小麦幼胚培养中的体细胞胚胎发生

小麦品种崇阳红麦和鄂思一号杂种一代幼胚培养具有再生植株的潜力。从一个幼胚经200天左右的连续培养获得530多株再生植株,并从中获得了典型的具有两极性的与愈伤组织块仅局部相连的胚状体。体细胞胚胎发生是小麦幼胚培养的主要途径,但受培养条件的影响,以MS培养基作基本培养基,低浓度2,4-D(0.4mg/1)和水解酪蛋白(1000mg/l)有利于体细胞胚胎发生。     

影响水稻幼穗培养体细胞胚胎发生因素的研究

用水稻幼穗为外植体进行组织培养,研究了影响其体细胞胚胎发生的有关因素,建立了高频率体细胞胚胎发生的培养程序。结果表明不同基因型之间体细胞胚胎发生率的差异达到61．2％;生长素2,4－D对诱导水稻体细胞胚起重要的调控作用,细胞分裂素BA有一定的协同促进作用。干燥处理可提高愈伤组织体细胞胚胎发生率,愈伤组织含水量在60％～80％范围的培养效果较好;外源DNA溶液浸泡发育早期的心状体细胞胚．其进一步发育时异常胚的频率显著增加．成苗率降低。     

玉米幼穗离体培养体细胞胚高频发生的研究

以玉米（Ｚｅａ ｍａｙｓ Ｌ．）幼穗为材料,ＭＳ主基本培养基,诱导体细胞且状体。筛选出了胚状体高频发生的品种;同时实验结果表明：玉米遗传型与胚状体形成有一定的相关性;诱导期２,４－Ｄ浓度对且状体产生十分重要,ＫＴ和６－ＢＡ影响且状体的发生。组织切片观察表明：多数胚状体起源于愈伤组织表层,少数产生于里层;愈伤组织产生且状体是不同步的。     

向日葵的幼胚培养

实验所用的基本培基中以B_5培养基对向日葵幼胚培养为最适。激素萘乙酸主要促进幼胚的胚性生长。吲哚乙酸(IAA)与激动素(KT)的配合使用,对幼胚的分化起明显的调节作用。天然提取物则明显地促进幼胚生长、其中荸荠汁的培养基可使向日葵球形胚进行正常发育。 用两种改良的B_5培养基做胚胎培养系统,使向日葵种间杂交胚生长发育。先将杂交后的心形胚培养在胚胎生长培养基上,进行充分的胚性生长。然后把胚转移到萌发培养基,使其萌发形成幼苗,最后移入土壤直至开花。     

云南松成熟胚的体细胞胚胎的发生研究

云南松（Ｐｉｎｕｓ ｙｕｎｎａｎｅｓｉｓ Ｆｒａｎｃｈ）是我国特产的一种优良森林树种。本研究采用云南松成熟合子胚为起始外植体,在含２,４－Ｄ１０ｍｇ／Ｌ,ＫＴ和ＢＡ各４ｍｇ／Ｌ的改良Ｐ６培养基上得到胚发生培养物。将白色半透明的胚性愈伤组织（含早期原胚）在含２,４－Ｄ１．０ｍｇ／Ｌ,ＫＴ和ＢＡ各０．４ｍｇ／Ｌ的培养基上保持并增殖。在附加９,０００ｍｇ／Ｌ肌醇的高渗培养基（含ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ,ＫＴ     

谷子幼穗培养体细胞胚胎发生的组织学研究

谷子劫穗培养再生植株及体细胞胚胎发生国内已有简报。我们在进行谷子幼穗培养高频率诱导胚性愈伤组织及再生植株的同时,利用组织学、解剖学及扫描电镜方法观察到了谷子幼穗培养中的体细胞胚胎发生,为进一步开展谷子原生质体培养及其抗性突变育种奠定了基础。本文着重报道谷子幼穗培养中体细胞胚胎发生的组织学观察结果。     

马尾松幼胚体细胞胚胎发生研究

本论文首次报道了马尾松（Pinus massoniana Lamb.）幼胚体细胞胚胎发生的完整发育过程,并对影响马尾松胚性愈伤组织诱导的因素如球果采种期、球果冷藏处理时间、外植体处理方式等进行了探讨,统计胚性愈伤组织诱导率,进行增殖评价,探讨ABA浓度梯度对马尾松体细胞胚分化成熟的影响,试验数据用SPSS16统计分析软件进行方差分析、差异显著性检验。结果表明：1）2008~2009连续2年内15个采种期得到的幼胚,胚性愈伤组织诱导和增殖有显著性差异,最适宜的马尾松球果采种期是6月下旬至7月下旬,诱导率在9.66%~22.59%之间;2）球果冷藏处理时间,对胚性愈伤组织诱导有显著性差异,其中4℃冷藏球果15d有利于幼胚胚性愈伤组织诱导;3）雌配子体包含幼胚的接种处理方式是可取的;4）胚性愈伤组织经稳定增殖培养后,转入分化成熟培养基,得到体细胞胚状体＂爆发式＂分化成熟,数量多,质量好。适宜体胚成熟转化的培养基为：成熟LP培养基添加ABA5.0mg·L-1＋60.0g·L-1蔗糖,并附加L-谷氨酰胺和水解酪蛋白;5）成熟体细胞胚在无激素萌发型LP培养基上正常萌发,并转化为结构完整的小植株。本研究首次建立了马尾松幼胚体细胞胚胎发生技术平台,为马尾松遗传改良种质创新、缩短育种周期奠定了研究基础。     

小麦体细胞胚发生的超微结构研究

对小麦（Ｔｒｉｔｉｃｕｍ ａｅｓｔｉｖｕｍ Ｌ．）幼胚培养中体细胞胚发生过程的超微结构变化进行了研究,结果如下：（１）原体细胞中大液泡消失,存在大量小液泡,细胞质的电子密度加强,核大,核仁明显,出现多核仁;（２）细胞器数量和种类,如质体、核糖体和线粒体增加;（３）细胞壁加厚,胞间连丝逐渐消失,细胞器数量丰富,胚性细胞中积累淀粉;（４）细胞壁加厚的胚性细胞中存在核仁液泡、自体吞噬泡和分泌泡;（５）多细胞原胚、球形胚和梨形胚被一层外壁包围,但胚体内细胞间广泛存在胞间连丝;（６）成熟胚生长点部位的细胞内质体中出现膜系结构,已向叶绿体转变,类囊体已形成     

大豆体细胞胚胎发生影响因素的研究

研究了影响大豆幼胚培养体细胞胚胎发生频率的9个因素。诱导体细胞胚胎发生的适宜幼胚长度为4mm;随着供俸植株发育阶段的提高诱导频率下降;最适基本培养基为 MS 培养基;蔗糖浓度从1.5%提高到9%,诱导频率逐渐下降;过高的维生素 B_1浓度对胚胎发生不利;2,4-D 的诱导效果优于 NAA,适宜的2,4-D 浓度为20ppm;光、暗处理与生长素种类和浓度之间存在交互作用;接种方式对诱导频率影响很大,体细胞胚只在下表皮与培养基接触的幼子叶的上表皮上产生,当上表皮与培养基接触时,两个表皮都不能产生体细胞胚;被试的所有基因型都能被诱导胚胎发生,不同基因型的诱导频率存在差异。     

防风悬浮培养中的体细胞胚发生

将防风（Ｓａｐｏｓｈｎｉｋｏｖｉａ ｄｉｖａｒｉｃａｔａ （Ｔｕｒｃｚ．） Ｓｃｈｉｓｃｈｋ．）试管苗幼根接种在含０．５ ｍ ｇ／Ｌ ２,４－Ｄ 的ＭＳ培养基上诱导出愈伤组织,继而在含１０％ 椰子乳和０．５ ｍ ｇ／Ｌ ２,４－Ｄ的ＭＳ液体培养基中振荡分散建立了细胞悬浮物。至胚性细胞团产生后转至无激素培养基中形成体细胞胚。观察了从单细胞直到球形胚发生的显微及超微结构的变化。在胚性细胞团阶段细胞内出现周质内质网,它的出现可能与细胞团向原胚过渡时的特殊代谢相联系。从单细胞至原胚各阶段细胞内均含有圆球体,到原胚时数量大增,而且其中央电子致密的基质变小变浅,周边部分扩大并更加透明,暗示圆球体在胚胎发生早期起着贮藏蛋白或脂蛋白的作用,后来消耗于原胚的建成而衍生为脂滴。球形胚阶段,在很多细胞的液泡中出现团块状的液泡蛋白。此外还观察到,悬浮培养时单细胞的聚集能促进体细胞胚的发生     

悬浮培养中旱芹体细胞胚发生的工艺条件研究

以旱芹 (Apium graveolens L.)下胚轴切段 (5～ 1 0 mm )为外植体 ,在 MS 1 .0 mg/L 2 ,4- D培养基中诱导愈伤组织 ,经几次固体—液体交替培养筛选后 ,将此胚性愈伤组织接种于 MS液体分化培养基(MS 0 .5mg/L KT 50 0 mg/L CH 50 0 mg/L Prolin)中 ,就摇床转速、接种量、初始 p H的调控等工艺条件对体细胞胚诱导的最佳条件进行了研究。结果表明 ,较佳的培养条件为 :摇床转速 1 0 0～ 1 50r/min;初始细胞密度和 p H分别为 2 .0 % (鲜重 )及 5.5左右。最后获得正常子叶期体细胞胚数为 1 30个 /m L。     

烯效唑在小麦幼胚培养中的应用

试验结果表明低浓度烯效唑有促进远缘杂交幼胚再生植株生长的作用,高浓度儿唑有抑制作用。附加２．５ｍｇ／Ｌ烯效唑和２％蔗糖的１／２ＭＳ培养基壮苗效果显著,当烯效唑浓度提高到５．０ｍｇ／Ｌ时,植株变矮,但根系发达,结合低温保存,可使幼胚再生植株顺利越夏,移栽时成活率达９６．９％。不同基因型的幼胚再生植株对烯效唑反应无明显差异。     

香雪兰的直接与间接体细胞胚胎发生

香雪兰的体细胞胚胎发生可通过两种途径进行,即直接发生与间接发生。在直接发生方式中,体细胞胚直接来源于尚未完全分化的外植体表皮细胞;体细胞胚与母体组织以一种类似胚柄的结构相联系。间接发生方式中,体细胞胚的形成要经过一个愈伤组织阶段。以是否能形成体细胞胚分类,可将愈伤组织分为胚性和非胚性愈伤组织。以间接方式形成的体细胞胚是由胚性愈伤组织中的一种决定细胞发育来的。这种体细胞胚不具有类似胚柄的结构,而与母体组织共同形成一个复合体。体细胞胚具有自己独立的维管束系统,在脱离母体组织后能够独立发育成株。     

大豆体细胞胚系培养及其微卫星DNA稳定性研究(简报)

植物离体培养是植物基因操作中的重要一环,也是植物个体发育研究中基因表达研究的有益参考体系。在继代培养过程中发生的遗传变异有时会使再生植株丧失优良的性状而需加以控制和避免。为此,首先需要了解培养过程中的遗传变异情况。