松胞素对百合花粉原生质体内肌动蛋白微丝的影响

用B_5培养基酶解分离出百合花粉原生质体。原生质体经松胞素(5μg/ml)分别处理5、10、15、30、60 min,再用荧光标记的鬼笔碱染色,共焦激光扫描镜观察,跟踪了原生质体内的肌动蛋白微丝从一个组织复杂严密的网络转变为无数颗粒体的过程。松胞素处理过的原生质体移回至不含松胞素的培养基中后继续培养15 min,肌动蛋白颗粒快速地再延伸出微丝,重组成新的网络。存在于花粉原生质体中生殖细胞的微丝网络,在经松胞素处理后同样都形成为颗粒体。之后,如果原生质体再放入不含松胞素的培养基内继续培养,生殖细胞内的颗粒体同样会再延伸出微丝,重新组成网络。从原生质体胞质以及生殖细胞内所见到的微丝和颗粒相互转化的情况,可以断定,颗粒体不但具有凝聚微丝的功能,同时也具有重组微丝的功能。     

几种百合的花粉形态研究

本文利用光学显微镜和扫镜电镜,对百合属9种植物的花粉形态与外部特征作了比较深入细致的观察研究。结合前人的研究结果,综合分析表明:百合属植物花粉粒呈椭球形,形状较为一致。极面观为椭球形,赤道面观为舟形。多为单沟花粉粒,沟延伸到两端。表面纹饰的演化路线为:拟网纹→双排基柱网纹→单双基柱网纹→单排基柱网纹。研究中首次发现湖北百合(Lilium henryi)同一花粉粒表面存在单双基柱网纹。且第一次以花粉粒的外壁纹饰特征制出了种的检索表。     

姜花花粉萌发时花粉和花粉管内微丝结构变化的共焦镜观察

用ＴＲＩＴＣ－鬼笔碱荧光显微探针入共焦激光扫描镜,观察了不同萌发阶段的姜花花粉和花粉管内肌动蛋白微丝的结构和分布格局的变化,花粉水合后在花粉内的微丝呈不规则网络状。但在靠近萌发孔周围,由於网络微丝向萌发孔汇集而延伸拉长,因此在萌发孔前缘出现荧光特别明亮区,显示微丝在此外开始密集。花粉水合后１０－３０分钟,大多数花粉管从萌发孔伸出,此时,在花粉管顶形成一个长约１０－２０μｍ的顶端区域微丝网络;在花粉     

烟草花粉母细胞细胞融合过程中微丝的免疫定位观察

应用普通电镜和酶联免疫电镜技术,研究了烟草花粉母细胞中的细胞融合现象及细胞融合过程中肌动蛋白微丝骨架的变化。观察发现,处于凝线期的花粉母细胞,其内含物,包括细胞器和染色质,通过胞质通道向相邻细胞发生转移。免疫电镜观察发现,花粉母细胞中的细胞质及核中存在线状和粒状的肌动蛋白微丝。在细胞融合过程中,有微丝骨架纤维与穿壁转移的染色质和细胞器相连。本文讨论了肌动蛋白微丝骨架在细胞融合过程中的作用。     

玉米花粉肌动蛋白与兔骨骼肌肌动蛋白的比较研究

本文对玉米花粉肌动蛋白和兔骨骼肌肌动蛋白进行了比较研究。玉米花粉肌动蛋白与兔骨骼肌肌动蛋白具有相同的分子量(42KD)。玉米花粉肌动蛋白可与兔抗鸡胃肌动蛋白抗血清产生免疫沉淀反应。玉米花粉肌动蛋白与兔骨骼肌肌动蛋白的氨基酸组成以及胰蛋白酶水解所得到的肽谱都相似。它们的羧基未端氨基酸顺序完全一致,其顺序都是Lys.Cys.Phe(COOH)。它们的圆二色谱基本相同,由圆二色谱计算得到的二级结构数据也相近。以上的结果表明了玉米花粉肌动蛋白与兔骨骼肌肌动蛋白的相似性。     

百合花粉细胞中钙离子的荧光测定法

以川百合花粉为材料,利用孵育法在花粉原生质体中,特别是利用低温装载法在完整花粉粒中,成功地载入酯化形成的钙离子荧光探针fluo-3AM,利用激光共聚焦显微技术对花粉细胞质中游离钙离子的分布特点进行了研究的结果表明,花粉萌发初期细胞质内游离钙离子呈极性分布,萌发沟附近的钙离子浓度明显高于其他部位,萌发孔附近最高,花粉细胞核中较低,文中对低温装载法的可行性进行了讨论。     

百合花粉细胞中钙离子的荧光测定法1

以川百合花粉为材料,利用孵育法在花粉原生质体中,特别是利用低温装载法在完整花粉粒中,成功地载入酯化形式的钙离子荧光探针fluo-3AM.利用激光共聚焦显微技术对花粉细胞质中游离钙离子的分布特点进行研究的结果表明,花粉萌发初期细胞质内游离钙离子呈极性分布,萌发沟附近的钙离子浓度明显高于其他部位,萌发孔附近最高,花粉细胞核中较低.文中对低温装载法的可行性进行了讨论.     

银杏与玉花粉肌动蛋白含量的比较研究

通过免疫印鉴鉴定,证明银杏花粉中存在肌动蛋白。同时对银杏和玉米花粉肌动蛋白含量进行了比较,结果表明,银杏花粉肌动蛋白含量明显少于玉米花粉肌动蛋白含量。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ扫描图谱显示,银杏花粉肌动蛋白含量只有玉米花粉的１／６。两种花粉ＤＮａｓｅＩ活性抑制结果表明,银杏花粉肌动蛋白含量约为玉米花粉的１／７。     

百合属中的四合花粉兼论玫红百合的分类问题

根据我们对国产百合属(Lilium)引种植物花粉形态的观察,已知该属有二个分类群具四合花粉, 本文依据花粉形态、外部形态及地理分布的特点,对其分类问题进行了讨论。     

烟草花粉原生质体与叶肉原生质体的融合及培养早期变化

用ＰＥＧ—高Ｃａ高ＰＨ法诱导抗卡那霉素的烟草（Ｎｉｃｏｔｉａｎａｔａｂａｃｕｍ）品系Ｎ３６４＋Ｋｍ＋花粉原生质体和黄花烟草（Ｎｉｃｏｔｉａｒｕｓｔｉｃａ）叶肉原生质体融合。幼嫩花粉原生质体和叶肉原生质体之间的融合体培养启动胚胎发生分裂,经卡那霉素筛选后,少数多细胞团存活并形成小愈伤组织。成熟花粉原生质体与叶肉原生质体之间的融合体则仅产生管状结构。这一结果表明,作为融合一方的花粉原生质体的发育时期对融合产物的发育途径有重要影响。     

花粉肌动蛋白和兔肌肌动蛋白与DNase I相互作用的比较研究

纯化了的花粉肌动蛋白同其他肌动蛋白一样,能显著抑制ＤＮａｓｅ Ｉ活性,其抑制率与肌动蛋白浓度呈直线相关。在同样条件下,花粉肌动蛋白对ＤＮａｓｅ Ｉ活性抑制没有兔肌肌动蛋白显著。花粉肌动蛋白和兔肌肌动蛋白抑制ＤＮａｓｅ Ｉ的Ｋａｐｐ分别为１．２５μｇ／ｍＬ和０．７５μｇ／ｍＬ。ＤＮａｓｅ Ｉ使聚合状态的花粉和兔肌肌动蛋白解聚,但在同一条件下聚合状的肌细胞肌动蛋白比花粉肌动蛋白稳定。     

微丝骨架动态参与花粉萌发的研究

利用改进的Alex-phalloidin活细胞染色方法和激光共聚焦显微镜技术,观察川百合(Lilium davidii Duch)花粉原生质体极性形成及萌发过程中微丝骨架的列阵变化.结果表明,花粉原生质体从贮存状态,经过水合、极性形成至萌发花粉管,其微丝结构从短小的梭形体,经过形成均匀的网状结构、向细胞边缘汇集的平行排列的束状结构,逐渐变成多层连续环绕细胞的微丝束结构.用酪氨酸磷酸酶抑制剂苯胂化氧(PAO)处理花粉原生质体,在微丝的汇合处,肌动蛋白聚集成小的团块,花粉的萌发受到抑制;而利用酪氨酸磷酸激酶抑制剂genistein处理细胞,微丝结构的列阵变化与对照相似.结果说明,在川百合花粉萌发过程中,有某种酪氨酸磷酸酶参与了反应.     

百合花粉母细胞核骨架的超微结构观察

参照动物细胞核骨架的研究方法,用整装电镜技术和DGD包埋-去包埋技术研究了选择性抽提的和完整的百合(Lilium davidii var. willmottiae (Wilson) Roffill)花粉母细胞。结果表明,住减数分裂前期Ⅰ,百合花粉母细胞核内存在一个精细的非染色质纤维——核骨架。该网络由5～15nm的纤维交织而成,广泛地分布于细胞核内。这些核骨架有的分布于染色体间,有的分布于染色体周围,并与染色体和核仁相连。随着减数分裂时间的推移,染色体(质)间核骨架纤维逐渐减少,染色体(质)周围的核骨架纤维逐渐增多,并与染色体内部的纤维结构相连,表明核骨架一方面为染色体拓扑变化提供一个空间支架,另一方面也可能参与了染色体骨架的构建。