miR-200a 及AFP 在肝癌、肝硬化患者血清中表达比较分析*

目的:分析miR-200a及AFP在肝癌、肝硬化患者血清中的表达水平并进行比较,探索其成为肝癌早期诊断血清标志物的可能性。方法:临床收集肝正常、肝硬化、肝癌患者血液标本。运用实时定量PCR技术检测血清miR-200a的相对表达情况,血清AFP水平从临床资料中提取。结果:临床标本分析结果显示,miR-200a在肝硬化及肝癌患者中均显著下调(P<0.05),AFP仅在肝癌患者中出现异常表达。结论:血清miR-200a极大程度地参与了肝癌发生,对肝硬化及肝癌具有一定的诊断价值。     

用滤纸血片法检测乙型肝炎

用滤纸血片做反向间接血凝检测乙型肝炎表面抗原HBsAg,其结果与血清标本是一致的。为了进行大面积乙肝检测,我们对滤纸血片和血清标本同时进行对比观察其结果如下。一材料与方法 1 标本采集份数:计450份。 2 滤纸血片:滤纸系中国杭州新华造纸厂制。直径11cm,滤纸分四等份,每份滴一人血液两滴,每滴直径>9mm。     

乳腺肿瘤组织标本库与数据库的建立及信息化管理

目的:随着基础和临床研究的深入开展,拥有完整基因信息的组织标本成为了肿瘤研究工作的基础.建立电子信息化管理的乳腺肿瘤组织标本库和数据库,为临床和科研收集、保存和管理标本资源.方法:标准化收集手术切除的乳腺肿瘤组织、正常腺体组织,以及患者血液标本,预处理后保存于-80℃冰箱中.每3个月从标本库中随机抽取5例标本,提取标本的总RNA,琼脂糖凝胶电泳验证总RNA质量;运用免疫组织化学法(Immunohistochemistry,IHC)检测标本中人表皮生长因子-2(Human epidermal growth factor receptor,HER-2 or c-erbB-2)和Ki67的表达,并与术后免疫组化结果进行比较.同时利用Epidata软件管理乳腺肿瘤组织标本库.结果:收集恶性肿瘤507例,良性肿瘤212例,血液标本9347份,并建立了一套高效的信息化管理系统.总RNA电泳结果显示28 S和18S亚基条带清晰明亮,5S条带很弱,表明标本中的RNA质量较高,无降解.免疫组化结果显示标本中的HER-2和Ki67的表达与术后免疫组化结果情况吻合,存储的标本质量良好.结论:建立的实验标本收集、储存流程是有效可行的,收集的标本质量是可靠的,管理方法是高效实用的,为乳腺肿瘤基础和临床研究提供质量可靠的标本来源,可为乳腺肿瘤研究提供良好的服务平台.     

血液标本采集质量的影响因素及预防措施

目的:探讨血液标本采集质量的影响因素以及预防措施。方法:我院选取了2014年6月至2015年6月期间来体检的5697例血液标本作为研究对象,观察血液标本检验出错率以及出现检验错误的因素。结果:经研究后发现,5697例血液标本中出现检测错误的有35例,检验误差率为0.61%。导致血液标本检测出错的因素包括血液采集量、采集部位、采集时体位、标本存放时间、心理因素。结论:影响血液标本采集质量的因素包括多种原因,医院相关部门要及时采取预防措施将血液标本采集质量提高,从而把医院血液检验分析的可靠性和准确性提高。     

变形杆菌诊断血清试制研究 Ⅲ、血清的实际应用——325株地方性菌株的鉴定结果

普通及奇异变形杆菌诊断血清试制工作的同时,即收集了一批地方性菌株,主要目的为检验血清的特异性。其中有部份具有新的O或H抗原的菌株也经过实验而得到证实,并试制了相应的O或H血清。同时,对325株变形杆菌进行了鉴定,其结果初步总结如下: 1.标本来源 325株变形株菌有以下几个来源。     

肝硬化患者无菌腹水中真菌DNA的检测及易位研究

目的检测和分析肝硬化患者无菌腹水中真菌DNA存在状况。方法选取118例无菌腹水的肝硬化患者为研究对象,分别采集患者刚入院时的腹水、血液和粪便标本。应用PCR技术直接检测标本的真菌DNA并克隆测序。并收集患者临床资料,对患者临床症状及检验结果进行分析比较。结果1名患者的腹水、血液、粪便中同时检测到真菌DNA,14名患者的腹水和粪便中同时检测到真菌DNA,3名患者的血液和粪便中同时检测到真菌DNA,大部分序列间的相似性高于99％。测序检测到最多的菌种为Candidaalbicans。结论肝硬化患者无菌腹水中能够检测到真菌DNA,并且提示在肝硬化患者腹水和血清中检测到的真菌DNA易位于肠道。     

实用淋巴细胞培养技术

采自人体的外周静脉血液,用淋巴细胞分离液进行分析,收集分离得到淋巴细胞,同时回收血液的血清成分,此血清不经灭活可直接用于培养。本实验对影响淋巴体外激少在、增殖的相关因子进行了详细的统计分析,实验结果表明,在基础培养液ＲＰＭＩ１６４０中添加１００μｇ／ｍｌ的ＰＨＡ、１００ｉｕ／ｍｌ的ＩＬ－２和１０％的自体或胎血清,可以有产地激活淋巴细胞并在营养条件允许的情况下长期处于增鱼的状态。     

溶血标本对部分常规生化检验结果的影响分析

目的:分析溶血标本对部分常规生化检验结果的影响。方法:选取到我院作健康体检人员80名,收集血液作标本,随机分为甲乙两组,使用日立7180生化分析仪,分析两组样本生化指标。结果:甲乙两组的ALB、AST、CHO、ALT、LDH、TBIL等指标对比(P0.05),BUN、TG、GIU及Cr对比(P0.05)。结论:溶血标本会影响部分常规生化检验结果,在采取常规生化检验时,需谨慎处理常规生化检验,掌握检验各个环节,以此提高检验结果的准确性。     

微量全血快速检测乙肝病毒基因亚型

选用特殊血液标本裂解液,可有效除去血液中对Taq酶有抑制作用的物质血叶啉,微量指尖全血标本即可满足检测需要,可取代血清检测HBV基因亚型．     

IL-17在COPD稳定期、急性加重期患者中的表达及其意义

目的:分析慢性阻塞性肺疾病稳定期、急性加重期(COPD、AECOPD)患者血清白细胞介素17(IL-17)表达水平的差异,探讨血清IL-17在评价COPD患者病情严重程度及预后中的价值。方法:收集符合纳入标准的COPD、AECOPD患者、正常对照组(健康体检者)各50例。取各组血清标本测表达浓度,比较各组血清IL-17水平,并进行相关性分析。结论:COPD、AECOPD患者血清中IL-17明显高于正常对照组,差异有统计学意义。检测血清IL-17表达水平有助于评估COPD患者的病情严重程度和预后。     

血中检测SARS冠状病毒N蛋白在SARS实验室早期诊断中的作用

为明确严重急性呼吸综合症(SARS)冠状病毒N蛋白在SARS实验室早期诊断中的作用,通过微量中和试验及酶联免疫方法、间接免疫荧光法检测疑似病人恢复期血清(大于28天)中SARS-IgG抗体,确诊SARS患者。同时收集发病不同时期SARS及普通发热病人血清,利用酶联免疫方法检测SARS-CoVN蛋白,并与荧光定量PCR早期诊断方法相比较。共检测：广州地区2003年12月～2004．年1月新发4例确诊SARS患者不同时期的血液和咽漱液标本;恢复期血清SARS-CoV中和抗体阳性病人不同时期的血清46份;广州地区2003年1月～4月临床确诊SARS患者159例的血清和56例疑似患者血清;非SARS普通发热病人血清97份;正常人体检血清100份。结果：4例新发SARS患者的不同时期标本中,3例患者急性期血均检出N蛋白,优于常用的荧光定量PCR检测方法。46份SARS-CoV中和抗体阳性的血清标本,N蛋白检出率为100％。159例临床确诊病例中,发病早期5天以内SARS-CoVN蛋白的检出率为92．3％,随后呈现逐步下降的趋势,在发病第18天仍可检出。56例临床疑似患者发病早期也有23．2％检出率。而97例普通发热病人及100份正常人血清中均未能检测出SARS-CoVN蛋白。表明在血清中检测SARS冠状病毒N蛋白的方法敏感性和特异性都好,对SARS实验室早期诊断具有重要作用。     

肛周脓肿和肛瘘患者的病原菌分布及其与血清MMP-2、IL-17A水平的相关性

目的分析肛周脓肿与肛瘘患者的病原菌分布及其与血清基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、白细胞介素-17A(IL-17A)的相关性。方法收集2017年3月至2019年11月在我院收治的肛周脓肿和肛瘘患者共69例,分为肛周脓肿组(n=23)、肛瘘病程90 d组(n=20)、肛瘘病程90～180 d组(n=17)、肛瘘病程180 d组(n=9)。收集患者脓液或瘘管分泌物进行细菌培养,同时采集血清标本检测MMP-2、IL-17A水平,分析病原菌分布与MMP-2、IL-17A表达的相关性。结果 69份标本中有66份标本培养出细菌,阳性率为95.65%(66/69)。共分离出68株细菌,其中有2份标本出现2种细菌同时生长,混合感染率为3.03%,其余64份标本均为单一细菌生长。68株细菌中革兰阴性菌58株(85.29%),革兰阳性菌8株(11.76%),真菌2株(2.94%)。各组患者血清MMP-2、IL-17A阳性率比较差异有统计学意义(均P0.05)。单一病原菌感染患者血清MMP-2、IL-17阳性率差异无统计学意义(均P0.05)。血清MMP-2与IL-17A水平呈正相关(r=0.325,P=0.009)。结论肛周脓肿与肛瘘患者以单一病原菌感染为主。患者血清MMP-2与IL-17A水平呈正相关。     

正视血清与血浆的差异

在维持机体内环境稳态中,循环血液起着关键作用。血液成份的变化在疾病诊断与疗效判断中十分重要。因此,采用血清、血浆或全血,是一个涉及临床医疗与科研质量的重要问题。WHO于2002年邀请41位专家进行专题研讨,并发表了一个报告,比较详尽地评述了血清、不同抗凝剂制备的血浆和全血在常用临床检验中的应用,并介绍了各种血标本相关指标的稳定条件。近20年来,许多学在这一领域已进行了大量工作。虽然我国也有人开始注意这一问题,但还不够重视。例如,血糖测定,WHO推荐使用EDTA抗凝全血,肝素抗凝全血需谨慎应用;但明确指出不宜使用血清,否则测定值偏低。北美与欧洲很少采用血清测定血糖。但我国不少检验医学书籍仍然推荐使用血清,甚至在高等医学院校教材中推荐使用血清（浆）标本,将两视同相等。产生这些不妥的原因,主要与生理学和生物化学教学中长期强调血清是缺乏纤维蛋白原的血浆所致。因此,明确血清与血浆的重要差别是非常必要的。     

不规范的标本及送检导致生化指标波动原因的探讨

目的:探讨不规范标本及送检对对生化指标波动的影响因素。方法:选取本院2013年1月~2014年1月内科送检的1262份血液标本进行回顾性分析,观察规范操作前后的检验结果并进行比较。结果:血标本放置时间过长血糖浓度会显着降低;溶血标本对生化测定的影响;输液时同侧采血对生化结果有一定的波动;结论:不规范的标本胶送检可大大导致生化指标的波动,临床送检标本必须严格规范操作,以采集到合格的标本,从而提高检测结果的准确性,减少实验误差。     

血液细胞检验质量控制在临床医学检验中的应用研究

目的对影响临床血液细胞检验质量的相关因素加以分析,并提出对应的质量控制办法。方法将采集的50份血液标本分别采用1:10000与1:5000两种稀释比例进行稀释处理;并将将采集的50等份标本混合分成100等份,分别放于室温与低温下保存,分析不同稀释比例、不同保存方式对血液检验结果的影响。结果不同稀释比例的血液标本,其RBC、PLT与WBC、血HGB指标水平存在显著差异(P0.05);且不同存放条件下同时段的RBC、PLT与WBC、血HGB指标水平也存在显著差异(P0.05)。结论稀释比例与存放条件均对血液检验结果有所影响,故需采取综合措施以有效控制血液检验质量。     

IgA肾病患者血液、尿液及咽拭子标本中穿通支原体的分离检出

目的探讨IgA肾病患者血液、尿液及咽拭子标本中穿通支原体（Mycoplasma penetrans,Mp）的分离检出率以及与病理型别相关性。方法采用分离培养法,共计从26例IgA肾病患者血液、尿液及咽拭子标本及38例正常对照相应标本中进行穿通支原体分离检测,对培养阳性标本用穿通支原体套式PCR进行证实。结果在11例（42．3％）患者血液与尿液或（和）咽拭子中同时分离到穿通支原体,单独尿液或咽拭子标本阳性分别为1例（3．8％）与7例（26．9％）。26例IgA肾病患者血液、尿液及咽拭子穿通支原体的分离检出率分别为42．3％、23．1％与57．7％;与38例正常对照组血液、尿液及咽拭子检出0例、2例（5．3％）与7例（18．4％）相比较,差异有非常显著性（P〈0．01）,在正常对照组中无2种以上标本同时检出穿通支原体。结论穿通支原体在ISA肾病患者的血液、尿液与咽拭子标本中均有较高的检出率且与病理型别有一定的相关性。     

实时定量PCR检测新生儿全血中肺炎克雷伯菌方法的建立和应用

目的:建立实时定量PCR(RQ-PCR)快速检测新生儿血液标本中肺炎克雷伯菌基因组DNA的方法,并进行初步临床应用。方法:选择肺炎克雷伯菌高度保守的二鸟苷酸环化酶基因作为靶基因,设计特异性引物和TaqMan探针,建立RQ-PCR反应体系;采用含靶基因扩增片段的重组质粒建立标准曲线,提取血液中的基因组DNA,对500份新生儿血液标本进行RQ-PCR检测。结果:设计的引物和探针特异性高,检测限为1个拷贝数;500份新生儿血液标本中,RQ-PCR检测为阳性的有18个病例,阳性率为3.6%,明显高于血培养的阳性率2.4%(12个病例),差异具有统计学意义(P0.01)。结论:RQ-PCR可用于检测新生儿血液标本中的肺炎克雷伯菌,此方法快速、灵敏、特异性强。     

DEC1-mRNA在肝癌患者血清中的表达和手术预后的关系

目的:研究DEC1在肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)患者血清中的表达水平及其临床意义。方法:收集60例HCC患者,30例正常人,30例慢性肝炎患者,30例慢性肝硬化患者血清标本。采用实时荧光定量RT-PCR(RT-PCR)检测血清DEC1的表达情况。分析血清DEC1的表达水平与AFP相关性。探讨血清DEC1的表达水平与HCC手术预后的关系。结果:肝癌患者血清DEC1明显高于正常人、慢性肝炎和慢性肝硬化患者(P0.05)。皮尔森相关分析结果显示HCC患者血清DEC1的表达与血清AFP水平是呈正相关的。Kaplan-Meier结果显示血清DEC1低表达组术后的复发转移率显著低于高表达组,其术后生存率也显著高于高表达组(P0.01)。结论:DEC1在肝癌者血清中高表达,不仅可能成为HCC诊断的标记物,且其血清表达水平也有助于HCC临床预后的评估。     

检验血液标本采集工作的探讨

目的 探讨如何做好检验血液标本的采集工作.方法 收集近期由实验室验收不合格而退回的标本,进行分类记录整理.结果 不合格率为8%,其中量不准为57.8%,溶血为23.2%,凝固为14.9%,其他为4.1%.结论 采血人员有必要了解不合格标本对检验结果 的影响及相关知识,进一步熟悉掌握检验血液采集技术.     

富士药品公司从剑桥大学引入简易的艾滋病鉴定技术

富士药品总公司(日本高冈市)公告:引进了英国剑桥大学部血液医学科教授Abraham Karpas所开发的简便、精确的艾滋病鉴定药。该公司获得了在全世界的销售权,开始进行艾滋病鉴定药的国际性开发。这次引入的艾滋病鉴定药是一种酶免疫测定(EIA)药物。把艾滋病病毒(英国分离的菌株)感染的细胞在标本上固定,与患者的血清反应后,使用一种与过氧化物酶化学结合的试剂(它与同抗体有亲和性的蛋白即蛋白质A发生显色反应),即可查出包含在艾滋病患者血液中的对艾滋病毒的抗体。一次检查所需血清仅10微升;约2小时即可完成鉴定;而且用