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《生物技术通报》1993,(3)
930884 。I组人y一干扰素的生产,提纯和曩.性亡会,裘]/Zhang,Z.…l j.Chromotogr.·1992,604(1).-143~155[译自DBA,1992,11(17),92-096633 发展了由含质粒pBV220/IFN-y的重组大肠杆菌DHs-a内含体捉纯人重组y一干扰素的三步提纯法;在SS—Sepharose FF‘上进行阳离子交换层析,在XKl6上进行固定化镍金属蟹合亲和层析和用Superdex75凝胶过滤层析。将y一干扰素cDNA插入到pRpL,启动子和CltsS57调节基因下游,以进行人重组',一干扰素的温度诱导表达。复性的人重组,,一千扰素混浊液的分批式吸附使澄清时不需高速离心并可除去70%的不纯蛋… 相似文献
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以感染肾综合征出血热病毒(HFRSV)的Vero E6细胞为材料,用免疫亲和层析结合制备聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)从感染细胞中提纯了HFRSV两种糖蛋白。先用免疫亲和层析从感染细胞的粗制抗原中获得含有四种蛋白的混合液,用[~3H]-氨基葡萄糖在感染细胞中标记病毒糖蛋白,观察到[~3H]-氨基葡萄糖只结合入78K和57K的病毒蛋白。再用制备SDS-PAGE从HFRSV混合液中提纯78K和57K两种蛋白。实验证明这两种糖蛋白均具中和抗原决定簇,57K的糖蛋白尚具血凝活性,初步鉴定表明这两种糖蛋白相当于文献报道的HFRSV G_1和G_2。 相似文献
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《生物技术通报》1992,(7)
922472 从人21染色体构建并鉴定酵母人工染色体部分文库[英]/Bellis,M.…∥DNA Cell Biol.-1991,10(4).-301~310[译自DBA,1992,11(1),92-00024] 构建酵母人工染色体(YAC)的一般方法是:琼脂糖制备DNA、EcoRI部分酶切、脉冲电场凝胶电泳(PFGE)对片段大小的筛选、反向电场电洗脱(field-inversion electroelution)、连接、用PFGE选择大小并消除未连接载体、洗脱、转化酿酒酵母、铺板于ura~-、trp~-培养基上、复印到尼尤膜上、筛选人源克隆。以体细胞杂交系WA-17(人源部分只有21染色体)在质粒pYAC4中 相似文献
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利用重组大肠杆菌产聚-4-羟基T酸的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
重组大肠杆菌E.coli XL-1 Blue(pKSSE5.3)携带Ralstonia eutropha H16的PHA聚合酶基因(phaC)和Clostridium kluyveri的4-羟基丁酸:CoA转移酶基因(orfZ),可以利用葡萄糖和4-羧基丁酸为碳源合成均聚的聚4-羧基丁酸[P(4HB)]。优化培养基和培养条件后,进行了补料分批培养。结果表明,经68h左右培养,E.coli XL-1 Blue(pKSSE5.3)的发酵液中菌体干重达13g/L,P(4HB)的密度达5g/L,P(4HB)百分含量为36%。从收获的冻干细胞中提纯得到40g均聚的P(4HB),为进一步分析检测P(4HB)生物、理化、加工特性及其应用价值成为可能。 相似文献
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《生物技术通报》1993,(3)
950897 用微孔纤维超滤胰透滤法提纯I组乙型肝炎表面扰原[英~/Chai,X.J.…/Bioteehn01.Tech.一1992,6(4).一381~384[译内DBA,1992,11(17),92-09670J 用分子置100kDa的聚砜超滤型檄孔纤维琰(HFM)透滤法,由重组中国仓鼠卵母细胞培养液提取重组乙型肝炎病毒表面抗原(HBVsAg)。用0.1%胰蛋白酶或胃蛋白酶于37℃预处理培养液24tb时,除去大部分污染蛋白,得到很高收率的HBVsAg。在饲液中的蛋白浓度为2.5mg/ml,其中HBVsAg的浓度为1.5%。饲液的体积为Z10ml,透过膜的压降(PD)为0.08MPa,温度为室温,浓缩液的流速与渗透之比为10 t 1。当用… 相似文献
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亲和层析法分离纯化猪肺血管紧张素转换酶 总被引:2,自引:0,他引:2
亲和胶合成实验以双环氧化合物1,4-丁二醇-2-缩水甘油醚(1,4-butanediol diglycidyl ether)为活化体及连接臂,在硼氢化钠(NaBH)存在的碱性条件下,将载体Sepharose CL―4B与雷诺普利(lisinopril)共价连接在一起,成功合成亲和层析胶,并利用亲和层析胶对猪肺血管紧张素转换酶(angiotensin converting enzyme, ACE)进行分离提纯.猪肺组织匀浆经1.6~2.6 mol/L硫酸铵分级沉淀、透析平衡、亲和柱分离等步骤,从200 g猪肺中提纯得到0.79 mg ACE蛋白,酶活力回收11.9%,比活力38.8 U/mg.与层析前的酶液比较,亲和层析一步提纯可达264倍;与肺匀浆液比较提纯达808倍.SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳可见,提纯的猪肺ACE为一条带,分子质量约为180 ku. 相似文献
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范丙基 《氨基酸和生物资源》1980,(2):40-43
<正> 1.从DL-赖氨酰胺原料提纯赖氨酸将待提纯的DL-赖氨酰胺原料,在20-40℃条件下,溶入C_1~C_5的低级醇类或乙醚中,使之与CO_2(或HCl、或HBr)形成难溶性的加合物。滤出,再以HCl处理,可得到纯度为98~99%的产品。回收率可达94~96%。[Allied chem,美国专利,3,819,699,(6/25/74)] 2.从含有仲胺和叔胺的赖氨酸水溶液中提纯赖氨酸 相似文献
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从黑曲霉Aspergillus niger,发酵液中分离提纯了β-葡萄糖苷酶。提纯步骤通过(NH4)2SO4分级沉淀,DEAE-Sephadex A-50和Sephadex G-100等三步纯化,得到凝胶电泳均一的β-葡萄糖苷酶。该酶的最适pH4.5,最适温度60℃,Km为0.44(pNPG),并有较好的热稳定性。用SDS-凝胶电泳法和凝胶色谱法测得该酶的分子量为120 000。 相似文献
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