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1.
用八株不同来源的流行性出血热(EHF)病毒的单克隆抗体(McAb),采用血凝抑制试验、反向间接血凝抑制试验、间接酶联免疫及阻断酶联免疫试验等,对两种方法(TE、SA)制备的血凝素抗原进行分析。根据A35、2A6McA5试验的结果,证实血凝素抗原中的核蛋白上存在有非构象依赖性的血凝结合位点;而另外5株McAb在血凝抑制活性方面,虽具有明显的株间交叉,但在反向间接血凝抑制试验、间接酶联免疫试验时则均为阴性,故认为其血凝结合位点位于病毒的膜蛋白,可能与G_2糖蛋白有关,为构象依赖性位点。有关4G6McAb,在阻断酶联免疫试验时,虽与A35、2A6一样具有较高的阻断率,但在反向间接血凝抑制试验、间接酶联免疫试验时明显有别于后二者,对其属性有待进一步确定。 相似文献
2.
本文报道应用反相间接血凝和间接血凝试验技术快速检测ADRV抗原和抗体,一般在60分钟左右作出诊断。用ELISA方法和协同凝集试验作对照,结果一致。本实验与其它肠道病毒不发生交叉凝集反应,与菌痢、肠炎病人粪便和正常人粪便标本也不发生非特异性反应。实验准确可靠。本实验用间接血凝试验技术快速检测了ADRV抗体,观察了流行性腹泻病人血清中ADRV抗体持续时间。发现流行性腹泻患者发病后ADRV抗体存在半年以上,八个月有不同程度的下降,流行地区的健康人的ADRV抗体水平占33%左右,非流行地区正常人的ADRV抗体占11.3%左右。并用血凝抑制试验检测ADRV抗体,与小儿轮状病毒抗体无交叉反应。本试验对流行性腹泻的流行病学研究和临床诊断具有实用意义。 相似文献
3.
本文应用致敏的人O型血球研究反向间接血凝(RPHA)和反向间接血凝抑制(RPHI)方法用以检测流行性出血热抗原抗体,并试验成功用pH9.0硼酸盐水制备灭活鼠脑病毒液作为抗原。为抗原制备提供了一种简便的方法。以上RPHA法用于检测组织培养内病毒与用荧光法检测细胞内病毒抗原法结果一致,用RPHI检测病人血清抗体效价,特异性高,敏感性与IFA相同。该致敏血球和抗原是冻干制品,稳定性好、使用方便,是一种代替荧光检测病毒抗原和抗体的良好制品。 相似文献
4.
本文利用加热搅拌及Sephadex G-100凝胶过滤方法,从双价重组工程菌RRI(pMG611)中分离了重组K99和F41菌毛抗原。SDS-PAGE测定其分子量,重组K99和F41抗原亚单位分子量分别是17200和29800,与各自野生菌毛亚单位分子量相同。甘露糖抗性血凝试验(MRHA)性质与野生K99和F41抗原相似。双向扩散试验和Western blot分析证实其免疫学性质亦与野生菌毛抗原相似。重组K99和F41抗原的免疫原性较强,能够刺激家兔产生高效价的抗体出现。 相似文献
5.
孙柱臣 《微生物学免疫学进展》1980,(2)
<正> (三)血清学鉴别诊断 血清学是鉴别诊断细菌、病毒、立克次体等微生物及其疾病的重要力法。熟练而准确地运用血清学技术才能做出正确、可靠的实验诊断。应用于立克次体和立克次体病的血清学诊断方法很多,最常用的有:补体结合试验、立克次体凝集及外斐氏凝集试验、间接血凝和反相血凝及其抑制试验、中和试验等。近年来免疫萤光抗体染色、酶免疫吸附及细胞免疫试验也常被采用。本文着重立克次体学上最常用的几种方法做一介绍。 血清学诊断的基本原则:(1)是应用已知的某种病原体或抗原去测知未知抗体的存在和滴度,以确定系由何种病原体而感染。当人或动物被某种病原体感染后,常在患者 相似文献
6.
Bam HI部分酶切表达K99抗原的重组质粒pMGK99,将其与相同酶切的含有F41菌毛基因的片段相连接,构建了载有两种抗原基因的质粒pMG611。通过转化大肠杆菌K12HB101、RRI和c600,得到HBlOl(pMG611)、RRl(pMG611)和C600(pMG611)菌株。经甘露糖抗性血凝试验、玻片凝集试验和western blot分析证明K99和F4l两种菌毛抗原在每株菌中均获表达。sDs—PAGE结果表明所表达K99和F4l菌毛亚单位的分子量与其各自野生株所产生的相同,分别是17200和29800Da,ELIsA测定HB101(pMG611)菌株表达K99和K41菌毛抗原的水平与相应出发菌株相同,而高于其野生株。本实验对质粒pMG611表达K99和F41菌毛抗原的影响因素也进行了研究。 相似文献
7.
上海市第六人民医院检验组 《微生物学报》1977,17(3)
本文介绍一种简便、快速、敏感、适宜于一般临床化验室使用的反向间接血凝检测HBsAg方法。以丙酮醛、甲醛固定羊红细胞,在酸性条件下,用四种不同方法纯化的抗-HBs/豚鼠血清直接致敏。其中以免疫纯或固相吸收经DEAE-纤维素层析-葡聚糖凝胶G-200过滤的抗-HBs/豚鼠血消致敏效果最好,效价最高可达220。这种致敏羊红细胞检测HBsAg灵敏度高,特异性强,凝集模式稳定,重复性良好,比对流免疫电泳法的敏感度提高500倍左右。作者老对不川红细胞作了选择,比较了几种常用固定剂,井对致敏红细胞的pH、时间、温度、蛋白量等条忭进行了摸索。用反向间接血凝试验,免疫粘附血凝试验,放射免疫对流自显影三种敏感方法测定796份样品,阳性率分剧为28.57%、28.39%、27.18%。以反向间接血凝法稍高。 相似文献
8.
本文报道了探讨双醛化被动血凝法一些影响因素的结果,认为固定方法,致敏时的pH,致敬物的浓度,以及致敏红细胞的浓度,均对血凝滴度有影响。用纯化的乙型肝炎抗体致敏双醛化羊红细胞,作反向被动血凝试验,可以测出每毫升含3.73毫微克的乙型肝炎抗原。用纯化的乙型肝炎抗原致敏双醛化羊红细胞,作被动血凝法可检测,乙型肝炎抗体;在4℃保存的致敏红细胞,其滴度至少在4个半月内无明显变化。比较了对流免疫电泳、放射对流免疫电泳和反向被动血凝三种方法,用于检测病人血清中乙型肝炎抗原的敏感性和特异性。三种方法的相对敏感度相应为l:20:600。用这三种方法检测407侧患者血清样品的阳性率,相应为2.2%、11.3%和13.3%,反向被动血凝法敏感性最高,但特异性差;放射对流免疫法敏感度虽稍差,但特异性高。如果与抑制试验结合应用,反向被动血凝法是一种可以推广的简便检查方法。 相似文献
9.
<正>序言 金黄色葡萄球菌A蛋白(SpA)在免疫技术中已经成为一种重要的试剂,这是由于它和大多数哺乳类动物的免疫球蛋白(主要是IgG)能相互作用。甲醛固定金葡菌提供了一个有用的SpA固相结果物,能和IgG相互作用,持续数月不受影响。开始,这个试剂借协同凝集试验用于细菌血清学分群,但是目前,它更常被作为一种固相抗IgG的试剂用于放射免疫试验及细胞膜抗原的免疫沉淀反应。根据淋巴细胞表面抗原不同,金葡菌也能用于细胞检测和分离,也可以作为一 相似文献
10.
<正>对于自然疫源地采集标本中克里米亚出血热(CHF)病原的检测一般采用接种新生小白鼠法(生测法);分离出的病原再用补体结合试验(CF)、间接血凝试验(IHA)和免疫荧光(IF)试验进行鉴定。这些方法特异性高,但是十分费力,且均不能直接用于原始材料中的病原体测定。 相似文献
11.
韩义贞 《微生物学免疫学进展》1980,(3)
<正> 血清学试验可确诊百日咳,用凝集试验或补体结合试验(CFT)方法能证明百日咳抗体。凝集试验检出不耐热血清型抗原的1,2,3型和耐热的菌体抗原的抗体。活的或福尔马林杀菌的菌悬液检出不耐热抗原的抗体。新近的两个试验中应用了不同的CFT抗原。1972年Bradstreet等用60℃加热1小时菌悬液的远沉上清作抗原,菌株血清型抗原并不影响血清效价,提示发现的主要抗体是对抗原1的(所有菌株所共有)而不是型特异抗体。苏格兰联合研究用新近分离的1,3型菌株并用NaOH37℃2小时提取抗原,他们没有证明是否测出了型特异抗体。 用间接血凝试验(IHA)测定人血清百日咳抗体的报导很多,除了Schuber等用百日咳可疑病例的双份血清做过试验,没有任何别的作者指出抗原附着到红血球上。 相似文献
12.
<正> 试管凝集试验(TAT)已成为布氏菌病血清学诊断的标准方法。是公认的关于布病血清学的定量试验。虽然TAT是标准方法,但因其繁琐,所以不适用于布病大量标本的初步试验。TAT对于现场或用于流行病学调查不方便。已报导了几种快速筛选试验,包括玻片凝集试验(TAT),酸性平板抗原凝集试验(CAT)和微量凝集试验(MAT)。在报告中,对SAT、MAT和CAT的敏感性和特异性、TAT真阳性和真阴性的结果界限进行了严格测定。 相似文献
13.
<正>血凝抑制(HAI)、间接血凝(IHA),补体结合试验(CF),病毒中和试验(VN)或琼脂扩散试验已经成为应用于传染病中定量测定特异性抗原或抗体的常规方法。然而,这些方法都受到许多限制。操作程序复杂,需要较长时间,各种试剂和样品的预先处理或滴定,同时各个实验室之间缺乏统一的标准。 相似文献
14.
<正>对流行性脑脊髓膜炎(简称流脑)双球菌夹膜多糖的检测,各种不同的免疫学方法其敏感性不同。免疫电泳检出的抗原量为0.7μg/ml;放射免疫分析法为2ng/ml。 作者采用了放射免疫定量分析法(NPMA)和协同凝集反应(PKA)两种方法同时对来自儿童患者的脑脊液标本进行平行试验。 相似文献
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用遗传工程技术构建含E.Coil K88ac和
LT(A-B+)两种抗原基因的菌株 总被引:1,自引:0,他引:1
用我室克隆的含大肠杆菌K88ac抗原基因的pMM031质粒和含肠毒素LT(A-B+)抗原基因的质粒pPMc4,使用限制性内切酶BamHI酶解,取得了K88ac抗原基因的片段,再经和BamH I消化的质粒pPmc4连接重组,构建了同时具有这两种抗原基因的质粒pMM085羟琼脂糖凝胶电泳分析,pMM085质粒的分子量约为14.6Md,在宿主菌E.CoilC600,经过ELISA和反向间接血凝等几种试验测定K88ac抗原,结果都说明其抗原产量与亲本菌株基本相同。重组菌的抗甘露糖豚鼠红细胞凝集反应也是阳性。对肠毒素抗原用被动溶血试验测定,结果说明其LT-B的产量和亲本菌的产量也基本相同。重组的工程菌株经兔肠结扎试验表明没有毒性反应,因此重组菌株可以作为预防仔猪腹泻的活菌疫苗候选株。 相似文献
18.
通过直接凝集试验、免疫荧光试验、SDS-PAGE和Western印迹,对一株猪源性大肠杆菌的粘附素进行了研究.结果表明,该菌株是一株同时表达987P和F_(41)两种粘附素抗原的猪源性大肠杆菌. 相似文献
19.
目的评价乳胶结合试验检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)及其肠毒素(SE),并进行耐药性分析.方法收集130株金黄色葡萄球菌临床分离株,通过药敏试验将其分为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA),用反向间接血凝试验(RPHA)检测金黄色葡萄球菌肠毒素.结果67株MR-SA产肠毒素,19株MSSA产肠毒素,MRSA产肠毒素率为100%,MSSA产肠毒素率为30%.结论实验室应重视金黄色葡萄球菌肠毒素的检测. 相似文献
20.
协同凝集试验快速诊断葡萄扇叶病毒 总被引:2,自引:0,他引:2
本文描述一个新的试验方法,即协同凝集试验,用于检测葡萄扇叶病毒(GFV).检出GFV的最低浓度为4ng/ml,其灵敏度与ELISA检测病毒水平相当,而且更简便、快速。 相似文献