产花生四烯酸油脂高山被孢霉干法造粒提油及菌粕的重复利用

对高产花生四烯酸油脂高山被孢霉干法造粒提油工艺中3个参数及菌粕重复利用进行研究。设计三因素四水平L16(43)正交试验,考察造粒直径、正己烷与菌粕的比例、萃取时间对提油效率及正己烷回收率的影响。结果表明:当含水率20%~25%、造粒直径1.2mm、正己烷的体积与颗粒的质量比20∶1L/g、萃取时间5h时,每克干菌体油脂得率0.5594g,正己烷的回收率达90%。与均质湿法提油相比,分别提高了17.35%和83.67%。用碱性蛋白酶及复合酶(纤维素酶、果胶酶和碱性蛋白酶)处理菌粕,以50%替代氮源(酵母膏)添加到培养基中,发酵周期分别为10d和7d。此时,生物量、油脂产量、花生四烯酸产量都达到了最大值,分别为30.33g/L、16.25g/L、8.59g/L(碱性蛋白酶处理);29.77g/L、16.89g/L、7.12g/L(复合酶处理)。其中,复合酶处理菌粕的生产强度可达4.253g/(L·d)、2.413g/(L·d)和1.017g/(L·d),与碱性蛋白酶处理相比,其生产强度分别提高了40.22%、48.49%和18.39%。干法造粒提油是有效的,且酶法处理菌粕的方法有应用前景。     

食用菌调味品造粒工艺研究

应用压力成型法、搅拌法和沸腾法对食用菌调味品进行造粒,并对制成的颗粒的成型率、颗粒外观、粒度分布、吸湿性和流动性等有关指标进行评价和比较。结果表明,造粒后颗粒成型率达到90%以上,临界相对湿度达到53%以上,比粉状原料防潮性能更强。压力成型法所制颗粒的成型率、吸湿性和流动性均为最好,在3种造粒方法中最适于食用菌调味品的造粒生产。     

干法造粒工艺在微生态活菌片剂生产中的应用研究

目的为降低生产成本,保证产品质量,研究干法造粒工艺在微生态活菌片剂生产中的应用。方法测定三批干法造粒和粉末直接压片技术获得的片剂的理化指标和贮藏期间活菌数。结果干法造粒工艺生产的片剂其片重、硬度、崩解时限和干燥失重均符合生产质量要求,且提高了产品的贮藏稳定性。结论干法造粒工艺更适用于微生态活菌片剂生产。     

双酶法制备螺旋藻多肽的工艺研究

选用碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶结合的双酶法对螺旋藻蛋白进行水解。其中,对木瓜蛋白酶水解螺旋藻蛋白的工艺进行优化。以水解度为指标,研究了酶解时间、酶与底物比、pH和酶解温度4种因素对酶解反应的影响。在此基础上设计了3因素(加酶量、酶解温度和pH)3水平的响应面试验。结果表明碱性蛋白酶水解螺旋藻蛋白的最佳酶解条件为:加酶量4300 U/g,pH 7.0,酶解温度55℃,酶解时间160 min;木瓜蛋白酶的最佳酶解条件为:酶底比为4.5%,酶解温度60℃,pH 6.5,酶解时间210 min。利用碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶结合的双酶法制得的多肽水解度可达32.90%,与单酶法相比,水解度明显提高。     

壶瓶枣干燥预处理及提取工艺对其多糖得率的影响

本文考察了不同的干燥预处理手段(烘箱干燥和真空冷冻干燥)及减压内部沸腾法中各因素(真空度、温度、液料比和提取时间等)对壶瓶枣多糖及蛋白质得率的影响。实验结果表明:干燥方式对原料枣粉的色差和多糖、蛋白质含量均有显著影响,对含水量无明显影响;真空冷冻干燥所得的枣粉色差小、多糖含量高、蛋白质含量低,综合考虑,选用真空冷冻干燥作为原料预处理手段;减压内部沸腾法最佳工艺参数为体系内温度60℃,液料比50∶1(mL∶g),提取时间30 min,此时外界温度为71℃,真空度为80 kPa,此条件下多糖及蛋白质得率分别为26.05 mg/g和2.14 mg/g;与传统热浸提相比,有效物质多糖得率提高了16.66%。     

响应面法优化蚕豆蛋白酶解工艺条件的研究

考察了碱性蛋白酶、胰蛋白酶和中性蛋白酶对蚕豆蛋白的酶解效果,探讨了水解度（DH）与酶解产物抗氧化活性间的关系。通过单因素试验和响应面分析法,得到碱性蛋白酶酶解工艺的最佳条件。结果表明,温度50℃、pH8.0、酶底比8%、底物浓度3%条件下酶解3h,水解度0~22%内,碱性蛋白酶较胰蛋白酶和中性蛋白酶水解蚕豆蛋白效果好;DH与还原能力（R2=0.68~0.81）及ABTS清除能力（R2=0.98~0.99）具有较好的相关性,碱性蛋白酶酶解液较其他2个酶解液有较好的还原能力和ABTS清除能力;优化后的最佳酶解工艺参数为：酶底比8%,温度50℃、pH 7.6,对蚕豆蛋白还原能力的影响顺序为酶底比＞pH＞温度;在此条件下,蚕豆蛋白酶解液的还原能力理论值为0.174,验证试验测得还原能力为0.173,与理论值接近。     

风味酶控结合乳化修饰技术制备多肽脱苦豆乳（粉）工艺

基于传统湿法制备豆乳（粉）工艺基础,采用连续密闭蒸煮浓缩、麦芽糊精/β-环糊精乳化及风味蛋白酶低限制性酶解风味修饰处理技术制备多肽脱苦强化型豆乳（粉）,研究风味修饰联控技术制备工艺对豆乳（粉）中多肽得率、苦味值的影响,并确定最佳加工工艺。采用响应面优化分析法对低酶—风味修饰联控制备多肽脱苦豆乳（粉）工艺进行优化,确定最佳工艺参数为风味蛋白酶添加量0.5%、限制性酶解时间18 min、麦芽糊精与β-环糊精添加量比值为2.5∶1、麦芽糊精与β-环糊精总添加量为16%,此条件下多肽得率达到最高为10.21%,并消除豆乳苦味。通过各理化性质发现,风味蛋白酶酶解修饰与麦芽糊精/β-环糊精乳化修饰具有协同作用。     

产业动向

<正>中科院研发出明胶制备用新型蛋白酶及配套工艺中国科学院天津工业生物技术研究所通过对土壤样品宏基因组测序,发现一个能够用于明胶制备的新型蛋白酶,并以该酶为基础对蛋白酶法制备明胶工艺进行了优化。该研究使用具有自主知识产权的蛋白酶制备明胶,实现了化学工艺的生物法替代,将传统骨明胶碱法制备工艺简化为酸-酶     

响应面法优化重组毕赤酵母表达米曲霉碱性蛋白酶诱导条件的研究

为探索重组米曲霉碱性蛋白酶（rAlp）在毕赤酵母中表达的最佳诱导条件,本研究在单因子实验的基础上,运用Box-Behnken设计的响应面试验对诱导条件进行了优化。根据回归分析确定了影响rAlp表达的因子,求得最佳诱导条件为：诱导温度28．53℃,诱导pH6．63,甲醇浓度1．28％。此工艺条件下碱性蛋白酶活力实测值为49．78U／mL,回归模型的预测值与实测值的相对误差〈1％,说明该回归方程与实际情况拟合很好。     

海藻酸钠包埋法制备固定化菠萝蛋白酶

以海藻酸钠为载体,包埋法固定菠萝蛋白酶,对固定化奈件进行优化,同时探讨固定化菠萝蛋白酶的部分酶学性能。结果表明：固定化菠萝蛋白酶的质量受海藻酸钠质量分数、固定化酶量、固定化时间以及CaCl2质量分数的影响,其最佳固定化条件为：海藻酸钠质量分数1．0％,CaCl2质量分数3％,固定化酶液量与海藻酸钠体积之比1：2,固定化时间60min,在此条件下,制备的固定化菠萝蛋白酶的比活力为211．8U／g（湿质量载体）,由此制得的固定化酶的最适pH为7．6,与游离酶相比,升高了0．8个pH单位,同时显示固定化菠萝蛋白酶能耐受较高的碱性环境,固定化酶最适温度与游离酶相同,均为50℃,固定化酶在较高温度范围内,仍能保持较高的相对活力。     

一种新型蛋白酶的酶学特性及脱毛应用

蛋白酶可作为清洁化产品应用在制革脱毛工艺,旨在明确枯草工程菌株WB800N/p HT43-npr发酵生产重组中性蛋白酶(JW-3蛋白酶)的脱毛效果及脱毛工艺条件,为清洁化脱毛制革工艺提供技术参考。研究了JW-3蛋白酶的热稳定性、pH耐受性,金属离子及化学试剂对酶活力的影响,酶解胶原蛋白的能力,同时对酶法与传统灰碱法黄牛皮脱毛效果进行评价。结果显示,JW-3蛋白酶的耐高温能力差,40℃保存1 h酶活力便开始衰减;在pH6、pH7稳定性良好;Ca~(2+)、Mn~(2+)对酶活力有激活作用;在表面活性剂Triton X-100、Tween20、Tween80中稳定;JW-3蛋白酶不具有水解胶原蛋白的能力,与传统灰碱法脱毛的皮粒面效果相当,且可以回收完整的动物毛发再利用。JW-3酶法可替代灰碱法脱毛实现清洁化脱毛制革工艺。     

酸性蛋白酶处理羊毛染色新工艺

迄今为止,羊毛染色一直是采用高温长时间蒸煮的方法,因而染色后的羊毛强度受到一定损害。为了改进羊毛染色工艺,我们在以前有关利用植物蛋白酶(菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶、无花果蛋白酶)预处理羊毛进行低温染色的报道启发下,进行了霉菌酸性蛋白酶处理羊毛低温染色的试验。结果表明:羊毛通过微生物酸性蛋白酶预处理进行染色缩短了高温处理时间,降低了纺纱断头率,提高了毛纱强度,用于提花毛毯的生产;较老工艺产品质量显著提高,利于节省煤电、提高劳动生产效率。比使用植物蛋白酶酶源丰富、成本低廉。     

AS1.398蛋白酶液体制剂的研究

国内蛋白酶制剂一般均为固体剂型,生产过程需用大量硫酸铵,因而限制了它的应用。而蛋白酶液体制剂。是在酶液中加入防腐剂与稳定剂,使蛋白酶液体制剂在较长时间内不变质,并较少失活。所以蛋白酶液体制剂具有工艺简单、效率较高的优点。本文就ASI.398蛋白酶液体制剂的防腐稳定剂的筛选、不同pH值、温度等条件对酶活的影响作了初步研究。报道如下:     

一种快速、经济提取外周凝血基因组DNA方法的建立

目的：建立一种经济、快速且高质量提取人体外周凝血DNA的方法。方法：摸索最佳的匀浆条件,对外周凝血块进行匀浆,采用Ⅺ法对匀浆液进行基因组DNA的提取,通过凝胶电泳、单重PCR和多重PCR检测凝血基因组DNA的提取产量和质量。并分别与常规的凝血基因组DNA提取方法,即蛋白酶K消化法,以及提取抗凝血基因组DNA的Ⅺ法进行比较分析。结果：最佳的匀浆条件为：39000map,15秒。在此条件下提取的基因组DNA完整性好,纯度和产量与蛋白酶K消化法提取凝血DNA和KI法提取抗凝血DNA的结果相比,没有统计学差异。单重PCR和多重PCR也获得了理想的扩增结果。结论：与常规的外周凝血提取方法相比（蛋白酶K消化法）,本方法节省了时间和成本,能快速、经济、有效地提取外周凝血基因组DNA,可用于后续的科研和临床诊断需要,解决了部分科研机构血液基因组DNA的样本来源问题。     

一种快速、经济提取外周凝血基因组DNA 方法的建立

目的:建立一种经济、快速且高质量提取人体外周凝血DNA的方法。方法:摸索最佳的匀浆条件,对外周凝血块进行匀浆,采用KI法对匀浆液进行基因组DNA的提取,通过凝胶电泳、单重PCR和多重PCR检测凝血基因组DNA的提取产量和质量,并分别与常规的凝血基因组DNA提取方法,即蛋白酶K消化法,以及提取抗凝血基因组DNA的KI法进行比较分析。结果:最佳的匀浆条件为:39000 rmp,15秒。在此条件下提取的基因组DNA完整性好,纯度和产量与蛋白酶K消化法提取凝血DNA和KI法提取抗凝血DNA的结果相比,没有统计学差异。单重PCR和多重PCR也获得了理想的扩增结果。结论:与常规的外周凝血提取方法相比(蛋白酶K消化法),本方法节省了时间和成本,能快速、经济、有效地提取外周凝血基因组DNA,可用于后续的科研和临床诊断需要,解决了部分科研机构血液基因组DNA的样本来源问题。     

地衣芽抱杆菌C碱性蛋白酶基因在枯草芽抱杆菌中的克隆及表达

本文采用DNA重组技术,用鸟枪法克隆获得地衣芽抱杆菌C1213碱性蛋白酶基因。对胞外蛋白酶 酶活测定表明,此基因在枯草芽抱杆菌中获得表达及分泌。用SDS-聚丙烯酚胺凝胶电泳法测定其胞外 蛋白质分子量,得知此基因产物与C1213碱性蛋白酶分子量相同。用酶切和琼脂糖凝胶电泳法确定了所 克隆DNA片段的物理图谱,并确定其大小为2.3kb     

烟田中静电喷雾和电动喷雾下噻虫嗪的防效及对昆虫群落的影响

【目的】探明静电喷雾与电动喷雾对噻虫嗪防治害虫效果及烟田昆虫群落的影响,为静电喷雾在烟草上的推广应用提供理论依据。【方法】利用静电喷雾与电动喷雾法喷施0.66 g·L~(-1)25%噻虫嗪水分散粒剂,施药1、3、7 d后,测定2种方法对烟蚜与斜纹夜蛾的防治效果、在烟株与土壤中的沉积以及对昆虫群落的影响。【结果】喷施25%噻虫嗪水分散粒剂1、3、7 d后,静电喷雾对烟蚜和斜纹夜蛾的防治效果均显著高于电动喷雾的防治效果,且防治效果均随时间的推移而升高。噻虫嗪在静电喷雾处理区烟叶上的沉积量高于电动喷雾处理区烟叶上的沉积量,而在静电喷雾处理区土壤中的沉积量低于电动喷雾处理区土壤中的沉积量,且都随时间的推移而降低。静电喷雾与电动喷雾均引起烟田昆虫群落的变化,静电喷雾引起的害虫和中性昆虫的数量变化大于电动喷雾,但天敌昆虫的数量变化小于电动喷雾,且静电喷雾区烟田的物种丰富度明显高于电动喷雾区,可见静电喷雾施药对烟田昆虫群落的影响小于电动喷雾施药。静电喷雾的S_t/S_i与S_n/S_p比值明显高于电动喷雾,说明静电喷雾烟田中昆虫群落稳定性高于电动喷雾烟田中昆虫群落的稳定性。【结论】相比电动喷雾,静电喷雾能够提高噻虫嗪在烟叶上的沉积量,从而提高噻虫嗪对害虫的防治效果,同时减少噻虫嗪在土壤中的沉积量,提高噻虫嗪的生态安全性,因此,静电喷雾在烟草病虫害防治上具有较好的应用前景。     

细菌及支原体的IgA1蛋白酶

有些致病菌能分泌ＩｇＡ１蛋白酶,此酶能特异地将ＩｇＡ１分子降解成完整的Ｆａｂ段与Ｆｅ段,尽科这同细菌的ＩｇＡ１蛋白酶在生化特性上各不相同,但在各自的栈分子障敢存在相同的抗原表位。细菌基因组间水平性遗传交换导致的ＩｇＡ１蛋白酶基因的特殊的镶嵌结构是产生该蛋白酶抗原性存在差异的遗传基础。本文对细菌ＩｇＡ１蛋白酶及其人基因特点和此酶在感染中可能作用方面的研究答一综述。     

耐热芽孢杆菌高温中性蛋白酶制备工艺研究

为使耐热芽孢杆菌(Thermophilic Bacillus)XJT9503高温中性蛋白酶产业化并在生产中应用,对XJT9503高温中性蛋白酶的制备工艺进行了研究.结果表明,可采用加热真空薄膜浓缩,在40℃,-0.094～-0.096MPa真空度下,经过45～55min浓缩,可使发酵处理液浓缩2～3倍,其酶活力仅损失10%左右.确定了采用喷雾干燥法生产固体酶制剂的最优工艺条件进口温度170℃、出口温度75℃、流量30kg*h-1.在此条件下,酶得率为68%.对固体酶与液体酶保存期稳定性的测定结果表明,固体酶的保存效果远比液体酶好,当保存210d时,固体酶制剂的酶活损失仅为2～8%.     

1398中性蛋白酶的色谱柱纯化与分子鉴定

1398食品级蛋白酶是一种由枯草芽胞杆菌1398发酵产生的用于食品加工处理的中性蛋白酶。目前国内生产工艺制取的固体酶制剂存在菌体未分离、产品颜色深、酸臭味大等缺点。本文以开发无色无臭的液体蛋白酶制剂为目的,对蛋白酶的发酵后提取、纯化工艺等进行了深入研究,分别考察了离子交换树脂层析和工业级大孔树脂对发酵液中1398中性蛋白酶的分离纯化效果,对纯化后的蛋白酶进行了Maldi-Tof质谱分析,并对编码该蛋白酶的基因进行了测序和序列分析,为进一步利用基因工程重组技术生产该蛋白酶奠定了研究基础。