光散射技术的建立与蛋白质分子量和分子形状的测定

在蛋白质的物理化学研究中,光散射是一种很重要的方法。利用它,可以比較方便地測出蛋白貭的分子量,而对于較大的蛋白貭分子,还可以測定其形状。在研究蛋白貭分子的解离聚合作用,不同分手間的相互作用及上述作用过程的动力学等方面,光散射也     

温差电偶温度计测量体温和循环时间

近年来医学在研究体溫調节和低溫麻醉方面,已經广泛地利用溫差电偶溫度計測量体溫;其优点主要是測溫部分体积小,所需要的热容量也小,当測定溫度时,能够迅速地达到被測物体的溫度。同时溫差电偶溫度計的測溫部分是由很細的两种不同的金属絲构成,因而可以用来測量皮肤或組織上微小一点的溫度;并能根据需要做成不     

男性大學生正常總體液量、硫氰酸間隙及血量

關於國人在正常生理情現下,各種體液分佈情形之研究材料,目前尚很缺乏。1948年夏季中國生理科學工作者趙寶礽、盧振東等曾在南京、上海兩地用T-1824(伊凡氏藍)作過男女各25人正常血漿量之測定,並推算出血液總量,同時又測定了男女共47人的硫氰酸間隙,但均未作全身總體液量之測定。同年冬季吳襄在南京用T-1824     

硫硫键的分光光度法测定

本文主要介紹用分光光度計直接和間接測定硫硫鍵的二个方法。由Na_2SO_3和硫硫鍵反应而产生的巯基可以和对氯汞苯甲酸(PCMB)結合而引起紫外吸收增加。这是一个定量反应,从紫外吸收增加数值可以算出硫硫鍵的含量;为了避免其他紫外吸收物貭的干扰,也可以利用含有二苯硫代縮二氨基脲(双硫腙)的四氯化碳溶液抽提殘留的自由PCMB,从PCMB与双硫腙結合而引起有机相可見光(625mμ)吸收的減少而間接求得硫硫鍵的含量。Na_2SO_3能和PCMB可逆地生成具有紫外吸收特征的絡合物,在pH为9.6,温度为50度时,这一反应的平衡常数为6.7mM,但当Na_2SO_3浓度远較PCMB为过量时,这一反应并不影响用上述方法对硫硫鍵測定的准确性。也可以在反应完成后用加入較Na_2SO_3略为过量的H_2O_2消除这一絡合物对紫外光吸收的干扰。依靠紫外吸收的测定方法比較准确,測定誤差可在2%以內,而用双硫腙間接測定誤差約在5%左右。用上述二个方法对一些蛋白如胰島素、木瓜蛋白酶、核糖核酸酶、胰疑乳蛋白酶、胰蛋白酶、人血清白蛋白等蛋白貭的硫硫鍵及巯基进行測定的結果与文献上报告符合。此外,在改变測定条件时还清楚地观察到不同蛋白貭的硫硫鍵,甚至同一蛋白貭內不同硫硫鍵与Na_2SO_3反应的能力相差很远。例如胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶的硫硫鍵較易反应,胰島素較难,而核糖核酸酶和木瓜蛋白酶分子中的某些硫硫鍵則要求更为強烈的反应条件。     

伤流量测定的改进方法

伤流量是植物根系活力的重要指标,在測定方法中采用称重法較为簡便准确。一般測定时都用指形管,中間放脱脂棉套在切断植株的伤口。但这种做法有一定的缺点:首先指形管和植株莖杆的粗度往往不易一致,在测定过程或多或少有水分蒸发,誤差无法計算。     

药用地不容中的生物碱

从药用地不容(Stephania officinarum Lo et Yang)的块根中分得8种生物碱,根据其理化性质、波谱分析及化学方法鉴定为异紫堇定碱(Ⅰ),1-四氢巴马汀碱(Ⅱ)、青风藤碱(Ⅲ)、克班宁(Ⅳ)、异波尔定碱(Ⅴ)、紫堇块茎碱(Ⅵ)、巴马汀碱(Ⅶ)和 N-β-甲基四氢巴马汀碱硝酸盐(Ⅷ)。其中Ⅰ为主要生物碱,得率为1.24%。Ⅷ为天然界中新的季铵型生物碱,并首次证实以硝酸盐形式存在于植物体中。     

提取线粒体DNA方法的比较及较纯线粒体基因获取方法的确立

目的:对2种常用的线粒体DNA提取方法进行比较,分析提取物中核DNA的存在情况,同时建立新检测方法降低线粒体假基因干扰。方法:以仅在核DNA中存在的基因β-actin作为核DNA存在的标定基因,通过PCR方法扩增线粒体DNA上的一段基因MTND5-2,并以β-actin做参比,比较常用的2种提取线粒体DNA方法的优劣,即碱法Ⅰ(先提取完整线粒体后从中获得线粒体DNA)和碱法Ⅱ(根据线粒体DNA与核DNA的结构差异,从中获得双链环状的线粒体DNA)。结果:2种线粒体DNA提取方法并不能获得仅含线粒体DNA的纯提取物,碱法Ⅰ获得的线粒体DNA纯度相对较高;以碱法Ⅰ提取物为模板进行PCR,可获得更多较纯的线粒体目的基因。结论:碱法Ⅰ较碱法Ⅱ可获得更纯的线粒体来源的目的基因;新建方法可获得较纯的线粒体基因,且是一种简单、方便、经济的方法。     

皮肤电位测定器的设制

皮肤电位測定器因其輸入阻抗較高,所測得的皮肤电位值,比由皮肤間两点直接連接至一高灵敏反光鏡检流計按光点偏轉讀数所表示的电位值更为可靠与准确。要制成一只灵敏度較高,工作很稳定用来測定皮肤电位的电子管直流毫伏計,不論在設計的結构上和使用元件的选择上都必須具备一定的条件与要求,才能得到較好的效果。本文所設制的皮肤电位測定器全部元件都是国产的,使用材料較少,同时工作上能滿足一般实驗需要。在設計上采用了阴极平衡电路和負反馈的原理,以保証获得較高的稳定性。     

測定强心苷的“臨界灌注速度”與“臨界轉向點”的意義

1910年,Hatcher曾以低濃度强心苷緩慢靜脈灌注的方法,測定其效價。1927年,Hauptstein發現毒毛旋花子苷等强心苷在快速短期灌注時致死量較小,在緩慢長期灌注時致死量大,並推想在灌注時間無限延長時(灌注速度極慢),則無限大量的强心苷也不能對動物發生作用。1933年,Lendle用靜脈灌注法測定貓對强心苷的消除時,     

用小液柱法测定植物組織的吸水力

測定植物組織吸水力的“細流法”(法)是一个簡便而又較精确的方法。宋廷生、余叔文在“关于測定植物吸水力和細胞渗透压的細流法”(植物生理学通讯1963,3)一文中,已对此法作了詳細的介紹,并提出一些改进意見。但是,对于“小液流”方向的判断     

牛血浆中一种α_1-糖蛋白的提純和鉴定

(一)本文用硫酸銨分段沉淀和DEAE纤維素柱层析方法从牛血浆中提取了一种对三氯乙酸不稳定的α_1-糖蛋白,經鉴定系超离心、电泳和免疫純。光散射法測定分子量为66,500,超离心-扩散法測定为67,000(偏微比容取0.65)。 (二)該蛋白质具有抑制胰蛋白酶的活力,酶与糖蛋白的克分子比值是2:1。 (三)該蛋白质与胰蛋白酶結合后,仍与其相应抗血清产生沉淀反应,文中对其抑制活力中心和抗原决定簇的关系作了討論。     

大花地不容中的生物碱

大花地不容（ＳｔｅｐｈａｎｉａｍａｃｒａｎｔｈａＨ．Ｓ．ＬｏｅｔＭ．Ｙａｎｇ）系防己科千金藤属（Ｓｔｅｐｈａ－ｎｉａ）一新种［１］。其化学成分未见报道。今从其块根中分得８种生物碱,经鉴定,主要为ｌ－四氢巴马汀（ｌ－ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｐａｌｍａｔｉｎｅ,Ⅰ）和异紫堇定碱（ｉｓｏｃｏｒｙｄｉｎｅ,Ⅱ）,得率分别为０．８３％和１．８２％。其余为紫堇定碱（ｃｏｒｙｄｉｎｅ,Ⅲ）、紫堇单酚碱（ｃｏｒｙｄａｌｍｉｎｅ,Ⅳ）、千金藤定碱（ｓｔｅｐｈａｌｉｄｉｎｅ,Ⅴ）、巴马汀碱（ｐａｌｍａｔｉｎｅ,Ⅵ）、紫…     

熏蒸剂气熏完整甘薯块根呼吸强度的連續測法

甘薯呼吸强度的測定,旣可以了解貯藏薯堆安全状况;也可明确化学药剂等处理甘薯保藏好坏的原因。     

应用滤纸层析法作维生素丙定量测定

(一)利用濾紙層析法分離維生素丙時,氧氣是破壞維生素丙的主要因素,防上這種破壞作用的最有效方法是用CO_2把層析室及溶媒中的O_2排出,並加一定量的H_2S。 (二)以正丁醇、三氯醋酸和水(混合四體積的正丁醇和六體積的4％三氯醋酸水溶液)為溶媒,用CO_2把溶媒及層析室中O_2盡量完全排出,並置飽和H_2S水溶液50—100毫升於層析室內,可以完全防止層析分離時維生素丙的破壞。用這種方法測定動植物組織中維生素丙的總合量時,回收率茌98％以上。 (三)層析室中的H_2S對脫氫維生素丙的還原能力不規律,因此不能用這種方法測定樣品中脫氫維生素丙的含量,只能用以測定還原維生素丙的總合量(浸取液先經H_2S處理然後層析)。     

蚕氨基酸代謝之研究——Ⅵ.家蚕与蓖麻蚕的谷氨酸脫氫酶

在家蚕与蓖痲蚕的脂肪体,絲腺后部和中腸組織中,利用分光光度法,都观察到谷氨酸脫氫酶。将α-酮戊二酸与NH_4~+加于以上各种組織的酶液中,測定NADH_2的氧化,証实了其逆向反应的存在。蚕組織中的谷氨酸脫氫酶需要NAD为其輔酶。在家蚕与蓖痲蚕的絲腺后部中,我們利用直接測定的方法,观察到БраунШтеЙн所提出的轉氨-脫氨作用的存在,从而进一步說明谷氨酸脫氫酶在氨基酸代謝中的重要地位。此外,我們尚发現在不同发育阶段,蓖麻蚕脂肪体中谷氨酸脫氫酶的活力表現显著的变化。     

江南山梗菜化学成分的研究

从江南山梗菜(Lobelia davidii Franch.)植株中分得β-谷甾醇、β-香树素及其棕榈酸酯,以及去甲山梗酮碱、去甲半边莲定、山梗新碱(Ielobanonoine)、山梗醇碱、去甲山梗醇碱.5种生物碱。其中山梗新碱为一新化合物。     

苦豆子生物碱抗烟曲霉、须癣毛癣菌和新生隐球菌的作用研究

目的对比研究苦豆子总碱、槐果碱、苦参碱、槐定碱、氧化苦参碱体外抗烟曲霉、须癣毛癣菌和新生隐球菌的敏感性,为苦豆子进一步开发利用奠定基础。方法分别用管碟扩散法和微量液基稀释法,测定苦豆子总碱、槐果碱、苦参碱、槐定碱、氧化苦参碱对烟曲霉、须癣毛癣菌和新生隐球菌的抗菌活性。结果管碟法显示上述5种生物碱体外对烟曲霉、须癣毛癣菌和新生隐球菌均有不同程度的抗菌活性。前4种生物碱对烟曲霉的最低杀菌浓度(MFC)分别为25.0、4.25、5.0、3.125 mg·mL~(-1),氧化苦参碱对烟曲霉MFC500 mg·mL~(-1);对须癣毛癣菌的MFC分别为3.125、2.125、5.0、1.5625、125 mg·mL~(-1);对新生隐球菌的MFC分别为3.125、4.25、10、6.25、1000 mg·mL~(-1)。结论槐果碱、苦参碱及槐定碱其抗真菌活性与苦豆子总碱相当,氧化苦参碱的作用不显著。     

槐定碱与牛血清白蛋白的相互作用研究

在模拟动物体生理条件下,用荧光猝灭、荧光偏振和紫外-可见吸收光谱法研究了槐定碱与牛血清白蛋白(BSA)结合作用。荧光猝灭数据显示,槐定碱与BSA发生反应生成了新的复合物,属于静态荧光猝灭。求出了不同温度(19、25、31、37℃)下槐定碱与BSA作用的结合常数分别为1.219×106,1.164×106,1.110×106和1.057×106L/mol,由van’tHoff方程式计算槐定碱与BSA反应的热力学参数:焓变ΔH和熵变ΔS值分别为-5.97kJ/mol和96.11J/(mol.K),表明槐定碱与BSA间的作用力以静电引力为主。以华法林和布洛芬(分别为siteI和siteII探针)为标记药物研究槐定碱在BSA上的结合位点,结果表明,槐定碱结合在BSA疏水空腔的siteI位点。     

3种苦参生物碱对小鼠的毒性作用研究

以小鼠为试验对象,对3种苦参生物碱(氧化苦参碱、槐定碱、苦参碱)的毒性作用进行了系统的分析.结果显示:(1)混合后的苦参生物碱毒性增加,其中苦参碱+槐定碱的增效作用最强,协同毒力指数(c.f)值达59.1,氧化苦参碱+苦参碱混合给药,c.f值为37.3,为增效作用;氧化苦参碱+槐定碱混合给药,c.f值为13.6,为相加作用.(2)血常规检测结果显示,3种苦参生物碱处理组小鼠的白细胞计数(WBC)、血小板总数(PLT)、中粒细胞(GR)较之对照组显著增高;血液生化指标检测结果显示,槐定碱和氧化苦参碱各处理组小鼠的尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)水平均极显著高于对照组(P＜0.01),苦参碱各处理组小鼠的丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基酸转移酶(AST)水平比对照组极显著升高(P＜0.01);脏器系数的统计结果显示:槐定碱、氧化苦参碱各处理组小鼠的肾脏系数、心脏系数以及肝脏系数均极显著高于对照组(P＜0.01),苦参碱处理组小鼠的肾脏系数、心脏系数及肺脏系数显著地高于对照组(P＜0.01、P＜0.05、P＜0.05).研究表明,3种苦参生物碱对小鼠肝脏、肾脏有影响,初步确定它们作用的靶器官是肝脏和肾脏.     

鹰爪花中生物碱类成分研究

为了解鹰爪花(Artabotrys hexapetalus)的化学成分,采用各种柱层析和色谱方法从鹰爪花茎中分离鉴定了12种生物碱类化合物,分别为:光千金藤定碱(1)、四氢非洲防己碱(2)、四氢药根碱(3)、前莲碱(4)、奥可梯木种碱(5)、华防己碱(6)、深山黄堇碱(7)、光千金藤碱(8)、鹰爪花碱(9)、lanuginolide(10)、isoscoulerine(11)和N-甲基阿西米洛宾(12)。其中化合物1~7均为首次从鹰爪花属植物中分离得到。化合物10对白色葡萄球菌(Staphylococcus albus)和蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)生长都具有较好的抑制作用,MIC值分别为20和10μg m L–1。