联合检测EB-IgG、IgM，EB-DNA在鼻咽癌中的诊断价值分析

摘要 目的：分析联合检测EB-IgG、IgM,EB-DNA在鼻咽癌中的诊断价值。方法：选择我院自2019年1月至2022年1月接诊的100例鼻咽癌患者作为观察组,另选同期的100例健康体检者作为对照组。使用化学发光免疫夹心法检测血清EB-IgG、IgM,实时荧光定量聚合酶链反应检测血浆EB-DNA表达水平;比较两组EB-IgG、IgM和EB-DNA的阳性率,分析不同临床分期的鼻咽癌患者EB-IgG、IgM和EB-DNA的阳性率及EB-DNA表达水平,使用AUC评价EB-IgG、IgM联合EB-DNA对鼻咽癌的诊断效能,计算单独和联合应用上述指标诊断鼻咽癌的敏感度和特异度。结果：观察组EB-IgG、IgM和EB-DNA的阳性率均明显高于对照组,差异均有统计学意义（P＜0.05）;EB-IgG、IgM和EB-DNA的阳性率及EB-DNA表达水平在不同临床分期的鼻咽癌患者中差异均有统计学意义（P＜0.05）,均随着临床分期升高而升高;经ROC曲线分析,EB-IgG、IgM联合EB-DNA诊断鼻咽癌的AUC为0.930,大于单一指标EB-IgG的0.755、IgM的0.740和EB-DNA的0.750,差异均有统计学意义（P＜0.05）;EB-IgG、IgM联合EB-DNA诊断鼻咽癌的敏感度为97.00 %,特异度为96.00 %,准确度为96.50 %。结论：EB-IgG、IgM和EB-DNA均对鼻咽癌具有一定的临床诊断价值,联合检测有助于提高鼻咽癌的诊断效能,值得予以重视应用。     

Epstein-Barr病毒和鼻咽癌血清学诊断

EB病毒与鼻咽癌关系密切。 EB病毒抗原可用于鼻咽癌早期诊断以提高鼻咽癌病人存活率。本文对 EB病毒生活周期及其抗原系统 ,EB病毒与鼻咽癌之间关系及应用 EB病毒抗原进行鼻咽癌血清学诊断的进展作一概括介绍     

在昆虫细胞中表达EB病毒壳抗原及其在诊断中的应用

本研究的目的是以昆虫杆病毒为感染为载体表达ＥＢ病毒壳蛋白的主要多肽ｇｐ１２５,用间接免疫荧光和免疫的印迹技术证明表达产物的特异性,表达产物位于感染细胞的胞闪内,分子量约１００ｋＤ,用免疫Ｄｏｔ法检查感染细胞裂解物中存在特异性表达产物的量,重组病毒裂解产物免疫小鼠后,能产生与ＶＣＡ反应的抗体,重组病毒感染的细胞为靶细胞,与Ｂ９５－８细胞片平行检查人血清中ＶＣ／ＩｇＧ和ＶＣＡ／ＩｇＡ抗体,确定表达产物     

应用纯化的重组Epstein-Barr病毒早期抗原建立检测鼻咽癌病人血清IgA/EA抗体的ELISA方法

利用凝胶和离子交换柱(Mono Q)两次层析,将大肠杆菌表达的EB病毒早期抗原P138片段多肽纯化。以此P138为抗原,增加鼠抗人IgA单克隆抗体以扩大IgA的反应,建立了三步ELISA法。用本法检查了100例鼻咽癌病人和63例正常人血清中抗EB病毒IgA/EA抗体,病人血清的阳性检出率为86％,正常人有3例阳性(4.7％)。此结果表明,三步ELISA法较常用的间接ELISA法(阳性检出率为71％)敏感。     

应用蛋白印迹法检测鼻咽癌病人血清中抗Epstein—Barr病毒IgA/EA抗体

曾毅等建立了一系列检测EB病毒IgA/VCA和IgA/EA抗体的鼻咽癌早期诊断方法,取得了满意的结果。为了进一步提高对鼻咽癌诊断更为特异的IgA/EA抗体的检出率,我们建立了检测EB病毒IgA/EA抗体的蛋白印迹法。方法敏感特异,结果令人满意。 本法中所用的两个质粒系由本实验室与西德Pettenkofer研究所Wolf教授的实验室合作构建。pUCARG1140和pUC9MBcE3.2质粒均为表达质粒,前者携带着来源于EB病毒Bam     

EB病毒DNA聚合酶基因的表达与纯化鼻咽癌病人诊断中的应用

以Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒｒ病毒（ＥＢＶ）ＤＮＡ聚合酶为抗原,建立了简便、快速、敏感和特异的鼻咽癌诊断方法。构建原表达载体ｐＲＳＥＴ－ＤＮＡ聚合酶及其亚克隆ＰＲＳＥＴ－Ａ１和ＢＬ２１（ＤＥ３）中表达的产物,经Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ检测其抗原性并用于检测鼻咽癌（ｎａｓｏｐｈａｒｙｎｇｅａｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ,ＮＰＣ）病人血清中的抗体。在ＤＰＣ病人血清中存在抗ＥＢ病毒ＤＮＡ聚合酶的ＩｇＧ抗体,并证明     

EB病毒DNA聚合酶基因的表达与纯化及其在鼻咽癌病人诊断中的应用

以Epstein-Barr病毒(EBV)DNA聚合酶为抗原,建立了简便、快速、敏感和特异的鼻咽癌诊断方法.构建原核表达载体pRSET-DNA聚合酶及其亚克隆pRSET-A1和pRSET-A2,在BL21(DE3)中表达的产物,经Western-blot检测其抗原性并用于检测鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)病人血清中的抗体.在NPC病人血清中存在抗EB病毒DNA聚合酶的IgG抗体,并证明DNA聚合酶的抗原性主要集中于后2/3片段(A2)上.Western-bolt检测A2/IgG抗体的敏感性和特异性分别为80%和100%.对46份NPC病人血清和46份非NPC头颈癌症病人血清,用ELISA检测A2/IgA,敏感度为89%,特异度为93%.初步建立了ELISA检测NPC病人血清中A2/IgG抗体的方法,获得较高的敏感性和特异性.     

鼻咽癌患者血清中Epstein-Barr病毒早期抗原特异性抗体的IgA类抗独特型抗体的检测

用3.5％PEG(MW6000)预先处理被检血清以除掉免疫复合物及干扰抗原之后,用新建立的ELISA方法测定血清中Epstein-Barr病毒早期抗原特异性抗体的抗独特型(Anti-Id)抗体。67例鼻咽癌患者中,80％IgA类的Anti-Id抗体阳性(P/N值≥2.1),而56例正常人群除1例阳性外,其余均阴性。测定46例鼻咽癌患者血清EA/IgA滴度与Anti-Id的关系表明,Anti-Id抗体P/N值与IgA/EA滴度呈负相关(r=-0.6,P<0.001)。12例鼻咽癌病人血清中EA抗体的IgG类Anti-Id抗体则与正常人无显著差别。     

用PO4细胞为靶细胞检测人血清中Epstein-Barr病毒IgA/MA抗体以诊断鼻咽癌

近年来,常用未经丙酮固定的、由丁酸和巴豆油激活的B95-8细胞或P3HR-1细胞为靶细胞,检测人血清中EB病毒IgA/MA抗体以早期诊断鼻咽癌,效果良好。但由于B95-8细胞含有多种EB病毒抗原,不能用丙酮固定,需多次离心沉淀,在浮悬状态下检测,技术比较复杂。     

鼻咽癌患者血清中抗Epstein-Barr病毒早期和晚期膜抗原抗体的检测

对Epstein-Barr(EB)病毒抗原的研究,发现有淋巴细胞确定的膜抗原(Lydma)、早期抗原(EA)、壳抗原(VCA)、核抗原(EBNA)、早期膜抗原(EMA)和晚期膜抗原(LMA)。除了Lydma抗原外,鼻咽癌患者对上述抗原均产生相应的IgG和IgA抗体。因而研究这些抗体,对阐明EB病毒与鼻咽癌的关系及鼻咽癌的早期诊断都十分有价值。     

单克隆抗体在呼吸道合胞病毒感染诊断和防治中的应用

呼吸道合胞病毒 (RSV)是世界范围内婴幼儿下呼吸道感染的重要病原 ,目前尚无成熟疫苗应用于临床。展开对RSV被动免疫的研究显得尤为重要。单克隆抗体成为深入研究和防治RSV感染的有力武器。本文综述了单克隆抗体在RSV感染的诊断、预防和治疗中的应用     

检测EB病毒TK激酶抗体方法的建立及其在鼻咽癌诊断中的应用

目的:建立检测鼻咽癌(NPC)患者血清中EB病毒TK激酶的酶免疫测定(EIA)方法,用于筛选和辅助诊断早期NPC患者。方法:用基因工程高效表达的EB病毒TK激酶作为包被抗原,建立EIA检测方法,检测NPC患者和对照血清中的TK/IgG抗体。结果:在NPC患者血清中检出了特异的对EB病毒TK激酶的IgG抗体,而正常人血清中为抗体阴性。结论:首先建立了简便、快速、特异和敏感的早期诊断NPC的EIA方法,并作为我公司产品扩展应用。     

HCMV-DNA定量检测和HCMV-IgG抗体AI检测在儿童HCMV感染诊断中的临床价值

摘要 目的：探讨人巨细胞病毒（HCMV）-DNA定量检测和HCMV-免疫球蛋白G（IgG）抗体亲和力指数（AI）检测在儿童HCMV感染诊断中的临床价值。方法：收集高度疑似HCMV活动性感染患儿血清样本103例作为研究组,健康体检儿童血清样本94例作为对照组。分析HCMV-DNA定量检测结果和HCMV-IgG抗体AI检测结果,并比较不同年龄、不同性别患儿HCMV-DNA阳性结果检出率和低HCMV-IgG抗体AI检出情况。结果：研究组血清HCMV-DNA阳性率为33.01%（34/103）,对照组血清HCMV-DNA均为阴性,研究组血清HCMV-DNA阳性率明显高于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。研究组血清低HCMV-IgG抗体AI检出率为13.59%（14/103）,对照组未检出低HCMV-IgG抗体AI,研究组血清低HCMV-IgG抗体AI检出率高于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。研究组不同性别之间患儿血清的HCMV-DNA阳性率、低HCMV-IgG抗体AI检测结果均无统计学差异（P>0.05）。研究组年龄1～5岁患儿血清HCMV-DNA阳性率明显低于年龄1 d～<6个月和年龄6个月～<1岁患儿（P<0.05）。三个年龄段患儿的血清低HCMV-IgG抗体AI检测结果均无统计学差异（P>0.05）。结论：1岁以下儿童更易受到HCMV感染,HCMV-DNA定量检测和HCMV-IgG抗体AI检测结果可以为临床早期诊断和治疗HCMV感染提供有效依据。     

CEA和CYFRA21-1在原发性肺癌诊断中的应用价值分析

目的:评价血清癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)和细胞角蛋白19的片段(CYFRA21-1)水平对原发性肺癌的诊断价值。方法:回顾性分析2012年5月~2013年5月我科收治的329例肺癌患者和192例肺部良性病变患者的临床资料。结果:肺癌患者血清CEA或CYFRA21-1水平随着肺癌的分期呈现逐渐上升的趋势(P0.001,P0.01)。以血清CEA≥3.4μg/L作为诊断条件诊断肺癌的灵敏度、特异度和阳性预计值预计值分别为67%、62%和75.2%;以血清CYFRA-21≥5.0 ug/L作为诊断条件诊断原发性肺癌的灵敏度、特异度和阳性预计值预计值分别为48%、87%和86.3%;以血清CEA≥3.4 ug/L和CYFRA-21≥5.0 ug/L共同作为诊断条件推断原发性肺癌的灵敏度、特异度和阳性预计值预计值分别为48%、87%和86.3%;良性肺部疾病患者中血清CEA和CYFRA-21水平同时升高者只有2%。结论:血清CEA≥3.4 ug/L和CYFRA-21≥5.0 ug/L同时升高对肺癌有具有重要的诊断价值,可有效的鉴别原发性肺癌与其它良性病变。     

单克隆抗体在畜禽病毒性传染病研究中的应用

着重阐述了单克隆抗体在畜禽病毒性传染病研究中的应用现状,单克隆抗体在病毒抗原结构与抗原表位研究、以及在畜禽病毒性传染病诊断和抗病毒治疗方面的应用,对当前单克隆抗体研究所面临的一些问题和研究方向做了分析。     

CA125、CA199、CEA 联合检测在妇科肿瘤临床诊断中的应用价值

目的：探讨CA125、CA199、CEA联合检测在妇科肿瘤临床诊断中的应用价值。方法：选择妇科恶性肿瘤组65例、妇科良性肿瘤组55例、健康对照组70例,采用自动荧光磁微粒酶免分析法检测血清中CA199、CA125的含量,采用光激化学发光法检测血清中CEA的含量。结果：妇科恶性肿瘤组血清中CA125、CA199、CEA的水平明显高于妇科良性肿瘤组及对照组,差异有统计学意义（P〈0．01）;妇科良性肿瘤组血清中CA125、CA199、CEA的水平高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．01）;CA125、CA199、CEA联合检测对早期妇科肿瘤诊断的阳性率较单独检测高,差异有统计学意义（P〈O．05）;良性组、恶性组联合检测ROC曲线下面积大于单项检测曲线下面积。结论：联合检测可提高对妇科肿瘤早期诊断的阳性率,对妇科良恶性的诊断及鉴别诊断有重要价值。     

抗CEA单链抗体与链亲和素融合基因的表达

克隆分泌CEA杂交瘤细胞重链可变区（V_H）和轻链可变区（V_L）,以Linker连接V_H及V_L构建抗CEA单链抗体.同时以Spacer连接单链抗体和链亲和素,构建成功单链抗体和链亲和素融合基因,克隆该融合基因至原核表达载体,pET21a(+),经IPTG诱导表达出该双特异性融合蛋白.活性鉴定表明该融合蛋白具有结合CEA及生物素的双特异性.该融合蛋白在生物领域中有较广阔的应用前景.     

Radioimmunoimaging of Liver Metastases with PET Using a 64Cu-Labeled CEA Antibody in Transgenic Mice

Purpose

Colorectal cancer is one of the most common forms of cancer, and the development of novel tools for detection and efficient treatment of metastases is needed. One promising approach is the use of radiolabeled antibodies for positron emission tomography (PET) imaging and radioimmunotherapy. Since carcinoembryonic antigen (CEA) is an important target in colorectal cancer, the CEA-specific M5A antibody has been extensively studied in subcutaneous xenograft models; however, the M5A antibody has not yet been tested in advanced models of liver metastases. The aim of this study was to investigate the ⁶⁴Cu-DOTA-labeled M5A antibody using PET in mice bearing CEA-positive liver metastases.

Procedures

Mice were injected intrasplenically with CEA-positive C15A.3 or CEA-negative MC38 cells and underwent micro-computed tomography (micro-CT) to monitor the development of liver metastases. After metastases were detected, PET/MRI scans were performed with ⁶⁴Cu-DOTA-labeled M5A antibodies. H&E staining, immunohistology, and autoradiography were performed to confirm the micro-CT and PET/MRI findings.

Results

PET/MRI showed that M5A uptake was highest in CEA-positive metastases. The %ID/cm³ (16.5%±6.3%) was significantly increased compared to healthy liver tissue (8.6%±0.9%) and to CEA-negative metastases (5.5%±0.6%). The tumor-to-liver ratio of C15A.3 metastases and healthy liver tissue was 1.9±0.7. Autoradiography and immunostaining confirmed the micro-CT and PET/MRI findings.

Conclusion

We show here that the ⁶⁴Cu-DOTA-labeled M5A antibody imaged by PET can detect CEA positive liver metastases and is therefore a potential tool for staging cancer, stratifying the patients or radioimmunotherapy.     

P53抗体联合CYFRA21-1和CEA在非小细胞肺癌中的应用

目的：研究血清P53抗体在非小细胞肺癌临床病理特征之间的关系,并结合血清中的癌胚抗原、角质蛋白21-1以指导对临床上肺癌复发和转移的分析,用来选择合理的治疗方案。方法：正常组30例,肺良性疾病组10例,肺癌组45例,肺癌全组分别于手术前1天、术后10、30、60和90天时抽取清晨空腹静脉血2ml,23例肺癌病例于手术后120天,15例病例于手术后180天抽取清晨空腹静脉血2ml,肺良性疾病组分别于手术前1天、抽取清晨空腹静脉血2ml。正常组清晨空腹采集静脉血2ml。采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清P53抗体和角质蛋白21-1,采用荧光酶标免疫法检测血清癌胚抗原。结果：血清P53抗体、CYFRA21-1和CEA在正常人组、良性疾病组、肺癌组术前阳性率的比较三种肿瘤标志物阳性率经X2检验,在肺癌组分别与正常人组和良性病例组有显著性差异（P〈0.05）,良性病例组和正常人组之间无显著行差异（P〉0.05）。并与手术后复发与转移相关。结论：联合检测癌胚抗原、角质蛋白21-1及血清P53抗体水平有助于肺部良恶性疾病的诊断;手术前后动态测定肺癌患者血清P53抗体和角质蛋白21-1的变化规律,有助于判断疗效,监测预后和指导肺癌术后的综合治疗。     

P53抗体联合CYFRA21-1和CEA在非小细胞肺癌中的应用

目的:研究血清P53抗体在非小细胞肺癌临床病理特征之间的关系,并结合血清中的癌胚抗原、角质蛋白21-1以指导对临床上肺癌复发和转移的分析,用来选择合理的治疗方案。方法:正常组30例,肺良性疾病组10例,肺癌组45例,肺癌全组分别于手术前1天、术后10、30、60和90天时抽取清晨空腹静脉血2ml,23例肺癌病例于手术后120天,15例病例于手术后180天抽取清晨空腹静脉血2ml,肺良性疾病组分别于手术前1天、抽取清晨空腹静脉血2ml。正常组清晨空腹采集静脉血2ml。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清P53抗体和角质蛋白21-1,采用荧光酶标免疫法检测血清癌胚抗原。结果:血清P53抗体、CYFRA21-1和CEA在正常人组、良性疾病组、肺癌组术前阳性率的比较三种肿瘤标志物阳性率经X2检验,在肺癌组分别与正常人组和良性病例组有显著性差异(P<0.05),良性病例组和正常人组之间无显著行差异(P>0.05)。并与手术后复发与转移相关。结论:联合检测癌胚抗原、角质蛋白21-1及血清P53抗体水平有助于肺部良恶性疾病的诊断;手术前后动态测定肺癌患者血清P53抗体和角质蛋白21-1的变化规律,有助于判断疗效,监测预后和指导肺癌术后的综合治疗。