野生稻愈伤组织的超低温保存和冻后再生植株的形成

对不同基因组的野生稻愈伤组织进行了超低温保存的研究,主要结果如下：①野生稻愈伤组织经过预培养→预处理→冰冻降温→液氮保存→快速解冻的超低温保存,冻后细胞存活率最高可达８７．９％。②１０％ＤＭＳＯ＋８％葡萄糖为最佳冰冻保护剂。降温程序为０℃→－１０℃,１５ｍｉｎ→－４０℃,６０ｍｉｎ→液氮（ＬＮ）。③普通野生稻、宽叶野生稻、疣粒野生稻获得了冻后再生植株。④疣粒野生稻解冻后形成旺盛胚性愈伤组织,并通过体细胞胚胎发生途径再生出大量植株。     

滇重楼地上部分的配糖体

从滇重楼ＰａｒｉｓｐｏｌｙｐｈｙｌｌａＳｍ．ｖａｒ．ｙｕｎｎａｎｅｎｓｉｓ（Ｆｒ．）Ｈ－Ｍ,地上部分,分离出４个微量的配糖体,经光谱分析和化学降解证明其化学结构分别为２５Ｓ－异钮替皂甙元－３－Ｏ－α－Ｌ－鼠李吡喃糖基（１→２）［α－Ｌ－鼠李吡喃糖基（１→４）］－β－Ｄ－葡萄吡喃甙（Ａ）,２６－β－Ｄ－葡萄吡喃糖基－纽替皂甙元－３－Ｏ－α－Ｌ－鼠李吡喃糖基（１→２）［α－Ｌ－鼠李吡喃糖基（１→４）－β－Ｄ－葡萄吡喃糖甙（Ｂ）,山奈酚－３－Ｏ－β－Ｄ－葡萄吡喃糖基（１→６）－β－Ｄ－葡萄吡喃甙（Ｃ）,７－Ｏ－α－Ｌ－鼠李吡喃糖基－山奈酚－３－Ｏ－β－Ｄ－葡萄吡喃糖基（１→６）－β－Ｄ－葡萄糖甙（Ｄ）。     

蜘蛛抱蛋根茎中的甾体皂甙

从蜘蛛抱蛋（ＡｓｐｉｄｉｓｔｒａｅｌａｔｉｏｒＢｌ．）根茎的甲醇提取物中分离得两个甾体皂甙。经波谱解析及化学降解证明其化学结构分别为薯芋皂甙元一３一Ｏ－［Ｂ－Ｄ－葡萄吡喃糖基（１→２）］－［Ｂ－Ｄ－木吡喃糖基（１→３）］－Ｂ－Ｄ－葡萄吡喃糖基（１→４）－Ｂ－Ｄ一半乳吡喃糖甙（即蜘蛛抱蛋甙ａｓｐｉｄｉｓｔｒｉｎ）及新静诺特皂甙元－３－Ｏ－［Ｂ－Ｄ－葡萄吡喃糖基（１→２）］～［Ｂ－Ｄ－木吡喃糖基（１→３）－Ｂ－Ｄ－葡萄吡喃糖基（１→４）一Ｂ－Ｄ－半乳吡喃糖甙,后者为一新试,命名为新蜘蛛抱蛋甙ｒｅｏａｓｐｉｄｉｓｔｒｉｎ。     

龙舌兰发酵叶汁中的一个新甾体皂苷

从龙舌兰（Agave americana)的发酵叶汁中分离到一个新甾体皂苷。结合波谱和化学方法,新化合物的结构鉴定为替告皂苷元3－O－α－L－鼠李吡喃糖基－（1→3)－β-D-葡萄吡喃糖基－（1→2）-[β-D-葡萄吡喃糖基－（1→3)-β－D－葡萄吡喃糖基－（1→4）－β－D－半乳吡喃糖苷。     

滇皂角中一个新三萜皂苷GS-C′

从滇皂角Gleditsia delavayi Franch荚果的水溶性部分分离到一个含有8个糖基的三萜皂苷。运用光谱方法鉴定其结构为：3－O－β－D－吡喃木糖基（1→2）－α－L－阿拉伯吡喃糖基（1→6）－β－D－葡萄吡喃糖基－28－O－β－D－吡喃木糖基（1→3)-β-D-吡喃木糖基（1→4）－α－L－鼠李吡喃糖基（1→2）－[α－L－鼠李吡喃糖基（1→6）]－β－D－葡萄吡喃糖基刺囊酸（GS－C′）。应用2D NMR谱,包括TOCSY,^1h-^1H COSY,HMQC,HMQC-TOCSY,HMBC和ROESY谱,全归属了其氢和碳的化学位移。     

无患子中两个新的大戟烷型三萜皂甙

从无患子科无患子（Sapindus mukorossi Gaertn.)根中分离到两个新的大戟烷型三萜皂甙SapimukosideA（1）和SapimukosideB（2）。运用波谱和化学方法鉴定它们的结构为3－O－α-L鼠李吡喃糖基－（1→2）-[α-L－阿拉伯吡喃糖基－（1→3）]－β－D－葡萄吡喃糖基－21,23R－epoxyl tirucall-7,24R-diene-3β,21-diol(1)和3－O－α-L－鼠李吡喃糖基－（1→6）－β-D-葡萄吡喃糖基21,23R-epoxyl tirucall-7,24R-diene-3β,21-diol(2)。     

日本续断中新五糖皂甙的结构及其核磁共振光谱

从日本续断（Ｄｉｐｓａｃｕｓ ｊａｐｏｎｉｃｕｓ Ｍｉｑ．）根的乙醇提取物中分得一个新的三萜皂甙,其结构被鉴定为３．－Ｏ－〖β－Ｄ－吡喃葡萄糖（１→）〗〖α－吡喃鼠李糖（１→３）〗－β－Ｄ－吡喃葡萄３９糖（１→３）－α－Ｌ吡喃鼠李糖（１→２）－α－吡喃阿拉伯糖－齐墩酸。采用一维ＳＥＭＤＹ谱和转坐标ＮＯＥ差谱核磁共振新技术相结合的方法,对糖体间和９糖体与甙元间的连接顺连接位置进行了研究。该方法的结果     

仙茅根茎中的配糖体

从仙茅（ Ｃｕｒｃｕｌｉｇｏ ｏｒｃｈｉｏｉｄｅｓＧａｅｒｔｎ） 根茎中分离到７ 个化合物, 经光谱分析推定其化学结构分别为： ２, ６ － 二甲氧基苯甲酸（Ａ） ; 苔黑酚葡萄糖甙（Ｂ） ; 仙茅素Ａ （Ｃ） ; 仙茅甙（Ｄ） ; ２４ｓ, ３β, １１α, １６β, ２４ － 四羟基环阿尔廷醇－ ３ － Ｏ－ α－ Ｌ－ 鼠李吡喃糖基（１ →２） － β－Ｄ－ 葡萄吡喃糖甙（Ｅ） ; ２４ｓ, ３β, １１α, １６β, ２４ － 四羟基环阿尔廷醇－ ３－ Ｏ－ β－ Ｄ－ 葡萄吡喃糖基（１ →２） － β－ Ｄ－ 葡萄吡喃糖甙（Ｆ） 和胡萝卜甙（Ｇ） 。Ｆ为一新甙。     

神经生长因子样免疫反应在鸡胚脊髓发育期的配布

探讨神经生长因子（NGF）对脊髓和背根节（DRG）发育的影响。取Hamburger 30期和40期鸡胚腰段脊髓及DRG。制作20μm厚冰冻切片。用2.5S NGF抗体进行ABC免疫组化染色,观察NGF样免疫阳性反应（NGF－IR）在两时相脊髓和DRG的配布,结果在30期,强NGF－IR呈现在白质,且腹侧较强,灰质未阳生细胞。40期时,除白质显NGF－IR和背侧白质NGF－IR增强外,脊髓灰质和DRG内亦出现了一些NGF阳性细胞,特别是在背角细胞可见强NGF－IR。结果表明NGF与脊髓和DRG的发育有关。     

鞭打绣球中的苯丙素甙和环烯醚萜甙

从鞭打绣球（ＨｅｍｉｐｈｒａｇｍａｈｅｔｅｒｏｐｈｙｌｌｕｍＷａｌｌ．）（玄参科）的全草中分离到２个新的苯丙素甙,命名为鞭打绣球甙Ａ和Ｂ（ｈｅｍｉｐｈｒｏｓｉｄｅＡａｎｄＢ）,２个已知的苯丙素甙,ｐｌａｎｔａｍａｊｏｓｉｄｅ和ｐｌａｎｔａｉｎｏｓｉｄｅＤ,以及３个已知的环烯醚萜甙,ｇｌｏｂｕｌａｒｉｃｉｓｉｎ,ｇｌｏｂｕｌａｒｉｎ和ｉｓｏ－ｓｃｒｏｐｈｕｌａｒｉｏｓｉｄｅ．通过化学和光谱分析,鞭打绣球甙Ａ和Ｂ的结构分别鉴定为２－（３－羟基－４－甲氧基苯基）乙基０－β－Ｄ－葡萄吡喃糖基（１→３）－４－Ｏ－反式阿魏醚基－β－Ｄ－葡萄吡喃糖试和２－（３,４－二羟基苯基）乙基Ｏ－［６－Ｏ－乙醚基－β－Ｄ－葡萄吡喃糖基（１→３）］－４－Ｏ－反式咖啡醚基－β－Ｄ－葡萄吡喃糖甙．     

甘蓝型油菜花粉超低温保存及其花粉活力的研究

研究超低温方法保存油菜花粉过程中的预冻和解冻处理方式对油菜花粉的形态、大小及其活力的影响。结果表明:采用0℃(12h)→-4℃(12h)→-20℃(12h)→-80℃(12h)变温预冻处理和用-80℃(1h)→-20℃(1h)→4℃(1h)逐步解冻后对油菜花粉形态大小和活力影响最小。而经过25℃室温解冻法和42℃快速解冻法处理后油菜花粉出现破裂,破裂率分别达到7.6%和9.1%。同时液氮保存油菜花粉的时间长短对花粉的大小及活力影响不大。     

光周期和温度对枯叶蛱蝶幼虫生长发育的影响

在人工气候箱中研究不同光周期和温度条件下枯叶蛱蝶Kallima inachus Doubleday幼虫的生长发育情况。结果表明,20℃时,光周期对枯叶蛱蝶幼虫发育历期影响明显,25℃和30℃时无明显影响。20,25和30℃,12.5~14h光照下,幼虫发育历期分别为31.7~36.0,26.3~27.4和21.0~21.5d,最长和最短历期分别相差4.3,1.1和0.5d。随着温度升高,在相同光照下,幼虫发育历期缩短。20,25和30℃12.5~14h光照下幼虫存活率分别为80%~92%、75%~95%和55%~85%,随温度上升,不同光周期下幼虫存活率差异加大。30℃时大部分光周期下存活率较低,已对幼虫生长发育不利,人工养殖时温度不宜超过30℃。     

不同温湿度组合对安徽虫瘟霉 诱发桃蚜病害的影响

用孢子浴方法,对42批次桃蚜Myzus persicae（30～60头/批）接种大剂量（孢子79～90个/ mm²）安徽虫瘟霉Zoophthora anhuiensis的分生孢子,在20℃下保湿24 h后转入不同温度（10℃、15℃、20℃、25℃、30℃及自然变温1.5～16.6℃和8.5～20.2℃）和湿度(50%、65%、80%、90%、95%及100% RH)的组合条件下观察桃蚜的反应。结果表明,各组合条件下的桃蚜均能发病死亡,而且累计死亡率的显著差异存在于不同温度（F=7.46, P<0.01)和湿度间（F=12.54, P<0.01）。最适发病的温度为恒温20℃和变温8.5～20.2℃（日均温12.4℃）,死亡率随湿度升高而增大。在10～25℃和100% RH的组合中,温度的变化几乎不影响桃蚜的累计死亡率,但影响发病速率,在10℃、15℃、20℃和25℃下的致死时间LT₅₀值分别为8.4 天、7.1 天 、4.0 天和3.4 天。回归分析表明, 在100% RH下安徽虫瘟霉诱发桃蚜发病的起始温度为1.65℃。在10～15℃及自然变温下,病死蚜尸顺利产孢的湿度为80% RH;而在20～30℃下,蚜尸产孢的湿度为90% RH。在所有温湿组合的蚜尸中未见安徽虫瘟霉的休眠孢子发生。     

枸杞木虱啮小蜂寄生行为及生物学特性的研究

枸杞木虱啮小蜂Tetrastichussp .是枸杞木虱ParatriozasinicaYang&Li若虫的外寄生蜂 ,自然寄生率可达 86 5 %。在温度为 2 0～ 2 5℃的室内条件下 ,完成 1个世代需 1 4～ 2 0d。成虫寿命与取食有关 ,取食 1 5 %的蜂蜜水 ,雌性成虫寿命为 1 2～ 1 7d,雄性成虫为 4～ 6d。成蜂最喜欢在 3龄和 4龄若虫上产卵。自然种群消长与寄主虫口密度相关。每年 7月到 8月下旬该蜂寄生率高 ,9月份下降 ,1 0月份几乎不见。     

冻干乙型脑炎减毒活疫苗的冻干工艺优化研究

为了研究优化冻干乙型脑炎减毒活疫苗的冻干工艺,运用正交试验法L934考察不同冻干参数对该疫苗成品质量的影响,以外观、残余水分、病毒滴度以及热稳定性为直观分析指标,并对病毒滴度进行方差分析。结果显示,主干燥时间和主干燥真空压力对病毒滴度的影响有显著统计学意义(P<0.05)。优化的冻干参数为预冻温度-35℃、时间2h;主干燥温度从-35℃升温至-10℃,再由-10℃升温至33℃,总耗时16h,真空压力0.220mbar;二次干燥的温度维持于30℃,真空压力为0.001mbar,终点测试压力无变化时结束。对冻干乙型脑炎减毒活疫苗冻干参数筛选优化后,可得到较佳的冻干曲线,经验证该曲线适用于生产。     

协同诱变法选育虾青素高产优良酵母菌株

以红法夫酵母(Phaffia rhodozyma)野生型菌株GH1为研究对象,选育虾青素高产优良酵母菌株,并初步研究其生长特性。对野生型菌株GH1用紫外线(UV)和亚硝基胍(NTG)协同诱变,用抗霉素A筛选,选育出虾青素高产突变菌株GH1-7.1。突变菌株GH1-7.1的虾青素最高产量达1200μg/gDCW,比野生菌株GH1的虾青素最高产量271μg/gDCW高出4倍,并且生长加快,达到最高生物量和最高虾青素产量的时间比野生菌株缩短了24h;野生菌株GH1的最适生长温度为20℃,高于28℃则不生长,而突变菌株GH1-7.1的最适生长温度为28～30℃,比野生菌株GH1提高8～10℃。首次采用协同诱变的方法成功选育了虾青素高产酵母菌株,并且生长周期短,最适的生长温度提高,是适宜南方高温环境发酵工程应用的优良菌株。     

嗜卷书虱的实验生态研究

在8种温度(17.5～35℃)及5种相对湿度(50%、60%、70%、80%和90%)条件下,以全麦粉、酵母粉、脱脂奶粉(10∶1∶1)为食料,系统研究了嗜卷书虱Liposcelis bostrychophila Badonnel实验种群生态学特性。获得了该虫在不同温、湿度条件下生长发育、生存和繁殖的一系列特性和参数,包括各虫态发育历期、存活率、发育起点温度、有效积温和平均繁殖力等,并建立了发育速率、存活率及繁殖力的理论模型。     

发菜藻蓝蛋白分离纯化的研究

以发菜为材料,比较了提取液类型和饱和硫酸铵浓度对藻蓝蛋白提取的影响,并对藻蓝蛋白的提取程序和部分特性进行了研究。结果表明:50 mmol/L KP缓冲液(pH值7.2)是合适的提取液,体积分数为40%~50%饱和硫酸铵盐析效果优于其它浓度。经过DEAE-Toyopeal 650 S离子交换层析和SuperdexTM200凝胶过滤层析后,藻蓝蛋白纯度达6.2,最大吸收峰位于615 nm,荧光发射峰位于649 nm,由α和β2个亚基组成,其分子质量分别为18 051.17和19 142.27 Da。因此,发菜藻蓝蛋白分离纯化较为理想的程序为:藻粉→50 mmol/L KP缓冲液(pH值7.2)浸泡→French pressure(1 500 kg/cm2)破碎细胞→40%~50%饱和硫酸铵盐析→DEAE-Toyopeal 650 S离子交换层析→SuperdexTM200凝胶过滤层析→较纯的藻蓝蛋白。     

黄鳝ISSR-PCR反应体系的建立及条件优化

以黄鳝基因组DNA为模板,采用正交试验设计方法,对各反应因子、引物退火温度和循环参数进行优化.建立了黄鳝的最适ISSR-PCR反应体系,25 μl反应体系中含2.5 mmol/ L Mg2+,250 μmol/ L dNTPs,0.25 μmol/ L 引物,1.0 U Taq DNA聚合酶,30 ng DNA模板.最佳反应程序:94℃预变性5 min;94℃变性40 s,48～57℃复性40 s(随引物而确定),72℃延伸1.5 min,循环次数40;72℃延伸10 min.利用所建立的ISSR反应体系,获得了清晰、重复性好、多态性高的DNA谱带.     

洋葱伯克霍尔德菌发酵产抗菌物质CF66I温度控制策略

在3.7 L发酵罐中考察了不同温度23℃～33℃对洋葱伯克霍尔德菌CF-66发酵产抗菌物质CF66I的影响,并对不同温度下的发酵过程进行了动力学特性分析。在此基础之上,提出抗菌物质CF66I合成的分阶段控制策略：发酵过程0～20 h控制温度在30℃,20 h后温度控制在25℃至发酵结束。采用此温度控制策略进行了CF66I的发酵,CF66I的活性达到了3.783 u/mL,比采用单一温度下的最大值提高了26.1%。