淋巴组织H.E染色"发灰"现象的纠正方法

在常规病理制片技术工作中 ,经常发现淋巴组织 (如淋巴结、鼻咽部组织及扁桃体等 )由于处理不当 ,造成切片染色后组织中间出现发灰现象 ,即镜下核浆染色模糊不清或组织成片不着色。这样将给临床病理诊断带来很大困难。为此 ,我们经大量实验 ,对原组织蜡块再切片后采用下述方法进行处理 ,收到了较好的染色效果。材料和方法1.标本来源 :选取 2 5例 H.E染色切片发灰的淋巴组织原蜡块再进行切片 ,切片厚 5μm。2 .切片的处理方法 :(1)将原蜡块所制切片浸入二甲苯 、 脱蜡各 5 min;(2 )无水酒精 、 浸洗各 2 min;(2 )用无水酒精乙醚等量 (1∶…     

高度木质化材料的冰冻切片技术

高度木质化植物材料的切片难度很大,应用常规切片方法不容易取得高质量的图版。本文介绍的冰冻切片方法,不需要进行长时间的软化处理、以及繁琐的脱水、包埋等过程,切片还进行不同的染色或组织化学测定,是一种快速、简捷和有效的制片方法。 其关键步骤是选好甘油浓度, 冰冻温度和展片步骤。     

高度木质化材料的冰冻切片技术

高度木质化植物材料的发片难度大,应用常规切片方法不容易取得高质量的图版。本文介绍了冰切片方法,不需要进行长时间的软化处理、以及繁琐的脱水、包埋等过程,切片还进行不同的染色或组织化学测定,是一种快速、简捷和有效的制片方法。其关键步骤是选好甘油浓度,冰冻温度和展片步骤。     

禾本科植物超薄切片应注意的问题

在透射电镜的生物样品制备方法中,超薄切片技术是最基本、最常用的制备技术,一般来说,植物样品的超薄切片比动物样品难度要大,而在植物材料中,禾本科植物材料的制样又特别困难,因为禾本科植物(如水稻、小麦、玉米、高梁、甘蔗等)质地坚硬,细胞壁角质化,并且充满硅质,它们对固定液的渗透具有不可忽视的障碍作用,按常规的生物样品制备方法常常失败或效果不佳。样品制备的好坏,很大程度上依赖于操作者的经验和操作技术,作者近几年来对禾本科植物叶片做了一些超薄切片工作,体会到要获得较理想的超薄切片,必须十分认真地对待制样过程中的每一操作步骤,任何环     

应用Steedman's wax 切片法观察植物细胞微管骨架

微管骨架在植物发育过程中起重要作用。由于植物细胞的特殊性,与动物细胞相比植物微管骨 架的研究遇到更多的困难。简略地介绍了曾被国内外学者应用的植物微管骨架的各种研究方法及其局限 性。Steedman's wax是一种多脂蜡。它熔点低(35~37℃),具有与石蜡相同的切片性质,能够切成不同厚 度的连续切片,适合深埋于器官内部的组织或细胞的免疫细胞化学研究。介绍了应用Steedman's wax 切 片法观察植物细胞微管骨架的一般程序和方法以及经过作者检验且切实可行的一些技术改进。     

去黑色素法在免疫组织化学中的应用

在有色素的黑色素瘤免疫组织化学鉴别诊断和研究中 ,常遇到的问题是经免疫组织化学 DAB显色后的切片 ,其棕黄色结果是抗原表达还是黑色素的沉集很难区别 ,有必要除去黑色素 ,否则将导致错误的结论。选择什么样的去黑色素方法 ,去色素后对免疫组织化学有无影响以及是否需要进行抗原修复等问题有待摸索 ,为此 ,我们特对 15例有色素和 13例无色素性黑色素瘤进行了实验比较 ,现报道如下 :材料和方法1　材料 :选取我科病理诊断为黑色素瘤的病例 2 8例 ,其中有色素的 15例 ,无色素的 13例 ,常规 10 %福尔马林固定 ,石蜡包埋切片 ,切片厚 4um,共 …     

免疫组化ABC法和粘液组化AB／PAS法的套染技术

我们在前列腺癌的组化研究中,将免疫组化ABC法和常规粘液组化AB/PAS法结合起来,在同一张切片上进行套染和观察,比较特异性抗原——细胞角蛋白(cytokeratin)与中性粘液和酸性粘液的关系,取得了较为满意的结果,并说明套染切片的观察比分别在两张切片的染色观察更为准确和方便。一、材料和方法 1、组织材料取前列腺癌术后标本和正常人前列腺组织,Bouins液固定,常规脱水包埋,切成4μm厚的连续切片,多聚赖氨酸帖片。 2、抗体和主要试剂①多聚赖氨酸(Poly-L-Lysin Sigma Ccm.USA)     

瓶尔小草是观察厚囊蕨类孢子囊发育的好材料

瓶尔小草是观察厚囊蕨类孢子囊发育的一种好材料。以瓶尔小草为材料观察孢子囊发育具有如下优点:便于确定和获得孢子囊发育的各个时期;易制作半薄切片和观察;可代表较原始的蕨类植物孢子囊发育的特点(厚囊型)等;为丰富《植物学实验》的教学材料提供参考。     

环氧树脂厚切片的染色

供电子显微镜观察的超薄切片,一般用各种环氧树脂作包埋剂。用环氧树脂的包埋头也能切成厚1—2微米的切片,供光学显微镜观察。这种厚度的切片与几百埃计算的超薄切片相对而言,可称之厚切片或半薄切片。在超薄切片之前,用环氧树脂包埋头先切     

石蜡切片法中细长或薄片状材料的包埋

石蜡切片法制作细长或薄片状生物材料的横切面切片时,可进行下列简便而有效的石蜡包埋方法：先在包埋纸盒底部倒上少许熔蜡,形成约1mm厚的软蜡层;待软蜡层凝固前,再向纸盒中倒满熔蜡,然后迅速将渗好蜡的材料直立地放入熔蜡中,并将材料轻压在纸盒底部的软蜡层上。     

杂草果实的冰冻切片技术

介绍一种快速、简便的杂草果实解剖技术。以4种木质化程度高且能够漂浮的杂草果实为材料进行冰冻切片, 经过材料固定、前处理、样品冷台固定、冷冻切片、展片、染色和观察并拍照等操作步骤, 可以获得清晰的果实解剖照片, 直观地揭示杂草果实适应漂浮的显微结构。杂草果实冰冻切片方法的优点是不需要对材料进行长时间的软化处理以及繁琐的脱水和包埋等过程。其关键环节是适宜的甘油浓度、冰冻温度和展片步骤。其中, 15%的甘油浓度进行前处理最合适。     

杂草果实的冰冻切片技术

介绍一种快速、简便的杂草果实解剖技术。以4种木质化程度高且能够漂浮的杂草果实为材料进行冰冻切片,经过材料固定、前处理、样品冷台固定、冷冻切片、展片、染色和观察并拍照等操作步骤,可以获得清晰的果实解剖照片,直观地揭示杂草果实适应漂浮的显微结构。杂草果实冰冻切片方法的优点是不需要对材料进行长时间的软化处理以及繁琐的脱水和包埋等过程。其关键环节是适宜的甘油浓度、冰冻温度和展片步骤。其中,15%的甘油浓度进行前处理最合适。     

一种用于DAPI染色的方法--Steedman's wax包埋切片法

以植物的胚珠和子房为实验材料,介绍一种用Steedman's wax 包埋对组织切片中的细胞核进行DAPI染色的方法.Steedman's wax 作为一种低熔点多酯蜡,具有与石蜡相似的性质,切片方法同常规石蜡切片,适合于切成厚度大于5 μm的连续切片.Steedman's wax包埋的切片能成功地进行DAPI染色.与用压片法和Technovit 7100或GMA包埋切片法进行的DAPI染色相比,用Steedman's wax 包埋切片法进行的DAPI染色具有廉价、操作简便、可进行连续切片、图象清晰等优点,特别在植物细胞程序化死亡(PCD)的研究中及细胞核DNA含量测定方面,有着较大的应用价值和潜能.     

用于光学显微镜研究的塑料半薄切片

本文介绍了以环氧树脂为包埋介质的用于光学显微镜的塑料半薄切片的制备技术和部分实验结果。叙述了固定、脱水、渗透、包埋、聚合、切片、染色及封片各程序。作为对石蜡切片技术的补充和发展。塑料半薄切片能充分发挥光学显微镜的分辨能力,能观察到许多在石蜡切片上看不清或看不到的细胞内部结构,如:花粉的外粉壁,萌发孔;细胞的微核,液泡和液泡问的原生质丝等。可用同一包埋材料在半薄切片基础上进行超薄切片,所以半薄切片技术是一种把光学显微镜水平的研究和电子显微镜水平的研究联系在一起的一种过渡性技术。因此,它无论对植物学工作者或其它生物学工作者都是很有用的一项技术。     

一种用于DAPI染色的方法Steedman＇s wax包埋切片法

以植物的胚珠和子房为实验材料,介绍一种用Steedrnan‘s wax包埋对组织切片中的细胞核进行DAPI染色的方法。Steedrnan‘s wax作为一种低熔点多酯蜡,具有与石蜡相似的性质,切片方法同常规石蜡切片,适合于切成厚度大于5μm的连续切片。Steedrnan‘s wax包埋的切片能成功地进行DAPI染色。与用压片法和Technovit 7100或GMA包埋切片法进行的DAPI染色相比,用Steedrnan‘s wax包埋切片法进行的DAPI染色具有廉价、操作简便、可进行连续切片、图象清晰等优点,特别在植物细胞程序化死亡(PCD)的研究中及细胞核DNA含量测定方面,有着较大的应用价值和潜能。     

一种制作毛发切片的方法

一种制作毛发切片的方法材料用县刀片、刀架、镊子、显微镜、载玻片、盖玻片、滴管、清水、洗涤剂（或洗衣粉）、人胡须。制作方法①用温水将胡须洗软后，拿刮胡刀将胡须刮２～３遍，使胡须出露极短。②将刀片、刀架洗净后重新刮一次，这时，刀片上便留有胡须的横切薄片、...     

一种重包埋方法的应用

目前普遍使用的简单定向方法,是先在包埋对使样品定向,以后再将聚合好的包埋块切一张大面积的1—2微米的厚切片,经光学显微镜检查找出所需要的部位,做好标记,然后对照厚切片修整样品再作超薄切片。Grimley 曾报道一种简单的重包埋方法,将包埋的组织块简单地切成一张1—8微米的厚片,贴在盖玻片上染色后,在光学显微镜下找出需要进行电镜观察的部位,标上记     

冰冻徒手切片

在用显微镜观察植物器官的解剖结构时 ,徒手切片的方法是制作玻片标本常用的最简便的方法。在对幼小植物根、海带带片、蘑菇菌褶、木耳子实体、苔藓植物、又薄又嫩的叶片等难于直接拿在手中的标本进行徒手切片时 ,通常利用萝卜、马铃薯块茎或泡沫塑料等作夹持物 ,将要切的材料夹在其中 ,进行切片。由于这些材料幼嫩软弱 ,有的容易夹坏 ,较难切薄。通过实验发现利用冰冻方法进行徒手切片效果很好。方法是 :将较厚的叶片、木耳子实体、蘑菇、海带带片、较粗的幼根等切成可以手拿方便的条块 ;将较细小的材料如苔藓植物捆成束 ;将较薄的几个叶片…     

花粉亚显微结构研究技术

做过花粉超薄切片的人们都知道,要想得到充整满意的连续切片和清晰的花粉电镜照片是比较困难的。造成闲难的原因主要有:(1)花药壁(尤其是禾本科植物的花药壁)外表皮上有一层较厚的蜡质,在固定、脱水及包埋过程中溶剂较难渗入。(2)花粉囊中往往有空气,花药漂浮在固定液上不下沉。(3)较成熟的小孢予的外壁厚而坚硬,其内壁也较厚。花粉外壁的主要成份是能耐酸、碱和射线的孢粉素。外壁不仅是溶剂渗透的重要障碍,而且在切片时     

应用Steedman's wax切片法观察植物细胞微管骨架

微管骨架在植物发育过程中起重要作用.由于植物细胞的特殊性,与动物细胞相比植物微管骨架的研究遇到更多的困难.简略地介绍了曾被国内外学者应用的植物微管骨架的各种研究方法及其局限性.Steedman's wax是一种多脂蜡.它熔点低(35～37℃),具有与石蜡相同的切片性质,能够切成不同厚度的连续切片,适合深埋于器官内部的组织或细胞的免疫细胞化学研究.介绍了应用Steedman's wax切片法观察植物细胞微管骨架的一般程序和方法以及经过作者检验且切实可行的一些技术改进.