皱皮木瓜多糖的分离、纯化及抗氧化活性研究

为了研究木瓜多糖的提取、分离、纯化与抗氧化活性,采用水提醇沉法提取皱皮木瓜中的多糖,得多糖Ⅰ;利用Sevag法除去多糖中的蛋白质后得多糖Ⅱ;以30%H_2O_2脱除色素后再次醇沉得到精制多糖Ⅲ;透析除去小分子后利用AB-8大孔树脂进行分离以水、30%、50%、70%和95%乙醇洗脱,其中水洗脱部分多糖为Ⅳ。用苯酚-硫酸法测定多糖含量。多糖Ⅰ得率为9.83%,多糖含量(纯度,下同)为64.45%;脱蛋白后多糖Ⅱ中多糖含量为78.23%;经脱色后多糖Ⅲ含量达88.39%;大孔树脂水洗脱部分多糖Ⅳ含量为89.74%。以DPPH(2,2-二苯基-1-苦肼基)清除率和Fe~(3+)还原力方法测定木瓜多糖的抗氧化活性,木瓜多糖均体现出一定的抗氧化作用,呈浓度依赖性增强,其中多糖Ⅰ、Ⅱ表现出更好的作用。     

从华蟹甲草中分离的两种活性成分对家蝇的杀虫活性

研究了从我国特有植物华蟹甲草Sinacalia tangutica (Maxim.) B. Nord中经生物活性跟踪实验得出的杀虫活性成分Z,Z,Z-9,12,15-十八碳三烯酸和Z,Z-9,12-十八碳二烯酸对家蝇Musca domestica vicina的生物活性及对其生理生化指标的影响。结果表明,家蝇经该2种化合物1 mg/mL处理后表现出类似神经毒剂中毒的兴奋症状。这2种化合物对家蝇表现出毒杀作用,24 h时,Z,Z,Z-9,12,15-十八碳三烯酸和Z,Z-9,12-十八碳二烯酸对家蝇的LC₅₀值分别为0.26 mg/mL和0.43 mg/mL; 对家蝇触杀作用极低,以1 mg/mL分别点滴处理家蝇后48 h,死亡率分别为21.54%和4.08%。这2种化合物对家蝇的AChE影响不明显,但可引起家蝇的过氧化物酶的活性发生紊乱,对家蝇总糖含量也有一定的影响。Z,Z-9,12-十八碳二烯酸可引起家蝇的Mg-ATPase的比活力降低,而Z,Z,Z-9,12,15-十八碳三烯酸引起家蝇的Na-K-Mg-ATPase和Ca-ATPase的比活力较对照上升。     

海芒果叶挥发油化学成分及杀虫活性研究

采用水蒸气蒸馏法提取,运用气相色谱-质谱联用技术对海芒果叶挥发油化学成分进行分析,用气相色谱面积归一化法测定了各成分的相对百分含量。经毛细管色谱分离鉴定了13个化合物。研究了挥发油对赤拟谷盗的活性:触杀活性测定发现挥发油对赤拟谷盗48 h的LC50为1.0067 mL/L;忌避活性测定发现1 mL/L浓度在12~48 h内忌避率都在80%以上;熏蒸活性测定发现24、48、72 h的LC50分别为2.0207、1.7450、1.0160mL/L;     

砂地柏中6种萜烯类化合物分离鉴定及其杀虫活性研究

为研究砂地柏杀虫化学成分特征,采用活性示踪法,从砂地柏果实乙醇提取物中分离鉴定出6种萜烯类化合物:4-表-松香醛(1)、7,13-松香二烯-3-酮(2)、4-表-松香醇(3)、日本扁柏酮(4)、β-谷甾醇(5)和豆甾醇(6),其中日本扁柏酮是从砂地柏中首次分离得到.以砂地柏中另2种主要杀虫活性成分鬼臼毒素和脱氧鬼臼毒素为对照品,采用小叶碟添加法和浸叶法分别测试了上述化合物对粘虫(Mythimna separata)幼虫的拒食活性和对菜青虫(Pieris rapae)的毒杀活性.结果表明,2种木脂素类化合物鬼臼毒素和脱氧鬼臼毒素的活性高于本研究得到的6种化合物,其中4种二萜类化合物的活性高于2种甾醇三萜类化合物;4种二萜类化合物的活性差异较大,其中4-表-松香醇和7,13-松香二烯-3-酮对粘虫幼虫的拒食活性较高,其48 h AFC50分别为2.92和3.02mg·mL-1,7,13-松香二烯-3-酮对菜青虫毒杀活性较高,其48h LC50为3.40mg·mL-1.所得到的4-表-松香醇和日本扁柏酮2种化合物的杀虫活性为首次报道.     

小果博落回中2种杀虫活性成分的分离及鉴定

以粘虫(Mythimna separata)3龄幼虫为试虫,采用生物活性示踪法从小果博落回(Macleaya microcarpa)乙醇提取物中分离纯化出2种活性成分,经MS1、H-NMR1、3C-NMR分析鉴定为二氢血根碱和二氢白屈菜红碱。采用小叶碟添加法测试了2种化合物对粘虫3龄幼虫的拒食及毒杀活性。结果表明,2种化合物对粘虫3龄幼虫均具有较高的拒食活性,48 h的拒食AFC50分别为0.168和0.231 mg.mL-1,同时,二氢血根碱对粘虫3龄幼虫具有一定的毒杀活性,96 h的LC50为0.085 mg.mL-1。分析认为二氢血根碱可能是小果博落回的主要杀虫活性成分之一。     

水菖蒲杀虫活性组分菖蒲螺酮的分离与鉴定（英文）

储粮害虫的危害造成储粮严重损失,化学农药的种种弊端使开发新型环境友好型药剂非常迫切, 植物由于其自身的特点, 成为开发新型药剂的重要来源。我们的前期研究表明, 水菖蒲Acorus calamus提取物对多种储粮害虫具有明显的触杀活性,并且分离得到了其主要活性组分β-细辛醚。本研究采用硅胶柱层析法,并以对玉米象Sitophilus zeamais的触杀活性进行追踪, 对水菖蒲提取物进行分离, 得到另一活性组分。经气相色谱-质谱联用、红外吸收光谱和核磁共振波谱方法鉴定,该活性组分为单体化合物菖蒲螺酮（1-异丙基-4,8-二甲基螺[4.5]癸-2,7-二酮）。将菖蒲螺酮以314.54, 251.63, 188.72, 125.82和62.91 μg/cm²的浓度处理玉米象96 h后, 玉米象的死亡率分别为85.6%, 72.2%, 53.3%, 38.9%和15.6%。处理96 h后,菖蒲螺酮对玉米象成虫的LD₅₀为158.00 μg/cm²。这些结果说明菖蒲螺酮对玉米象具有明显的生物活性,是水菖蒲提取物中除β-细辛醚以外的又一活性组分。     

岩黄连乙酸乙酯部位化学成分及其抗炎活性研究

为研究岩黄连的化学成分及其抗炎活性,该研究采用硅胶、MCI、Sephadex LH-20、制备型高效液相色谱等方法对岩黄连95%乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位进行分离和纯化,通过核磁共振波谱(NMR)、高分辨质谱(HR-MS)等谱学手段鉴定其结构,同时采用脂多糖(LPS)诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7建立体外炎症筛选模型,并评价其抗炎活性。结果表明：从岩黄连乙醇提取物的乙酸乙酯部位中分离并鉴定了13个化合物,分别为黄连碱(1)、盐酸小檗碱(2)、文殊兰新碱(3)、甲基小檗碱(4)、脱氢卡维丁(5)、左旋四氢巴马汀(6)、药根碱(7)、紫堇定(8)、反式阿魏酸酰对羟基苯乙胺(9)、对苯二甲酸二丁酯(10)、山奈酚(11)、异地芰普内酯(12)、地芰普内酯(13)。其中,化合物3、4、8-13为首次从该植物中分离获得;化合物4、9、11对LPS诱导巨噬细胞RAW264.7产生炎症因子NO均具有良好的抑制作用,半抑制浓度(IC₅₀)值分别为(18.8±0.2)、(29.1±0.3)、(18.0±0.1)μmol·L^-1,优于阳性对照吲哚美辛,在抗...     

木瓜化学成分的研究

从木瓜[Chaenomeles speciosa（Sweet）Nakai]果实的乙酸乙酯提取物中分离并鉴定了4个化合物,利用现代波谱技术（MS、^1H NMR、^13C NMR）进行结构鉴定,它们分别为对苯二酚（1）、3,4-二羟基苯甲酸（2）、槲皮素（3）和3-羟基丁二酸甲酯（4）.2,2-二苯基-1-苦肼基（DPPH）自由基清除试验表明化合物（1～3）显示抗氧化活性.化合物1～4均为首次从该植物中获得.     

龙须菜免疫活性多糖的分离纯化及结构鉴定

利用小鼠淋巴细胞增殖模型,筛选龙须菜中具有免疫活性的多糖,并对其结构进行鉴定。活性筛选与分离纯化相结合,经室温提取,DEAE-Sepharose F.F.离子柱和凝胶Sephacryl S500层析,分离纯化得到具有刺激小鼠脾淋巴细胞增殖活性的龙须菜多糖GCpF2-3B。免疫实验表明,GCpF2-3B在较低浓度10μg/mL就表现出刺激作用(增殖率135%),当浓度为50μg/mL时增殖率达到最高(195%)。高效渗透色谱HPSEC层析纯度鉴定和紫外扫描表明GCpF2-3B为均一多糖,分子量约为1.03×105Da。红外光谱扫描显示,GCpF2-3B为典型的含硫酸基团多糖,具有糖类特征峰和总硫酸基吸收峰;13C NMR谱显示GCpF2-3B主要由交替相连的(1→3)-β-D-半乳糖和(1→4)-α-L-3,6-内醚半乳糖重复二糖组成。     

Phytochemical and chemotaxonomic study on Ficus tsiangii Merr. ex Corner

Thirty-four compounds, including ten coumarins (1–10), thirteen flavonoids (11–23), three triterpenoid, one lignanoid (24), seven triterpenes (25–31) and three other compounds (32–34), were isolated from the stems of Ficus tsiangii Merr. ex Corner (F. tsiangii). Their structures were identified as xanthyletin (1), coumarin (2), umbelliferone (3), isoangenomalin (4), dihydroxanthyletin (5), scopoletin (6), nodakenetin (7), 6,7-dihydroxy-coumarin (8), 4'-O-β- glucopyranosyl-3'-hydroxy-nodakenetin (9), 6-carboxy-umbelliferone (10), 5,7,4'-trimethoxy- 3'-hydroxy-aurone (11), apigenin (12), naringenin (13), genistein (14), luteolin (15), prunetin (16), chrysoeriol (17), 5,6,7,-trihydroxy-4'-methoxy-flavone (18), eriodictyol (19), isocarthamidin (20), 5,7,2',4'-tetrahydroxyflavone (21), taxifolin (22), dihydro-kaempferol (23), syringeresinol (24), taraxerol (25), taraxerone (26), lupeolacetate (27), 3-acetoxy-12- oleanene-11-ketone (28), 3-acetoxy-lup-12,20(29)-diene (29), oleanic acid (30), ursolic acid (31), 3,4,5-trimethoxy phenyl-1-O-glucopyranoside (32), 8'-hydroxyabscisic acid glucoside (33) and adenosine (34). Among them, all compounds except 3, 14, 17, 25, 26, 30, 33 were isolated from the plant for the first time, and compounds 1, 4, 5, 8–11, 16, 18, 20, 23, 24, 32, 34 were firstly reported from the genus Ficus. The chemotaxonomic significance of these compounds was summarized as follows.     

灰毛豆树皮中的杀虫成分及其杀虫活性

为确定灰毛豆Tephrosia purpurea树皮甲醇提取物中的杀虫成分,以白纹伊蚊Aedes albopictus4龄幼虫为靶标昆虫,在活性跟踪的基础上利用色谱技术分离其活性成分,然后根据各化合物的核磁共振网谱和质谱数据确定化合物的结构,并利用玻片载蚜法和点滴法测定了各化合物对桃蚜Myzus persicae无翅蚜...     

无花果内生真菌的分离及其鉴定

从无花果(Ficus carica)的根、茎、叶中分离得到87株内生真菌,经显微形态特征观察鉴定为14个属,其中根部35株涉及8个属,茎部37株涉及10个属,叶部15株涉及3个属。结果表明,无花果的不同部位内生真菌的数量、分布和种群存有差异。     

嗜线虫致病杆菌HB310菌株杀虫蛋白的纯化及活性鉴定

嗜线虫致病杆菌Xenorhabdus nematophila HB310是从河北省土壤中筛选出的一株昆虫病原线虫体内分离纯化获得的共生菌,该菌的发酵液对多种昆虫有较高的杀虫活性。利用85％饱和度的硫酸铵盐析分别获得胞内蛋白提取物和上清液中胞外蛋白提取物,生测结果表明这两种蛋白提取物中都含有胃毒素和血腔毒素。通过制备型非变性凝胶电泳对蛋白提取物进行分离和纯化,得到了3种有杀虫活性的毒素蛋白（毒素Ⅰ、毒素Ⅱ和毒素Ⅲ）,胞内的毒素蛋白与分泌到胞外上清液中的毒素蛋白是同种蛋白。毒素Ⅰ和毒素Ⅱ对棉铃虫初孵幼虫有明显的胃毒活性,但没有血腔毒性;毒素Ⅲ对大蜡螟幼虫有很强的血腔毒性,LD₅₀为0.18 μg/头。SDS-PAGE图谱显示毒素Ⅰ和毒素Ⅱ是由多个多肽组成的复合蛋白,而毒素Ⅲ只分离出一条多肽。毒素Ⅱ在50℃处理10 min,其杀虫活性没有显著变化;70℃处理10 min对毒素Ⅲ杀虫活性没有显著影响。     

醉马草内生菌的分离、鉴定及杀虫效果

【目的】探明醉马草内生菌的种类,筛选对农作物虫害有毒杀作用的菌株。【方法】采用研磨法从健康醉马草植物的根、茎、叶和种子中进行菌种分离;通过对其形态、培养特征、生理生化及其他生物学特性的研究;16SrDNA及ITS序列的系统发育学分析进行鉴定;用玻片浸渍法和喷雾法筛选产杀虫活性物质菌株。【结果】获得细菌89株,分别属于枯草芽孢杆菌属(Bacillus)、链霉菌属(Streptomyces)、棒状杆菌属(Corynebacterium)、叶杆菌属(Phyllobacterium)、鞘脂单胞菌属(Sphingomonnas)、类芽孢杆菌(Paenibacillus)、假单胞菌属(Pseudomonas)和不动杆菌属(Acinetobacter)8个属;真菌2株,分别属于麦角菌属(Claviceps)和毛壳菌属(Chaetomium)。经初筛及复筛,内生菌娄彻氏链霉菌Streptomyces rochei(GA)和黑麦麦角菌Claviceps purpurea(PF-2)发酵液粗提物对棉蚜虫(Aphis gossypii)致死率达85%以上。【结论】醉马草内生菌株PF-2和GA的粗提代谢物对棉蚜虫有明显的毒杀作用,为开发新的生物源农药提供了生物源物质。     

高毒力昆虫病原线虫共生细菌菌株的筛选及其杀虫活性的检测

昆虫病原线虫共生细菌是寄生在昆虫病原线虫肠道的一种细菌,二者互惠共生。实验采用6个不同种的菌株为筛选材料。共生细菌菌株的培养液经85%饱和度的(NH₄)_2SO4盐析,浓缩冻干得到杀虫粗提物。以粗提物注射大蜡螟Galleria mellonella、饲喂玉米螟Ostrinia furnacalis和棉铃虫Helicoverpa armigera,发现Xenorhabdus nematophilus D43、X.bovienii A54、Photorhabdus luminescens HZL和CB-8等4个菌株发酵液的粗提物对昆虫有高的血腔毒性,菌株A54对昆虫又有高的胃毒效果。由此确立A54为高毒力的菌株,其杀虫活性表现为：注射大蜡螟48 h的死亡率为80%,96 h为93.3%;粗提物饲喂玉米螟,72 h死亡率为53.3%,120 h死亡率为100%;饲喂棉铃虫,72 h死亡率为80.1%,120 h死亡率为90%。杀虫粗提物经DEAE-52柱层析分离,得到一个穿透峰和三个盐的梯度洗脱峰,其中穿透峰对昆虫有很好的胃毒效果,但没有血腔毒性;三个盐峰均有很高的血腔毒性,但没有胃毒作用。穿透峰样品饲喂2龄、3龄棉铃虫也有很好的杀虫活性,96 h 2龄棉铃虫的死亡率为65%,3龄棉铃虫的死亡率为30%;处理96 h的棉铃虫同处理前相比体重下降,未死棉铃虫体重明显低于对照。     

A toxin protein from Xenorhabdus nematophila var. pekingensis and insecticidal activity against larvae of Helicoverpa armigera

Xenorhabdus nematophila var. pekingensis, which is highly virulent for many insects, is a symbiotic bacterium of Steinernema carpocapsae isolated from Beijing soil in China. Previous studies demonstrated that the bacterium had high antifeedant activity against larvae of Helicoverpa armigera, Plutella xylostella and Spodoptera exigua. Herein, we report the purification, molecular cloning and antifeedant activity of an intracellular toxic protein from the bacterium. The purified protein displayed a single band and a relative molecular weight of over 212 kDa determined by SDS-PAGE. We designated the protein as XnAFP2. Peptide segments were obtained by MALDI-TOF and covered 40% of the amino acid sequence of a toxin protein from X. nematophilus PMFI1296. The full cDNA sequence encoding for XnAFP2 (Genbank accession number FJ222606) was amplified from X. nematophlia var. pekingensis and consists of 7575 bp. The gene showed homology with up to 99% identity to the A2 gene from X. nematophila strain BP (GenBank accession number AY282763) and 92% identity to the insecticidal toxin xptA2 gene from X. nematophila PMFI 1296 (GenBank accession number AJ308438). The protein caused a rapid cessation in feeding and reduction in larval weight of H. armigera. When fed to third instar larvae of H. armigera in an artificial diet at 6.0 µg/g (w/w) toxin protein, growth reduction reached 97.9%. The insecticidal protein greatly decreased fourth instar larval weight, lengthened larval stage, and reduced pupation and emergence rates. The antifeedant rate in choice and no-choice leaf disk tests against fifth instar larvae was 78.4 and 87.6% in 24 h, respectively.     

广藿香精油的杀虫作用及其活性成分分析

采用室内生物活性测定方法,研究了广藿香〔Pogostem on cablin(B lanco)Benth.〕全草精油的杀虫活性及其活性成分。结果表明,广藿香精油和广藿香酮对菜粉蝶(Preris rapaeL.)和小菜蛾(Plutella xylostellaL.)幼虫有较好的防治作用。使用2.5~40.0 mg.mL-1广藿香精油和1~10 mg.mL-1广藿香酮分别对菜粉蝶和小菜蛾幼虫进行饲喂实验,均表现出较强烈的拒食作用;广藿香精油和广藿香酮对4龄菜粉蝶幼虫毒杀作用的LC50值分别为104.28和32.20μg.mL-1。活性跟踪实验确证广藿香酮为广藿香精油的有效杀虫成分。     

Identification of lipopeptide xantholysins from Pseudomonas sp. DJ15 and their insecticidal activity against Myzus persicae

Myzus persicae is an important insect pest that reduces crop production worldwide. The use of pesticides for aphid control has generated much concern related to insect resistance and undesirable environmental effects. In an effort to discover new alternatives to counter M. persicae, we found that Pseudomonas isolate DJ15 produced insecticidal metabolites. To isolate the insecticidal metabolites, a cell‐free supernatant of DJ15 was extracted and subjected to bioassay‐guided chromatography. Based on the structures elucidated in instrumental analyses, the metabolites were identified as xantholysins A and B. The metabolites showed strong insecticidal activity against M. persicae with 50% mortality at levels of 13.4 and 24.6 μg/mL for xantholysins A and B, respectively. This is the first study to identify xantholysins as insecticidal metabolites against M. persicae.