光动力诊疗中的5-氨基酮戊酸及酯类衍生物的研究进展

5-氨基酮戊酸(ALA)是体表光动力疗法的一个重要前体药物,通过代谢产物原卟啉Ⅸ(PpⅨ)介导发挥光敏作用。ALA制剂的研发和优化促生了一系列产品和技术,不仅推动了体表光动力疗法的应用,而且ALA介导的PpⅨ荧光还可用于肿瘤的荧光可视化和辅助手术。本文将对光动力诊疗中ALA及其酯类衍生物和PpⅨ的研究进展作一个系统介绍。     

5-氨基酮戊酸光动力疗法对不同疾病来源的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的体外杀伤作用

光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)利用光敏剂与光源反应后产生的活性氧,破坏细菌组分,进而致细菌死亡。其多靶位杀伤特性在治疗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)感染方面有应用前景,但相关研究尚处于起步阶段。本研究MRSA菌株取自烧伤、急性咽炎、鼻窦炎和肺炎4类临床常见MRSA感染性疾病患者,使用5-氨基酮戊酸(5-aminolevulinic acid,ALA)光敏剂、发光二极管光源,于体外检测ALA介导的PDT(ALA-PDT)对MRSA菌株的杀伤作用。结果显示,经5mmol/L ALA孵育1h后,给予360J/cm~2强光[(633±10)nm]照射1h,ALA-PDT对MRSA菌株具有1.80log_(10)cfu的有效杀伤作用。结果提示,在相同实验条件和参数下,ALA-PDT对上述4种疾病来源的MRSA菌株体外杀伤作用无统计学差异。     

5-氨基酮戊酸声动力疗法诱导人骨肉瘤细胞凋亡的研究

目的:探讨5-氨基酮戊酸声动力疗法(5-ALA-SDT)对人骨肉瘤细胞株U2-OS细胞凋亡的影响。方法:对数生长期的U2-OS细胞随机分为空白对照组(control)、声敏剂组(5-ALA)、超声组(ultrasound),声动力组(5-ALA-SDT)。采用流式细胞术检测细胞凋亡率,荧光探针及共聚焦激光扫描显微镜检测细胞内荧光定位,用DCFH-DA检测活性氧(ROS)的产生情况。结果:与单纯超声组,单纯5-氨基酮戊酸组和对照组相比较,5-氨基酮戊酸介导的声动力组细胞存活率(40.18%±1.35%)均明显下降(P0.01),细胞内荧光定位表明5-ALA扩散在细胞质和主要累积在U2-OS细胞线粒体内,并且5-氨基酮戊酸介导的声动力组ROS产生的百分率(34.3±2.4)%较单纯超声组、单纯5-氨基酮戊酸组和对照组明显升高,差异有统计学意义(P0.01)。结论:5-氨基酮戊酸介导的声动力作用可能通过线粒体途径对诱导U2-OS细胞凋亡。     

不同浓度5-氨基酮戊酸对光动力方法抗白念珠菌效果的影响

目的通过测定白念珠菌内不同光敏剂浓度下生成原卟啉IX(Pp IX)的水平及5-氨基酮戊酸光动力疗法(5-ALA-PDT)对白念珠菌的抑菌率,为临床选择最佳光敏剂浓度提供理论依据。方法制备白念珠菌悬液,与ALA避光孵育,采用激光共聚焦显微镜观察Pp IX产生情况,MTT法测定5-ALA-PDT对白念珠菌生长的抑制率。结果白念珠菌与ALA避光孵育后有荧光物质Pp IX产生,ALA光敏剂浓度与Pp IX强度呈正相关,当ALA浓度到达300 mg/m L时,Pp IX强度将不再增加。对照组无荧光物质出现。结论 ALA-PDT对白念珠菌抑制效应同光敏剂浓度密切相关。这为临床ALA-PDT治疗白念珠菌疾病提供了理论依据。     

5-氨基γ-酮戊酸及其己酯衍生物对几种细胞株的光动力作用

5 氨基γ 酮戊 (ALA)及其己酯 (He ALA)具有内源生成光敏剂的特点 ,在肿瘤光动力探测及治疗中显示出了优势。ALA及He ALA对神经母细胞瘤、肝癌细胞及成纤维细胞的光动力作用被研究比较。由特征荧光光谱证实 ,经ALA或He ALA培养后 ,三种细胞内均可生成原卟啉 (PpIX)产物。激光扫描荧光显微镜显示 ,在经ALA或He ALA培养后的神经母细胞瘤中 ,PpIX均以弥散方式分布在细胞质中。PpIX在三种细胞中的积聚动力学过程不同 ,随着ALA或He ALA培育时间的增长 ,PpIX在肝癌细胞及成纤维原细胞中的积累增加 ,而在神经母细胞瘤中PpIX在 8h后已达到饱和。此外 ,在同样的培育条件下 ,神经母细胞瘤中PpIX的生成浓度明显高于肝癌细胞及成纤维细胞。经ALA培养及光照射后 ,可使近 90 %的神经母细胞瘤失活 ;而在同样条件下却只能杀伤 5 0 %左右的肝癌细胞及成纤维细胞。揭示了神经母细胞瘤对ALA光动力作用有极高的敏感性 ,并适于光动力治疗。与ALA相比 ,He ALA可在三种细胞内造成与ALA相近的杀伤率 ,但所用的药物浓度却比ALA低 10倍 ,显示He ALA具有极高的光动力灭活效率。因此在内源光动力治疗中 ,He ALA是一种极具开发前景的新药物。     

重组枯草杆菌5-氨基酮戊酸脱水酶的纯化和性质研究

大肠杆菌中表达的枯草杆菌5-氨基酮戊酸脱水酶(5-aminolevulinate dehydratase, ALAD),其N端含有组氨酸标签,Ni-NTA 一步纯化至均一.纯化的酶比活为3.6 U/mg蛋白,酶的最适pH为8.0～10.0,Km为0.95 mmol,Vmax为16.7 mmol/h,在55 ℃温浴10 min,酶活保留85 %,2 mmol/L的K+、Zn2+、Mg2+、Li+、Fe3+和Mn2+提高酶活,2 mmol/L的Co2+和Ca2+对酶活没有显著影响,2 mmol/L的Cu2+和1 mmol/L的Hg2+完全抑制酶活.在2 mmol/L的EDTA存在下酶活性丧失,表明酶催化依赖金属离子.100 mmol/L的酮戊酸抑制酶活约50 %.10 mmol/L的2-巯基乙醇时提高酶活3倍,而100 mmol/L的二硫苏糖醇几乎完全抑制酶活.氨基酸修饰表明赖氨酸和半胱氨酸残基可能是酶催化必需的,组氨酸和丝氨酸残基对酶催化不起关键作用.     

不同光敏剂孵育时间在白念珠菌光动力抑制效应中的实验研究

目的：通过测定5?氨基酮戊酸（5?ALA）与白念珠菌菌悬液不同孵育时间生成PpIX的水平及5?氨基酮戊酸光动力疗法（5?ALA?PDT）抑菌率,为临床选择最佳孵育时间提供理论依据。方法制备白念珠菌悬液并与ALA避光孵育,设实验组和对照组。采用激光共聚焦显微镜观察PpIX产生情况,MTT法测定ALA光动力治疗对白念珠菌生长的抑制率。结果白念珠菌菌悬液与ALA避光孵育后有荧光物质PpIX产生,孵育30 min到90 min产生的PpIX最多,120 min以后PpIX开始明显减少,对照组无荧光物质出现。结论 ALA?PDT对白念珠菌抑制效应同孵育时间密切相关。这为临床ALA?PDT治疗白念珠菌疾病提供了理论依据。     

光动力疗法在真菌感染性疾病中的应用

随着激素、广谱抗生素和免疫抑制剂在临床上的广泛应用,真菌感染的发病率不断上升,加上真菌耐药性日趋严重,使得抗真菌药物治疗面临的挑战越来越大.光动力疗法是一种具有高度选择性的药械联动技术,越来越多的研究表明光动力疗法能有效对抗念珠菌、马拉色菌等真菌性疾病的感染,该文就光动力疗法的特点以及光动力学疗法治疗真菌感染的现状做一综述,旨在让大家对光动力抗真菌治疗有一个全面深入的了解.     

生物基塑料单体5-氨基戊酸的生物合成新途径

5-氨基戊酸(5-aminovalanoic acid,5AVA)可作为新型塑料尼龙5和尼龙56的前体,是合成聚酰亚胺的有前途的平台化合物。目前5-氨基戊酸的生物合成法普遍产率较低且合成过程复杂,成本高。为实现5AVA的绿色生物合成,本研究通过组合表达来自日本白腹鲭(Scomber japonicas)的L-赖氨酸α-氧化酶、来自乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)的α-酮酸脱羧酶和来自大肠杆菌(Escherichia coli)的醛脱氢酶,在大肠杆菌中建立了一条以L-赖氨酸为原料,以2-酮-6-氨基己酸盐为中间产物生物合成5AVA的途径。在葡萄糖浓度为55 g/L,赖氨酸盐酸盐40 g/L的初始条件下,最终消耗158 g/L的葡萄糖和144 g/L的赖氨酸盐酸盐,补料分批发酵产生了57.52 g/L的5AVA,摩尔得率为0.62 mol/mol。与文献报道的以2-酮-6-氨基己酸盐为中间产物的5AVA生物合成途径相比,本文报道的新途径无需使用乙醇和双氧水,且5AVA产量进一步提高。     

氨基酮戊酸光动力联合一清片治疗中重度痤疮效果及对血清学指标的影响

摘要 目的：观察氨基酮戊酸光动力联合一清片治疗中重度痤疮疗效以及对血清学指标的影响。方法：将93例中重度痤疮患者进行随机分组,31例为治疗组,31例为参照组1,31例为参照组2。治疗组采用氨基酮戊酸光动力联合一清片治疗,参照组1采用氨基酮戊酸光动力治疗,参照组2采用一清片治疗,观察三组治疗前、后患者痤疮严重程度分级系统(GAGS)评分、痤疮特异性生活质量量表（Qol-Acne）评分变化及性激素结合球蛋白（SHBG）、游离睾酮（FT）、雌二醇（E₂）、补体C3、免疫球蛋白IgG、IgM水平,比较三组临床疗效。结果：治疗组FT水平低于参照组1和参照组2（P＜0.05）,治疗组SHBG、E₂水平高于参照组1和参照组2（P＜0.05）,治疗组补体C3、IgG、IgM水平低于参照组1和参照组2（P＜0.05）,治疗组Qol-Acne评分较参照组1和参照组2高（P＜0.05）,治疗组GAGS评分较参照组1和参照组2低（P＜0.05）,治疗组总有效率（93.55%）高于参照组1（77.42%）和参照组2（64.52%）（P＜0.05）。结论：氨基酮戊酸光动力联合一清片治疗中重度痤疮患者,可调节患者内分泌,改善性激素水平及免疫状态,缓解患者痤疮症状,提升生活质量及临床疗效。     

Photodynamic Therapy in the Treatment of Superficial Mycoses: An Evidence-based Evaluation

Photodynamic therapy (PDT) is effective in the destruction of fungi. In order to evaluate the efficacy and safety of PDT for superficial mycoses, we performed an evidence-based review of published literature. Database of MEDLINE, EMBASE, and Cochrane Library was searched until March 2010. English-language articles evaluating the efficacy and safety of PDT for superficial mycoses were included. No randomized clinical trials were found. Seven reports described the antifungal effect of PDT against 63 superficial mycoses patients. Eight of 10 (80%) tinea cruris patients and 6 of 10 (60%) tinea pedis were led to mycological cure after 1–3 treatments. Unfortunately, only 4 (40%) tinea cruris patients and 3 (30%) tinea pedis had a persist healing at the 8-week follow-up. Six of the 9 (66.7%) foot-interdigital mycoses patients recovered clinically and microbiologically after 1 or 4 treatments. Only 2 patients (22.2%) had a persist healing at the 8-week follow-up. Eleven of 30 (36.6%) onychomycosis patients were cure for 18 months after treatment, and 3 onychomycosis patients were all cure in other 2 reports. The therapeutic effect of PDT for one pityriasis versicolor patients was well. Overall tolerability of PDT was good. Therefore, it is unclear what PDT’s place for superficial mycoses will be. Further clinical trials are needed to evaluate the efficacy of PDT to treat superficial mycoses. It is also important to optimize treatment protocols in order to cope with recurrence.     

光动力学疗法治疗肝胆肿瘤的研究现状

介绍了光动力学疗法治疗肝胆肿瘤的实验室和临床研究现状,提出了光动力学疗法在治疗肝胆肿瘤面临的问题,并建议在腹腔镜手术中引入光动力学疗法,认为随着新型光敏剂及光源的开发应用,PDT将会成为治疗肝胆肿瘤的切实可行方法。     

Rare Fungal Infections in Children: An Updated Review of the Literature

An increasing trend of reports of rare fungal diseases has been observed to be mainly associated with the substantial increase of high-risk immunocompromised children, as well as with the selective pressure of antifungal drugs. On the other hand, recent reports have shown that several species of these rare fungi may also cause infections in immunocompetent children without obvious underlying conditions. The clinical spectrum of these infections, and most importantly their outcome, varies greatly, implying for a rather heterogenic group of pediatric infections. Various types of superficial and subcutaneous fungal infections, as well as systemic and disseminated life-threatening infections, have been reported. Prompt diagnosis and appropriate treatment of rare fungal diseases in children remains a great challenge. Several treatment options have been used, ranging from localized to combination treatment with extensive surgical excision and long-term antifungal therapy. We review contemporary data of rare fungal infections in pediatric patients focusing on epidemiology, mycology, management and outcome, published during the last three years.     

重庆动物园亚洲象真菌性皮肤病的治疗探讨

重庆动物园亚洲象普遍发生一种皮肤病,表现为臀部、腰部或脖颈部等处皮肤不同程度的白斑、脱屑、皲裂、瘙痒和结痂等,严重妨碍动物生长发育,在应用特比萘芬等化学药物治疗效果不佳的情况下,于2008年经分离鉴定推测为小孢子菌真菌性皮肤病,自2009～2011年采用艾叶水剂外洗治疗,并以艾叶混合饲料饲喂动物,配合艾叶环境熏蒸消毒,取得良好的防治效果。初步表明艾叶为一种具有推广前景的防治动物皮肤病的中草药。