糖尿病大鼠心肌纤维化与心肌AGEs/RAGE水平的变化

目的通过构建Ⅱ型糖尿病大鼠模型,研究该模型心肌纤维化和心肌AGEs/RAGE水平的变化情况。方法雄性SD大鼠高脂饲料饲喂6周后,过夜空腹12 h,腹腔注射小剂量链脲佐菌素(STZ,30 mg/kg)。注射3、7 d后检测大鼠随机血糖浓度,两次随机血糖≥16.7 mmol/L为Ⅱ型糖尿病大鼠建模成功。在建模成功后第4、8和12周,检测大鼠血FBG、insulin和左心室AGEs、Hyp含量及Masson染色、RAGE表达的变化。结果造模成功后第4、8和12周,糖尿病对照组(4D,8D,12D)血FBG水平均较同周次正常对照组(4C,8C,12C)显著升高,体重显著下降;造模成功后第12周时,糖尿病对照组(12D)大鼠Insulin显著高于同周次正常对照组(12C)和4周时糖尿病对照组(4D);从造模成功后第8周开始,糖尿病对照组(8D,12D)心肌Hyp、CVF、AGEs和RAGE与正常对照组(8C,12C)相比均显著升高;2型糖尿病大鼠心肌AGEs/RAGE水平与CVF呈显著正相关。结论高脂饮食饲喂加腹腔注射小剂量STZ,能够成功复制Ⅱ型糖尿病大鼠模型。随着病程的延长,心肌纤维化和心肌AGEs含量、RAGE蛋白表达均呈逐渐上升趋势,且Ⅱ型糖尿病大鼠心肌AGEs/RAGE水平与心肌纤维化存在有正相关关系。     

基质金属蛋白酶及其抑制因子与扩张型心肌病的关系

目的研究基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP-1)在扩张型心肌病(DCM)中的变化,探讨血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)对心肌纤维化的影响及其调控机制。方法雄性SD大鼠腹腔注射阿霉素(2 mg/kg,每周1次,连续8周)建立扩张型心肌病模型。将达到DCM诊断标准的大鼠分3组:①H组(卡托普利高剂量干预组,50mg/Kg.d);②L组(卡托普利低剂量干预组,25mg/Kg.d);③C组(DCM对照组)。HE染色和苦味酸天狼星红染色观察各组大鼠心肌细胞和间质胶原变化,RT-PCR法检测心肌MMP-2及TIMP-1的表达。结果与正常对照组比较,DCM组心肌细胞坏死明显、胶原纤维和胶原容积分数增加(P<0.05);而H组和L组的胶原纤维较C组减少(P<0.05)。DCM组心肌MMP-2 mRNA表达较正常对照组显著增加(P<0.01),H组和L组较C组降低(P<0.05)。DCM组TIMP-1mRNA的表达较正常对照组降低(P<0.05),H组较C组有所增加(P<0.05)。结论 MMP-2及TIMP-1与心肌细胞外基质的重塑密切相关,ACEI有降解MMP-2的作用,可以减轻心肌间质的...     

麝香保心丸对一次性力竭运动大鼠心肌损伤标记物和C反应蛋白的影响

目的探讨麝香保心丸对一次性力竭运动大鼠心肌损伤标记物和C反应蛋白的影响。方法选择雄性Wistar大鼠52只,随机分成实验组和对照组,每组26只。两组大鼠每天自由进食饮水相同,实验组大鼠每天麝香保心丸2粒(每粒22.5 mg)分2次灌胃,共两周。两组均接受力竭游泳运动,制成力竭运动动物模型,分别测定和比较两组大鼠血清和心肌组织肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白T(Tn T)、B型脑钠肽(BNP)和C反应蛋白(CRP)水平。结果大鼠平均力竭运动游泳时间实验组较对照组明显延长(P0.01)。实验组血清和心肌组织CK、CK-MB、Tn T、BNP和CRP水平均明显低于对照组(P0.05)。结论麝香保心丸可显著降低力竭运动大鼠血清和心肌中CK、CK-MB、Tn T、BNP和CRP水平,能够减轻力竭运动后心肌损伤。     

不同剂量链脲佐菌素腹腔注射制备大鼠糖尿病心肌病模型的病理学观察

建立糖尿病性心肌病（DCM）大鼠模型,观察不同剂量链脲佐菌素（STZ）单次腹腔注射后大鼠心肌和胰腺的病理学变化。用STZ 50 mg/kg、55 mg/kg、60 mg/kg 3种剂量单次腹腔注射,制备糖尿病大鼠模型;以柠檬酸三钠-柠檬酸缓冲液腹腔注射,作为对照。72 h后,测空腹血糖及做口服葡萄糖耐量实验（OGTT）;3周后,HE染色观察各组大鼠胰腺和心肌形态学变化,Masson三色染色观察心肌纤维化改变。OGTT和空腹血糖显示3组存活大鼠糖尿病均成模;3周末,50 mg/kg和55 mg/kg剂量死亡率为25%;60 mg/kg剂量高,达到75%;HE染色显示55 mg/kg剂量组大鼠胰岛明显萎缩,轮廓不清晰,胰岛细胞数量少,心肌细胞肥大、排列紊乱,细胞间隙增大,并有炎症细胞浸润;50 mg/kg组胰岛和心肌也有变化,但无55 mg/kg组明显。心肌Masson染色显示55 mg/kg组心肌内胶原组织明显增多,排列紊乱,分布不均。55 mg/kg剂量的STZ单次注射大鼠腹腔,造模3周可以建立较明显的DCM模型,可为DCM的组织病理学和实验研究提供一个较好的动物模型。     

逍遥散对CUMS模型大鼠行为学及脑内单胺类神经递质的影响

目的:观察逍遥散对慢性温和不可预知应激(CUMS)模型大鼠的行为学及脑内单胺类神经递质含量的影响。方法:应用慢性温和不可预知应激程序对大鼠进行为期11周的造模,造模后3周,分别采用逍遥散(19.5g/kg、25.0g/kg)和丙咪嗪(15.0mg/kg)对模型大鼠进行为期8周的治疗。实验进程中,定期测定大鼠体重、糖水消耗量;应用开场实验测定大鼠爬行格子数和站立次数;造模、治疗结束后处死大鼠,解剖分离大鼠皮层和海马部位,采用荧光分光光度法测定5-HLAA、5-HT、DA和NE含量。结果:与正常对照组比较。大鼠造模后3周糖水消耗量、爬行格子数和站立次数均明显减少(P<0.01);与模型对照组比较,逍遥散19.5、25.0g/kg连续给药2周能显著增加糖水消耗量,但给药4周、7周对糖水消耗量影响不明显;与模型对照组比较,逍遥散25.0g/kg连续给药7周,对大鼠体重、爬行格子数和站立次数表现出提高趋势(P>0.05),逍遥散25.0g/kg连续给药8周,能明显提高模型大鼠皮层部位5-HT含量及海马部位5-HIAA含量(P<0.05,P<0.01)。结论:逍遥散对CUMS抑郁模型大鼠表现出抗抑郁作用,作用机制与影响脑内单胺类神经递质5-HT活性有关。     

环磷酰胺对大鼠神经上皮细胞向神经元方向分化的影响

目的研究环磷酰胺对大鼠神经上皮细胞向神经元方向分化的影响,进一步探讨其致畸作用的分子机制,为预防人类NTDs的发生提供理论依据。方法将孕鼠随机分实验组和对照组,实验组在妊娠第13天上午8-9时腹腔注射环磷酰胺(15mg/kg体重),对照组注射等量生理盐水。分别于给药后4、8、12、24、48h处死孕鼠,剖腹取出胎鼠,于10%中性福尔马林中固定,常规石蜡包埋、连续切片。应用免疫组织化学和免疫荧光技术检测β-tubulin和NeuN在NTDs发生中的表达变化。结果(1)β-tubulin免疫荧光染色结果:给药后4、8h,实验组β-tubulin阳性率与对照组相比,差异无统计学意义;给药后12、24、48h,β-tubulin阳性细胞与对照组相比减少,差异均有统计学意义。(2)NeuN免疫组织化学结果:给药后4、8、12h,实验组和对照组均未检测到NeuN阳性细胞;给药后24、48h,实验组与对照组相比,NeuN阳性细胞减少,差异均有统计学意义。结论环磷酰胺可使β-tubulin、NeuN的表达降低,干扰神经上皮细胞向神经元方向分化。     

鳖甲育肝颗粒对乙醇性肝纤维化大鼠的影响*

目的:探讨鳖甲育肝颗粒对乙醇性肝纤维化大鼠的防治作用。方法:将SD大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、鳖甲育肝颗粒对照组、秋水仙碱组、鳖甲育肝颗粒低剂量组和鳖甲育肝颗粒高剂量组(n=8),采用梯度乙醇灌胃法复制肝纤维化动物模型,即除了空白对照组及鳖甲育肝颗粒对照组灌胃等量纯净水外,其余各组大鼠第1～4周灌胃5 g/(kg·d)乙醇,第5～8周灌胃7 g/(kg·d)乙醇,第9～12周灌胃9 g/(kg·d)乙醇,第13～24周灌胃9.5 g/(kg·d)乙醇,其中乙醇剂量计算采用下列公式:乙醇剂量(g) = 无水乙醇体积(ml)×预配乙醇浓度(%)×0.8(g/ml),同时每天灌胃相应的药物:鳖甲育肝颗粒对照组灌胃鳖甲育肝颗粒5.55 g/kg、秋水仙碱组灌胃秋水仙碱0.1 mg/kg、鳖甲育肝颗粒低剂量组灌胃鳖甲育肝颗粒1.85 g/kg、鳖甲育肝颗粒高剂量组灌胃鳖甲育肝颗粒5.55 g/kg,空白对照组及模型对照组灌胃等量纯净水。实验第169日观测鳖甲育肝颗粒对大鼠肝脏脏器宏观变化、肝组织含水量及其纤维化病理变化、肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、CREB表达水平的影响。结果:1.85、5.55 g/kg鳖甲育肝颗粒能明显改善乙醇性肝纤维化大鼠肝脏脏器宏观变化及肝组织纤维化病理变化,降低肝组织含水量及Hyp的含量,下调α-SMA、CREB表达水平。结论:鳖甲育肝颗粒具有明显的抑制乙醇性肝纤维化的作用,而下调CREB是其抗肝纤维化的作用机制之一。     

一种新型高脂血症易感大鼠的血脂水平与心血管并发症

目的观察一种新型高脂血症易感WSHc大鼠经高脂饲料诱导后血脂的动态变化和心血管并发症病理特点,为WSHc大鼠的应用提供参考。方法取7～8周龄雌性WSHc大鼠20只和Wistar大鼠10只,进行高脂饲喂,另取同周龄同性别的WSHc大鼠和Wistar大鼠各10只饲喂普通饲料,分别作为正常对照。观察高脂饲喂2、4、8、12、16周时的血脂动态变化,饲喂16周后采用心动超声检测大鼠心功能及左心结构,病理组织学观察心脏及主动脉病变。结果与正常对照组比,高脂饲喂2周后WSHc大鼠与Wistar大鼠血清总胆固醇(TC)与低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)均显著升高;高脂饲喂的WSHc大鼠TC、LDL-c水平为:(6.34±2.12)mmol/L、(2.56±0.94)mmol/L,而高脂饲喂的Wistar大鼠TC、LDL-c水平仅为(2.93±0.23)mmol/L,(0.63±0.12)mmol/L;在高脂饲喂期间,WSHc大鼠TC始终维持在高水平状态。饲喂16周后,WSHc大鼠心脏射血分数升高,左心室室壁增厚,并出现心肌纤维化,心肌细胞凋亡程度增高;主动脉内膜增厚,弹力纤维排列紊乱,形成早期动脉粥样硬化病变。而Wistar大鼠经高脂饲料诱导后,心功能及心血管病变不明显。结论 WSHc大鼠对外源性胆固醇敏感,高脂饲喂后易发高脂血症及心血管疾病,且TC、LDL-c水平与临床高脂血症更接近,相较于普通大鼠,更适用于高脂血症及相关心血管并发症的实验研究。     

自发性高血压大鼠心肌胶原与血管紧张素Ⅱ的关系

目的　观察成年 (16周龄 )自发性高血压大鼠 (spontaneouslyhypertensiverat,SHR)与同龄对照组 (WKY)大鼠之间细胞外基质成分的差异及血管紧张素Ⅱ (AngiotensinⅡ ,AngⅡ )在SHR大鼠左室肥厚形成过程的作用。方法　用尾袖法间接测定大鼠血压 ;检测左心室组织及血浆中的血管紧张素转化酶 (angiotensinconvertingenzyme ,ACE)活性 (紫外分光光度法 ) ;放免法测定左室心肌AngⅡ含量。免疫组化测定左室心肌胶原含量 ,用3H -Proline掺入量测定体外培养心肌成纤维细胞 (cardiacfibroblast,CFB)胶原的合成率。结果　 (1) 16周龄SHR大鼠血压明显高于对照组 (WKY)大鼠 ,分别为 (2 7.6 3± 2 .6 7)kPa和 (16 39± 0 54)kPa ,P <0 .0 5;(2 )SHR大鼠左室心肌AngⅡ含量明显高于WKY组 ,分别为 (2 6 6± 75)pg/ 10 0mg和 (134± 4 1)pg/ 10 0mg ,P <0 .0 5;(3)左室重量 (Leftventricalarmass,LVM)SHR明显高于WKY组 ,分别为 (10 14.3± 6 2 .1)mg和 (895.7± 86 .4 )mg ,P <0 .0 5;(4 )心体比 (Letventricrlarmass/bodyeight,LVM/BW )SHR明显高于WKY组 ,分别为 (3.4 4± 0 .15)mg/g和 (2 .17± 0 .11)mg/g ,P <0 .0 5;(5)体外细胞培养的心肌成纤维细胞3H -Proline掺入量随着AngⅡ浓度升高而增加 ,1μmol/L的AngⅡ使SH     

高血压大鼠心肌2型小电导-Ca2+-激活-K+通道蛋白(SK2)表达的变化*

目的:观察高血压大鼠心肌细胞2型小电导-Ca²⁺-激活-K⁺(SK2)通道蛋白表达情况。方法:12只健康成年雄性SD大鼠随机分为对照组(5只)和实验组(7只),实验组采用N’-硝基-L-精氨酸(L-NNA 15 mg/(kg·d))腹腔注射制备高血压模型,对照组以等体积生理盐水腹腔注射,每天称量大鼠体重,每周测量血压及心电图变化,4周后处死大鼠取心脏;采用Western blot的方法检测心肌SK2通道蛋白表达水平。结果:给药4周后,与对照组相比,实验组大鼠血压明显升高(P＜0.05),心电图QRS时长和R-R间期延长,实验组大鼠心房组织和心室组织SK2通道的表达均明显升高(1.12±0.18 vs 0.52±0.99,1.64±0.26 vs 0.99±0.22, P＜0.05)。结论:高血压模型大鼠心房和心室SK2通道表达增加,其可能是导致高血压模型大鼠出现心律失常的机制之一,为高血压疾病的治疗和预后提供新的思路和策略。