中国石斛兰属(兰科)一新记录种——广坝石斛兰

报道了中国兰科(Orchidaceae)植物一新记录种——广坝石斛兰(Dendrobium lagarum Seidenf.)。它与景洪石斛(D. exile Schltr.)相似,但本种不分枝,茎上部"Z"字形,叶片较稀疏;茎基不膨大成纺锤形,具有7~8条均匀的纵脊线,花大小约为景洪石斛的一半,唇瓣中裂片近三角形,蕊柱足不具球状胼胝体。     

广西人工栽培铁皮石斛内生菌根的研究

通过光学生物显微镜及Qwin图像分析系统,对人工繁育栽培的铁皮石斛各生长期植株的内生菌根进行了观察分析。结果表明:铁皮石斛具有典型的内生菌根;铁皮石斛根内共生菌不是其原有的,而是通过栽培基质传与铁皮石斛的根而共生。被真菌侵染的区域大,其植株生长茂盛,真菌对铁皮石斛的生长发育可能有促进的作用。     

微生物共同作用下的铁皮石斛组培苗生长效应研究

植物体和植物根际均是复杂的微生态系统,其内栖息着关系复杂的共生微生物,共同影响植物的生长发育.为探讨混合接种真菌与细菌对兰科植物生长的影响,筛选出真菌与细菌的优势促生组合,本研究选取经分离、筛选获得的4株促生内生真菌(铁皮石斛内生真菌C22、C35,美花石斛内生真菌L12、L28)和3株促生内生细菌(铁皮石斛菌内生细菌TX-7、TX-16、TX-19),以"真菌+细菌"的方式混合接种于铁皮石斛无菌组培苗中,共培养120 d.结果获得了3组优势组合:C22+TX-19、L28+TX-16和L28+TX-19,它们对铁皮石斛组培苗的生长均表现出正效应,其中C22+TX-19和L28+TX-19对促进组培苗生物量的增长具有协同效应,L28+TX-19对提高组培苗的根分枝率具有协同效应,3个组合对增加组培苗的分蘖数和根尖数均表现为累加效应.研究结果表明,内生真菌与内生细菌的共同作用可显著促进铁皮石斛的生长,混合接种有可能更大地发挥微生物的效能.     

铁皮石斛异胡豆苷合成酶基因STR序列结构及表达模式分析

异胡豆苷合成酶基因STR编码吲哚类生物碱合成的关键酶异胡豆苷合成酶,并参与植物抗逆和花粉发育等生物过程。本研究通过对铁皮石斛异胡豆苷合成酶基因DoSTR的结构及特异性表达进行分析,探究其在铁皮石斛生长发育中的潜在功能。从铁皮石斛基因组数据中获得铁皮石斛异胡豆苷合成酶编码序列(DoSTRs),利用ClustalW软件进行氨基酸序列的比对,利用Gene Structure Display Server 2. 0在线软件分析基因内含子和外显子结构,利用PlantCARE数据库分析基因启动子区元件;基于转录组数据和qRT-PCR对铁皮石斛根茎叶组织、共生与非共生生长的种子和根、冷诱导和茉莉酸甲酯诱导后叶片中的STR家族基因的表达情况进行检测和分析,从铁皮石斛基因组中预测获得10个STR成员,具有典型的"Str_synth"结构域,且启动子区存在大量顺式作用元件,涉及到茉莉酸甲酯响应和低温响应等多个生物学过程;DoSTRs基因家族不同成员表达模式存在较大差异,DoSTR3、DoSTR7、DoSTR10在叶片中的表达量高于茎和根中,DoSTR9和DoSTR2在铁皮石斛种子萌发时显著高表达,DoSTR5和DoSTR10在茉莉酸甲酯处理早期,具有明显的上调表达趋势,推测STR家族可能参与不同的生物学过程,研究结果为深入探究铁皮石斛STR家族基因奠定了基础。     

铁皮石斛内生真菌分布

本研究从铁皮石斛(Dendrobium officinale)根、茎和叶中分离得到内生真菌67株,经形态学和分子生物学鉴定分别归属于16个属,Fusarium和Alternaria为铁皮石斛内生真菌的优势种群。研究发现,铁皮石斛根、茎、叶中内生真菌分布存在较大差别,具有一定的组织差异性,不同石斛植物中内生真菌的存在情况差别较大,具有一定的宿主差异性。本研究丰富了真菌资源,为石斛属药用植物内生真菌资源的开发利用提供了基础理论依据。     

中华仙草——铁皮石斛

<正>石斛是兰科石斛属植物的干茎制成的传统名贵中药材,始载于《神农本草经》,而铁皮石斛则是石斛品种中最珍贵,也是最昂贵的一种,享有"救命仙草"的美誉。在唐代《道藏》一书开列的"中华九大仙草"中,铁皮石斛被列于首位。铁皮石斛被奉为"药中之上品",其神奇独特的药用价值深受历代医家推崇备至,是皇家御用圣品。铁皮石斛经历千百年历史的洗礼,其生长条件要求极为苛刻,到近现代古医书记载的盛产野生铁皮石斛原产地已均无可采,濒临     

3种石斛属植物假鳞茎高位腋芽的萌发初探

对比分析3种具有重要药用价值的石斛属植物高位腋芽萌发情况,为石斛种苗营养繁殖提供参考。方法:采集扁草石斛Dendrobium nobile Lindl.、铁皮石斛Dendrobium officinale Kimura et Migo和齿瓣石斛Dendrobium devonianum Paxt.等3种石斛假鳞茎,观察高位腋芽萌发率和生长情况。结果:扁草石斛、铁皮石斛和齿瓣石斛的茎条高芽萌发率分别为93.7%、74.2%、83.3%;茎节萌发率分别为26.4%、15.8%、16.1%;高芽生长情况齿瓣石斛扁草石斛铁皮石斛。结论:3种石斛均具有典型高位腋芽萌发特性,随着当前市场石斛假鳞茎成本降低,利用其高位腋芽繁育种苗具有较好的发展前景。     

硝酸镧和兰科菌根真菌互作对石斛生长和有效成分积累的影响

利用盆栽的方式研究了不同硝酸镧水平下接种OM真菌对石斛生长、根系活力、N、P、K等营养元素吸收以及有效成分积累的影响,并分析了根际硝酸还原酶和磷酸酶活性变化。结果表明,添加适量的硝酸镧有利于OM真菌侵染和菌根发育,促进石斛生长,包括地下和地上的生物量。在接种OM真菌时,同时添加5.0 mg·L-1的硝酸镧,石斛的生物量达到最大,为对照组的4.76倍。在适量的硝酸镧水平下接种OM真菌还可以提高根系活力,并促进N、P和K的吸收和利用,提高根际硝酸还原酶和磷酸酶的活性;显著提高蛋白质、多糖以及石斛碱的含量。硝酸镧与OM真菌互作能促进石斛生长和有效成分的积累,提高其药用品质。     

霍山石斛内生真菌分离、培养及其促生作用的初步研究

从野生的霍山石斛(Dendrobium huoshanense)根中分离出1株内生真菌SH-01,纯化后以生物量为主要指标对培养条件进行优化,并将内生真菌SH-01与霍山石斛试管苗共生培养。结果表明:与对照相比,该菌株对石斛试管苗的鲜重、株高及分蘖都有一定的促进作用,对株高的增长有显著促进作用(P<0.05),但对鲜重和分蘖的促进作用不显著(P>0.05)。在离体条件下,选择适当的内生真菌与石斛共生培养可以促进石斛试管苗的生长。     

霍山石斛托品酮还原酶基因的克隆及其表达分析

为了探究托品酮还原酶(tropinone reductase,TR)基因在石斛中的功能,该研究采用RT-PCR结合RACE技术,以霍山石斛原球茎为材料,克隆得到霍山石斛TR-I基因的cDNA序列,其在Gen Bank中的登录号为KY912085。TR-I基因的cDNA长1 043 bp,包含一个完整的共807 bp的ORF(open reading frame)(79-885),共编码268个氨基酸。生物信息学分析表明,该蛋白质可能是一种疏水性稳定蛋白质,无信号肽,不含卷曲螺旋结构,具有14个功能位点、47个潜在磷酸化位点,其二级结构由螺旋、折叠和卷曲结构组成。系统进化树分析表明,霍山石斛TR-I与铁皮石斛、金钗石斛的亲缘关系较近,处于同一分支。qPCR结果显示,TR-I基因在霍山石斛不同生长期的相对表达量均表现为茎叶根,且茎和叶中TR-I的表达量均随着生长期的延长呈现低–高–低的变化趋势;在不同品种中,金钗石斛的TR-I基因相对表达量最高,铁皮石斛中最低;不同浓度茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,Me JA)处理比较,100μmol/L茉莉酸甲酯处理下TR-I基因表达量最高,推测该基因可能参与霍山石斛生物碱的合成途径。     

金钗石斛内生细菌的组成及多样性分析

采用9种培养基对贵州省的赤水市旺隆镇(P1)、贵阳市贵州师范大学生命科学学院大棚(P2)和金沙县台金生态农业观光园(P3)内栽培的金钗石斛(Dendrobium nobile Lindl.)根、茎和叶中的内生细菌进行了分离,并采用扩增核糖体DNA限制性分析(ARDRA)法对分离的内生细菌进行了多样性分析。结果表明:从3个样地金钗石斛的根、茎和叶中共分离出1 081株内生细菌,隶属2门5科12属40种1亚种,可分成41个OTUs;其中,芽孢杆菌属(Bacillus)和短芽孢杆菌属(Brevibacillus)为优势属,Bacillus subtilis subsp.subtilis和Brevibacillus invocatus为优势种(亚种)。金钗石斛的内生细菌在不同器官中的分布存在差异,根中内生细菌的菌株数量最多(695),且根中内生细菌的Shannon-Wiener多样性指数(2.20)和Margalef丰富度指数(5.81)均高于茎和叶中内生细菌,而叶中内生细菌的Pielou均匀度指数却最高(0.69);并且,茎和叶间内生细菌的Sorenson相似性系数最高(0.82),显著高于根和茎间以及根和叶间内生细菌的Sorenson相似性系数。3个样地金钗石斛内生细菌的共有OTUs有14个,分离菌株数占金钗石斛内生细菌分离菌株总数的96.5%;并且,3个样地金钗石斛内生细菌的Shannon-Wiener多样性指数和Pielou均匀度指数差异较小,仅P1样地金钗石斛内生细菌的Margalef丰富度指数明显高于P2和P3样地。NA、TSA、LB、KB、R2A和TB培养基从金钗石斛中分离出的内生细菌菌落数和OTU数量均高于YPD、YT和YG培养基。研究结果显示:金钗石斛体内含有丰富的内生细菌资源,并且,其内生细菌的组成和多样性与分离器官、种植地和培养基密切相关。     

氮磷钾不同配比水溶肥对春石斛组培苗生长的影响

以春石斛品种‘甜心石斛’Den.Lucky Girl‘Sweetheart’组培苗为材料,研究不同N、P、K比例的水溶肥及施肥方式对其幼苗生长的影响。结果表明,花多多2号(10-30-20)叶面喷施和灌根处理的植株成活率均为最高;花多多1号(20-20-20)灌根处理的植株株高、叶片数、茎围等指标表现居中,但新芽个数最少;花多多2号(10-30-20)灌根处理植株新芽数最多,其他指标较差;花多多10号(30-10-10)灌根处理的植株生长表现最优,但成活率最低。     

多效唑对金钗石斛试管苗生长的影响

多效唑是一种高效的植物生长延缓剂,通过不同浓度的多效唑对金钗石斛试管苗生长的影响进行研究。结果表明多效唑能明显提高金钗石斛试管苗再生芽分化的数量,促进再生苗根的分化,提高生根的数量;同时,多效唑能使再生苗的叶片变短,对再生植株有显著的矮化作用,使植株的茎段变粗,抑制根的伸长生长。多效唑对金钗石斛试管苗生长的影响具有明显的规律性,其作用效果均随着其使用浓度的升高而增强,并在3~4mg/L的范围处达到最强效果,再提高浓度则趋于饱和。     

霍山石斛多糖吸湿保湿性能及皮肤刺激性研究北大核心CSCD

为探讨霍山石斛多糖吸湿保湿性能及皮肤刺激性,应用干燥器控制湿度对霍山石斛多糖进行体外吸湿(43%、81%)和保湿性能研究,应用皮肤水分测定仪对霍山石斛多糖进行人体皮肤保湿性能研究,应用家兔正常皮肤和破损皮肤进行霍山石斛多糖皮肤刺激性研究。结果显示:霍山石斛多糖体外吸湿率随环境湿度的升高而升高,相对湿度43%、81%的吸湿率强弱为丙三醇>霍山石斛多糖>壳聚糖>海藻酸钠;体外的保湿强弱为壳聚糖>霍山石斛多糖>海藻酸钠>丙三醇,霍山石斛多糖在涂抹后6、8、12 h的人体皮肤保湿率显著高于丙三醇保湿率,12 h显著高于海藻酸钠保湿率,与壳聚糖保湿率无显著性差异;家兔正常皮肤及破损皮肤刺激值小于0. 5。表明霍山石斛多糖具有一定的吸湿保湿性能,且无皮肤刺激性,具有开发为天然保湿剂的潜能。     

铁皮石斛DoWRKY6转录因子基因的克隆与分析

目的:植物生长发育由多种转录因子调控,探索WRKY转录因子调控铁皮石斛组织生长发育机理。方法:根据铁皮石斛原球茎转录组数据中的WRKY6序列设计引物,并利用RACE技术克隆该基因;用生信分析软件预测其蛋白结构,并进行系统发育分析;利用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)技术研究该基因在铁皮石斛幼苗根、茎、叶等组织中的表达。结果:通过RACE技术得到1个1,238bp的Ⅱ类WRKY转录因子基因,命名为DoWRKY6,其ORF长1,017 bp,编码339个氨基酸残基,与梅[PrmuWRKY27(XM_008236601.1)]及大豆[GlmaWRKY27(XM_003555347.3)]有较近的亲缘关系,且DoWRKY6在茎中的相对表达量最大。结论:我们预测在铁皮石斛的生长发育过程中DoWRKY6基因对根、叶、茎的调控作用依次增强,表明DoWRKY6与已发表的铁皮石斛WRKY基因在组织的差异性表达上有较大差别,这对丰富WRKY家族对铁皮石斛的生长发育调控机制提供更多依据。     

3种石斛属植物和细叶石仙桃的红外光谱分析和鉴定

利用傅里叶红外光谱仪和OMINI采样器直接迅速地测定3种石斛属常用原料药植物和常用伪品细叶石仙桃的红外光谱。结果表明,细叶石仙桃与石斛属组3种植物茎叶的红外光谱图存在较大差异,亲缘关系较远,而石斛属组内种间红外光谱图的差异较小。其中,铁皮石斛茎的特征峰为1 254、1 416、1 5453、365 cm-1等,铁皮石斛叶的特征峰为914、1 061 cm-1等。研究表明,铜皮石斛与铁皮石斛具有相似的红外光谱图,它可作为药用石斛品种代用品,而细叶石仙桃则不能作为药用石斛的代用品。     

珍稀药用植物铁皮石斛的组学及功能基因研究进展

铁皮石斛为兰科珍稀名贵药用植物,具有极高的医药保健和生态观赏价值。以"高通量、高精度、低成本"为特点的新一代测序技术平台,高效推动了铁皮石斛基因组和转录组等组学基础研究,有关铁皮石斛多糖和石斛碱积累、生长发育调控、环境适应性等机制逐渐获得了分子数据支持。该文综述了近年来铁皮石斛基因组、转录组、蛋白质组等组学以及功能基因等研究,内容涉及其非生物胁迫、多糖合成、种子萌发等过程,最后对当前铁皮石斛分子生物学研究进行了讨论。     

3种石斛光合作用和叶绿素荧光特性的比较研究

以美花石斛、春石斛和铁皮石斛为材料,对它们的叶片进行光合作用、叶绿素含量和叶绿素荧光等参数的测定.结果表明:3种石斛的光饱和点都低于300 μmol·m-2·s-1,且美花石斛具有较高的净光合速率和较低的光饱和点,容易引起光抑制;美花石斛的羧化效率高于春石斛和铁皮石斛,其净光合速率随着CO2浓度的升高而迅速升高,并在CO2浓度达到500 μmol·m-2·s-1时达到最大值;美花石斛的非循环电子传递速率(ETR)、实际光化学反应量子效率(Yield)和光化学猝灭系数(qP)都明显高于铁皮石斛和春石斛,而春石斛具有较高的非光化学猝灭系数(qN),其光合机构的自我保护能力较强;美花石斛的叶绿素a、叶绿素b以及总叶绿素含量都较低.研究发现,3种石斛的光饱和点均比较低,具有石斛喜阴的生活习性,都表现出对密林和悬崖等独特生长环境的适应,并以美花石斛的这种特性更为突出.     

关于金钗石斛抗氧化损伤作用的微综述

金钗石斛（Dendrobium nobile Lindl.）为兰科（Orchidaceae）石斛属（Dendrobium SW.）植物,具有益胃生津、滋阴清热等功效。药理学研究发现金钗石斛在防治肿瘤、肝硬化、老年痴呆及抗氧化应激损伤等方面具有良好的应用前景。金钗石斛可作为天然抗氧化剂的候选药材,金钗石斛总多酚、总多糖、总黄酮、总生物碱均有不同程度的自由基清除能力。研究发现这些化合物在降低活性氧水平,增强抗氧化酶活性,激活相关抗氧化通路,以及保护蛋白质、DNA、脂质免受氧化损伤等方面具有重要作用。对近年来发表的有关金钗石斛主要活性化合物抗氧化损伤作用的文献进行了综述,旨在为后续金钗石斛的开发应用提供参考。     

霍山石斛内生真菌的分离及其及活性菌株的鉴定

从霍山石斛(Dendrobium huoshanense)根、茎、叶中筛选具有抑菌活性的真菌,并对活性菌株进行种属鉴定。采用组织块法分离野生霍山石斛组织内的内生真菌;采用琼脂块法与牛津杯法研究了霍山石斛内生真菌的抑菌活性;通过形态特征及分子生物学方法鉴定菌种。结果表明,从霍山石斛组织内共分离得到的52株内生真菌中,根部数量最多,茎部次之,叶中最少;有5株内生真菌对指示菌株表现出拮抗活性,占总分离菌株的9.6%,其中菌株DH10对4种指示菌有抑菌活性,且对金黄色葡萄球菌的抑菌能力最强,其抑菌圈直径为23.73mm。根据菌株DH10的形态学特征与ITS序列系统发育分析,最相似菌株为丝枝蜡蚧霉菌(Lecanicillium aphanocladii)。综上所述,野生霍山石斛组织内内生真菌较丰富,在宿主中的数量分布存在一定的组织差异性,高活性菌株为蜡蚧菌属,可供进一步深入研究。