酵菌丝体中三萜和多糖的提取工艺提供了参考。     

紫芝中三萜类化学成分研究北大核心CSCD

采用色谱法从紫芝(Ganoderma sinense) 95%乙醇溶液中分离得到7个三萜类化合物,利用波谱学方法鉴定了它们的结构,分别鉴定为紫芝烯酸C(1)、赤芝酸A(2)、赤芝酮B(3)、灵芝烯酸B(4)、灵芝烯酸E(5)、灵芝酸H(6)和灵芝酸I (7),其中化合物1为新化合物。采用MTT法检测不同浓度化合物1对DU145细胞株、CEM细胞株及Hela细胞株细胞活力的影响,其半数抑制浓度为28. 8±1. 5μMol/L(Hela细胞株),说明化合物1对Hela细胞具有抑制效果。     

紫菀中三萜及甾体化合物的研究

从紫菀(Aster tataricusL.f.)的根及根茎中分离得到11个化合物,经IR、NMR、MS、X-ray单晶衍射等波谱方法分别鉴定为紫菀酮(shionone)(1)、木栓酮(friedelin)(2)、表木栓醇(epi-friedelanol)(3)、蒲公英萜醇(taraxerol)(4)、α-菠甾醇(-αspinasterol)(5)、二十二碳酸(decosanoic acid)(6)、豆甾醇(stigmasterol)(7)、β-谷甾醇(-βsitosterol)(8)、α-菠甾醇--βD-葡萄糖苷(-αspinasterol--βD-glucoside)(9)、豆甾醇--βD-葡萄糖苷(stigmasterol--βD-glucoside)(10)、胡萝卜苷(daucosterol)(11)。化合物6为首次从该属植物中获得,化合物5,9,10为首次从该植物中分得。活性实验研究结果表明紫菀酮(1),表木栓醇(3)可显著抑制氨水所致小鼠咳嗽。     

格木中新的三萜化合物

对豆科格木属植物格木(Erythrophleum fordii Oliv.)树皮的乙醇提取物进行药理筛选,结果表明,对KB(人口腔上皮癌)、A2780(人卵巢癌)细胞具有较强的选择性抑制作用.从该醇提物的乙酸乙酯萃取部分分得一个新化合物和4个已知化合物,经光谱鉴定为20S 24S-环氧-23S,25-二羟基达玛烷-3-酮(1)、20S,25-环氧-24R-羟基达玛烷-3-酮(2)、20S,24S-环氧-达玛烷-3β,25-二醇(3)、白桦酸(4)和乙酰莫绕酸(5).     

云木香根中一新的巴卡林烷型三萜

从云木香(Saussurea lappa C.B.Clarke)根中分得一新的巴卡林烷型三萜化合物3β-acetoxy-9(11)-baccharene(1)和一已知三萜化合物α-amyrin(2)。它们的结构通过波谱方法得到鉴定。     

甘草属植物中三萜化合物的研究进展（综述）

本文综述了甘草属植物中三萜化合物近年来的药理活性研究,化学结构和结构鉴定中的波谱特征。     

紫芝酸性三萜类化合物体外抑癌和抑菌作用的研究

采用噻唑蓝比色(MTT)法研究紫芝酸性三萜对几种癌细胞体外增殖的影响,并用管碟法检测了紫芝胞内酸性三萜对几种细菌和霉菌的体外抑菌作用。结果表明,紫芝胞内酸性三萜和胞外酸性三萜在250μg/mL时,对人肝癌细胞BEL7402和人乳腺癌细胞MCF-7均有显著抑制作用(P<0.05),但对人胃癌细胞SGC-7901没有显著抑制作用(P>0.05)。BEL7402细胞的生长曲线试验表明,胞内酸性三萜组的细胞受到显著抑制,未出现指数增长期,且BEL7402细胞培养3d后,对照组细胞数目多、均匀,而胞内酸性三萜组的细胞数目明显减少,且细胞变小。抑菌试验结果表明,胞内酸性三萜在40mg/mL时,对大肠杆菌Escherichia coli和金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus的生长均具有显著抑制作用(P<0.01),对枯草芽孢杆菌Bacillus subtitis和青霉的Penicillium chrysogenum抑制作用较弱;而在此浓度下对黑曲霉Aspergillus niger没有抑制作用。该样品对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、黑曲霉和青霉的MIC分别为20mg/mL、20mg/mL、40mg/mL、80mg/mL和40mg/mL。此外,该酸性三萜的抑菌成分在60℃下(处理2h)较稳定,但在80℃以上,热稳定性较差,活性降低。     

藜蒿黄酮提取方法研究

通过对乙醇提取藜蒿黄酮各影响因素的研究,用正交实验探讨较好的提取方案。实验表明：15倍于物料的70％的乙醇在50℃以上温度下提取6h为最佳工艺。     

沙棘中三萜酸物质的提取及含量测定

沙棘是一种含有丰富营养物质和生物活性成分的植物。为了进一步提高新疆阿合奇县沙棘中三萜酸物质的得率,利用单因素实验与正交试验优化沙棘中三萜酸物质的提取工艺,并分析比较沙棘不同部位的三萜酸物质含量差异。通过单因素实验确定了影响萜类物质得率的重要因素为乙醇浓度、料液比。以总三萜酸的得率为综合考察指标,采用正交试验确定了沙棘三萜酸的最适提取工艺条件：按照料液比1∶15(g/mL)加入体积分数80%的乙醇,先超声1 h,再将料液进行60℃水浴回流1.5 h。在此条件下,沙棘叶中三萜酸的得率达到2.332 mg/g,其中科罗索酸为0.332 mg/g、齐墩果酸为0.875 mg/g,熊果酸为1.125 mg/g。沙棘不同部位的三萜酸总含量(从大到小)顺序为沙棘叶、沙棘籽、沙棘果。     

紫芝的化学成分研究进展

通过查阅、整理和分析国内外文献对紫芝的化学成分进行了综述。研究表明从紫芝中已经发现18个多糖类化合物、39个三萜类化合物、14个甾体类化合物、9种生物碱及苷类、80余种脂肪族类化合物、1个芳香族类化合物、3个杂环族化合物、1个环肽类化合物及多种酶类等蛋白质成分。本文为进一步研究紫芝提供了化学成分方面的基础资料。     

过量表达OsUgp2基因提高紫芝多糖含量

尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶（UDP-glucose pyrophosphorylase,UGPase）是多糖生物合成过程中重要的酶,水稻基因组中存在两个UGPase同源基因分别命名为OsUgp1和OsUgp2。构建了由构巢曲霉3-磷酸甘油醛脱氢酶基因启动子驱动OsUgp2表达的真菌过量表达载体,并通过农杆菌介导法将OsUgp2基因转入紫芝中,获得了潮霉素抗性的转化菌株。PCR和Southern杂交结果显示OsUgp2基因成功整合到受体紫芝基因组中。半定量RT-PCR检测结果显示外源基因OsUgp2在紫芝转     

紫芝免疫调节蛋白基因的原核表达与功能分析

以紫芝(Ganodermasinense)真菌免疫调节蛋白基因(FIP-gsi)为材料,采用原核表达技术进行蛋白表达,利用基质辅助激光解吸附质谱技术(MALDI-MS)鉴定表达的蛋白,通过体外诱导细胞因子表达技术分析细胞因子基因的表达模式,为真菌免疫调节蛋白生物活性及作用机制的研究奠定基础。结果表明:紫芝真菌免疫调节蛋白基因(FIP-gsi)可在原核细胞中表达,表达出的重组蛋白FIP-gsi约占大肠杆菌总蛋白的46.1%;基质辅助激光解吸附质谱技术鉴定显示表达的蛋白为FIP-gsi,与灵芝(G.lucidum)真菌免疫调节蛋白LZ-8有88.6%的一致性;重组蛋白FIP-gsi能够诱导细胞因子IL(interleukin)-2、IL-4、IFN(interferon)-γ,TNF(tumor necrosis factor)-α,LT(lymphotoxin)及IL-2 R(IL-2 receptor)表达,并且呈现一定的剂量关系。     

Heterologous expression of the immunomodulatory protein gene from Ganoderma sinense in the basidiomycete Coprinopsis cinerea

Aims: FIP‐gsi, a fungal immunomodulatory protein found in Ganoderma sinense, has antitumour, anti‐allergy and immunomodulatory activities and is regulated by the fip‐gsi gene. In this study, we aimed to express the fip‐gsi gene from G. sinense in Coprinopsis cinerea to increase yield of FIPs‐gsi. Methods and Results: A fungal expression vector pBfip‐gsi containing the gpd promoter from Agaricus bisporus and the fip‐gsi gene from the G. sinense was constructed and transformed into C. cinerea. PCR and Southern blotting analysis verified the successful integration of the exogenous gene fip‐gsi into the genome of C. cinerea. RT‐PCR and Northern blotting analysis confirmed that the fip‐gsi gene was transcribed in C. cinerea. The yield of the FIP‐gsi protein reached 314 mg kg^?1 fresh mycelia. The molecular weight of the FIP‐gsi was 13 kDa, and the FIP‐gsi was capable of hemagglutinating mouse red blood cells, but no such activity was observed towards human red blood cells in vitro. Conclusions: The fip‐gsi from G. sinense has been successfully translated in C. cinerea, and the yield of bioactive FIP‐gsi protein was high. Significance and Impact of the Study: This is the first report using the C. cinerea for the heterologous expression of FIP‐gsi protein and it might supply a basis for large‐scale production of the protein.     

药用蕈菌紫芝液体培养的生长特征分析

使用专门设计的ALR ff蕈菌液体培养反应器 ,研究了有关紫芝液体培养过程中菌丝生长的特征。结果表明 ,液体培养时紫芝菌丝生长对温度有较宽的适应范围 2 5℃～ 3 5℃ ,但生长比速率相差很大。通气量由 0 93vvm提高到 1 6 4vvm时 ,菌丝生长比速率明显地增加 ,最大值为 0 0 4 4 4 (h- 1) ;当通气量进一步提高到 2 5 0vvm时 ,生长比速率反而下降。与低糖浓度比较 ,较高糖浓度 (2 80g 1 0 0mL)可以使生长迟滞期缩短 ;培养后期菌丝缠绕成浓密颗粒 ,较高糖浓度可以促进生长。在整个培养过程中 ,糖浓度较低时葡萄糖转化成菌体的生长效率明显高于较高葡萄糖浓度的效率。碳源限制生长的连续培养研究结果 ,进一步反映了菌丝不同生长活性使菌丝物具有不同形态结构。菌体量、限制生长底物、菌体生成率的三者关系与细菌有明显的差异。并且 ,在 0 0 1 0～ 0 2 2 0 (h- 1)稀释率范围内菌丝生长符合Contois方程     

紫外分光光度法测定破壁灵芝孢子粉提取物总三萜含量

确定一种破壁灵芝孢子粉提取物总三萜紫外分光光度测定方法。采用紫外分光光度法,以熊果酸为对照品测定样品。溶液在波长548 nm处具有最大吸光度,熊果酸含量在14~54μg范围内呈良好的线性关系,r为0.999 4,平均回收率为92.94%。提示使用上述方法绘制标准曲线可计算出样品中三萜类化合物的含量。测定方法操作简便、检验快速、稳定性高、重复性好,可以用于灵芝孢子粉产品的质量控制。     

紫芝基因组rDNA序列特征及ITS2二级结构比较

紫芝栽培品种‘紫芝S2’(武芝2号)的ITS序列与NCBI数据库中5个紫芝菌株/分离株相似度高达99.79%-100%,在系统进化树上相聚成一类。本研究预测‘紫芝S2’基因组与参考基因组中的rRNA基因簇,分析rDNA结构及各构件序列间的多态性。从高质量‘紫芝S2’基因组中挖掘得到完整rDNA,序列全长40.377 kb,由4组串联重复的(18S、5.8S、28S、5S) rRNA基因簇组成,并含有完整的基因内间隔区(ITS1、ITS2)和基因间间隔区(IGS1、IGS2)。在紫芝S2的rDNA中,高度保守的28S rRNA基因间出现3个SNP和2个插入(1 bp,10 bp)位点;虽然第4条ITS2中有1个SNP位点,但紫芝S2的4条ITS2在二级结构上的分子形态高度一致,与ITS2数据库中其他紫芝菌株仅存在螺旋区间夹角的微小差异。由‘紫芝S2’基因组rDNA的ITS2生成的DNA条形码与二维码,可以作为该栽培品种鉴定与同源物种其他菌株鉴别的分子标记。     

正交-满意度函数优化灵芝多糖及三萜共提取条件及其清除自由基活性

灵芝Ganoderma lingzhi是我国的一种著名珍稀药用真菌,多糖及三萜类化合物是其主要活性成分提。取乙时醇间水4h溶和液料为液提比取1:剂40,,以多灵糖芝和多三糖萜及的三提萜取提率取分率别为达响到应1值.13,=%正?和交k0-.4满6意%。度优函化数条优件化下乙提醇取含的量多、糖提和取三温萜,前者DPPH自由基清除活性高于热水法提取多糖,后者与乙醇浸提法提取三萜有相近的DPPH自由基清除活性。     

New Triterpenoids from the Fruiting Bodies of Ganoderma lucidum and Their Bioactivities

Phytochemical investigation of the AcOEt extract of G. Lucidum has led to the isolation of two new triterpenoids, 1 and 2 , together with five known ones, 3 – 7 . The structures of the new compounds were identified as 12β‐acetoxy‐3β,7β‐dihydroxy‐11,15,23‐trioxolanost‐8‐en‐26‐oic acid butyl ester ( 1 ) and 12β‐acetoxy‐3,7,11,15,23‐pentaoxolanost‐8‐en‐26‐oic acid butyl ester ( 2 ) on the basis of detailed spectroscopic analysis (mass spectrometry, and 1D‐ and 2D‐NMR experiments). The antimicrobial activities of 1 and 2 were also evaluated.