新型人工红细胞的制备

目的:接枝淀粉包裹血红蛋白制备新型人造红细胞的代替品。方法:利用油酸接枝淀粉,在超声条件下下自组装,包裹天然牛血红蛋白,并鉴定其物理化学及生物学性能。测定包封率、红外光谱分析(FTIR)、电镜观察形态学及粒径,测定P50和Hill系数。结果:人工红细胞呈圆球形,平均粒径250nm,包封率高,具有良好的携氧、释氧能力。结论:成功制备了人工纳米红细胞,为进一步临床应用提供了基础。     

接枝淀粉载体固定化糖化酶的研究

合成了淀粉接枝丙烯腈及烯酰胺的两亲性高分子化合物,并以此为载体,用物理吸附方法固定化了糖化酶,最适偶联条件研究表明：缓冲液的浓度,ＰＨ值及吸附时间和加酶量都对固定化酶活力,比活有一定的影响,有最适固定化条件下,固定化酶的活力为１５００Ｕ／ｇ干胶,蛋白载量为２５ｍｇ／ｇ干胶,比活为６０Ｕ／ｍｇ蛋白,比天然酶的比活提高６倍,最适反应温度比天然酶提高１０℃。无底物存在下,固定化酶在５５℃的半衰期为２４ｈ     

松茸利用淀粉的初步研究

目的：研究松茸在以淀粉为碳源的人工培养基上生长的可能性,初步了解共生菌根真菌松茸离体培养下的营养生长习性。方法：采用改良真菌合成培养基和单因子试验方法,比较了葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、可溶性淀粉和普通玉米淀粉等不同碳源对松茸纯培养菌丝体生长的影响,描述了菌丝体萌动生长速度与菌落扩展的态势,定期收获并称量菌丝体生物量（干重）,然后进行统计分析。结果：当查氏（Czapek）培养基以KNO3为供试氮源,供试碳源是普通玉米淀粉时,移植的松茸菌块萌发菌丝体相对延迟,长势较弱,松茸菌落扩展速度为0.13～0.2mm·d-1之间,生物量积累较少;以NH4Cl为优化氮源,松茸菌落扩展速度提高至0.37mm·d-1,1个月生物量积累27.3mg;进一步添加1‰（W/V）马铃薯汁,菌落扩展速度达到0.63mm·d-1,生物量积累达73.4mg。结论：共生真菌松茸可以利用淀粉作为单一碳源进行营养生长,但菌丝体扩展速度和生长态势较其它供试碳源条件下弱。而普通淀粉经改性加工成可溶性淀粉后,松茸长势有所改善。优化氮源,补充生长因子,则显著促进了松茸利用普通玉米淀粉的生长水平。     

血红蛋白类氧载体研究现状

介绍了目前比较有代表性的几类血红蛋白类氧载体的研究现状,着重介绍了第一代血红蛋白类氧载体存在的氧化性损伤问题和第二代偶联抗氧化酶的血红蛋白类氧载体的发展前景。     

接枝淀粉载体固定化糖化酶的研究

合成了淀粉接枝丙烯腈及丙烯酰胺的两亲性高分子化合物,并以此为载体,用物理吸附方法固定化了糖化酶。最适偶联条件研究表明：缓冲液的浓度,ｐＨ值及吸附时间和加酶量都对固定化酶活力,比活有一定的影响。在最适固定化条件下,固定化酶的活力为１５００Ｕ／ｇ干胶,蛋白载量为２５ｍｇ／ｇ干胶,比活为６０Ｕ／ｍｇ蛋白,比天然酶的比活（８．０Ｕ／ｍｇ蛋白）提高６倍。最适反应温度比天然酶提高１０℃（天然酶最适反应温度为５０℃）．无底物存在下,固定化酶在５５℃的半衰期为２４ｈ,而天然酶只有１ｈ;有底物存在下,固定化酶在５５℃的半衰期为２２０ｈ,４５℃的操作半衰期由外推法算得为６９天,而且该载体对糖化酶有一定的保护作用,当固定化酶在低于５５℃热处理一段时间后,对酶活力有激活作用,酶活力最大可提高４０％。该载体合成简单,固定化方法简单,步骤少,因而为工业上应用提供了一种新的可能性。     

大鼠红细胞作为SOD新型载体的细胞水平上的研究

用低渗透析 -等渗重封的方法制备了包埋超氧化物歧化酶 ( SOD)的大鼠载体红细胞 ,并从细胞水平上研究了透析条件对大鼠红细胞包埋 SOD的影响与载体红细胞的部分性质 .流式细胞计( FCM)研究表明 ,随透析时间延长和透析液渗透压降低 ,包埋 SOD的载体红细胞百分率升高 ,但载体细胞平均包埋 SOD的量无明显变化 ;SOD浓度对载体细胞百分率无明显影响 ,但与载体细胞平均包埋 SOD的量成线性关系 ;载体红细胞前向角散射 ( FLS)明显下降 ,但显微镜下观察到的载体细胞的大小无明显变化 ,当载体细胞反注射到大鼠体内后 FLS能迅速恢复 ;载体红细胞密度下降 ,其原因是低渗透析时红细胞膨胀未能完全恢复 ;载体红细胞未暴露与自身 Ig G结合的抗原位点 .激光扫描共聚焦显微镜 ( LSCM)分析表明 ,SOD在细胞内呈从细胞中心到细胞膜浓度逐步下降的辐射分布特征 .     

猴头菌固体发酵降解玉米淀粉的初步研究

猴头菌在玉米粉培养基上进行固体发酵时能够产生活性较强的α－淀粉酶降解玉米淀粉。添加5％～15％黄豆粉和发酵时间从15d延长到25d能显著提高淀粉酶活力和淀粉降解率。在添加15％黄豆粉,加水40％,25℃发酵25d的玉米粉发酵产物中,淀粉降解率达到65．20％;蛋白质含量达到16．83％;蛋白质中赖氨酸含量由35．96mg／g提高到56．12mg／g,色氨酸含量由9．05mg／g提高到13．25mg／g,从而明显提高了玉米粉的营养价值。     

双囊气压输液袋在失血性休克病人中的应用

目的:评价应用双囊气压输液袋抢救失血性休克病人的疗效.方法:根据纳入/排除标准选择2009年1月至2012年6月收入我科的创伤失血性休克病人40例做为研究对象,分别采用双囊气压输液袋(实验组)或传统注射器配合三通管快速输液(对照组)恢复患者血压,观察和比较两种方法处理的患者输完250 mL液体所需的时间,恢复正常收缩压和正常动脉血氧饱和度的时间,以及连续扩容1000mL后的收缩压值、心率、体温和患者存活率.结果:实验组输注250mL液体所需的时间明显少于对照组(P＜0.01),实验组恢复正常收缩压和正常动脉血氧饱和度的时间少于对照组(P＜0.05),而两组患者在扩容1000 mL后收缩压、心率、体温的平均值的差异无统计学意义(P＞0.05),两组患者的存活率的差异无统计学意义(P＞0.05).结论:应用双囊气压输液袋补液抢救失血性休克病人能更迅速、有效恢复患者的收缩压.     

脱磷脂牛血红蛋白的制备

研究了一种新的脱磷脂血红蛋白制备方法。在2%、5%PEG4000或2%、5%PEG10000作共溶剂的情况下,利用疏水相互作用色谱基本上完全除去了新鲜牛血红细胞裂解液中的磷脂类成分,其中以5%PEG4000为共溶剂时,血红蛋白的回收率最高,达85.0%,在血红蛋白存在下所用的苯基琼脂糖-6B型疏水介质的吸附容量为86.6 mg磷脂/mL介质。经过疏水作用色谱后,血红蛋白的P50是33864Pa,Hill系数是2.54,较好地保存了血红蛋白的生物活性。对疏水作用色谱的脱磷脂机理以及PEG的保护机制进行了讨论。  血红蛋白,疏水作用色谱,PEG,磷脂,共溶剂     

戊二醛聚合对猪、牛和人血红蛋白免疫学特性的影响

猪、牛、人血红蛋白或其相应的戊二醛聚合体分别经皮下或腹腔多次免疫小鼠,ELISA检测抗血清IgG滴度;免疫印迹法分别检测小鼠抗猪、牛、人血红蛋白或其相应的戊二醛聚合体IgG与猪、牛、人血红蛋白或其相应的戊二醛聚合体之间的交叉反应,探讨戊二醛聚合对不同种类血红蛋白免疫学特性的影响.结果表明:猪、牛、人血红蛋白的免疫原性均...     

新型蛋白质修饰剂的合成及修饰牛血红蛋白的初步研究

以L-谷氨酸和己二酸为原料合成了一种新型的四官能团蛋白质修饰剂,并用核磁共振和红外光谱对其结构进行了表征。然后以其为修饰剂,对牛血红蛋白的化学修饰进行了初步的研究,并通过高效液相色谱、聚丙烯酰胺凝胶电泳和血氧分析仪对交联牛血红蛋白的分子量和携氧性能进行了表征。结果表明,该修饰剂可以使牛血红蛋白同时在分子内和分子间发生化学交联,并较好地保持携氧能力（P50:21.7mmHg,Hill系数:2.01）,因此在众多用于开发人工血液代用品的化学修饰剂中该修饰剂具有良好的应用前景。     

Identification and Inhibitory Mechanism of Angiotensin I-Converting Enzyme Inhibitory Peptides Derived from Bovine Hemoglobin

Angiotensin I-converting enzyme (ACE, EC.3.4.15.1) inhibitory peptide is an efficacious therapy for hypertension. In this study, four dipeptides, TY, FD, FL and FG, were identified from the desalted fraction of bovine hemoglobin hydrolysate, obtained by in vitro simulated gastrointestinal digestion, via liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS/MS). The IC₅₀ value of TY and FL are 96.43?±?6.17 and 290.66?±?57.92 μM, respectively. The result of molecular docking indicated that TY occupied the ACE subsite S1 and S1′ with a lowest estimated binding energy of ?9.96 Kcal/mol, while FL occupied the subsite S5 with a lowest estimated binding energy of ?9.37 Kcal/mol. The subsite S1′ and S2′ are closer to the ACE active center (Zn²⁺) than S5, and the lowest estimated binding energy of TY is lower than that of FL. This work provided new ACE-inhibitory peptides derived from bovine hemoglobin hydrolysate and explained their inhibitory mechanism.     

Spectrophotometry of Hemoglobin: Absorption Spectra of Bovine Oxyhemoglobin, Deoxyhemoglobin, Carboxyhemoglobin, and Methemoglobin

The absorptivity at 540 nm of bovine hemiglobincyanide (cyanmethemoglobin) was determined on the basis of the iron content and found to be equal to the established value for human hemiglobincyanide (11.0 L · mmol⁻¹ · cm⁻¹). On this basis the absorption spectra of the common derivatives were determined for bovine hemoglobin. There proved to be only slight differences in the oxyhemoglobin, deoxyhemoglobin, and carboxyhemoglobin spectra between bovine and human hemoglobin. For comparison of the methemoglobin spectra a new series of measurements was made for human hemoglobin. As also found in the rat, the methemoglobin spectrum of bovine blood differed considerably from that in the human. These differences should be taken into account in multicomponent analysis.     

Evaluation of Meloxicam-Loaded Cationic Transfersomes as Transdermal Drug Delivery Carriers

The aim of this study is to develop meloxicam (MX)-loaded cationic transfersomes as skin delivery carriers and to investigate the influence of formulation factors such as cholesterol and cationic surfactants on the physicochemical properties of transfersomes (i.e., particle size, size distribution, droplet surface charge and morphology), entrapment efficiency, stability of formulations and in vitro skin permeation of MX. The transfersomes displayed a spherical structure. Their size, charge, and entrapment efficiency depended on the composition of cholesterol and cationic surfactants in the formulation. Transfersomes provided greater MX skin permeation than conventional liposomes and MX suspensions. The penetration-enhancing mechanism of skin permeation by the vesicles prepared in this study may be due to the vesicle adsorption to and/or fusion with the stratum corneum. Our results suggest that cationic transfersomes may be promising dermal delivery carriers of MX.     

以聚乙二醇为层析伴侣同时制备SOD、过氧化氢酶和血红蛋白

发展了一条从红细胞裂解液中同时制备超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶和血红蛋白的新工艺。采用0 75 %的聚乙二醇600作为层析伴侣,使血红蛋白直接流过阴离子交换层析柱,同时吸附SOD和过氧化氢酶。经过梯度洗脱获得SOD和过氧化氢酶组分,再经过疏水性相互作用层析与凝胶过滤层析相串联,使SOD和过氧化氢酶得到纯化。纯化后的SOD和过氧化氢酶的比活力分别达到15932u/mg和65918u/mg ,血红蛋白的纯度达到99.9%以上。总回收率为:SOD ,47.4% ;过氧化氢酶,29.6% ;血红蛋白,88.7%。     

Bovine Bile Derivative Treatment for Cancer—A Critical Evaluation

Bovine bile derivative, a material reported to be effective in cancer chemotherapy, was administered to 31 patients with malignant disease. In 22 cases the results were considered evaluable. In one of the 22 there was a suggestion of antitumor response. In almost all patients diarrhea and phlebitis developed and in 11 these complications necessitated cessation of therapy.