食管鳞状细胞癌中SOX2和Slug的表达及与肿瘤出芽之间的关系

目的探讨食管鳞状细胞癌中SOX2、Slug的表达与临床病理参数的关系及两者表达与肿瘤出芽的关系。方法应用免疫组织化学染色方法检测89例食管鳞状细胞癌及癌旁组织中SOX2、Slug的表达及计算食管鳞状细胞癌病例HE切片中肿瘤出芽的数量。分析SOX2、Slug的表达在ESCC侵袭和转移中的临床病理学意义。结果食管鳞状细胞癌中SOX2、Slug的表达率分别为53.93%和68.53%,明显高于癌旁组织SOX2和Slug表达率(31.46%和31.46%);癌组织中肿瘤出芽率为39.32%。SOX2高表达与食管鳞状细胞癌的浸润深度、淋巴结转移及高临床分期有关,Slug高表达与食管鳞状细胞癌的分化程度、浸润深度、淋巴结转移及高临床分期有关。肿瘤出芽发生率与食管鳞状细胞癌的分化程度、浸润深度、淋巴结转移及高临床分期有关。Spearman相关性分析表明,食管鳞状细胞癌组织中SOX2表达与Slug表达呈显著正相关,Slug表达与肿瘤出芽明显呈正相关。结论SOX2的高表达可能通过上调Slug的表达从而促进肿瘤的出芽,在食管鳞状细胞癌的侵袭及转移过程中发挥重要作用。     

GRP78 在食管鳞状细胞癌、不典型增生及正常食管鳞状上皮 组织中的表达

目的:检测葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated proteins 78,GRP78)在同一食管癌患者食管的鳞状细胞癌、不典型增生及正常鳞状上皮组织中的表达,研究GRP78与食管鳞状细胞癌发生发展的关系。方法:取90例食管鳞状细胞癌患者的病变组织,其病理切片中正常鳞状上皮组织、不典型增生组织和鳞状细胞癌组织均存在,用免疫组化的方法 ,检测GRP78在3种不同组织中表达的情况,分析GRP78与性别、年龄、浸润深度、分化程度、分期及淋巴结转移等参数之间的关系。结果:GRP78在食管正常鳞状上皮组织、不典型增生组织、鳞状细胞癌组织中的阳性表达率分别为7.8%、85.6%、47.8%,GRP78在正常食管组织、不典型增生组织、食管鳞癌组织3组中表达的差异有显著性意义(P<0.01)。鳞状细胞癌组织中GRP78表达阴性者,年龄较阳性者大;GRP78表达与肿瘤分化程度、分期、淋巴结转移等有明显相关性。结论:GRP78在食管正常细胞向恶性细胞转化的过程中可能扮演了重要角色,检测GRP78的表达可能有助于对食管鳞状细胞癌的预防及早期诊断。     

GRP78在食管鳞状细胞癌、不典型增生及正常食管鳞状上皮组织中的表达

目的：检测葡萄糖调节蛋白78（glucose—regulated proteins78,GRP78）在同一食管癌患者食管的鳞状细胞癌、不典型增生及正常鳞状上皮组织中的表达,研究GRP78与食管鳞状细胞癌发生发展的关系。方法：取90例食管鳞状细胞癌患者的病变组织,其病理切片中正常鳞状上皮组织、不典型增生组织和鳞状细胞癌组织均存在,用免疫组化的方法,检测GRP78在3种不同组织中表达的情况,分析G史P78与性别、年龄、浸润深度、分化程度、分期及淋巴结转移等参数之间的关系。结果：GRP78在食管正常鳞状上皮组织、不典型增生组织、鳞状细胞癌组织中的阳性表达率分别为7．8％、85．6％、47．8％,GRP78在正常食管组织、不典型增生组织、食管鳞癌组织3组中表达的差异有显著性意义（P〈0．01）。鳞状细胞癌组织中GRP78表达阴性者,年龄较阳性者大;GRP78表达与肿瘤分化程度、分期、淋巴结转移等有明显相关性。结论：GRP78在食管正常细胞向恶性细胞转化的过程中可能扮演了重要角色,检测GRP78的表达可能有助于对食管鳞状细胞癌的预防及早期诊断。     

LATS1在食管鳞癌中的表达及启动子甲基化状态研究

在我们以前的研究中,在食管鳞癌细胞株中过表达大肿瘤抑制基因-1(large tumor suppressor kinase 1,LATS1)能够明显抑制细胞增殖、细胞迁移和侵袭,同时能够促进细胞凋亡。为了进一步研究LATS1基因在食管鳞状细胞癌发生发展中的作用以及可能的机制,我们在食管鳞癌组织与配对癌旁组织中,应用免疫组化检测LATS1基因蛋白质表达情况,应用荧光定量PCR(qRT-PCR)检测配对组织LATS1基因mRNA表达差异。甲基化特异性PCR(MSP)和亚硫酸氢盐测序法(BGS)检测食管鳞癌组织及细胞中LATS1基因的CpG岛甲基化状态。我们发现LATS1基因在癌旁组织中广泛表达,而癌组织中LATS1基因表达明显下调。结果表明LATS1在食管鳞癌中起到抑癌基因的作用,并且与肿瘤的临床分期相关,而其下调与CpG岛的高甲基化无关。在食管鳞癌细胞中过表达LATS1抑制细胞增殖、细胞迁移和侵袭,同时能够促进细胞凋亡。因此,LATS1基因值得进一步探索作为食管鳞癌生物标志物的可能用途和未来分子诊断和治疗的目标。     

VEGF-A在食管鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的:探讨血管内皮生长因子A(VEGF-A)在食管鳞状细胞癌中的表达及临床意义。方法:收集2009年1月-2010年12月收治的45例食管鳞状细胞癌患者临床资料及病理标本,应用免疫组织化学法检测肿瘤组织VEGF-A表达及微淋巴管密度(MLVD),分析VEGF-A表达与食管鳞癌患者临床病理资料、MLVD及与患者生存期限的关系。结果:1有淋巴结转移的患者VEGF-A表达阳性率为66.67%,明显高于无淋巴结转移患者的38.10%(P0.05);2 VEGF-A阳性食管鳞状细胞癌患者MLVD为(8.35±2.45)明显高于阴性患者的(5.32±1.44),(P0.05);3VEGF-A阳性食管鳞状细胞癌患者3年存活率为41.67%明显低于阴性患者的61.90%(P0.05)。结论:VEGF-A表达在确定早期食管鳞状细胞癌淋巴结转移方面具有一定的应用价值,可以作为评价预后的有效指标。     

Flot-2高表达促进食管鳞状细胞癌的生长和侵袭

目的探究flotillin-2(Flot-2)在人食管鳞状细胞癌中的表达及基本功能。方法利用免疫组织化学技术检测76例人食管鳞状细胞癌组织及相应癌旁组织中Flot-2的免疫反应阳性水平,并分析其与食管鳞状细胞癌的相关性。以小分子si RNA降低人食管鳞状细胞癌细胞系KYSE150细胞中Flot-2表达后,利用CKK-8及Transwell小室实验,检测细胞生长和侵袭能力的变化。结果 Flot-2在人食管鳞状细胞癌组织中免疫反应性明显升高,其在转移组织中的免疫反应水平显著高于非转移组织。敲低Flot-2表达后,KYSE150细胞的生长和侵袭能力明显降低。结论 Flot-2能促进细胞的生长和侵袭,参与人食管鳞状细胞癌的发生与转移过程。     

PBX3高表达促进食管鳞状细胞癌的侵袭和迁移（英文）

PBX3是PBX家族成员之一,它是机体生长发育所必需的蛋白质因子。当PBX3基因表达异常时,它可导致肿瘤的发生,促进其侵袭转移。PBX3的作用在其他肿瘤研究中已有了解,但其在食管癌中的作用尚不清楚。本研究旨在通过了解PBX3在食管癌细胞中的表达及其与临床病理参数和患者愈后的关系,以及对食管癌侵袭及转移的影响。对食管癌进行PBX3的临床与细胞学研究结果显示,PBX3表达与食管癌患者浸润深度和淋巴转移有关,与患者的年龄、性别、肿瘤分期无关。PBX3表达水平越高,食管癌的恶性程度越高。进一步通过PBX3基因转染食管癌细胞株证明,该基因可促进上皮间质转化,并增强转移侵袭特性。我们的研究结果提示,PBX3与食管鳞状细胞癌的侵袭、转移及愈后有关,其可能是通过影响食管鳞状细胞癌的上皮-间质转化,促进癌细胞的侵袭及迁移。所以,PBX3有可能作为评估食管鳞状细胞癌恶性程度的指标。     

Egr-1基因及其相关癌基因蛋白在放疗后食管鳞癌的表达

目的研究早期生长反应基因1（Egr-1基因）在放疗后切除人食管癌组织的表达及其与癌基因蛋白C－fos、C—Jun和Egr-1靶基因蛋白P53、Rb和Bax表达的关系。方法应用原位杂交和免疫组化法分别检测80例非放疗和放疗后外科切除食管鳞状细胞癌Egr－1mRNA、Egr-1、Cfos、C-Jun、P53、Rb和Bax蛋白的表达。结果Egr-1mRNA和Bax蛋白阳性定位于细胞质;而Egr-1、Fos、Jun、P53和Rb蛋白阳性定位于细胞核。40例非放疗和40例放疗后的食管癌切除肿瘤标本均存在Egr-1表达,其中40例例放疗病人外科切除标本Egr-1阳性表达9例（22．5％）,40例放疗后病人Egr-1阳性表达23例（57．5％）。Egr-1基因表达与Fos、Jun癌基因蛋白的表达无关。食管癌放疗后癌组织Egr-1超表达病人预后较好。结论放疗反应上调食管癌Egr-1表达。Egr-1超表达可作为食管鳞癌放疗反应的基因标志,并对食管鳞状细胞癌的预后判断有重要作用。     

DcR3蛋白在人食管鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的:探讨诱骗受体(Decoy receptor 3,Dc R3)蛋白在人食管鳞状细胞癌中的表达和临床意义。方法:通过免疫组化的方法,在人食管鳞状细胞癌组织和正常食管粘膜组织各112例中检测Dc R3蛋白的表达差异,并分析Dc R3蛋白表达与食管鳞状细胞癌临床病理学特征间的相关性。结果:在组织标本中检测发现,Dc R3蛋白在食管鳞状细胞癌组织中的阳性表达为72.3%,在正常食管粘膜组织中的阳性表达为25.9%。卡方检验分析表明,Dc R3蛋白在食管鳞状细胞癌组织中的阳性表达与食管鳞状细胞癌的临床分级(P=0.002)、淋巴结转移(P0.001)、组织学分级(P=0.01)具有显著相关性,而与患者的年龄(P=0.673)、性别(P=0.378)、抽烟史(P=0.392)、饮酒史(P=0.093)等均无关。Spearman相关性分析检测发现,Dc R3蛋白高表达与高临床分级(r=-0.213,P=0.024)、高组织学分级(r=-0.285,P=0.002)、淋巴结转移(r=-0.568,0.001)呈正相关,而与食管鳞状细胞癌患者的年龄、性别、吸烟史、饮酒史等均无相关性(P0.05)。结论:Dc R3蛋白在食管鳞状细胞癌组织中表达更高,且与食管鳞状细胞癌疾病的进展、转移呈正相关。Dc R3蛋白表达可用来检测食管鳞状细胞癌疾病严重程度。     

Cdc25C在放疗敏感的食管鳞状细胞癌中高表达

目的研究食管鳞状细胞癌组织中Cdc25C的表达与放疗敏感性的关系。方法回顾性分析62例根治性放疗的局部晚期食管鳞状细胞癌患者,根据放疗近期疗效分为放疗敏感组和放疗不敏感组,采用免疫组织化学检测放疗前食管癌组织中Cdc25C表达,分析Cdc25C的表达与放疗敏感性之间的关系。结果食管鳞状细胞癌组织中Cdc25C表达率显著高于癌旁正常上皮组织,放疗敏感组Cdc25C表达率显著高于放疗不敏感组。结论食管鳞状细胞癌组织中Cdc25C高表达与放疗敏感性密切相关,Cdc25C的高表达可能有助于预测肿瘤细胞对放射治疗的敏感性,对于指导食管鳞状细胞癌临床治疗具有重要的参考意义。     

复杂疾病基因定位策略与肿瘤易感基因鉴定

对于不存在某单一基因位点经典的孟德尔显性或隐性遗传模式的疾病,称为复杂疾病,肿瘤是最常见的类型之一 . 目前,以连锁和相关分析为基础的功能克隆、功能候选克隆、定位克隆、定位候选克隆、系统生物学等复杂疾病易感基因定位策略逐渐发展起来 . 其中,系统生物学策略由于整合了从 DNA 到蛋白质的各个层面的信息,对复杂疾病基因调控网络做出了良好诠释,使其成为最有潜力的方法之一 . 目前,虽然已有近 100 种肿瘤 / 遗传性癌综合症的易感基因被鉴定出来,但未来的复杂疾病易感基因定位工作仍充满了挑战 .     

前列腺癌相关基因研究

前列腺癌是目前最重要的危害欧美国家男性健康的肿瘤疾病,在我国发病也呈上升趋势,本综述了前列腺相关基因研究的最新献,分染色体畸变、易感基因、原癌基因、抑癌基因和其他基因等五个部分。     

突触融合蛋白6在食管鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的:探讨突触融合蛋白6(syntaxin 6,STX6)蛋白在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous carcinoma,ESCC)组织中的表达及临床意义。方法:回顾性分析了241位食管癌病人的临床资料,应用免疫组织化学方法及Western blot法检测肿瘤组织和癌旁食管组织中STX6蛋白的表达情况,并进行统计分析,分析STX6的表达水平与各临床指标间的关系。结果:免疫组织化学法及Western blot结果均显示食管鳞状细胞癌组织中STX6的水平较临近的癌旁食管组织显著上升。食管癌患者病变组织中STX6的表达水平与性别、肿瘤分化程度、有无淋巴结转移以及肿瘤分期显著相关(P0.05),与患者的肿瘤大小、年龄没有明显的相关性(P0.05)。结论:STX6在食管癌的发生发展过程中起着重要的作用,是一个有价值的诊断及治疗靶点。     

SLP-2荧光表达载体的构建及其在乳腺癌细胞MCF-7中的表达与定位

人的SLP-2基因是一个新的肿瘤相关基因,它在多个癌组织里高表达,如食管鳞状细胞癌组织和肺癌组织。其中在乳腺癌组织的高表达和病人的存活率负相关,这说明该基因很可能在乳腺癌的发生中发挥重要作用。为了研究SLP-2基因在肿瘤里的功能,将人类SLP-2基因全长编码区定向连入pEGFP—C3质粒,使SLP-2蛋白可以与绿色荧光蛋白在乳腺癌细胞MCF-7内融合表达。而且细胞荧光实验发现SLP-2蛋白主要定位在MCF-7细胞的胞质内,这为进一步研究SLP-2基因在乳腺癌中的功能奠定了实验基础。     

肿瘤易感基因的克隆策略进展

定位克隆仍是当前克隆肿瘤易感基因的一条主要途径。关联分析方法和检测患ＬＯＨ,纯合性丢失的高发频率区有利于易感基因的定位,削减杂交和脉冲场凝胶电泳的方法有利于目的基因的获取;精细遗传连锁图谱和ＥＳＴ数据库的建立将加速肿瘤易感基因的克隆;从模式生物基因组的研究成果入手来寻找人业肿瘤易感基因是一条可行的途径。     

喉癌STK15基因表达和染色体不稳定的研究

为研究喉鳞状细胞癌中STK15基因表达及其与染色体不稳定的相关性,提取50例喉鳞状细胞癌及配对癌旁正常组织和喉鳞状细胞癌Hep-2细胞系的RNA,反转录合成cDNA,以β-actin为内对照进行PCR扩增,用软件分析电泳结果,研究喉癌中STK15基因表达的水平;以Hep-2细胞系为代表应用常规和高分辨G显带方法进行核型分析。在50例喉癌中,癌组织STK15表达高于配对癌旁正常组织的有34例,占68％,经统计学分析,肿瘤组与对照组差异显著,Hep-2细胞系中STK15基因表达高于内对照β-actin;Hep-2细胞系中存在显著的染色体不稳定,染色体数目变化于43－84条之间,众数为69－74条,结构畸变主要表现为13条标记染色体,本研究首次发现STK15基因在喉癌中表达增高,它可能通过中心体异常而引起染色体不稳定,在喉癌的发生,发展中发挥一定作用。     

食管鳞状细胞癌癌组织中hMLH1、hMSH2的表达及其意义

目的:探讨错配修复基因hMSH2、hMLH1在食管鳞癌组织中的表达及其临床意义。方法:采用sP免疫组化的方法检测144例食管鳞癌手术切除标本、30例正常粘膜组织中hMSH2、hMLH1表达情况,并与临床病理参数作相关分析。结果:食管鳞癌组织hMSH2、hMLH1基因阳性表达明显下降,与正常食道粘膜相比相差显著(P<0.01),hMSH2、hMLH1表达缺失与年龄、性别、肿瘤大小、淋巴结转移、浸润深度无显著相关,与肿瘤的分化程度有关(P<0.01)。结论:提示hMLH1和hMSH2基因突变所致的蛋白表达异常缺失与食管鳞状细胞癌发生有关,可能为一种早期事件。     

细胞角蛋白基因13在喉鳞状细胞癌中缺失和表达的研究

为了探讨细胞角蛋白基因13（Cytokeratin13,CK13)在喉癌发生中的作用,在CK13基因内部及附近选择5个微卫星引物进行杂合性丢失（loss of heterozygosity,LOH)分析,于DNA水平间接检测72例喉鳞状细胞癌患者中该基因的缺失,应用Northern Blot检测16例喉鳞癌患者的配对肿瘤及癌旁正常组织中CK13基因的表达差异;同时应用CK13蛋白单克隆抗体对不同分化程度的喉鳞癌组织进行免疫组化染色。结果表明：5个STR位点均存在LOH,其中D17S1964E、D17S2092、D17S791、D17S1665及D17S808位点的LOH频率分别为18．03％、28．13％、27．42％、39．68％和34．85％,其中D17S1665位点的LOH频率最高,至少一个位点出现LOH的病例高达77．78％（56／72）,杂合性丢失与临床分期、淋巴结转移无显著相关,但与肿瘤分化程度高低相关（P＜0．05）。Northern blot结果表明：16例喉鳞癌患者C13基因在正常组织中的表达比肿瘤组织显著增强,免疫组化结果也显示CK13蛋白在正常组织或高分化肿瘤中的表达明显高于低分化者,且存在显著差异（P＜0．01）。证实CK13基因可能在喉鳞状细胞癌的发生中具有重要作用,可能是一个新的抑癌基因。     

血管生成拟态和E-cad在食管鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的 探讨血管生成拟态( vasculogenic mimicry,VM)与E-钙粘蛋白(E-cadherin,E-cad))在食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma)组织中的表达及意义.方法 收集食管鳞状细胞癌术后标本100例和30例癌旁正常食管黏膜,应用免疫组化法和组织化学法检测食管鳞状细胞癌和正常食管黏膜组织中VM和E-cad的表达情况.结果 在食管鳞状细胞癌组织和正常食管黏膜组织中,VM和E-cad的阳性表达率分别为47.0％、48.0％和0％、70.0％,差异有统计学意义(P＜0.05);VM及E-cad的表达与食管鳞癌的组织学分级、临床分期及淋巴结转移(P＜0.05);VM与E-cad在食管鳞癌中的表达呈负相关(r=-0.865,P=0.000).多因素分析:PTNM分期、淋巴结转移、VM和E-cad的表达是影响食管鳞癌根治术后患者预后的独立因素(P＜0.05);VM阳性组与阴性组的5年生存率分别为4.3％和64.2％,,差异有统计学意义(P=0.000);E-cad阳性组与阴性组5年生存率分别为60.4％和15.4％,差异有统计学意义(P=0.000).结论 具有VM结构的食管鳞状细胞癌的分化程度低,恶性度高,预后差,VM和E-cad表达的程度与食管鳞状细胞癌的进展和预后密切相关.