MALDI-TOF-MS技术检测宫颈癌中HPV感染状态

目的:本研究拟评MALDI-TOF-MS技术在HPV分型中的实际应用效果.方法:采用MALDI-TOF-MS技术检测河南安阳地区94例宫颈癌样本中HPV感染状态,并与普通PCR方法得到的结果相比较.结果:94例宫颈癌组织中HPV感染率为92.6%,共检测到10种常见的高危型别,以16为主,其次是58和18型.样本单一HPV型别感染为主,其中16型单一型别感染占6I.7%,见多种型别和组合的多重感染.与普通PCR检测结果比较发现两种方法样本HPV(不分型)检测一致率为95.7,样本HPV16型检测一致率为93.6%.结论:MALDI-TOF-MS技术能够精确、快速、高通量的对宫颈癌中HPV进行检测和分型.     

新疆维族妇女感染的HPV 型别分布的研究

目的:探讨人乳头瘤状病毒(Human papillomavirus,HPV)在新疆南部维族妇女人群中的型别分布情况。方法:以年龄在30-59岁的新疆伽师县夏普吐勒乡维吾尔族妇女人群为基础进行筛查,签署知情同意书后,采集受试者宫颈脱落细胞,利用PCR和基因芯片技术检测HPV DNA并分型。结果:共2473名妇女入选。HPV总的感染率为9.1%,高危型中HPV-16的感染率最高为6.9%,其他高危型的感染率从高到低依次为:HPV-59、HPV-56、HPV-18、HPV-33、HPV-58、HPV-51、HPV-31、HPV-45、HPV-52、HPV-68、HPV-35、HPV-39。低危型中HPV11感染率最高,其他低危型的感染率从高到低依次为HPV-42、HPV-43、HPV-6、HPV-53、HPV-66、HPV-73。HPV-44、-83、-MM4没检测到。多重感染率为34.2%。结论:新疆维吾尔族妇女人群中以HPV16感染为主,其次为HPV59、56、18、33等。HPV59可能是新疆维吾尔族妇女较易感染的类型。体现了新疆维吾尔族妇女感染HPV的特殊性。     

人乳头瘤病毒治疗性疫苗的研究进展

人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)感染是宫颈癌的主要致病因素,多年来人们努力通过研发HPV疫苗来控制HPV相关疾病。虽然预防性HPV疫苗的接种代表了重大的公共卫生突破,但它仅能预防HPV部分型别的感染,并不具有治疗效果,无法防止预先存在的HPV感染进展为恶性肿瘤。而以致癌蛋白E6、E7等为靶点,诱导特异性细胞毒性T细胞的HPV治疗性疫苗可以减轻甚至消除HPV相关高度病变和癌症,因此其研究具有重要意义。本文旨在阐述近年来HPV治疗性疫苗的研究进展,并为以后的治疗性疫苗研究提供指导。     

高危人乳头瘤病毒基因型与宫颈癌筛查

应用第二代基因杂交捕获技术（HC-Ⅱ）对7068例21-58岁妇女官颈细胞进行13种高危型人乳头瘤病毒（HPV）DNA的检测。该人群中13种高危型HPVDNA的总检出率为23．45％。在检出的1440例HPV阳性者中,宫颈癌、官颈上皮内高度病变（CINⅡ／Ⅲ）及宫颈上皮内低度病变（CINⅠ）的高危型HPVDNA检出率分别为100％、100％、65．06％。女性生殖道高危型HPV感染是宫颈癌及CIN流行的主要危险因素,提示言颈癌的防治应重点预防HPV感染,而对HPV感染的筛查和密切监测应是已感染高危型HPV的对象;     

人乳头瘤病毒与宫颈癌关系研究进展

宫颈癌是一种严重危害女性健康的恶性肿瘤,其发病率较高,位居女性恶性肿瘤的第二位,仅次于乳腺癌。自从1977年德国学者ZurHausen等从宫颈癌标本中发现了人乳头瘤病毒(Human papillomavirus HPV)DNA,并推测HPV感染与宫颈癌发生有关后,许多学者对HPV与宫颈癌的相关性进行了大量的研究,并证实HPV感染是宫颈癌发病的必需因素。目前,对于宫颈HPV感染检测有多种手段,其中聚合酶链反应(PCR)和捕获杂交技术在实验室中应用较广泛。在宫颈癌筛查中联合应用HPV检测和细胞学,不仅可以提高敏感性,而且还可以减少随诊频率,从而大大降低了宫颈癌的发生。     

宫颈人乳头瘤病毒感染治疗方法研究进展

人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)感染所致宫颈疾病是常见的性传播疾病之一,也是导致宫颈癌发生的重要危险因素.目前尚无特异有效的临床治疗手段,针对HPV感染所致宫颈疾病治疗策略的研究和应用是世界范围内迫切需要解决的重要问题.本文针对宫颈HPV感染治疗策略从手术治疗、物理治疗、药物治疗(包括西药和中药)和免疫治疗四方面的研究进展进行综述.     

宫颈癌组织人乳头瘤病毒的荧光偏振基因分型

采用荧光偏振人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)分型新方法探讨了8种常见型别HPV在陕西宫颈癌患者中的流行情况。首先,用HPV GP5 ／GP6 通用引物PCR扩增65例早期宫颈癌(Ⅱa期内)和72例慢性宫颈炎病变组织DNA粗提物,继之将模板指导的末端延伸反应与荧光偏振检测技术结合(TDI-FP),用GP5 ／GP6 扩增区内的HPV6、11、16、18、31、33、35和58型特异性探针与PCR产物杂交后,荧光素标记的特异碱基(TAMRA-ddTTP或R110-ddGTP)在GP5 ／GP6 产物中相应的模板指导下,掺入延伸至相应探针末端,致使对应的TAMRA或R110 FP值升高,从而对扩增的HPV阳性产物进行HPV分型。65例宫颈癌患者中检出HPV57例,阳性率87．69％,72例慢性宫颈炎患者中检出HPV28例,阳性率38．89％,两组间HPV阳性率有显著性差异。宫颈癌与慢性宫颈炎患者中4种最常见的HPV型别分别是HPV 16(45．6％)、HPV 18(22．8％)、HPV 58(17．5％)、HPV 31(7．02％)和HPV 16(35．7％)、HPV 11(32．1％)、HPV 6(21．4％)、HPV 18(10．7％)。慢性宫颈炎患者中检出的HPV型别57．14％属高危型。HPV 16在两组中均最为多见。中国陕西宫颈疾病患者中HPV感染有其特点,世界范围内少见的HPV 58在陕西宫颈癌与慢性宫颈炎患者中均较为多见,在进行HPV新诊断方法及疫苗研制时应考虑到这种特点。     

人乳头瘤病毒HPV31型宫颈癌细胞模型的建立

宫颈癌与人乳头瘤病毒感染密切相关,建立宫颈癌实验模型可为宫颈癌的研究提供理想的模拟实验条件。我们通过应用基因重组技术,分别以HPV31型E6和E7基因为目的基因,通过原核表达、蛋白纯化和免疫小鼠等获得其特异性检测抗体。我们还通过构建E6和E7基因真核表达载体、转染C33A细胞、博莱霉素抗性筛选和表达检测等步骤,获得一种稳定的体外宫颈癌细胞系。经酶切鉴定及测序证实细胞基因组已重组插入质粒中的目的基因。我们已成功筛选到稳定的目的mRNA和蛋白表达的阳性细胞系,建立了稳定的人乳头状瘤病毒31型(HPV31)的宫颈癌细胞株,为研究宫颈癌提供了体外实验模型。     

广西柳州地区大学生人乳头瘤病毒感染自然史的前瞻性研究

研究广西柳州地区男女性大学生人乳头瘤病毒(HPV)感染的自然史。2014年6月至7月在广西科技大学招募161名有性生活史的大学生,基线访视收集其人口学及性行为信息,之后每隔6个月进行随访,共随访2次。每次访视均采集女性阴道、外阴和肛周部位的标本,采集男性外生殖器和肛周部位脱落细胞标本,并对所有标本进行HPV DNA分型检测。使用Kaplan-Meier法分析男女性大学生HPV累积感染和清除的风险差异,采用Logistic回归、Cox比例风险回归和WLW-Cox比例风险回归分别分析HPV基线感染、新发感染和清除的影响因素。男性和女性大学生基线HPV感染率分别为7.7%和16.3%,男性感染率更低[OR(95%CI)=0.23(0.06～0.89);P=0.03]。大学生HPV新发感染率为7.6(95%CI:3.8～15.2)/1 000人月,未发现性别差异(P=0.69)。平均随访12.5个月后,70.6%(12/17)的感染被清除,清除的中位时间为6.6个月,且男性清除的速度更快[HR(95%CI)=4.37(1.26～15.12);P=0.02]。广西柳州地区女性大学生HPV感染率高于男性,且HPV感染在女性大学生中清除速度低于男性。     

兰州地区女性感染HPV及其基因类型分析

目的:了解兰州地区成年女性感染人乳头瘤病毒(humanpapillomavirus,HPV)及其基因类型分布状况,为本地区HPV分子流行病学研究提供理论依据。方法:利用PCR技术分别对100例妇科门诊就诊者进行HPV基因亚型检测。结果:100例样品中,HPV DNA检出率为19%(19/100),其中HPV16 DNA感染率15%(15/100),HPV58 DNA感染率3%(3/100),HPV18 DNA感染率2%(2/100),HPV 16与HPV18双重感染1例。结论:本地区成年女性HPV感染主要以HPV16多见,而HPV16与恶性肿瘤密切相关,因此对HPVDNA阳性者定期随访,有利于宫颈癌的防治。     

Identification of Genetic Variants of Human Papillomavirus in a Group of Mexican HIV/AIDS Patients and Their Possible Association with Cervical Cancer

Infections caused by the human immunodeficiency virus (HIV) and human papillomavirus (HPV) cause thousands of deaths worldwide each year. So far, there has been no consensus on whether there is a direct relationship between the incidence of neoplasms and the immunosuppression caused by HIV that could help understand if coinfection increases the likelihood of cervical cancer. The objective of the study was to identify the presence of genetic variants of HPV in a group of HIV-positive women and their possible association with cervical cancer. Cervical samples were taken from HIV-positive patients for cytological analysis to identify the HPV genotype by polymerase chain reaction (PCR) and sequencing. The most prevalent L1 capsid protein mutations in the HPV genotype were analyzed in silico. Various types of HPV were identified, both high-risk (HR) and low-risk (LR). The most prevalent genotype was HPV51. Analysis of the L1 gene sequences of HPV51 isolates showed nucleotide variations. Of the samples analyzed in Puebla, Mexico, HPV51 had the highest incidence (17.5%, 7/40). Different mutations, which could be used as population markers, were detected in this area, and they have not been reported in the L1 databases for HPV51 in Mexico. Genotypes 6, 14, 86, 87, 89, and 91, not detected or reported in samples from patients with HPV in Mexico, were also identified. Data from the population analyzed suggest no direct relationship between HIV immunosuppression and cervical cancer, regardless of the high- or low-risk HPV genotype. Furthermore, it is possible to develop regional population markers for the detection of HPV based on the mutations that occur in the sequence of nucleotides analyzed.     

反向点杂交法快速检测HPV基因型的临床应用

应用反向点杂交法(RDB)的原理,针对HPV 6B, 11, 16, 18, 31, 33和35设计了7条序列作为未标记的特异性寡核苷酸(SSO)探针,分别固定在尼龙膜条上,形成7个点,再与经PCR扩增的样品DNA序列杂交,即可在一个膜条上分辨出这7型HPV中的任一型.此法快速简便,特异性高,不存在假阳性;且因PCR灵敏度高,亦不易出现假阴性.用PCR-RDB法检测保存的宫颈癌组织石蜡包埋标本32例,结果:HPV16阳性22例(68.8%),HPV18阳性5例(15.6%),HPV16/18双重感染2例(6.3%),阴性仅3例(9.3%).     

Pin1，CyclinD1在宫颈癌中的表达及与HPV16／18感染的关系

研究肽基脯氨酰顺反异构酶Pin1,CyclinD1在宫颈液基细胞上皮内病变和宫颈癌中的表达与HPV16/18感染的关系,探讨其对宫颈上皮内病变和宫颈癌诊断的意义。经液基细胞学筛查,采用原位杂交方法对80例宫颈上皮内病变和宫颈癌,13例正常组织进行HPV检测分型,同时对HPV16/18阳性的标本进行Pin1,CyclinD1免疫组化。在正常宫颈组织、CINⅠ,CINⅡ-Ⅲ,浸润癌组织中Pin1表达率分别为7.7%(1/13)、57.1%(12/21)、68.4%(13/19)、85%(34/40)(P<0.05);CyclinD1表达率分别为0%、9.52%(2/21)、20.5% (4/19)、55%(22/40)。HPV16/18的表达率也随着宫颈病变的升级而升高,分别为15.4%(2/13)、42.9%(9/ 21)、57.9%(11/19)、82.5%(33/40)。Pin1和HPV16/18在宫颈病变中的表达高度相关(r_0=1.0,P<0.05);而CyclinD1的表达与HPV16/18相关性较小(r_0=0.4,P<0.05)。认识Pin1,cyclinD1和HPV16/18三者之间的关系及对宫颈上皮内病变和宫颈癌的筛查诊断具有重要意义。     

尖锐湿疣病变的人乳头瘤病毒6型L1序列多态性分析

采用PCR方法从协和医院尖锐湿疣患者皮损中检测人乳头瘤病毒(HPV),并通过限制性片断长度多态性分析分型发现,HPV6型为主要感染型别,其次是HPV11型.根据临床特征选择主要致病型HPV6 8个分离株,扩增L1晚期基因,构建重组测序质粒,双脱氧法测序并分析L1区的核苷酸和氨基酸序列变异状况.结果表明,HPV6L1基因序列发生碱基替换的区域主要有四个区,包括SR1(5911～6104),SR2(6217～6273),SR3(6540～6661)和SR4(7062～7250).少数的碱基替换导致错义突变,推导的蛋白质一级结构中有0～3个氨基酸发生变异,但抗原性强弱与原型HPV6基本一致.     

宫颈癌患者高危型人乳头瘤病毒感染状况及其与阴道微环境、氧化应激水平及Th1/Th2细胞因子的关系研究

摘要 目的：探讨宫颈癌患者高危型人乳头瘤病毒（HR-HPV）感染与阴道微环境、氧化应激水平及辅助性T细胞（Th）1/Th2细胞因子的关系。方法：选择2016年1月至2021年12月石家庄市妇幼保健院收治的201例宫颈癌患者,根据是否发生HR-HPV感染将患者分为HR-HPV组（84例）和非HR-HPV组（117例）,另选择171例体检健康妇女为对照组。检测受试者阴道微环境（阴道清洁度、pH值、滴虫、霉菌、线索细胞和乳酸杆菌）,氧化应激指标[血清总氧化态（TOS）、总还原态（TAS）、氧化应激指数（OSI）]、Th1/Th2细胞因子[白细胞介素（IL）-2、IL-4、IL-6、IL-10、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、干扰素-γ（IFN-γ）]水平,比较上述指标的差异。结果：201例宫颈癌患者,HR-HPV 感染84例,发生率为 41.79%。HR-HPV组和非HR-HPV组阴道清洁度异常、pH值异常、滴虫阳性、霉菌阳性、线索细胞阳性检出率高于对照组（P＜0.05）,乳酸杆菌阳性检出率低于对照组（P＜0.05）;HR-HPV组阴道清洁度异常、pH值异常检出率高于非HR-HPV组（P＜0.05）,乳酸杆菌阳性检出率低于非HR-HPV组（P＜0.05）。HR-HPV组血清TOS、OSI、IL-4、IL-6、IL-10水平高于对照组、非HR-HPV组（P＜0.05）,血清TAS、IL-2、TNF-α、IFN-γ低于对照组、非HR-HPV组（P＜0.05）。结论：宫颈癌患者存在较高的HR-HPV感染风险,HR-HPV感染可引起宫颈癌患者阴道微环境改变、氧化应激损伤以及Th1/Th2细胞因子紊乱,检测HR-HPV有助于评估宫颈癌患者阴道微生态和病情进展。