酒精用于辨别果蝇雌雄性状的尝试

果蝇性状观察实验是遗传学果蝇系列实验成功的关键。在正确观察果蝇雌雄性状的基础上,成功地挑选处女蝇,才能确保果蝇杂交实验的顺利进行。本实验尝试用75％酒精作药品来致死果蝇进行观察,相比较发现观察果蝇雌雄性状效果更好,而且相对更加环保、经济。     

果蝇整体装片

果蝇是遗传学最好的实验材料之一。为解决果蝇观察问题,我们使用了一种方便的果蝇整体装片方法,经二年多存放和观察证明方法简单、效果可靠,值得介绍给老师和同学一试。其方法是先取相应性状的活果蝇(如红眼灰身的雄果蝇和雌果蝇、白眼雄果蝇和雌果蝇、残翅雄果蝇和雌果蝇……)用乙醚麻醉。麻醉方法是将一乙醚棉球放入培养果蝇的培养瓶中,盖上棉塞,一、二分钟即可麻醉(如无乙醚可用少量二甲苯或酒精“麻醉”),在东北地区的冬季放在室外片刻亦可冻昏,置电冰箱冰盒中冷冻片刻亦可。如用乙醚麻醉,最好是待果蝇将醒能     

果蝇的采集和饲养管理

采集 用以观察染色体的果蝇,可在实验前进行诱捕。在温暖季节尤其在初秋,在果皮或腐烂水果堆积处可见到成群果蝇。用瓶内放置有果皮的广口瓶置于阳台或室外墙边蔽阴处。不长时间即有果蝇飞入瓶中。用硬纸片盖住瓶口,用乙醚将果蝇麻醉．倒出后可鉴别性别,然后移入培养瓶进行培养。     

生活中潜在诱变剂对果蝇存活率及遗传变异的影响

用紫外线、抗氧化剂、化妆品等多种生活中潜在的诱变剂处理野生型黑腹果蝇,观察果蝇的存活率及性状遗传变异情况,进而分析这些诱变剂对于果蝇的影响。实验结果表明,随紫外线照射时间的增加,果蝇生活力降低,子代果蝇突变率增加;随培养基中抗氧化剂浓度的增加,果蝇突变率与死亡率均呈上升趋势;不同化妆品也对果蝇造成了明显伤害,造成亲代个体死亡,后代出现突变型果蝇。     

果蝇唾腺染色体观察材料的制备

选择夜间气候为南风、多云、20～28℃的条件下,用香蕉培养基引诱、采集果蝇.室内或恒温箱中培养12 d,取野外果蝇三龄幼虫替代实验室长期饲养的果蝇幼虫,制作果蝇唾腺染色体.经剥离、解离、染色、压片,观察到比实验室饲养的果蝇染色体较大、个体更清楚的片子.     

用改良苯酚品红染色液替代醋酸洋红染色液的研究

以往在动物遗传学实验“果蝇唾液腺染色体标本的制作和观察”中,采用醋酸洋红染色液对染色体染色。本文对用改良苯酚品红染色液替代醋酸洋红染色液对果蝇唾液腺染色体染色的问题进行了研究。结果表明,改良苯酚品红染色液对果蝇唾液腺染色体的染色效果与醋酸染洋红染色液的染色效果是相同的。而且用改良苯酚品红染色液还人提高工效,简易节约的优点。因此认为,在对果蝇唾液腺染色体染色中,用改良苯酚品红染色液替代酸酸洋红染色液     

果蝇纯系繁育的初步研究

为探究果蝇的纯系繁育,选用处女蝇,利用玉米培养基对6个纯系果蝇进行纯系繁育实验,判断果蝇纯系繁育过程中是否出现群体退化现象并有无突变发生,为纯系果蝇的长期保存提供参考。实验中使用玉米培养基进行培养并观察记录果蝇生活史以及产卵数量。观察到果蝇生活周期无明显变化,产卵数目稳定,没有发生群体退化和突变现象。     

用“增强子陷阱”技术构造并筛选果蝇UAS/GAL4系统中GAL4新品系及脑基因表达图谱数据库的开发

"增强子陷阱"技术是建立果蝇脑全基因组表达图谱及其数据库的重要方法.筛选获得新特异表达的GAL4品系,可为进一步研究果蝇脑神经在学习记忆功能提供强有力的基因工具.通过"增强子陷阱"技术来获得果蝇突变体,并与报告转基因果蝇(UAS-EGFP)杂交,用荧光显微镜观察成年果蝇脑内荧光分布,从而获得该突变体的脑基因表达图谱,在此基础上利用JavaScript来建立果蝇脑全基因组表达数据库.目前获得基因突变体果蝇2 677种,大部分在果蝇脑中有表达,其中在果蝇嗅觉学习记忆相关脑区蘑菇体表达的基因有368个,且有部分基因特异地表达在某些传导通路上.这些果蝇基因突变体库及其表达图谱为进一步研究各基因的功能及作为遗传工具来研究各脑区结构和功能提供极大方便.     

研究: 甲醛对果蝇寿命及其在应激条件下耐受性的影响

虽然甲醛对人及动物多种器官的毒性作用已经有了大量研究,但不同浓度甲醛影响动物寿命的研究还极其少见.本文用黑腹果蝇作为模式生物,在食物中添加不同浓度的甲醛,观察果蝇寿命及其在应激条件下耐受性的变化.实验结果显示,雌性果蝇的寿命表现出对甲醛浓度的依赖,0.037%甲醛可以极显著地延长雌性果蝇的寿命,较高浓度甲醛(≥0.185%)可以极显著地缩短雌性果蝇与雄性果蝇的寿命.0.037%甲醛还可以极显著地增强雌性和雄性果蝇对饥饿以及高温的耐受性,但减弱其对活性氧的耐受性.这些结果有助于从新的途径研究果蝇寿命及其在应激条件下耐受性的分子机制.     

甲醛对果蝇寿命及其在应激条件下耐受性的影响

虽然甲醛对人及动物多种器官的毒性作用已经有了大量研究,但不同浓度甲醛影响动物寿命的研究还极其少见.本文用黑腹果蝇作为模式生物,在食物中添加不同浓度的甲醛,观察果蝇寿命及其在应激条件下耐受性的变化.实验结果显示,雌性果蝇的寿命表现出对甲醛浓度的依赖,0.037%甲醛可以极显著地延长雌性果蝇的寿命,较高浓度甲醛(≥0.185%)可以极显著地缩短雌性果蝇与雄性果蝇的寿命.0.037%甲醛还可以极显著地增强雌性和雄性果蝇对饥饿以及高温的耐受性,但减弱其对活性氧的耐受性.这些结果有助于从新的途径研究果蝇寿命及其在应激条件下耐受性的分子机制.     

不同生长阶段的烟曲霉对果蝇自噬水平的影响

目的探究不同生长阶段的烟曲霉对果蝇自噬水平的影响。方法用沙保弱平板培养烟曲霉,收获静息孢子;用沙保弱液体培养基震荡培养烟曲霉,在不同时间收获膨胀孢子、菌丝。以3种形态的烟曲霉分组处理转基因果蝇,组织切片观察烟曲霉形态,Rt-PCR(逆转录PCR)检测自噬相关蛋白LC3BⅡ、Beclin-1mRNA的转录水平,Western blot检测LC3BⅡ、Beclin-1的表达量。结果组织切片观察菌的形态与注入时的形态相符,Rt-PCR检测LC3BⅡ、Beclin-1mRNA的转录水平升高,同时,感染膨胀烟曲霉孢子及菌丝组的果蝇LC3BⅡ、Beclin-1蛋白的表达水平升高。结论烟曲霉膨胀孢子及菌丝能显著提高果蝇自噬水平,而静息孢子不能引起果蝇自噬应答。     

制备果蝇唾液腺染色体标本片的改进方法

制备果蝇唾液腺染色体标本片的改进方法赵惠玲,王清李秀芬（山西省教育学院实验中心０３００３１）（山西大学生命科学院）果蝇唾液腺杂色体制片方法虽然历史已久,却仍存在不完善之处,尤为明显的是制片的染色体背景底色深重,影响了着色清晰度和观察效果。我用以下措施...     

食物营养对黑腹果蝇中肠干细胞的影响

【目的】研究市场上常见的几种儿童、青少年较为喜爱的小食品的主要营养成分,及其对黑腹果蝇Drosophila melanogaster的体重、发育等的影响,进而探讨膳食中营养均衡的重要性。【方法】采用双缩脲法、苏丹Ⅲ染色法及碘酒染色法分别对食物中的蛋白质、脂肪及淀粉含量进行测定。分别用基础培养基或实验用食品配制的培养基培养黑腹果蝇,待果蝇卵孵化后,取一定数量果蝇个体进行称重,并对果蝇中肠进行解剖和免疫荧光染色,观察果蝇肠道发育情况。【结果】基础食物(培养基)中的蛋白质、脂肪及淀粉含量配比较为均衡,而实验用零食有些脂肪含量较高,有些蛋白质含量较高,有些淀粉含量较高,配比严重失衡。淀粉及脂肪含量均较高的食物能引起果蝇体重超重;同时果蝇肠道细胞Arm/Pros的染色显著增加,显示肠道干细胞数目显著增加,另外果蝇肠壁明显加厚;而食物中淀粉或蛋白质严重缺失的食物则引起果蝇发育障碍。其中,在高碳水化合物但几乎没有蛋白质存在的食物中,果蝇干细胞数目同样增加很多,肠壁加厚,但其体重显著降低,同时发育迟缓。在高蛋白高脂肪低碳水化合物的食物中,中肠干细胞数目明显减少,果蝇肠壁变薄,发育受到影响。将几种实验组食物按照基础食物的蛋白质、脂肪及淀粉含量进行配比混合,模拟营养的均衡配比,喂养果蝇后发现,营养成分配比均衡极大地缓解配比失衡后所造成的中肠损伤,并使果蝇的个体发育恢复均衡。【结论】食物中的营养失衡会显著影响果蝇的体重以及肠壁和肠道干细胞的数目,导致果蝇体重下降或上升,肠道细胞增殖功能紊乱,对果蝇发育产生严重影响。这些结果提示了儿童偏好零食引起的营养不良和过度肥胖及肠道功能障碍,因此建议青少年儿童不能偏好零食,要做到合理膳食,营养均衡。     

5种珍稀食药用真菌活性提取物对果蝇寿命影响的研究

探讨了松茸、栎金钱菌、蜂窝菌、云芝、杏鲍菇活性提取物对果蝇寿命的影响,分别用这5种食药用真菌活性提取物各以5、20g/L的剂量加入培养基中培养果蝇,观察其对果蝇寿命的影响.结果表明,松茸、栎金钱菌、蜂窝菌、云芝、杏鲍菇的活性提取物能显著延长果蝇的平均寿命和半数死亡时间,其平均寿命延长率分别达23.96%、53.22%、23.09%、32.58%、20%.这提示松茸、栎金钱菌、蜂窝菌、云芝、杏鲍菇都具有良好的延寿效果.     

果蝇的培养和管理

果蝇的发育要经过卵、幼虫、蛹和成虫等几个时期(图一)。观察果蝇唾液腺细胞的巨形染色体是在果蝇的三龄幼虫期。要完成这个实验须经过对果蝇的诱捕、培养和幼虫保存等准备过程。     

实验用果蝇培养技术探索

用添加了臭干子汁液的培养基培养果蝇,能提高果蝇繁殖率37.9%,果蝇幼虫化蛹数增加47.2%,羽化为成虫的数目增加43.5%,成虫平均体重和体长分别增加5.6%和16.6%。由此表明臭干子汁能加速果蝇生长发育,显著提高果蝇繁殖率,是一种简便易行、经济实用的实验室中果蝇培养的新方法。     

云芝、灵芝和柱状田头菇胞外多糖对果蝇寿命的影响

研究了云芝、灵芝、柱状田头菇等3种食药用真菌胞外多糖及复合多糖对黑腹果蝇寿命的影响.分别将3种食药用真菌胞外多糖及复合多糖以1、5g/L的剂量加入果蝇培养基中,观察对黑腹果蝇寿命的影响.结果表明,3种食药用真菌的胞外多糖及复合多糖对果蝇寿命均有不同程度的延长,云芝5g/L、柱状田头菇5g/L、云芝2.5g/L＋柱状田头菇2.5g/L、灵芝2.5g/L＋柱状田头菇2.5g/L对果蝇平均寿命延长率分别达到了36.38%、46.60%、36.69%、47.08%.     

“观察果蝇的生殖与发育”的实验教学

黑腹果蝇作为遗传学研究中重要的模式生物,其科研价值一直备受瞩目。目前中学生物学实验教学中少有利用果蝇作为实验材料的案例,其主要原因是:果蝇培养、果蝇相关实验的具体操作在中学教材中未提供成熟的、适宜在中学实验室中操作的方法。针对上述问题,探索出了在中学实验室中进行果蝇饲养的条件,以及适合中学生的果蝇成虫麻醉方法,使果蝇成为"观察昆虫的生殖和发育"实验中较为理想的昆虫材料之一。     

野生果蝇的收集和培养

果蝇实验可从收集野生果蝇开始。培养野生果蝇可用于 :1为做唾腺染色体装片提供三龄期幼虫 ;2观察突变性状和进行杂交试验 ;3观察动物完全变态发育的全过程。本文将介绍收集和培养野生果蝇的经验和方法。1　果蝇的形态和生活习性果蝇是双翅目昆虫 ,成蝇体长约 0 .5cm,体色多数为檀黄色 ,故又称“黄果蝇”,也有灰身和黑身的。眼睛为复眼 ,在放大镜或显微镜下观察 ,如向日葵状 ,多为红色。卵椭圆形 ,长约 0 .0 5cm。受精卵约需 36h孵化出白色幼虫 ,经两次蜕皮发育成三龄期幼虫。一龄二龄幼虫较小 ,三龄幼虫长约 0 .0 3～ 0 .0 5cm。成熟三龄期…     

获取果蝇三龄幼虫的简便方法

果蝇三龄幼虫是观察果蝇唾液腺细胞巨大染色体的好材料 ,如何获取果蝇三龄幼虫 ?我们设计了一个简便的方法 ,效果较好。该方法是 :在天气暖和的日子里 ,取一清洁的广口瓶 ,放入一些已发酵的面团 ,倒入适量凉开水 ,搅拌发面成糊状 ,厚约 2～ 3cm。取纱布盖住瓶口 ,用线扎紧 ,在纱布的中央开一小孔 ,将广口瓶放到窗口。不久 ,就会有果蝇飞进瓶里 ,在发面上生活 ,雌雄果蝇交配、产卵 ,卵孵化成幼虫 ,幼虫以发面中的酵母菌为食。当发现有幼虫爬到瓶壁上时 ,取其大的即为充分发育的三龄幼虫。果蝇生活史 (即卵→幼虫→蛹→成虫 )的长短与温度关系…