锈赤扁谷盗成虫趋光行为研究

【目的】研究灯光诱捕技术防治锈赤扁谷盗Cryptolestes ferrugineus(Stephens)的可行性。【方法】在实验室条件下测定了锈赤扁谷盗成虫对不同光源的趋光反应。【结果】锈赤扁谷盗成虫对实验所选取的光源都有一定的趋性。在可见光中,对主波长为575 nm的光源的趋性最强,对430、495、620、530和450 nm光源的趋性依次降低。在紫外光中,对主波长为385 nm的光源的趋性显著高于对主波长为365、375和395 nm的光源;1~10日龄的锈赤扁谷盗成虫,随日龄的增加,成虫趋光性先增强后有所减弱;雌虫的趋光性高于雄虫,且交配状态会影响雌虫和雄虫的趋光性。交配会抑制雄虫的趋光性,但是交配后的雌虫的趋光性增强;短期饥饿处理和灯光经历对害虫趋光性无显著影响。【结论】锈赤扁谷盗成虫对光波长的选择偏好性证实了其灯光诱捕技术的可行性。     

植物精油对锈赤扁谷盗成虫熏蒸毒杀作用研究

为明确适用于防治锈赤扁谷盗的植物精油种类及其用量,本试验采用拌粮密闭熏蒸法,比较23种植物精油对锈赤扁谷盗成虫熏蒸毒杀活性差异,从中筛选出作用效果较好的精油种类进行熏蒸毒力测定。通过二次筛选结果表明,大蒜与芥末精油对锈赤扁谷盗成虫具有明显的熏蒸毒杀作用。进一步的毒力测试结果表明,在24 h、48 h、72 h处理时间下,大蒜精油对锈赤扁谷盗成虫的LC_(50)值分别为0.7827、0.7222、0.6478μL/L,而芥末精油在相同处理时间条件下的LC_(50)值分别为2.7581、2.6117及2.4619μL/L,大蒜精油对锈赤扁谷盗具有更强的熏蒸毒杀活性。     

两种防护剂和磷化氢联用对储粮书虱和锈赤扁谷盗的实仓防治效果

储粮书虱Liposcelis spp.和锈赤扁谷盗Cryptolestes ferrugineus(Stephens)由于对磷化氢具有较高的抗性而成为目前粮食储藏过程最难防治的两类害虫,研究储粮防护剂和磷化氢联用对储粮书虱和锈赤扁谷盗的防治效果,对于缓解其对磷化氢的抗性以及其在实仓中综合防治具有重要的经济意义。本文用55%甲基嘧啶磷乳油和2%溴氰·甲嘧磷粉剂分别和磷化氢联用对广东、广西、安徽和河南4个不同气候条件的粮库中的书虱和锈赤扁谷盗进行防治效果的研究。结果表明,在磷化氢熏蒸粮食之前用55%甲基嘧啶磷乳油或2%溴氰·甲嘧磷粉剂处理粮面表层的粮食,在4个粮库的试验粮仓内书虱和锈赤扁谷盗的防治效果有显著差异:在北方干燥少雨的河南汤阴库防治效果最好,可达100%,其次是安徽舒城库、广西柳州库,防治效果分别为71.8%和71.9%。效果最差的是高温高湿的是广东湛江库,防治效果为50.4%。用55%甲基嘧啶磷乳油或2%溴氰·甲嘧磷粉剂和磷化氢联用对书虱和锈赤扁谷盗具有很好的防治效果,说明储粮防护剂和磷化氢联用对于储粮书虱和锈赤扁谷盗具有更好的防治效果。     

温度对赤拟谷盗爬行和起飞活动的影响

在不同温度下研究了赤拟谷盗Tribolium castaneum(Herbst)在固体物面、设定粮面、温度均匀的粮(小麦)柱和具有温度梯度粮柱内爬行扩散速度、起飞温度等.主要结果为:赤拟谷盗在17℃开始有爬行为,25℃开始有飞行行为,在15～25℃时水平爬行速度和15 ～ 20℃时竖直运动速度与温度呈显著正相关,在无障...     

不同地区转Bt基因抗虫水稻稻谷对赤拟谷盗生长发育的影响

为了明确来自湖北武穴、孝感、随州3个不同地区的转cry1Ab/cry1Ac、cry2A、cry1C基因明恢63(分别命名为TT51、T2A-1和T1C-19)对赤拟谷盗Tribolium castaneumHerbst生长发育的影响,在室内以不同的转Bt基因稻谷继代饲养赤拟谷盗6代,结果表明:各处理赤拟谷盗的卵期3～4d,卵孵化率85%～100%,幼虫期22～27d,化蛹率85%～97%,蛹期6～7d,百蛹重0.25～0.31g,性比0.8～1.4,羽化率82%～97%,产卵前期5～7d。不同抗虫转基因水稻对赤拟谷盗各发育历期及生命表参数没有显著的影响,同一转基因事件,没有因为种植地区的不同造成对赤拟谷盗生长发育的差异。3种Bt蛋白在继代饲养的赤拟谷盗幼虫体内检测均呈阳性反应,但积累量很小,继代饲养后,没有发现在赤拟谷盗体内明显的累积。     

温湿度对赤拟谷盗成虫飞行能力的影响

本文利用昆虫飞行磨研究了温度和湿度变化对赤拟谷盗Tribolium castaneum(Herbst)雌、雄成虫飞行能力的影响;分别测定了23℃、26℃、29℃、32℃和35℃等5个温度,45%、65%和85%等3个湿度条件下,赤拟谷盗雌、雄成虫的飞行距离、时间和速度等反应昆虫飞行能力的参数。单次飞行距离、单次飞行时间、单次飞行速度、24 h累计飞行距离及时间分析结果表明,环境温度和湿度对赤拟谷盗雌、雄成虫的飞行能力有不同程度的影响,环境温湿度过高或过低均不利于赤拟谷盗雌、雄成虫飞行;温度为32℃时,赤拟谷盗雌成虫的单次飞行距离、飞行时间、飞行速度、24 h累计飞行距离和飞行时间分别为0.925 m、9.616 s、0.023 m/s、0.979 km和2.886 h;雄成虫的单次飞行距离、飞行时间、飞行速度、24 h累计飞行距离和飞行时间分别为0.638 m、6.035 s、0.014 m/s、0.674 km和3.175 h。在相对湿度45%、65%和85%时,雌成虫的单次飞行时间分别为6.998 s、9.616 s和6.431 s;雄成虫的单次飞行时间分别为3.163 s、6.035 s和0.208 s。飞行速度与相对湿度的关系与飞行时间相似。从飞行能力参数来看,雌虫的飞行能力优于雄虫。     

氮气处理对赤拟谷盗生理生化反应的影响

为明确不同体积分数氮气对赤拟谷盗Tribolium castaneum生理生化反应的影响,本研究在28℃±1℃、RH75%±5%、不同体积分数（78%（大气压下作为对照）、90%、95%、98%）氮气、不同处理时间（2 d、4 d、6 d、8 d）条件下研究了赤拟谷盗幼虫和成虫体内总超氧化物歧化酶（SOD）活性、过氧化物酶（POD）活性、过氧化氢酶（CAT）活性、总抗氧化能力（T-AOC）和乳酸（LD）含量等生理生化指标的变化规律。研究结果表明,随氮气体积分数增加,赤拟谷盗幼虫和成虫体内SOD、POD和CAT活性均在处理时间为8 d时响应速度最快,在氮气体积分数为98%处理8 d时赤拟谷盗幼虫和成虫体内SOD、POD和CAT活性全部降为0,赤拟谷盗全部死亡。赤拟谷盗幼虫体内T-AOC值随氮气体积分数增加,在处理时间为6 d和8 d时响应速度最快,在氮气体积分数为98%处理6 d和8 d时赤拟谷盗幼虫体内T-AOC值降为0;赤拟谷盗成虫体内T-AOC值在处理时间为8 d时响应速度最快,在氮气体积分数为98%处理8 d时赤拟谷盗幼虫体内T-AOC值降为0。赤拟谷盗幼虫体内LD含量随氮气体积分数增加,在处理时间为6 d和8 d时响应速度最快,在氮气体积分数为98%处理6 d和8 d时赤拟谷盗幼虫体内LD含量降为0;赤拟谷盗成虫体内LD含量在处理时间为8 d时响应速度最快,在氮气体积分数为98%处理8 d时赤拟谷盗成虫体内LD含量降为0。     

小菜蛾对定虫隆的抗性生化机制初探

以定虫隆汰选的抗性指数为23.78倍抗性种群(CH-R),并以上海田间种群(SH-R,对定虫隆的抗性指数为9.16倍)作为参比种群,研究小菜蛾Plutella xylostlla(L.)对定虫隆的抗性机制,结果表明：CH—R种群多功能氧化酶O-脱甲基活力比相对敏感种群(SZ-S)提高1倍,而SH-R种群多功能氧化酶O-脱甲基活力虽有所提高,但与SZ-S种群相比差异并不显著;CH-R和SH-R种群羧酸酯酶比活力均明显高于Sz-S种群,分别为SZ-S种群的4.61和2.18倍,且CH-R种群的Km仅为SZ-S种群的1/20;酸性磷酸酯酶和碱性磷酸酯酶比活力种群间无明显差异;CH-R种群的几丁质酶活力降低48%,酚氧化酶活力降低60%。说明小菜蛾对定虫隆的抗性机制具有多因子性,多功能氧化酶解毒代谢能力的提高可能是主导抗性机制之一,羧酸酯酶、几丁质酶和酚氧化酶也参与了小菜蛾对定虫隆的抗性。     

磷化氢对赤拟谷盗成虫体内CAT和SOD活性的影响

用赤拟谷盗Tribolium castaneum(Herbst)成虫,研究PH3对其体内超氧化物岐化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性的影响。结果表明PH3熏蒸后,4种不同地理种群的成虫体内,CAT酶活性都有所降低。种群NGD1降低最多,接近57%,而NGD4则只降低了19%,NGD2和NGD3的降低都在40%左右。不同地理种群的成虫体内,SOD酶活性在熏蒸后都有所增加,种群NGD1增加幅度最大,NGD2增加幅度最小。SOD和CAT活性的变化幅度与成虫对PH3产生的抗性有关,抗性越大,酶活性变化越大。     

八角茴香提取物对长角扁谷盗成虫的熏蒸作用及其酶活性的影响

为探索八角茴香的杀虫活性及其作用机理,采用密闭容器熏蒸法测定八角茴香干果的甲醇、乙酸乙酯、石油醚3种溶剂提取物对长角扁谷盗成虫的杀虫活性,及其对试虫体内乙酰胆碱酯酶(AChE)和谷胱甘肽-S-转移酶(GSTs)活性的影响。结果表明:3种提取物对试虫均有较强的熏杀活性,熏杀效果随着处理剂量的提高和处理时间的延长而增强,熏蒸72 h后,20.0 mg/L甲醇、乙酸乙酯、石油醚提取物对试虫的校正死亡率分别为89.93%、96.71%和91.56%,LD50分别为7.16、4.57、5.42 mg/L,以乙酸乙酯提取物的熏杀效果最好。3种提取物对试虫体内的AChE、GSTs活性均表现出明显的剂量效应和较强的时间效应,随着处理剂量的升高,对2种酶活力多数表现为抑制作用增强,而低剂量(1.25 mg/L)的甲醇提取物对AChE具有一定的诱导作用;乙酸乙酯、石油醚提取物在48 h而甲醇提取物在60 h对AChE、GSTs活性抑制作用最强;3种溶剂提取物对AChE、GSTs活性的抑制作用大小均表现为乙酸乙酯>石油醚>甲醇。提取物对酶活性的抑制作用与熏杀效果整体呈正相关,说明AChE、GSTs活性下降可能是造成试虫死亡的重要原因之一。因此,八角茴香具有潜在的杀虫应用研究价值。     

棉铃虫几丁质合成酶1基因的时空表达分析及氟啶脲对其表达的影响

本研究旨在明确棉铃虫Helicoverpa armigera(Hübner)几丁质合成酶1(HaCHS1)基因在不同发育时期和不同组织的表达及氟啶脲处理后对该基因表达的影响。利用RT-PCR和RACE技术克隆获得棉铃虫HaCHS1基因,HaCHS1基因全长为5247 bp,其中开放阅读框4698 bp,编码1565个氨基酸,5′非翻译区为168 bp,3′非翻译区为381 bp。预测蛋白的相对分子质量为180.7 kDa,等电点为6.50,HaCHS1具有16个跨膜螺旋和6个N-糖基化位点。RT-qPCR检测结果表明,HaCHS1基因在预蛹期表达量最低,在蛹期第1天表达量最高。HaCHS1基因在头部的表达量最高,其次是表皮,而在中肠、气管、马氏管和脂肪体中的表达量均极低。亚致死浓度(60 mg/L)氟啶脲处理后,棉铃虫HaCHS1基因呈现出“抑制-激活-再抑制”的波动。本研究将为棉铃虫HaCHS1基因功能的研究奠定基础,为基于几丁质合成途径设计新药提供科学的理论依据。     

朱砂叶螨几丁质合成酶基因1全长cDNA的克隆与表达分析

【目的】克隆朱砂叶螨Tetranychus cinnabarinus几丁质合成过程中的关键酶几丁质合成酶基因,并检测该基因在朱砂叶螨生长发育不同阶段的相对表达量。【方法】本研究采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)以及c DNA末端快速扩增(RACE)技术首次克隆获得朱砂叶螨几丁质合成酶基因1的全长c DNA序列(命名为Tc CHS1,Gen Bank登录号为KM242062),并使用实时荧光定量PCR技术首次检测了Tc CHS1基因在朱砂叶螨生长发育不同阶段的相对表达量。【结果】朱砂叶螨Tc CHS1基因的c DNA全长为4 881 bp,包括198 bp的5'非翻译区(5'-UTR),4 425 bp的开放阅读框(ORF),258 bp的3'非翻译区(3'-UTR),开放阅读框编码1 474个氨基酸,预测其蛋白质分子质量约为168.35 ku,理论等电点为6.26。其包含EDR和QRRRW这2个几丁质合成酶基因的标签序列。氨基酸序列同源性分析结果表明:Tc CHS1与其他昆虫该基因编码蛋白的氨基酸序列相似度在50%左右,与二斑叶螨Tetranychus urticae的氨基酸相似度最高(98%),与西方盲走螨Metaseiulus occidentalis的相似度为55%。分子系统进化的结果也表明Tc CHS1与其他昆虫的CHS1聚在一起,并且和二斑叶螨具有最近的亲缘关系。荧光定量分析表明Tc CHS1基因在朱砂叶螨生长发育的不同阶段(卵、幼螨、第1若螨、第2若螨、雌成螨和雄成螨)均有表达,在卵和雌成螨中的表达量较高,在第2若螨的表达量最低。【结论】Tc CHS1基因可能在朱砂叶螨生长发育过程中具有重要作用。     

Heterogeneity of β2-Microglobulin in Human Urine

Purification and characterization of β₂-microglobulin from human urine was performed. The yield was 30.1%, and 150.4 mg of β₂-microglobulin was obtained. The final preparation of β₂-microglobulin obtained showed three bands on disc gel electrophoresis at pH 9.5, and all of them have immunological activity. However, these three bands migrated as a single band on disc gel electrophoresis at pH 4.3. It is concluded that the three bands observed on disc gel electrophoresis at pH 9.5 were charge isomers. The isoelectric points of isomers were determined by isotachophoresis and two of them were 5.4 and 5.9 respectively, while the other one was not determined.     

小麦条锈菌II类几丁质合成酶基因PstChsII的克隆及表达特征

摘要:【目的】克隆小麦条锈菌几丁质合成酶基因PstChsII,分析其在小麦条锈菌不同发育时期的表达水平。【方法】利用RT-PCR和PCR技术克隆PstChsII的cDNA序列和基因组序列,利用不同的生物信息学软件对序列进行分析,运用实时荧光定量技术分析基因在孢子、芽管以及不同侵染时间的表达水平。【结果】PstChsII基因（Genbank登录号GQ329851）编码区存在15个内含子,开放阅读框长2727 bp,编码908个氨基酸。PstChsII蛋白C端含有7个跨膜螺旋区,N端含多个保守结构域和“QXR     

氟虫脲对东亚飞蝗和中华稻蝗几丁质合成酶基因表达的影响

为了探讨氟虫脲可能的作用靶标及毒性机制, 本研究以重要农业害虫东亚飞蝗Locusta migratoria manilensis (Meyen)和中华稻蝗Oxya chinensis (Thunberg)为材料, 采用简并引物扩增中华稻蝗几丁质合成酶1基因（OcCHS1）的部分cDNA序列; 以氟虫脲浸渍法处理2龄中期中华稻蝗及1, 2和3龄东亚飞蝗若虫为处理组, 丙酮处理为对照组, 使用RT-PCR和实时荧光定量PCR方法分析氟虫脲对蝗虫几丁质合成酶基因mRNA表达的影响。结果获得的OcCHS1部分cDNA序列, 其长度为312 bp, 编码104个氨基酸, GenBank登录号为HM214491, 与东亚飞蝗几丁质合成酶1基因（LmCHS1）在氨基酸水平上相似度达95％。RT-PCR结果显示, 处理组几丁质合成酶1扩增带均强于对照组。实时荧光定量PCR结果表明: 与对照组相比, 处理组中华稻蝗2龄中期若虫OcCHS1 mRNA表达提高了1.02倍, 东亚飞蝗1, 2, 3龄若虫LmCHS1 mRNA表达分别提高了34%, 82%和89%, 差异显著（P<0.05）。分析基因表达提高的原因是几丁质合成受阻后基因表达水平的一种代偿性增加, 由此推测几丁质合成酶可能是氟虫脲作用的靶标之一。     

Chitin synthase 2 gene sequence of Malassezia species.

Nucleotide sequences of the chitin synthase 2 (CHS2) gene of seven species, Malassezia furfur, M. globosa, M. obtusa, M. pachydermatis, M. restricta, M. slooffiae and M. sympodialis, were analyzed for their phylogenetic relationship. About 620-bp genomic DNA fragments of the CHS2 gene were amplified from these Malassezia species by polymerase chain reaction (PCR) and sequenced. The CHS2 nucleotide sequences of these Malassezia species showed more than 95% similarity between the species. A phylogenetic analysis of the nucleotide sequences of CHS2 gene fragments of seven Malassezia species revealed that the species were genetically distinct from each other.     

Detection of Mattesia oryzaephili (Neogregarinorida: Lipotrophidae) in grain beetle laboratory colonies with an enzyme-linked immunosorbent assay

An indirect sandwich enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for the detection of the neogregarine Mattesia oryzaephili was developed with monoclonal antibodies. It was used to screen laboratory colonies of Oryzaephilus surinamensis, Cryptolestes ferrugineus, C. pusillus, and C. turcicus from the United States, Canada, and Australia. All of the colonies except C. turcicus had larvae that tested positive with the percent of positives ranging from 0.2 to 83.9, but only colonies that tested positive had reported population declines. This assay will make possible epizootiological studies to assess the impact of M. oryzaephili on pest populations.