组织微阵列技术研究肿瘤转移相关基因在鼻咽癌中的表达与临床意义

利用高通量组织微阵列结合免疫组化检测MT1-MMP、MT2-MMP、Ezrin、nm23-H1、E-cad和TIMP-2在鼻咽癌组织中的蛋白质表达,探讨肿瘤转移相关基因异常表达在鼻咽癌侵袭转移中的作用,筛选鼻咽癌转移相关分子标志物.结果发现,鼻咽癌组织存在MT1-MMP、Ezrin蛋白高表达(P<0.01)和nm23-H1、TIMP-2蛋白低表达(P<0.05).临床Ⅱ期、Ⅲ期和Ⅳ期鼻咽癌和淋巴结转移鼻咽癌中MT1-MMP、MT2-MMP和Ezrin蛋白阳性表达显著高于临床Ⅰ期鼻咽癌和无转移癌(P<0.05,P<0.01),但临床Ⅱ期、Ⅲ期和Ⅳ期鼻咽癌和淋巴结转移鼻咽癌中nm23-H1蛋白的阳性表达显著低于临床Ⅰ期鼻咽癌和无转移癌(P<0.05).鼻咽癌组织中MT1-MMP与MT2-MMP r=0.308,P<0.001),nm23-H1与E-cad(r=0.167,P<0.05)及TIMP-2(r=0.279,P=0.001),E-cad与TIMP-2(r=0.279,P=0.001)的蛋白质表达旱显著正相关.MT1-MMP与E-cad(r=-0.188,P<0.05)及TIMP-2(r=-0.233,P<0.05),Ezrin与E-cad(r=-0.204,P<0.05)的蛋白质表达呈显著性负相关.聚类分析显示,鼻咽癌MT1-MMP、MT2-MMP和Ezrin蛋白共同阳性表达显著高于慢性炎性鼻咽上皮(P<0.05),但nm23-H1、E-cad和TIMP-2蛋白在鼻咽癌组织中的共同阴性显著高于癌旁上皮和慢性炎性鼻咽上皮(P<0.05,P<0.01).多因素分析和有效性评估发现,MT1-MMP蛋白能较好地独立预测鼻咽癌淋巴结转移和临床进展.上述研究结果提示,多个肿瘤转移基因的蛋白质高表达,转移抑制基因的低表达和这些基因的蛋白质表达失平衡在鼻咽癌淋巴结转移和临床进展过程中起重要作用.MTI-MMP蛋白可作为预测鼻咽癌淋巴结转移的较好分子标志.     

HIV感染者/AIDS病人高迁移率族蛋白1的表达及其临床意义

通过检测74例处于不同病期的HIV感染者/AIDS患者和10例健康对照者PBMCs中HMGB1 mRNA的表达水平及其外周血浆HMGB1、TNF-a和IL-2水平,比较各组之间表达水平的差异及其与CD4＋T淋巴细胞的关系.发现HMGB1 mRNA的表达水平及血浆HMGB1含量在AIDS病人组明显高于感染者组和正常对照组（P〈0.05）;AIDS患者经HAART治疗后疗效差组HMGB1 mRNA的表达水平及血浆HMGB1含量也明显高于疗效好组（P〈0.05）;而经HAART治疗后效果好且免疫功能恢复的患者HMGB1 mRNA的表达及血浆HMGB1含量均较治疗前明显下降（P〈0.05）;当CD4＋T细胞数低于200/μL时,血浆HMGB1含量以及PBMCs中HMGB1 mRNA表达水平与CD4＋T细胞数呈负相关.显示HMGB1在HIV/AIDS发病及病情进展过程中可能起重要作用,HMGB1血浆含量及PBMCs中HMGB1 mRNA的表达水平高低与HIV/AIDS患者病情轻重密切相关.     

子宫内膜癌组织PRDM1、KIF23蛋白表达与临床病理特征及预后的关系研究

目的:探讨子宫内膜癌组织PR结构域蛋白1(PRDM1)、驱动蛋白家族成员23(KIF23)蛋白表达与临床病理特征及预后的关系。方法:选择2012年4月至2015年8月期间于我院行手术治疗的80例子宫内膜癌患者作为研究对象。检测子宫内膜癌组织以及癌旁组织中PRDM1、KIF23蛋白表达。分析PRDM1、KIF23蛋白表达与临床病理特征的关系。分析不同PRDM1、KIF23蛋白表达患者5年总生存率的差异。分析子宫内膜癌患者预后的影响因素。结果:与癌旁组织相比,子宫内膜癌组织中PRDM1、KIF23蛋白表达阳性率上调(P<0.05)。有淋巴结转移以及FIGO分期Ⅲ期患者的PRDM1、KIF23蛋白表达阳性率明显高于无淋巴结转移以及FIGO分期Ⅰ~Ⅱ期患者,组间差异显著(P<0.05)。PRDM1、KIF23蛋白阳性患者的5年总生存率明显低于PRDM1、KIF23蛋白阴性患者,组间差异显著(P<0.05)。Cox比例风险回归分析结果显示:PRDM1、KIF23蛋白表达、淋巴结转移、FIGO分期是子宫内膜癌患者预后的影响因素(P<0.05)。结论:在子宫内膜癌当中PRDM1、KIF23蛋白表达阳性率升高,有淋巴结转移、FIGO分期较高的患者PRDM1、KIF23表达阳性率上调,PRDM1、KIF23表达阳性患者5年总生存率下降。     

nm23-H1基因转染前后人高转移大细胞肺癌细胞株双向凝胶电泳图谱分析

为了更全面地了解nm23-H1在肺癌中发挥转移抑制的机理,用双向凝胶电泳技术比较人高转移大细胞肺癌细胞株(L9981)和转染nm23-H1基因的人大细胞肺癌细胞株(L9981-nm23-H1)间蛋白表达的差异.利用固相pH梯度双向凝胶电泳分离人高转移大细胞肺癌细胞株(L9981)和转染nm23-H1基因的人大细胞肺癌细胞株(L9981-nm23-H1)的总蛋白,用图像分析软件比较分析以识别细胞间的差异表达蛋白质.结果成功地获得了两株细胞蛋白组分辨率高、重复性好的双向凝胶电泳图谱.软件分析两种细胞的凝胶电泳图谱后发现,在相同分析条件下识别的蛋白质斑点数L9981为902±169个、L9981-nm23-H1为1160±212个.比较L9981和L9981-nm23-H1人大细胞肺癌细胞株的双向凝胶电泳蛋白质图谱后发现6个蛋白质点仅在L9981中有表达,17个蛋白质点仅在L9981-nm23-H1中有表达.此外,发现13个在两种细胞株中均存在,但表达量差异在2倍以上的蛋白质点(P<0.05).结果提示,nm23-H1基因转染引起人高转移大细胞肺癌细胞株蛋白质表达谱的变化,可能是其逆转肺癌侵袭转移的生物学基础.     

nm23基因与结核菌L型感染在前列腺癌中的表达及意义

目的 探讨转移抑制基因nm23和结核菌L型感染在前列腺癌中的表达及临床相关性研究.方法 应用免疫组化、原位杂交和抗酸染色等方法检测了65例前列腺癌(carcinoma of prostate,Pca)中的nm23蛋白及mRNA的表达,以及结核菌L型的检出率.并对前列腺癌主要临床资料和病理分级参数进行比较,用χ2检验进行统计学处理.结果 nm23蛋白及mRNA阳性表达与前列腺癌的临床分期、病理分级差异有显著性(P<0.01～0.05);无淋巴结转移者高于有淋巴结者,2组之间差异有显著性(P<0.05),呈负相关.结核菌L型检出率与前列腺癌的临床分期、病理分级差异有显著性(P<0.05);有淋巴结转移者明显高于无淋巴结转移者,2组之间差异有显著性(P<0.05),呈正相关.结论 nm23蛋白及mRNA在前列腺肿瘤中有不同程度的异常表达,可能与结核菌L型感染有协同致瘤作用.提示nm23基因可作为判断前列腺癌分化程度及患者预后参考指标.结核菌L型感染与前列腺癌的发生发展可能有一定关系,因此研究结核菌L型感染与前列腺癌的关系,具有重要的临床应用价值.     

共刺激因子B7-H1和B7-H3蛋白表达与胆囊癌病例特征相关

本研究选取2015年3月至2017年5月在我院保存的胆囊癌标本55例,同选取癌旁正常组织(距癌边缘>5 cm)作为对照,采用免疫组化染色检测B7-H1和B7-H3蛋白表达,分析B7-H1和B7-H3表达与胆囊癌临床病理特征和预后的关系,探讨共刺激因子B7-H1和B7-H3蛋白在胆囊癌中的表达及意义。研究结果表明:胆囊癌组织B7-H1和B7-H3蛋白阳性表达率分别为76.36%和63.63%,明显高于癌旁组织(p<0.05);B7-H1蛋白表达与胆囊癌TNM分期、淋巴结转移和侵袭深度有关(p<0.05);B7-H3蛋白表达与胆囊癌TNM分期、分化程度、淋巴结转移和侵袭深度有关(p<0.05);胆囊癌组织中B7-H1与B7-H3蛋白表达呈正相关(rs=0.516, p<0.05);B7-H1和B7-H3表达双阳性者和B7-H1或B7-H3单一表达阳性者中位总生存时间分别为20个月和21个月,明显低于B7-H1和B7-H3表达双阴性者组,差异比较有统计学意义(p<0.05)。本研究结论认为:B7-H1和B7-H3蛋白表达与胆囊癌病理特征有关系,两者间有一定相关性,且与患者预后有关。     

B7-H3蛋白在脑胶质瘤中的表达及与疾病发展、预后的关系

为了探讨共刺激分子B7-H7蛋白在脑胶质瘤组织中的表达及与肿瘤发生发展及预后的关系。本研究选取我院病理科收集的100例脑胶质瘤组织作为脑胶质瘤组、40例因外伤等原因进行脑部手术切除的脑组织作为对照组,收集时间为2011年3月至2013年5月,采用免疫组化染色检测两组标本中的B7-H7蛋白表达情况,并分析其与患者临床病理特征、预后的关系。结果显示,脑胶质瘤组织中的B7-H7蛋白阳性表达率(69.00%)显著高于对照组(5.00%)(p0.05);脑胶质瘤组织中的B7-H7蛋白阳性表达与患者肿瘤分级具有显著相关性,随着肿瘤分级增高,阳性表达率增高(p0.05);脑胶质瘤组织中的B7-H7蛋白阳性表达与患者的年龄、性别、病理学类型无关(p0.05);B7-H7蛋白阳性表达的胶质瘤患者的3年生存率(27.87%)低于阴性表达患者(44.83%),但差异无统计学意义(p0.05);B7-H7蛋白阳性表达的胶质瘤患者的生存时间(20.0个月)低于阴性表达患者(28.0个月)(Log Rank(Mantel-Cox)=3.829,p0.05)。本研究表明,B7-H7蛋白在脑胶质瘤组织中表达上调,并且与肿瘤分级、不良预后显著相关。     

nm23-H1和PTEN蛋白与肝癌侵袭进展关系的研究

为研究原发性肝细胞性肝癌中nm23-H1和PTEN的表达状况,并分析两者的临床意义,本研究选取顺德第一人民医院2005年1月至2008年12月原发性肝细胞性肝癌手术患者蜡块标本68例,按Edmondson标准进行组织学分级,68例原发性肝细胞性肝癌组织为对照组,5例正常肝组织作为参照组。通过采取免疫组化S-P实验法测定两组标本nm23-H1、PTEN的表达。结果显示,nm23-H1蛋白在HCC、正常肝组织中的阳性表达率分别是30.88%(21/68)、86.67%(13/15),nm23-H1在HCC中的表达低于正常肝组织(χ~2=15.813, p0.05)。同时,根据实验分析可见,PTEN在正常肝组织、肝癌组织中的阳性率分别为93.33%(14/15)、60.29%(41/68),且PTEN在HCC中的表达低于正常肝组织(χ~2=6.001, p0.05),两者均与肿瘤的分化程度和转移相关。本研究表明PTEN、nm23-H1与HCC侵袭性强弱和是否发生转移有一定的相关性。     

消化系统肿瘤中纤维蛋白原及D-二聚体的表达及临床价值

目的:探讨血浆纤维蛋白原和D-二聚体在消化系统肿瘤中的表达水平和临床价值。方法:测定215例消化系统常见恶性肿瘤患者及50名健康人员血浆中纤维蛋白原和D-二聚体的含量并进行比较。结果:恶性肿瘤患者血浆纤维蛋白原和D-二聚体增高,与健康对照组比较差异有统计学意义(P0.05);Ⅲ+Ⅳ期肿瘤患者纤维蛋白原和D-二聚体水平明显高于Ⅰ+Ⅱ期患者(P0.05);不同肿瘤类型患者的血浆纤维蛋白原和D-二聚体水平差异无显著性。结论:纤维蛋白原、D-二聚体检测对消化系统肿瘤的实验室诊断和疾病分期可能具有重要作用。     

siRNA分析nm23-H1基因与人慢性髓性白血病的关系

设计并筛选靶向nm23-H1基因的siRNAs序列,探讨nm23-H1基因与人慢性髓性白血病之间的关系。依据siRNA设计原则,设计3条siRNA序列。将不同靶点的siRNA用lipofectamine2000转染人慢性髓性白血病细胞株K562。转染后24h RTPCR检测nm23-H1mRNA水平变化;转染后48h免疫细胞化学法检测nm23-H1蛋白表达。MTT法检测转染后24h、48h和72h有效siRNA对K562细胞生长的影响。3条siRNA中,siNM526能有效地抑制K562细胞nm23-H1基因表达,转染siNM526的K56细胞生长受到抑制。说明下调nm23-H1基因的表达有抑制K562细胞增殖的作用,即降低了K562细胞的恶性程度。nm23-H基因有可能成为白血病治疗潜在的分子靶点。