棉花胚珠纤维发育的研究

将未受精的棉花胚珠漂浮培养在加有不同植物激素的BT培养基上,培养48小时或96小时后,用扫描电镜观察纤维发育情况,以及测定胚珠内IAA氧化酶活性变化及内源ABA的含量变化,并和同一时期的大田生长的胚珠进行比较。结果表明:IAA+GA_3是最佳激素组合。在这种激素组合的培养基中培养的未受精胚珠,在纤维发育、酶活性变化等方面,均与大田生长的胚珠相似。这一激素组合还能抑制离体胚珠内源ABA的增长,但同一时期的大田生长的胚珠,其内源ABA含量却相对要高。     

黑穗醋栗(Ribes nigrum L.)未受精胚珠培养诱导体细胞胚状体和植株再生的研究

本文报告了黑穗醋栗(Ribes nigrum L.)三个栽培品种中的薄皮黑豆未受精胚珠(花粉发育到单核晚期)在MS基本培养基附加植物激素BA,2.4-D和GA_3中形成了体细胞胚状体。长度约为0.5—1.0cm大小的胚状体在生根培养基中可以形成完整的再生植株。经过筛选得到了体细胞胚性愈伤组织无性系,继代培养二年多仍能保持胚状体形成能力。试验结果表明:诱导体细胞胚胎发生受品种和接种时期的影响,适宜的接种时期为花粉发育到单核晚期。培养基中的BA为诱导胚胎发生和保持胚性愈伤组织无性系所必需。     

巴西橡胶树未受精胚珠培养时愈伤组织与胚状体的起源(简报)

THEORIGINOFCALLUSANDEMBRYOIDINCULTUREDUNFERTILIZEDOVULESOFHEVEABRASILIENSISYangXiaoqua(DepartmentofFallScience,SouthChinaUniversityofTechnolop,Guangzhou510641)FuJiarui(DepartmentofBiology,ZhongshanUniversity,Guangzhou510275)迄今为止,利用未受精胚珠高体培养诱导木本植物形成单倍体植株的仅有杨树及巴西橡胶树两例[1-3],但均缺乏详细的胚胎学观察资料,胚状体的起源不甚清楚。在某些草本植物中,起源问题已有详细的研究。例如向日葵未受精胚珠离体培养时,胚状体起源于未受精的卵…     

中棉×戴维逊氏棉胚胎发育的研究

以棉花栽培种中棉作母本,野生种戴维逊氏棉作父本进行杂交试验,并用中棉自交作对照,比较研究了杂交情况下花粉粒的萌发、花粉管的生长、受精作用及胚和胚乳的发育过程,得到以下结果:(1)中棉×戴维逊氏棉花粉粒的萌发及花粉管在异己花柱中的生长基本正常,有花粉管胚珠的频率约20％,为中棉自交的1/4左右;(2)在杂交情况下,有花粉管进入的胚珠基本上能实现受精;(3)杂种胚乳在授粉后7天发育异常,11天开始解体,16天才有部分胚珠的胚乳开始形成细胞壁;(4)杂种胚不分化或畸形分化,在授粉后11—22天坏死。     

野生棉与栽培棉种间杂交胚珠离体培养的胚胎发育研究

以陆地棉(Gossypium hirsutum L.)做母本,野生的瑟伯氏棉(Gossypium thurberi Tod)和克劳茨基棉(Gossypium klotzschianum Anderss.)做父本,并以陆地棉自交为对照,取杂交授粉后两天的胚珠进行离体培养,研究胚胎发育。在培养条件下,三种遗传型合子启动的时间不一致,而且胚乳的发育也存在差异。珠心和胚囊腔的生长变化在有胚胚珠和无胚胚珠之间,存在明显的不同。球形胚时期,是杂种胚能否正常发育的关键时期。离体培养,改变了自然杂种状态的胚和胚乳以及胚和母体组织的不协调关系,因此产生了较多的杂种胚。     

小叶杨与美杨种间杂交的胚胎发育和杂种胚珠的离体培养

1.观察了小叶杨(Populus simonii Carr.)和美杨(Populus pyramidalis Borkh.)人工杂交后从花粉粒萌发至胚分化完成的发育过程:1.大多数美杨花粉粒可以在小叶杨的柱头上萌发长出花粉管,花粉管在花柱中正常地生长并通过珠孔进入胚囊,于授粉后4—7天发生双受精作用,形成初生胚乳核和合子。胚乳的发育正常或不正常,后者表现为在游离核阶段的败育或胚乳细胞发育不良。胚在各个发育阶段尤其是球形胚和心形胚阶段,都可能败育,也可以正常发育成为分化完全的有效胚。2.将授粉后19天、22天、26天和29天含有不同发育阶段(心形期、鱼雷期、子叶伸长期)未成熟的杂种胚珠接种于人工培养基上,结果表明:1.M110培养基(1/2 MS+IAA 0.01毫克/升+BA 0.1毫克/升+蔗糖2%)是选用培养基中效果最好的;2.不同发育阶段杂种胚的胚珠可以离体培养成生长正常的小植株。     

南瓜未受精胚珠的离体培养及植株再生

以南瓜(Cucurbita moschata)品种试验1号为材料, 以未受精胚珠为外植体, 研究了激素种类、外植体发育时期、高温预处理时间和AgNO₃浓度对胚状体诱导的影响。结果表明, 2,4-D、NAA和6-BA组合有利于胚状体的形成, 出胚效果最好的培养基为MS+1.0 mg·L^–12,4-D+0.25 mg·L^–1NAA+0.5 mg·L^–16-BA, 出胚率达31.1%; 雌花开放当天的胚珠出胚率最高(26.7%), 且愈伤组织形成频率低(<5%); 外植体在黑暗、高温(35°C)条件下处理5天有利于胚状体的形成, 出胚率为32.2%。培养基中添加AgNO₃对胚状体形成的抑制作用明显。胚状体转移至成苗培养基后可形成正常小苗, 出苗率最高可达64.3%, 植株再生过程经历了典型的胚胎发育途径。细胞学观察结果表明, 胚状体极有可能起源于胚囊珠孔端的细胞, 即卵细胞或助细胞。     

一个高频率的活体-离体胚胎发生研究系统

通过对受精后烟草(Nicotiana tabacumL.)胚珠的体外培养,建立了一个简便、实用、高频率的胚胎发生研究系统。采用MS培养基附加6%蔗糖,然后换以2%蔗糖对烟草胚珠进行培养,结果受精后胚珠在体外可以完成正常的胚胎发生并可直接萌发成幼苗。追踪观察表明,合子体外胚胎发生过程中关键发育事件,如合子休眠期间的定向生长、一次不对称分裂的完成、胚柄的形成和解体、胚的分化等过程均可在体外重现。体外培养形成的胚珠及胚胎在形态上与自然状态下形成的胚珠及胚胎几乎没有差异。此体系操作简单,稳定性好,且关键发育事件的时空调控与自然胚胎发育进程相吻合。     

赤霉酸和吲哚乙酸对器官脱落和离区纤维素酶的影响

赤霉酸(GA_3)处理菜豆叶柄和棉苗子叶柄外植体,离区的纤维素酶活力增加,而吲哚乙酸(IAA)则抑制离区纤维索酶的活力。这与GA_3促进菜豆叶柄和棉苗子叶柄外植体的脱落、IAA延迟脱落的效应成正相关。GA_3促进菜豆叶柄外植体的脱落可被环己酰亚胺(CHI)所阻止,而且离区纤维素酶的活力也显著降低。但在棉铃柄离区并没有观察到GA_3与脱落和离区纤维素酶活力三者之间的相关性。GA_3对棉株上未受精棉铃具有明显的防脱效果,而对棉铃柄外植体有促进脱落的作用,但二者离区纤维素酶活力无明显的差异。     

棉属二倍体野生棉与四倍体栽培棉种间杂交的胚珠培养

用棉属二倍体野生种与四倍体栽培种陆地棉杂交及四倍体栽培种海岛棉、陆地棉与二倍体栽培种亚洲棉杂交,以陆地棉自交作对照。将杂交和自交授粉后2天(部分材料为1天)的胚珠在液体培养基上进行飘浮静置暗培养。培养50—70天,7个杂交组合及2个自交品种的胚珠均获得一定频率的胚(包括成熟和不成熟胚)及成熟胚萌发的苗。其中陆地棉与澳洲野生棉、阿拉伯棉、亚洲棉、海岛棉与亚洲棉等4个杂交组合已得到杂种一代植珠。试验结果表明,同一组合的胚珠,在不同的培养基上获得胚的频率和胚萌发率有明显差异;不同组合的胚珠,在同一培养基上培养的结果也不一致。陆地棉X亚洲棉、海岛棉×亚洲棉两个组合授粉后1天的胚珠培养也获得一定频率的胚发育。     

被子植物未受精胚珠与子房离体培养的研究进展

介绍被子植物未受精胚珠与子房离体培养诱导单倍体植株的研究进展。迄今已有9个科21种植物用这一方法诱导出单倍体植株,植物的基因型、外植体的发育程度、接种前的预处理、培养基和培养条件等均能影响诱导率的高低。胚胎学观察揭示大孢子与胚囊内的卵细胞、助细胞和反足细胞均有可能在培养中启动分裂,通过胚状体或愈伤组织形成单倍体植株。本项技术在植物单倍体育种中可发挥重要作用。     

百合未授粉子房离体培养胚胎形成及植株再生

未受精子房离体培养是诱导雌核产生单倍体的技术之一。以1个野生种和3个杂种系共7个百合(Lilium)基因型为实验材料, 探讨了基础培养基、花蕾取样时期和外源激素等因素对百合未授粉子房离体培养胚胎形成的影响。结果表明, CBM、MS和BDS三种基础培养基均可诱导百合未授粉子房胚胎形成, 但以BDS培养基诱导效果最佳; 开花前1天的花蕾较适于百合未授粉子房离体培养; 2 mg·L^-1 2,4-D + 2 mg·L^-1 6-BA和2 mg·L^-1 2,4-D + 2 mg·L^-1 KT两种外源激素配方均适用于百合未授粉子房离体培养诱导胚胎形成。在培养过程中, 大多数胚性胚珠中只含有1个胚胎, 位于珠孔端、合子端或极核处, 少数胚性胚珠中含有双胚胎。通过百合未授粉子房离体培养, 从5个基因型材料中共获得146株再生植株。采用根尖染色体计数法对其中的62株进行了倍性测定, 其中43株与母体植株染色体倍性不同。     

试管棉纤维与天然棉纤维超微结构的差异(简报)

棉纤维由棉胚珠表皮细胞分化生长而成,是研究细胞分化、细胞伸长等机理的良好材料。为了更好地研究它的分化和发育,人们建立了多种实验系统:离体胚珠培养系统、胚珠来源的单细胞悬浮培养系统、胚珠愈伤组织细胞来源的细胞悬浮培养系统,并对这些实验系统的特点对纤维细胞分化和生长,如培养基的配方、激素配比、pH值、抑制剂或促进剂的影响等进行了较为系统的研究。发现棉纤维的发育     

向日葵未受精胚珠培养再生植株

迄今,有关向日葵离体雌核发育的研究,仅蔡得田与周嫦(1983)、Gelebart与San(1987)由未传粉子房培养分别得到单倍体小苗和植株,而在未受精胚珠培养方面,阎华等对诱导胚状体形成的因素作了大规模研究,但未继续研究其植株再生问题。我们在上述基础上,经过三次重复实验,建立了向日葵未受精胚珠培养再生单倍体植株的技术流程,使其进一步用于育种及细胞工程成为可能。     

五唇兰未受精胚珠离体培养及雌配子体发育的研究

五唇兰(DoritispulcherrimaLindl.)的胚珠属于倒生型,具薄珠心,两层珠被。胚囊发育类型为双孢子葱型,授粉后约45d形成七细胞八核的成熟胚囊。五唇兰未受精胚珠在离体培养初期对外源激素的依赖性很小,在没有外源激素的培养基上,大孢子母细胞也能经过减数分裂发育为二核胚囊。在培养后期,外源激素对胚囊发育的影响很大。在培养基无外源激素或仅含生长素或细胞分裂素时,雌配子体的发生过程不能顺利完成;在改良VW培养基上添加0.5mg/LBA和0.1mg/LNAA时,形成成熟胚囊。     

五唇兰未受精胚珠离体培养及雌配子体发育的研究

五唇兰(Doritispulcherrima Lindl.)的胚珠属于倒生型,具薄珠心,两层珠被.胚囊发育类型为双孢子葱型,授粉后约45 d形成七细胞八核的成熟胚囊.五唇兰未受精胚珠在离体培养初期对外源激素的依赖性很小,在没有外源激素的培养基上,大孢子母细胞也能经过减数分裂发育为二核胚囊.在培养后期,外源激素对胚囊发育的影响很大.在培养基无外源激素或仅含生长素或细胞分裂素时,雌配子体的发生过程不能顺利完成;在改良VW培养基上添加0.5 mg/L BA和0.1 mg/LNAA时,形成成熟胚囊.     

梨的胚珠培养

植物名称:梨(Pyrus)。材料类别:胚珠。培养条件:(1)诱导幼胚生长培养基:改良的Nitsch培养基 0.5mg/L BA 100mg/L LH 5％蔗糖;(2)胚萌发成苗培养基:改良MS 2％蔗糖。培养室温度25±3℃;光照度3000lx;每日光照16h。生长与分化情况:胚珠在诱导幼胚生长培养基上培养30d后,其中的幼胚利用珠心、胚乳及培养基中的多种营养进一步维持胚性生长,得到生长的胚,其平均长度均大于8mm。将胚取出并转移到胚     

植物激素对促进棉花种间杂种胚胎发育的效果

本文报道了陆地棉和中棉间正、反交时,喷施植物激素(GA_3、NAA)后,对杂种胚胎发育的影响。观察发现:1.外源激素对棉花授粉受精速度的影响不显著。2.陆地棉×中棉时,外源激素显著提高了有胚胚珠百分率。胚体大小也显著增加。3.中棉×陆地棉时,外源激素能明显地促进胚的分化,使一部分杂种胚的分化接近正常状态。4.喷施外源激素是克服种间杂交不亲和性的有效途径。这是由于外源激素促进了胚乳发育的缘故。     

甜橙成熟果实未发育胚珠的离体培养

路比血橙和锦橙成熟果实的未发育胚珠在含ME(1000mg/l)的MT培养基上培养,胚状体诱导率和每个胚珠平均产生胚状体数均较高。带胚状休的愈伤组织转入该培养基上继代培养,仍可保持其胚性特点。将子叶形胚状体转至含GA(1mg/l)和CH(500mg/l)的MT培养基上,成苗率较高。这为扩大柑桔组织培养的外植体来源和克服外植体的季节限制提供了新途径。     

禿杉组织培养研究

本文详细报道了从秃杉(Taiwania flousiana Gaussen)离体胚诱导不定芽、不定根及从无菌苗茎端培养再生植株的过程。诱导不定芽要求较低的蔗糖浓度(以3％最好);同时BA是必须的,在附加0.1—3 mg/1 BA的White培养基上,从离体胚的子叶或胚轴上诱导了不定芽的发生(以1 mg/1最好);NAA与BA结合使用,对不定芽诱导无促进作用;适当提高光照有利于不定芽的诱导。在诱导不定芽的同时,在子叶表面还观察到有许多无结构的“不定突起”。不定芽起源于子叶表皮下1—2层细胞。IBA对诱导离体胚上产生不定根效果较好。在有或无生长素的培养基上,从生长1月龄的无菌苗茎端培养获得了不定根的产生,在加有细胞分裂索的培养基上,从无菌苗上产生了腋芽。