氨基酸纸层析展层剂的改进

<正> 一、前言在利用离子交换树脂柱分离蛋白质水解液中的氨基酸时,常希望用单向纸上层析手段鉴定洗脱液中氨基酸的种类。然而目前使用的纸层析展开剂对于某些氨基酸的分离效     

一种蚯蚓体腔液蛋白的分离纯化及其生物活性

赤子爱胜蚓体腔液含有多种蛋白并具有广泛的生物学活性,本研究采用6 V电压刺激蚯蚓分泌体腔液,通过离心、超滤分离得到蚯蚓体腔液蛋白粗品;然后将蛋白粗品经过凝胶层析和离子交换层析纯化,得到一种蚯蚓体腔液蛋白。以离子交换色谱分离到的蚯蚓体腔液蛋白样品为受试样品,紫外光谱扫描显示该蛋白在280nm处有最大吸收峰,SDS-PAGE凝胶电泳测定其分子量约为38.6 KDa,比浊抑菌试验结果显示低浓度受试样品作用大肠杆菌1 h出现抑制效果,作用金黄色葡萄球菌3h出现抑制效果,表明该样品具有一定抑制细菌生长的活性,此外,该蛋白还具有较强的溶解鸡红细胞的作用,溶解红细胞的最低浓度为0.39μg/mL,提示此蛋白的生物活性可能是通过破环细胞结构而实现的。     

混合床离子交换法对蛋白质溶液去离子

目的:探索一种能够在蛋白质不变性的前提下迅速而大量除去含蛋白质的溶液中无机离子的方法。方法:将001×7和201×7混合树脂应用于家兔全血细胞裂解液的去除无机离子过程,测定裂解液中无机离子被清除的程度,以及红细胞中乙酰胆碱酯酶的活性改变。结果:混合床离子交换法既能彻底清除裂解液中的无机离子,又能保留其中乙酰胆碱酯酶的活性。结论:在某些领域,混合床离子交换法是一种优越的去除蛋白质溶液中无机离子的方法。     

氨基酸制备色谱——丙氨酸、缬氨酸和亮氨酸制备柱柱效率研究

现代液相色谱已从分析色谱发展到制备色谱,为了研究氨基酸制备色谱柱柱效率,我们从液相色谱理论的十几个基本关系式中归纳出五个基本方程式,用以评价丙氨酸、缬氨酸和亮氨酸制备柱柱效率。初步试验结果表明,对强酸性阳离子交换树脂柱而言: 1.凝胶型离子交换树脂柱柱效率高于普通大孔型离子交换树脂柱柱效率,而与本室合成的Dpsc大孔型离子交换树脂柱柱效率相当。 2.凝胶型离子交换树脂中,低交联度离子交换树脂有利于提高缬氨酸和亮氨酸制备柱柱效率,可较好地分离缬氨酸和亮氨酸;较高交联度离子交换树脂有利于提高丙氨酸和缬氨酸制备柱柱效率,可较好地分离丙氨酸和缬氨酸。将不同的离子交换树柱组合起来,可以提高丙氨酸,缬氨酸和亮氨酸的分离度,提高氨基酸的回收率。这项研究成果已应用到从猪血粉、猪毛等天然蛋白质酸水解物中系统分离多种氨基酸,以及分别从缬氨酸、亮氨酸(异亮氨酸)发醇液中分离纯化缬氨酸、亮氨酸(异亮氨酸)。     

氨基酸的离子交换色谱(理论原理和实践)

<正> 第二章非自动分析仪中氨基酸离子交换色谱在第一章我们叙述了自动仪器中柱操作及有关参数,在这一章我们将叙述非自动仪器即手动操纵装置中色谱柱操作及有关规定。虽然非自动仪器也象自动仪器(氨基酸分析仪)一样,用聚苯乙烯磺酸阳离子交换剂填充柱子,但是色谱柱操作和柱流出液的检测,以及研究样品中成分的计算都用手工操作,因此有别于自动仪器,而具有其独特之处。     

广西眼镜蛇毒神经生长因子分离纯化方法

为了得到更高纯度和活性的广西眼镜蛇毒神经生长因子(never growth factor,NGF),我们对原有的分离纯化方法进行改进。采用DEAE CL-6B离子交换柱、Sephadex G-50凝胶层析柱、Macro-prep High S离子交换柱结合的方法进行分离。在分离纯化过程中,采用PC12细胞检验每一步所得结果中的NGF活性,并测定NGF诱导PC12细胞分化的最小浓度。经DEAE CL-6B离子交换柱、Sephadex G-50凝胶层析柱、Macro-prep High S离子交换柱分离纯化后,得到的第二峰具有NGF活性,并且已达到电泳纯。经PC12细胞验证后,确定NGF诱导PC12细胞分化的最小浓度为0.1μg/m L。     

离子色谱法检测食品中硼酸及硼酸盐

通过优化试验对离子色谱法检测食品中硼酸及硼酸盐的工艺进行了研究,探讨了取样量、超声提取时间、滤膜的选择、OnGuard RP柱和Ag柱的活化条件为：分析柱的选择、淋洗液的选择、进样体积和流速的选择,确定了离子色谱法检测食品中硼酸及硼酸盐的最佳检测条件,淋洗液：甲基磺酸（3mmol/L）/甘露醇（60mmol/L）;再生液：四甲基氢氧化铵（25mmol/L）/甘露醇（15mmol/L）;色谱柱：IonPac-borate分析柱,250*9mm或等效柱。检测器：电导检测器。抑制器：AMMS-ICE300,4mm微膜抑制器;柱温：25℃;流速：0.8mL/min;进样量：300μL。     

氨基酸的离子交换色谱(续)(理论基础和实践)

<正> 十、分析试剂为借助离子交换树脂成功地进行氨基酸色谱,试剂要特别纯化和对它进行必要的预处理。特别要注意去掉纯试剂中的重金属离子和带颜色的化合物,因为两者都牢固地保留在柱内离子交换树脂上,这不可避免地导致在氨基酸的分离过程中树脂交换容量的损失。对氨基酸离子交换色谱用主要试剂的必     

活性炭-离子交换树脂联合柱层析分离猪血粉水解液中L-苯丙氨酸等多种氨基酸的新工艺

<正> 本文报道了活性炭——离子交换树脂联合柱层析分离猪血粉水解液中L-苯丙氨酸等多种氨基酸的新工艺。本工艺将猪血粉水解液通过活性炭柱吸附,依次用IN氨水,适当浓度乙醇解吸得到L-苯丙氨酸,L-酪氨酸;活性炭柱流出液再通过离子交换柱交换吸附,依次用0.05、0.1、2N氨水解吸得到L-组氨酸、L-亮氨酸、L-精氨酸、L-赖氨酸。上述六种氨基酸对猪血粉的百分收率分别为2.5、0.8、5.4、4.1、3.4、2.9。     

猪血粉水解液预处理对碱性氨基酸产量的影响

<正> 一、前言以猪血粉为原料,经盐酸水解后,用一强酸性阳离子交换树脂柱同时分离三种碱性氨基酸的生产工艺,国内已有报道。我们重复国内工艺,发现现行工艺生产周期仍较长,驱酸的彻底性对收率影响较大,由于上柱液pH值不当,在洗脱过程中,洗脱液组份     

铜藻中β-丙氨酸的分离及结构鉴定

非蛋白质氨基酸在抗癌、抗菌、抗结核、抗坏血病等方面有着重要的作用。本文主要对铜藻中的游离氨基酸进行检测分析和部分分离纯化及结构鉴定方面的研究,为更好的开发利用这些天然产物提供技术支持。采用离子交换树脂层析法分离铜藻粗提液中的游离氨基酸,收集3 mol/L的氨水洗脱液,用PITC-HPLC柱前衍生反相高效液相色谱法对其进行检测分析,结果显示粗提液中除含有多种组成蛋白质的氨基酸外还有3种未知组分,且含量较高的常见蛋白质氨基酸为丙氨酸、脯氨酸、缬氨酸。采用半制备高效液相色谱系统制备分离了其中一种未知组分的衍生物MWZ2,经真空冷冻干燥后为略黄固体粉末,结合核磁共振波谱、高分辨质谱、红外光谱数据,最终鉴定MWZ2去掉已知取代基团PITC后的成分为β-丙氨酸,分子式为C3H7NO2,分子量为89.09。     

高效液相色谱法测定葡萄叶中甘氨酸甜菜碱、脯氨酸及葫芦巴碱

甘氨酸甜菜碱、脯氨酸及葫芦巴碱的含量与葡萄的抗逆性能密切相关,应用离子交换树脂提取葡萄叶中的这三种物质,采用Suger-pak1(waters)色谱柱,柱温:85℃;样品测定时间:70min;进样体积:100μL;流速:0.6mL/min;检测波长:195nm;流动相:50mg/LCa-EDTA的HPLC同时分析测定这三种物质,甘氨酸甜菜碱、脯氨酸及葫芦巴碱线性相关系数分别为0.9999,0.9994及0.9994;保留时间分别为20.28,25.66及30.65min;检出限分别为1.35,2.56及1.02ng/mL,回收率为93%~96%。此方法分离效果好,稳定,精确。     

槲寄生中多肽B6的分离纯化和一级结构测定

采用离子交换、凝胶过滤、HPLC等提取、分离、纯化方法,从我国东北产槲寄生中得到第二种新成分槲寄生毒素B6。Edman降解结合质谱技术测定其一级结构为KSCCPNTTGRNIYNTCRFAGASRERCAKLSGCKIISASTCPSDYPK。进化分析说明该成分与白果槲寄生中的槲寄生毒素同源性很高,亲缘关系较近。同源模建表明B6是一种高α-螺旋的多肽。     

抗苯丙氨酸羟化酶单克隆抗体的提纯和轻、重链的N端顺序

利用DEAE-52离子交换层析和FPLC的Mono Q离子交换柱,从鼠的腹水液中提纯抗苯丙氨酸羟化酶单克隆抗体,再利用FPLC的Superose 12凝胶柱分离它们的轻链和重链。经SDS-凝胶电泳,氨基酸组成分析和N端顺序测定,确定轻链的分子量约为24 kD,约含有215个残基,轻链的N端的顺序是:D-V-V-M-T-Q-T-P-L-S-L-P-V-S-L-G-D-Q-A-S-I-S-C-R-S-D?-Q-N(D)-,并确认该轻链为鼠KaPPa轻链Ⅱ型。重链的分子量约为52 kD,它的末端被焦谷氨酰封闭。     

高效液相色谱法对重组人甲状旁腺素相关肽的研究

针对重组人甲状旁腺素相关肽在反相柱的高效液相色谱中出现的两个峰,研究两个峰性质并对两个峰是由于一种物质形成了两种构象造成的加以讨论。采用了离子交换柱的高效液相色谱分析、电泳、高效液相色谱和质谱联用分析、SDS破坏小肽高级结构再进行反相柱的高效液相色谱分析、更换反相柱高效液相色谱分析中的流动相等方法,结果表明,从高效液相色谱分析和电泳分析来看,样品为纯品。同时推测两个峰是由于一种物质形成了两种不同的构象造成的,且两种构象可以在有酸性离子对试剂的情况下快速达到动态平衡。     

用亲和层析技术鉴别布氏菌强弱毒差异抗原成分

采用CDI和CCA两种方法活化Sepharose4B,制备亲和层析柱,并对这两种方法的优劣进行了比较。分别用超声液破碎和Ribi机器压榨制备布氏菌强毒M28株和疫苗M25株的可溶性抗原,作为亲和层析柱的配基。抗M28的血清经过M28和M5柱,洗脱液中的抗体再分别和M28、M5抗原反应经电转印检查证实,M28抗原中的一条蛋白带只与M28柱洗脱液反应,不与M5柱洗脱液反应。这种只与M28柱洗脱液反应的蛋白可能即是布氏菌强毒M28株所特有的抗原成分,也就是强毒株和弱毒株的差异抗原成分。     

“观察根对矿质元素离子的交换吸附现象”实验的说明

在“观察根对矿质元素离子的交换吸附现象”的实验中,被吸收到根上的亚甲基蓝阳离子分为三部分:第一部分是可被蒸馏水从根上洗脱的亚甲基蓝阳离子,也就是实验中所指的“根上的浮色”;第二部分是与根细胞上的H~+离子交换后而到达根细胞的亚甲基蓝阳离子。它们不能被蒸馏水洗下来,但可以被Ca~(2+)离子交换下来,这是该实验要求观察的主要现象;第三部分则是那些既不能被蒸馏水洗脱,又不能被Ca~(2+)离子交换下来的亚甲基蓝阳离子。根上的亚甲基蓝阳     

配位体交换色谱法测定槐米废渣水解液单糖成分

利用生物质转化成糖研究近年来备受关注,为给工业化高效利用槐米废渣提供检测技术,本文建立了槐米废渣水解转化糖液中4种主要单糖的铅(Pb~(2+))配位体交换高效液相色谱分析方法并采用离子色谱法验证了方法的可行性;实验比较了Pb~(2+)和Ca~(2+)两种不同柱内抗衡离子对组分分离的影响,最终利用铅配体方法对实际样品进行了测试。方法分离柱采用Sepax Carbomix Pb-NP 5(300×7.8 mm ID,5μm,8%交联度)色谱柱,柱温75℃;流动相采用超纯水,流速0.50 m L/min;检测器采用示差折光检测器,检测器温度为30℃;样品采用活性炭固相萃取小柱脱除色素。结果表明,组分葡萄糖、木糖、半乳糖和阿拉伯糖在25 min内完成分离,在0.2~20.0 mg/m L浓度范围内呈现良好的线性关系,方法检测限在1.94~1.98μg/m L之间;槐米废渣水解液中阿拉伯糖平均含量大于67%,具有较高回收价值。方法样品前处理简便,重现性好,结果准确,测试成本低。     

离子色谱法同时测定包装饮用水中的6种阴离子

建立离子色谱法同时测定包装饮用水中Br O3-、NO2-、Br-、NO3-、SO42-和Cl O4-含量的方法。选用亲水性的Ion Pac AS19阴离子交换色谱柱作为分离柱,KOH溶液作为淋洗液,优化淋洗液浓度、淋洗程序、流速、柱温等测试条件后,采用电导检测器测定包装饮用水中6种目标阴离子的含量。结果表明:当进样体积为100μL时,6种目标阴离子在一定浓度范围内与其对应的峰面积呈线性关系,相关系数均大于0. 999,Br O3-、NO2-、Br-、NO3-、SO42-和Cl O4-的最小检测质量浓度分别为0. 004 5、0. 005 9、0. 012 4、0. 004 0、0. 011 7和0. 015 6 mg/L;对每份样品进行3个水平的加标回收试验,加标回收率均为91. 35%～106. 88%,测定结果的相对标准偏差为0. 14%～3. 49%。该方法具有选择性好、准确度高和操作简单等优点,可应用于同时测定包装饮用水中多种阴离子的含量。     

最新专利文摘

一种手性药物分离用双柱切换色谱制备装置 本发明涉及手性药物分离技术,具体地说是一种手性药物分离用双柱切换色谱制备装置。它用计算机控制,主要由四根色谱柱、三个电磁阀、制备泵组成,其中:待拆分的原料容器经制备泵、进料电磁阀与预柱连接,溶剂容器接到进料电磁阀,预柱通过切换电磁阀与第一、二手性制备柱串联后和平衡柱相连,平衡柱输出端经紫外检测