从辣椒精中分离辣味特制方法的研究

用硅胶柱层析方法从含辣味物质２．４％的黑色辣椒精中分离得到含辣味物质２２．２％的淡褐色辣椒精,从淡褐色辣椒精中分离得到辣味物质的白色晶体．     

羊角椒辣味物质成份分析

用紫外光谱法、红外光谱法和高效液相色谱法分析羊角椒中辣味物质纯度与组成,表明辣味物质由辣椒素、二氢辣椒素和降二氢辣椒素组成。     

辣椒红色素与辣椒碱的提取分离

以干辣椒粉为原料,用95％乙醇作溶剂进行索氏提取,溶剂的用量为原料质量的5倍,减压蒸馏回收溶剂至浸膏状,用石油醚溶解注入硅胶柱。用石油醚：丙酮（V/V）=5：1的复配液为洗脱剂把色素洗脱下来,回收洗脱液,得到深红色油状辣椒红色素产品。留在柱子上的辣椒碱则用75％乙醇作溶剂洗脱下来,去除溶剂,无水乙醚结晶得白色的矩形晶体。     

辣椒子叶原生质体分离条件的研究

以不同基因型的辣椒子叶为供体组织进行辣椒原生质体分离条件的研究,结果表明：幼龄子叶的原生质体产量与活力均高于老龄子叶;酶解过程中酶液渗透压、酶液浓度、酶解时间均对原生质体分离效果产生重要影响。对于辣椒子叶原生质体,最佳分离条件为酶液甘露醇浓度０．５ｍｏｌ／Ｌ,纤维素酶Ｃｅｌｌｕｌａｓｅ Ｏｎｚｕｋａ Ｒ－１０ １．５,果胶酶Ｍａｃｅｒｏｚｙｍｅ Ｒ－１０ ０．６％,酶解时间８－１０ｈ。不同基因型辣     

土壤中辣椒疫霉分离方法的研究与量化测定

从杭州、西安、广州及武汉等辣椒病田分别采集土样 ,室内晾干研碎后 ,用选择性培养基 ,采用土壤稀释平板法和组织诱饵法分离辣椒疫霉 (PhytophthoracapsiciLeonian) ,并对土壤中辣椒疫霉的密度进行量化处理。结果表明 ,利用选择性燕麦培养基 ,采用土壤稀释平板法可分离获得大量的辣椒疫霉菌株 ,而且辣椒连作田的辣椒疫霉菌密度高于轮作田。组织诱饵法试验结果表明 ,辣椒叶片诱集效果最好 ,其次是辣椒果实。     

辣椒根系分泌的潜力化感物质对生菜幼苗抗氧化代谢的影响

以盆栽辣椒为试验材料,采用树脂吸附萃取和气质联用仪测定辣椒根系分泌物,分析、确定其中的疑似化感物质。分别使用6种（0、2、4、8、12、16μg·mL-1）不同浓度的外源潜力化感物质处理生菜种子,通过种子发芽、幼苗生长分析其潜力化感作用,并研究其对生菜幼苗抗氧化代谢的影响。结果表明,2,6-二叔丁基苯酚（2,6-DTBP）、邻苯二甲酸二异丁酯（DIBP）和邻苯二甲酸二丁酯（DBP）为辣椒根系分泌的潜力化感物质,随三种潜力化感物质浓度的增加,生菜幼苗的谷胱甘肽（GSH）含量降低,超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、过氧化物酶（POD）、多酚氧化酶（PPO）和抗坏血酸氧化酶（APx）活性先增加后降低。2,6．DTBP、DIBP和DBP4化感抑制作用的低限浓度分别为4、8、8pg·mL-1,三者通过降低GSH含量而损伤生菜幼苗的抗氧化代谢系统。     

肉桂醛对增强辣椒疫霉病抗性的作用机制研究

该实验以辣椒疫霉菌(Phytophthora capsici)致病性菌株NJ01和‘苏椒5号’辣椒幼苗为研究对象,通过肉桂醛对辣椒疫霉菌的体外抑菌作用、室内侵染效果以及对辣椒幼苗防卫反应的调控作用,揭示肉桂醛对增强辣椒疫霉病抗性的作用机制。结果表明:(1)肉桂醛对实验所用致病性菌株NJ01的抑制中浓度(EC50)值为0.81mmol/L;肉桂醛处理可导致NJ01菌丝严重皱缩、畸形、断裂;PI染色显示NJ01菌丝出现明显的细胞死亡现象。(2)单独NJ01菌株接种的辣椒植株表现出明显病症(茎基部变黑褐色、干枯萎缩,植株倒伏,叶片脱落,生物量下降);而肉桂醛处理2h后接种NJ01菌株的辣椒植株长势良好,无明显病症,鲜重和叶绿素含量显著上升至对照水平。(3)与单独接种NJ01菌株处理相比,肉桂醛处理2h后接种NJ01菌株的辣椒植株体内抗氧化酶(CAT、SOD、POD)活性显著上升,抗氧化物质(GSH和ASA)含量显著增加。研究认为,肉桂醛可能通过抑制辣椒疫霉菌的生长及其对辣椒植株的侵染能力,同时调控辣椒植株防卫反应,进而提高辣椒对疫病抗性。     

大鼠精原干细胞的高效分离和纯化方法

精原干细胞是精子发生的基础,是永久分化成精子的克隆源,它既可以自我更新维持体内干细胞的数量,又可以增殖分化形成各阶段的生精细胞直至成熟精子。本文以22～25日龄Wistar-Iamichi大鼠为研究对象,利用两步酶消化法分离得到睾丸曲细精管细胞悬液,根据精原干细胞与曲细精管细胞悬液中体细胞(支持细胞及少量的管周细胞)及各级分化的生精细胞贴壁能力及对细胞外基质粘附力的不同,将大鼠精原干细胞进行纯化。经纯化后,5只大鼠的睾丸可以得到约3×10~5个精原干细胞,该精原干细胞在体外培养可形成克隆,并且该克隆可表达精原干细胞特异的标记基因GFRα1和CDH1。本文所介绍的高效分离和纯化大鼠精原干细胞的方法,操作简便,且得到的精原干细胞具有很高的活力和增殖能力,该方法为今后大鼠精原干细胞的长期培养及操作研究奠定了基础。     

韭菜精细胞的分离(简报)

分离精细胞是在高等植物中开展离体受精研究的前提之一,也是开展精细胞分子生物学研究的前提 [1,2].对具三胞花粉的植物,精细胞的分离比较容易,将花粉粒直接撒到含一定渗透压的培养基中,花粉粒爆破释放出精细胞.     

产香酵母Pichia myanmarensis LX15的分离纯化及对精酿啤酒风味物质形成的影响

为了适应精酿啤酒对个性化风味的需求,能产生特定风味化合物的产香酵母成为研究者的研究重点。从精酿啤酒原液中分离到1株产香酵母LX15菌,该菌细胞呈圆形或卵圆形、多极芽殖生长;LX15菌在玉米粉培养基上培养7~10 d不形成假菌丝,在酵母膏蛋白胨培养基上培养3 d能够形成子囊孢子。经生理生化特征和系统发育分析,确认该生香酵母为Pichia myanmarensis菌中的一个菌株,所产主要风味化合物包括乙酸乙酯、乙酸异戊酯、己酸乙酯和辛酸乙酯。当LX15菌与啤酒酵母C1菌共发酵时,能够产生协同效应,提高酯类化合物和高级醇类的含量,并与LX15菌的接种比例正相关,但并不影响啤酒酿造的整体发酵速率和发酵能力。因此,LX15菌是一株适于提高精酿啤酒风味的产香酵母菌。     

应用转铁蛋白-Sepharose 4 B亲和层析分离浓集小鼠胎肝CFU-E

本文以人血清转铁蛋白与Sepharose 4B交联制成转铁蛋白-Sepharose 4 B亲和层析凝胶,应用转铁蛋白-Sepharose 4 B亲和柱层析分离浓集小鼠胎肝红系造血祖细胞CFU-E。绝大部分CFU-S和CFU-GM均被转铁蛋白-Seph-arose 4 B亲和柱层析洗脱,且转铁蛋白-Seph-arose 4 B柱层析对CFU-S、CFU-GM无明显浓集作用。大部分BFU-E和几乎所有CFU-E均被吸附在亲和层析柱上;经解离吸附洗脱后,BFU-E和CFU-E浓集倍数分别为6.3倍和9.2倍,由此证明了CFU-E细胞膜表面转铁蛋白受体的高度密集性,为今后以转铁蛋白为分子探针,识别和研究CFU-E提供了实验依据。     

马尾松毛虫性引诱外激素活性组分的柱层析分离

通过低温沉淀,去除马尾松毛虫性外激素粗提油的非活性杂质,将所得的活性上清油分别用葡聚糖凝胶柱和硅胶柱进行柱层析。用触角电位(EAG)技术和林间生物测定方法鉴定柱层析馏份的活性,同时对这些馏份进行了硅胶薄层层析分析。实验结果表明,马尾松毛虫性外激素系统可能是多组分的,最少包括两种成份,其一极性较强,另一则较弱。前者可能具有醇的功能团,因为粗提油皂化后,无论是EAG检测或是林间生物测定都证明具有活性。     

生姜油树脂微囊化的实验研究

用生姜为原料,经连续渗漉抽提的油树脂为心材,以食用胶为壁材,经均质、乳化、喷雾干燥获得生姜油树脂微胶囊,对其主要技术参数测定结果表明:含水率为3.81％,心材包埋率为96.76％,收得率为92.1％。姜油酮含量为1.7285％(WW)。溶剂残留量为4.5ppm。研究中用日立S-450扫描电镜研究了微胶囊的外形结构,未发现微胶囊破裂情况,在姜油酮检测中,用电位滴定法发展和完善了羟胺法。     

凝胶色谱法制备寡糖

采用已知结构的多糖,控制其水解条件,使之产生所需寡糖片断。用聚丙烯酰胺凝胶色谱(BiO-6el P-4)分离,对中性糖可以分离到含十一个糖残基的寡糖。对氨基糖可分离到含七个糖残基的寡糖。用薄层色谱和快原子轰击质谱鉴定了它们的纯度。     

超胶AcA_(34)柱层析法分离提纯人血清IgD

本文用超胶AcA_(34)柱层析法从IgD型骨髓瘤病人血清中分离提纯人血清IgD。经聚丙烯酰胺凝胶电泳、SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳、免疫电泳和免疫双扩散等方法检查其纯度及活性均较满意。这个方法简单方便,时程短,效果好。此外,还用超薄层胶等电聚焦电泳法得到了IgD的等电聚焦图谱,薄层扫描为五条带,等电点在5.4—6.0。     

A PROCEDURE FOR THE PURIFICATION OF BETA-LACTOGLOBULIN FROM BOVINE MILK USING GEL FILTRATION CHROMATOGRAPHY AT LOW pH

A simple and rapid procedure for the purification of beta-lactoglobulin (β-LG) from bovine milk is described. The procedure exploits the major difference in molecular mass of β-LG and other whey components and the existence of the former in monomeric form at acidic pH. Gel filtration of whey was carried out using a Bio-Gel P10 column at pH 3.0. Residual caseins and other milk proteins were excluded from the gel and β-LG and alpha-lactalbumin (α-LA) emerged as two fully resolved peaks. Sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) suggested that β-LG was purified to apparent homogeneity, while absorption, fluorescence, and circular dichroism spectroscopy indicated the native-like conformation of the protein. Western blot analysis revealed that the antibodies raised against the purified β-LG in rabbits also readily react with the commercial bovine protein. This procedure requires only 4–5 hr for the purification of about 10 mg of β-LG from a single run while using a small column (2.3 cm × 83 cm) of Bio-Gel P10 and has the potential for scaling up.     

辣椒素类物质的化学研究进展

本文对国内外在辣椒果实中的辣椒素类(Capsaicinoid)物质化学组成及结构、化学合成及分子结构改造、生物合成及降解代谢、提取与分离方法以及辣椒素类物质的结构鉴定、定性定量分析方法等方面的研究进行了综述。