果蝇的培养和管理

果蝇的发育要经过卵、幼虫、蛹和成虫等几个时期(图一)。观察果蝇唾液腺细胞的巨形染色体是在果蝇的三龄幼虫期。要完成这个实验须经过对果蝇的诱捕、培养和幼虫保存等准备过程。     

结合GAL4/UAS系统与CyO-GFP平衡子获取表达RNA干扰序列果蝇幼虫并有效干扰Tis11表达

TIS11是转录后调控因子TTP在果蝇中的同源物,在果蝇幼虫免疫、发育和代谢等多种生理过程中都发挥重要作用.为研究TIS11的功能,需要利用GAL4/UAS系统获得整体高干扰效率的Tis11 RNAi果蝇幼虫．为平衡GAL4转基因果蝇高活性启动子的致死效应,需要使用带有成蝇卷翅标记CyO的第二染色体的平衡子,但CyO标记在幼虫中无可见表型,因此无法区分杂交幼虫的基因型．为解决这一问题,引入了带有CyO-GFP标记的平衡子．携带CyO-GFP平衡子的G-Actin果蝇与携带Tis11 RNAi序列的101765果蝇杂交,杂交幼虫可以通过GFP标记进行区分,剔除带有CyO-GFP平衡子的幼虫,从而挑选出表达Tis11 RNAi序列的幼虫,最后经real-time PCR检测所得幼虫具有整体高干扰效率．     

获取果蝇三龄幼虫的简便方法

果蝇三龄幼虫是观察果蝇唾液腺细胞巨大染色体的好材料 ,如何获取果蝇三龄幼虫 ?我们设计了一个简便的方法 ,效果较好。该方法是 :在天气暖和的日子里 ,取一清洁的广口瓶 ,放入一些已发酵的面团 ,倒入适量凉开水 ,搅拌发面成糊状 ,厚约 2～ 3cm。取纱布盖住瓶口 ,用线扎紧 ,在纱布的中央开一小孔 ,将广口瓶放到窗口。不久 ,就会有果蝇飞进瓶里 ,在发面上生活 ,雌雄果蝇交配、产卵 ,卵孵化成幼虫 ,幼虫以发面中的酵母菌为食。当发现有幼虫爬到瓶壁上时 ,取其大的即为充分发育的三龄幼虫。果蝇生活史 (即卵→幼虫→蛹→成虫 )的长短与温度关系…     

二种活体饲料对东亚小花蝽生长发育和生殖的影响

本文比较了果蝇Drosophila melanogaster(Meigen)幼虫和西花蓟马Frankliniella occidentalis(Pergande)2种活体饲料对东亚小花蝽Orius sauteri(Poppius)生长发育和生殖的影响。结果显示:果蝇幼虫饲喂的东亚小花蝽幼虫发育历期12.36d,与西花蓟马饲喂的(12.19d)相近。果蝇幼虫饲喂的东亚小花蝽产卵量(89.58粒)与西花蓟马饲喂(95.72粒)相当。表明果蝇幼虫与传统活体饲料西花蓟马饲养东亚小花蝽的效果相当,可以很好的满足东亚小花蝽生长发育和生殖的要求。由于西花蓟马饲喂成本比较高,实际操作中有一定困难,果蝇幼虫是一种较为理想的活体饲料。     

果蝇幼虫的视觉系统

视觉对于动物的生存和行为来说是非常重要的。虽然果蝇幼虫的视觉神经系统在组织结构上比成虫简单,但是也具有一定的复杂性和多样性。在最近几年中,随着对果蝇幼虫视觉系统功能的研究取得重要进展,我们对于果蝇幼虫视觉系统的认识更加丰富了。果蝇幼虫视觉系统的结构中,最初级的光感受神经元包括三类,一类是BO/BN(Bolwig's organ/Bolwig's nerve),一类是表达感光分子CRY(cryptochrome)的神经元,另外一类是Ⅳ型DA(classⅣdendriticarborization)神经元;果蝇幼虫视觉系统的次级神经元主要是光节律相关的侧神经元(lateralneurons,LN),它表达Per(period)、Tim(timeless)及Pdf(pigment dispersion factor)等节律相关的蛋白分子;而第三级神经元包括更为下游的、表达果蝇促胸腺激素且直接调控幼虫光偏好的NP394神经元。这三级神经元构成了我们现在所了解的果蝇幼虫视觉神经系统的基本框架。     

两种果蝇成虫与幼虫期的竞争及其对二者共存的影响

昆虫均为完全或不完全变态发育,其幼虫和成虫阶段往往有着不同的资源需求。研究昆虫在幼虫和成虫阶段的生态位和适合度,有助于提升我们对昆虫物种共存和群落构建的认识。黑腹果蝇(Drosophilamelanogaster)和伊米果蝇(D.immigrans)是全球广布的两种果蝇,它们常常发生在相同的季节,且均在腐烂的水果上产卵,幼虫寄生在其中完成生长发育。本研究通过转瓶实验评估了这两种果蝇在连续竞争过程中的内禀增长率和种内与种间竞争系数,并进一步检验了它们的成虫对产卵场所,以及幼虫对食物的竞争强度,据此计算了两个物种在成虫和幼虫阶段的生态位分化与适合度差异,在当代物种共存理论的框架下分析了影响两种果蝇共存的关键因素。结果表明,连续饲养过程中,黑腹果蝇表现出更高的适合度,大概率会竞争排斥掉伊米果蝇。具体而言,两种果蝇在幼虫和成虫期均有极大的生态位重叠,虽然伊米果蝇成虫对产卵场所有着更高的利用率,黑腹果蝇的幼虫在生长发育阶段对饲料有着更高的利用率,但两种果蝇在成虫、幼虫阶段竞争的结果更多地取决于谁先占据资源。本研究表明昆虫在不同发育阶段对资源利用率的变化会在一定程度上影响它们共存的可能性。     

果蝇唾腺染色体观察材料的制备

选择夜间气候为南风、多云、20～28℃的条件下,用香蕉培养基引诱、采集果蝇.室内或恒温箱中培养12 d,取野外果蝇三龄幼虫替代实验室长期饲养的果蝇幼虫,制作果蝇唾腺染色体.经剥离、解离、染色、压片,观察到比实验室饲养的果蝇染色体较大、个体更清楚的片子.     

我国结膜吸吮线虫在是间宿主—变色纵眼果蝇体内发育过程的研究

以结膜吸吮线虫产在家兔眼分泌物仙的初产蚴和解剖雌虫子宫内的幼虫,喂饲实验室繁殖的变色纵眼果蝇进行感染,证明了变色纵眼果蝇可作为我国结膜吸吮线虫的是间宿主。经终宿主眼分泌物中的初产蚴喂饲果蝇,结果在感染后第１６天,于存活的１１只果蝇中,在２只雄蝇的口器和头部检出感染期幼虫９条。用取自雌虫体内的幼虫,平均每蝇５条幼虫的比例喂饲感染６０８只果蝇,结果检出阳性蝇１０６只,其感染率为１７．４％。并发现幼虫在     

我国结膜吸吮线虫在中间宿主——变色纵眼果蝇体内发育过程的研究

以结膜吸吮线虫产在家兔眼分泌物内的初产蚴和解剖雌虫子宫内的幼虫,喂饲实验室繁殖的变色纵眼果蝇进行感染,证明了变色纵眼果蝇可作为我国结膜吸吮线虫的中间宿主。以终宿主眼分泌物中的初产蚴喂饲感染果蝇,结果在感染后第16天,于存活的11只果蝇中,在2只雄蝇的口器和头部检出感染期幼虫9条。用取自雌虫体内的幼虫,平均每蝇5条幼虫的比例喂饲感染608只果蝇,结果检出阳性蝇106只,其感染率为17.4％。并发现幼虫在果蝇体内发育主要侵入雄蝇睾丸外层组织和雌蝇的血腔壁形成“虫泡囊”,幼虫在囊内发育至腊肠蚴蜕1次皮,进入感染前期发育阶段,再行第2次蜕皮,而发育成感染期幼虫。发育速度与外界温度密切相关,当外界温度为26.1—31.8℃,发育到感染期幼虫最早天数需要17天。     

第19届国际生物学奥林匹克竞赛试题 实验(10)A-4 动物行为学

<正>动物行为总分49分,时间60min。本实验中,你要完成如下2项任务:任务1A:研究果蝇幼虫的味觉反应:实验设计。(7分)B:研究果蝇幼虫的味觉反应:幼虫的培养皿     

异色瓢虫捕食胁迫对黑腹果蝇繁殖与后代发育的影响水

以模式昆虫黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)及捕食性天敌异色瓢虫(Harmonia axyridis)为研究系统,通过把异色瓢虫接入到有黑腹果蝇的指形管中,研究了黑腹果蝇雌、雄成虫单独或共同被异色瓢虫捕食胁迫后,其自身寿命、子代的生长发育、繁殖和适合度的变化。结果表明:当雄性黑腹果蝇受到异色瓢虫成虫胁迫时,其寿命明显延长,但胁迫与否对雌性黑腹果蝇的寿命无明显影响;当黑腹果蝇的雌雄成虫同时受到胁迫时,其子代幼虫的发育历期延长,雄性后代寿命也增加,而雌性或雄性黑腹果蝇单独受到胁迫,其子代幼虫发育进度没有明显改变;当初孵黑腹果蝇幼虫受到异色瓢虫成虫直接或间接捕食胁迫后,其后续幼虫的发育历期都会受到影响,其中1龄期受到的间接捕食胁迫作用的影响大于直接捕食胁迫作用,直接捕食胁迫1龄幼虫比间接捕食胁迫更能延长其将来雌性成虫的寿命。     

野生果蝇的收集和培养

果蝇实验可从收集野生果蝇开始。培养野生果蝇可用于 :1为做唾腺染色体装片提供三龄期幼虫 ;2观察突变性状和进行杂交试验 ;3观察动物完全变态发育的全过程。本文将介绍收集和培养野生果蝇的经验和方法。1　果蝇的形态和生活习性果蝇是双翅目昆虫 ,成蝇体长约 0 .5cm,体色多数为檀黄色 ,故又称“黄果蝇”,也有灰身和黑身的。眼睛为复眼 ,在放大镜或显微镜下观察 ,如向日葵状 ,多为红色。卵椭圆形 ,长约 0 .0 5cm。受精卵约需 36h孵化出白色幼虫 ,经两次蜕皮发育成三龄期幼虫。一龄二龄幼虫较小 ,三龄幼虫长约 0 .0 3～ 0 .0 5cm。成熟三龄期…     

果蝇的生活史及其人工饲养

果蝇是双翅目昆虫 ,成蝇体长约 0 .5 cm。广泛用于遗传学研究的果蝇为黑腹果蝇 (Drosophilamelanog-aster) ,属于果蝇科、果蝇属 ,它体形小、繁殖快。1　生活史果蝇的 1个完整的生活周期分为 4个明显的时期 ,即卵→幼虫→蛹→成虫。卵长约 0 .5 mm、白色 ,前端背面伸出一触丝 ,能附着在食物或瓶壁上 ,不致深陷于食物中 ,卵经 2 2～ 2 4 h孵化为幼虫 ,幼虫经两次蜕皮为三龄幼虫约 4～ 5 mm,肉眼可见其一端稍尖为头部 ,上有一黑色钩状口器 ,幼虫生活约 4 d左右化蛹 ,起初颜色淡黄、柔软 ,以后逐渐硬化变成深褐色 ,此时即将羽化 ,成虫果蝇自羽…     

野生果蝇的采集和幼虫培养及保存的简易方法

“观察果蝇唾液腺细胞的巨大染色体”实验,常常因实验材料不易得到,欲做而不能。笔者经过多年的实践,现介绍一种城乡均易做到的野生果蝇的采集和幼虫的培养、保存的简易方法。(一)诱饵与培养基果蝇以酵母菌为食。在众多的诱饵和培养基中,酒糟最容易获得(可自制也可到市场或酒厂购买),且含酵母菌多,基质松软、又不易被杂菌污染,为最好的野生果蝇的诱饵和幼虫的培养基,而且培养的果蝇幼虫量多、个大、体壮。     

龟纹瓢虫的捕食胁迫作用对连续三代果蝇发育与繁殖的影响

捕食性天敌不仅直接捕食害虫,而且还能改变害虫的生长发育、繁殖,间接地影响害虫的适合度。以常见模式昆虫黑腹果蝇Drosophila melanogaster Meigen及捕食性天敌龟蚊瓢虫为研究系统,研究龟纹瓢虫Propylea japonica Thunberg连续多代直接捕食胁迫、一代捕食胁迫后下一代不捕食胁迫,对果蝇生长发育、繁殖和适合度的影响。结果表明:如果持续地释放瓢虫对果蝇的捕食胁迫作用,显著缩短了第1代、第2代果蝇的幼虫的发育历期,增加了第1代、第2代果蝇的繁殖量。但在第3代的影响却是延长了果蝇的幼虫的发育历期,降低第3代果蝇的繁殖量。如果在上一代胁迫作用得到释放后,下一代不再有瓢虫胁迫,那么连续2代胁迫后去掉胁迫的果蝇比只胁迫一代后去掉胁迫的果蝇幼虫的发育历期明显延长,繁殖量明显下降,后代性比也明显下降。与连续胁迫条件下的处理相比,成虫的寿命明显延长;对果蝇幼虫的发育历期、繁殖量则没有显著影响。结果表明,龟蚊瓢虫的干扰胁迫作用,可以间接的增加果蝇的适合度,促进果蝇种群的增长,使果蝇种群自我维持、调节到相应的水平。     

果蝇幼虫唾腺染色体标本的制备与比较

唾腺染色体是最早发现于双翅目昆虫唾腺细胞的一种巨大染色体,现已广泛应用于细胞遗传、基因定位等研究中。用黑腹果蝇3龄幼虫为材料,压片法制备染色体标本,并对3种品系果蝇幼虫的唾腺染色体的形态结构进行比较。结果表明:果蝇唾腺染色体臂端粒端的横纹特征基本恒定,是辨认各染色体臂的最便捷方法;黑腹果蝇的3种品系果蝇幼虫在唾腺染色体横纹的宽窄、数目、排列顺序及疏密程度上不存在明显的差异,在不同变种之间无法区分。     

荸荠汁对果蝇生长发育的影响

在正常果蝇培养基上每日添加荸荠汁,显著提高果蝇繁殖率,加速幼虫发育,增加成虫体重和身长。     

高流动性蛋白基因过量表达对果蝇发育的影响

HmgD基因编码果蝇高流动性蛋白（High mobility group proteins, HMG）的同源物,它可以参与染色质的组装。目前关于HMGD蛋白在果蝇胚胎发育过程中的作用尚无定论。我们采用UAS-Gal4系统,通过功能获得性突变的方法研究了HmgD基因过量表达对果蝇发育的影响。结果表明：HmgD过量表达对果蝇胚胎期发育的影响较弱,而对后期幼虫的发育具有很大的影响;HmgD过量表达的果蝇胚胎死亡率增高,但这种影响不是很大,因为一部分胚胎仍然能够发育至成体;但是当HmgD在广泛表达的Gal4驱动子（ActGal4）的控制下过量表达时导致子代大量死亡,特别是用4个拷贝的转基因果蝇进行杂交时,后代中的突变型在三龄幼虫末期全部死亡;部分突变型幼虫体内长有黑色素瘤,其血淋巴中的血细胞数量极显著地高于野生型。RT-PCR分析表明,突变幼虫中与血细胞增殖有关的Ras-MAPK途径和Toll途径被异常激活。这些结果显示：HmgD过量表达可能引起染色质结构疏松,激活了特定的转录因子,从而引发了三龄幼虫期异常的转录调控,并导致幼虫死亡。     

实验用果蝇培养技术探索

用添加了臭干子汁液的培养基培养果蝇,能提高果蝇繁殖率37.9%,果蝇幼虫化蛹数增加47.2%,羽化为成虫的数目增加43.5%,成虫平均体重和体长分别增加5.6%和16.6%。由此表明臭干子汁能加速果蝇生长发育,显著提高果蝇繁殖率,是一种简便易行、经济实用的实验室中果蝇培养的新方法。     

用摇蚊幼虫观察染色体简便易行

现行高中生物课本中的第二个分组实验“观察果蝇唾液腺细胞的巨大染色体”的实验材料是果蝇的幼虫。此材料虽然不难得到,但由于幼虫较小,在目前各校解剖镜不足的情况下,剖取唾液腺虽可行,但比较困难,同学们做起来成功率也比较低。如果改用摇蚊幼虫(即市售喂金鱼的红虫子,以下简称幼虫)则十分简便易行,并具下述优点: