卵泡内环境对猪卵泡卵体外成熟和发育的影响

研究卵泡内环境对猪卵母细胞体外成熟、受精及受精卵体外发育的影响。主要结果如下：直径≥5mm、4－4.9mm、3－3.9mm和2－2.9mm的卵泡卵母细胞体外成熟率分别为90.5%、89.7%、85.4%和67.4%,体外受精后,卵母细胞的发育能力随卵泡直径的增大而增强,直径≥5mm和4－4.9mm卵泡卵的2－细胞、3－4－细胞发育率显著高于直径2－2.9mm的卵泡卵（P＜0.05或0.01）。体外成熟培养36h、42h和48h,直径2－2.9mm卵泡卵的体外成熟率,体外受精后的卵裂率差异不显著（P＞0.05）。在体外成熟培养液中添加5％或15％的不同直径卵泡的卵泡液,各组间卵母细胞的体外成熟率,受精卵的体外发育率均无显著差异,结果表明：卵泡大小对猪卵母细胞体外成熟、受精及受精卵体外发育有重要影响。     

猪卵泡内环境对其卵母细胞体外成熟与发育的影响

目的：研究猪卵泡内环境对卵母细胞体外成熟,受精及受精卵体外发育的影响。结果：直径≥5mm,4-4.9mm,3-3.9mm,2-2.9mm的卵泡内卵母细胞体外成熟率分别为90．5％,89．7％,85．4％和67．4％。体外受精后,受精卵的发育能力随卵泡直径的增大而增强,来自直径≥5mm和4－4．9mm卵泡的受精卵发育到2－细胞,3－4细胞的比率显高于来自直径2－2．9mm的卵泡受精卵（P＜0．05或0．01）,体外成熟培养36,42,48小时,直径2－2．9mm卵泡卵的体外成熟率,体外受精后的卵裂率差异不显（P＞0．05）。在体外成熟培养液中添加5％或15％的不同直径卵泡的卵泡液,各组间卵母细胞的体外成熟率,受精卵的体外发育率均无显差异。结论：卵泡大小对猪卵母细胞体外成熟,受精及受精卵体外发育有重要影响。     

原始卵泡库的形成、维持和激活分子调控机制研究进展及其临床应用

卵泡是哺乳动物卵巢结构和功能的基本单位,由位于中央的卵子和周围的体细胞组成。原始卵泡是卵泡发育的最早阶段,在哺乳动物出生前后形成。由于数量有限,原始卵泡构成了卵巢的储备库,为女性的生殖周期提供成熟卵子。原始卵泡在大部分时间内处于休眠状态,直到被激活后开始生长和发育,最终成为可排卵的成熟卵泡。原始卵泡休眠与激活的动态平衡对于卵巢生殖功能的维持非常重要,而各种因素导致的原始卵泡库提前耗竭则可能引起女性的早发性卵巢功能不全。该文系统总结了过去二十年关于原始卵泡形成和激活分子机制的研究进展,全面概述了原始卵泡体外激活技术的发展和在治疗早发性卵巢功能不全或卵巢功能障碍导致的不孕症患者中的临床应用。此外,该文就如何调节原始卵泡库来保护卵巢储备、延缓卵巢衰老方面的研究也进行了讨论,为诊断和治疗与卵泡发育相关的疾病、卵巢性不孕不育的干预以及女性生育力保存提供了新的思路。     

小鼠卵巢几个重要发育事件的初步研究

选定多个阶段小鼠卵巢进行切片染色和生殖细胞计数统计等分析,以发现该阶段小鼠卵巢的发育特点。结果显示在胚胎发育第12.5 d的生殖嵴中,大部分的生殖细胞正进行有丝分裂增殖,并以生殖包囊的形式存在;在出生后第2 d的小鼠卵巢中,有大量紧密接触的原始卵泡,表明生殖包囊刚完成重组形成原始卵泡;在第5 d的小鼠卵巢中,原始卵泡仍占有大部分比例,但也有大量的初级卵泡处于发育之中;在出生后第10 d的卵巢中同时有原始卵泡、初级卵泡和次级卵泡的发育;老年小鼠(16个月大)卵巢中已基本没有卵母细胞。     

树鼩(Tupaia belangeri chinensis)卵巢的显微结构及不同季节的卵巢活动

本文报道不同季节的野外成体树鼩卵巢结构的观察和卵泡发育测定的结果。树鼩卵巢的间质腺组织稀少,但普遍有“睾丸索”型的髓质索结构。卵泡发育过程类似于大多数哺乳类和灵长类。近成熟卵泡的腔极大,内膜较窄并有插入的膜腺细胞层。孕期成熟黄体较大,中间有小腔,多角形的黄体细胞具圆形的核和富含脂滴的胞质。带退化透明带残体的付黄林结构偶尔可见,有的与孕期黄体同时出现。次级卵泡和中等囊状卵泡的发育未见有明显的季节性差别。但是,具生长活性的大囊状卵泡和近成熟卵泡的发育,在1、4月份更为明显,为卵泡前期和卵泡期的卵巢周期形态者较多。孕期黄体和付黄体结构见于7月份。10月份未见孕期卵巢结构,多数卵巢缺乏生长活性的大囊状卵泡的发育。这些结果表明,树鼩的卵巢活动同睾丸的精子发生一样,有季节性变化。     

毛脚鸟卵巢的组织学观察

对3例雄性毛脚鸟的卵巢结构进行组形态学研究。采用常规方法制片,H．E染色。结果显示卵巢分叶呈条索状,卵泡发育中没有出现卵泡腔,卵泡细胞始终为单层,卵泡膜随卵泡发育成熟由单层转变为多层,闭锁卵泡在卵泡发育的各个不同时期都有出现。     

双峰驼卵泡发育过程中卵泡液差异蛋白质组学

为了比较双峰驼卵泡发育过程中卵泡液中差异表达的蛋白质,将卵泡按照直径分为6 类,运用双向电泳技术构建双峰驼卵泡液蛋白质二维凝胶电泳图谱,凝胶经考马斯亮蓝染色后用PDQuest 8. 0 检测差异蛋白,结果表明在6 类大小不同的卵泡中共检测到13 个差异蛋白点,这些蛋白点经LC -MS/ MS 鉴定出7 种不同的蛋白质,它们分别是:血红蛋白、toll-like 受体9、抗凝血酶、聚泛素、γ 纤维蛋白原、重组活化蛋白1 和跨膜与卷曲螺旋域3。基于这些蛋白的功能和表达模式,结合实验结果讨论了这些蛋白质在生殖中的功能,发现toll-like 受体9、聚泛素、γ 纤维蛋白原和重组活化蛋白1 可能与卵泡发育或卵母细胞的成熟有关。这些蛋白质的发现为了解双峰驼卵泡发育和卵母细胞成熟的生理机制奠定基础。     

卵泡液中细胞外囊泡及其携带的microRNA对卵泡发育的作用

细胞外囊泡(Extracellular vesicles,EVs)是指细胞分泌的双层膜转运囊泡。EVs能从细胞中摄取大分子物质,并将其转移至受体细胞。在这些大分子物质中,研究最多的就是microRNA (miRNA)。miRNA是一种参与基因表达调控的非编码RNA,已证实在哺乳动物卵泡液EVs中有不同的非编码RNA存在,EVs携带miRNA可以作为自分泌和旁分泌的替代机制,影响卵泡发育。文中系统介绍了EVs的种类、特征和分离鉴定方法,重点综述了EVs及携带的miRNA对卵泡发育的作用,包括早期卵泡发育、卵母细胞成熟、卵泡优势化以及对颗粒细胞功能的影响。同时对卵泡液中EVs及其携带的miRNA的未来研究进行了展望,为卵泡液中EVs及携带的miRNA功能的研究及应用提供了思路和方向。     

阴道超声监测卵泡发育及子宫内膜厚度变化对治疗不孕症妇女的临床价值

目的:研究阴道超声监测卵泡发育及子宫内膜厚度变化对治疗不孕症妇女的临床价值。方法:选取从2015年4月至2016年9月于我院收治的71例不孕症患者记为观察组。另取同期正常体检者71例记为对照组。分别采用阴道超声对两的卵泡发育以及子宫内膜厚度情况进行监测,观察两组卵泡成熟情况、子宫内膜厚度变化。结果:观察组卵泡成熟占比显著低于对照组,而无卵泡发育占比显著高于对照组,差异均有统计学意义(均P0.05)。观察组子宫内膜三线型人数占比显著低于对照组,而均质型人数占比显著高于对照组,差异均有统计学意义(均P0.05)。观察组排卵前卵泡直径与子宫内膜厚度均显著低于对照组,差异均有统计学意义(均P0.05)。结论:阴道超声监测卵泡发育及子宫内膜厚度变化对不孕症的临床诊断以及治疗均有重要的临床价值。     

卵泡颗粒细胞凋亡相关蛋白的研究进展

哺乳动物的卵巢中存在大量卵泡。大多数卵泡在发育过程中发生闭锁而消失,只有少数可以发育到成熟而排卵。卵泡是由卵母细胞与其周围的颗粒细胞构成的。卵泡颗粒细胞的凋亡是卵泡闭锁的主要原因。颗粒细胞凋亡相关蛋白通过参与凋亡通路及凋亡信号转导调节凋亡。本文就哺乳动物卵泡颗粒细胞凋亡相关蛋白的研究进展进行综述。     

年龄和FSH在肉牛活体取卵过程中对卵泡和卵母细胞发育的影响

用B超活体取卵技术（TVFA）对莫累灰和婆罗门杂交肉取卵,探讨年龄和FSH诱导对青年牛,经产牛及老年牛卵泡和卵母细胞发育的影响。结果显示：青年牛（12月龄）和经产牛（7－8岁）平均卵泡数（≥2mm）及＞10mm卵泡数明显高于老年牛（≥14岁）（P＜0．01）。青年牛和经产牛平均卵母细胞数及平均COC数高于老年牛（P＜0．05）。1和2级卵母细胞比例青年牛高于或等于经产牛高于老年牛,3和4级卵母细胞比例老年牛高于经产牛高于或等于青年牛（P＜0．05）。青年牛和经产牛2级卵母细胞占优势,而老年牛3级卵母细胞居多。不同剂量外源性FSH诱导后,经产牛和老年牛平均卵泡数在各剂量组之间没有显著差异（P＞0．05）;但≥6mm卵泡数及2级卵母细胞比例明显增加,而2－5mm卵泡数相应减少及裸卵和老化卵比例降低（P＜0．05）。在10次取卵过程中,青年牛和经产牛发情当天平均卵母细胞数均以后各次的数量低（P＜0．05）。研究表明：利用TVFA可从肉牛获取卵母细胞,卵泡及卵母细胞发育受年龄的影响,这可能与生理状况有关;而适量FSH秀导可以促进牛卵泡发育,提高卵母细胞质量。     

新生小鼠卵巢移植雄鼠肾囊下卵泡的生长发育

将1日龄小鼠卵巢移植入成年雄鼠肾囊下,分别于移植后18d、36d回收移植卵巢进行形态学、组织学观察,以评价卵巢移植体在成年雄性受体小鼠体内生长及卵泡发育潜能。结果表明:移植体生长增大,有各级生长卵泡发育;18日龄移植体平均直径为1881.1μm±204.7μm,与1日龄卵巢相比差异极显著(P<0.01),卵泡发育到有腔卵泡阶段;36日龄移植体平均直径达2575.3μm±466.4μm,显著大于18日龄移植体(P<0.01),有成熟卵泡出现,未观察到黄体;从移植体分离到GV期卵母细胞和卵丘卵母细胞复合体。研究表明1日龄小鼠卵巢移植体在雄性受体生理环境中具有正常生长发育和形成成熟卵泡的潜能。     

哺乳动物卵泡发育模式及其调控机理

了解卵泡发育动脉及其调控机理对于提高动物繁殖率和控制人类生育,都具有重要的意义。近年来随着超声波扫描技术的发展,人们对家畜卵泡发育模式及其调控机理有了更深入的认识。本文简要综述了当前在家畜卵泡发育基本模式,参与卵泡发育调节的各种因子及卵泡发育的种属特异性等方面的研究进展。     

有关卵原细胞在卵泡中形成卵母细胞的4点释疑

浙科版选修3在《胚胎工程》中指出,从卵巢中采集到的是未成熟的卵母细胞,并且要将其培养至成熟才具受精能力,这与必修2中有关卵原细胞形成卵细胞的认知存在一定冲突.本文从生理学的角度对卵原细胞的形成、卵泡的发育、卵母细胞的去向及体外培养4个方面进行释疑.     

“生育和发育”一章教学参考资料——部份来稿摘登

人的精子是与次级卵母细胞受精的现行高级中学课本《生物》(全一册)对受精作用的叙述是:“精子与卵细胞结合成合子的过程,叫做受精作用”。根据这个概念,使许多学生认为人的精子首先就是与卵细胞受精的。其实不然,在人的卵细胞发生中,卵原细胞是在胚胎时期的卵巢中增殖的。出生后,大部分卵原细胞逐渐退化,在一生中大约有400个左右的初级卵母细胞得到发育。人在性成熟后,一般来说每月仅有一个卵泡经10～14d发育成熟。成熟的     

小鼠腔前卵泡体外培养中BMP-6和GDF-9的表达

目的观察BMP-6及GDF-9蛋白在小鼠体外培养卵泡中的定位和定量表达,探讨二者与卵泡发育的关系。方法采用免疫荧光和western blot技术观察BMP-6及GDF-9在体外培养的第6、10天卵泡的定位和定量表达情况。结果在体外培养中,腔前卵泡和有腔卵泡的卵母细胞和颗粒细胞中均检测到BMP-6和GDF-9蛋白的表达;western blot定量显示,在卵泡体外发育的不同阶段,BMP-6和GDF-9蛋白的表达水平不同。结论 BMP-6及GDF-9蛋白存在于体外培养卵泡的卵母细胞和颗粒细胞中;二者的表达水平随卵泡的发育成熟而发生变化。     

原始卵泡形成与早期卵泡发育的遗传调控

原始卵泡形成与早期发育调控对卵母细胞发育来说非常重要,通过对原始卵泡的体外培养,可以了解原始卵泡发育的调节机制.原始卵泡向初级卵泡的转变不依赖于促性腺激素,而主要受卵巢旁分泌因子的调控,包括Kit/KL、GDF9等促进因子和AMH等抑制因子的调控.目前,原始卵泡发育的分子调控机理研究多以小鼠为模型,而对大型哺乳动物和人的研究甚少.概述了哺乳动物原始卵泡形成与发育启动调控机制的既有研究成果,详细阐述了原始卵泡发育过程中关键分子的调控作用,并介绍了小鼠及其他哺乳动物卵泡体外培养的研究进展.     

毛脚卵巢的组织学观察

对3例雌性毛脚的卵巢结构进行组织形态学研究。采用常规方法制片,H.E染色。结果显示卵巢分叶呈条索状,卵泡发育中没有出现卵泡腔,卵泡细胞始终为单层,卵泡膜随卵泡发育成熟由单层转变为多层,闭锁卵泡在卵泡发育的各个不同时期都有出现。     

脂联素在应激状态下对小鼠卵泡发育的影响

目的:利用饥饿刺激探讨应激状态下脂联素缺失对小鼠卵泡发育的影响。方法:C57BL/6、脂联素半缺失(APN+/-)、脂联素全缺失(APN-/-)三种基因型小鼠以正常进食量的一半给予饥饿刺激,建立应激模型,30天后处死小鼠取卵巢,计数三种基因型小鼠各级卵泡数目。结果:1经过30天饥饿后饥饿组小鼠体重下降与初始体重比较有统计学意义(P0.001),应激模型建立。2应激状态下三种基因型小鼠卵巢重量未见统计学差异(P0.05)。3正常饮食组三种基因型小鼠各级卵泡比例未有统计学差异(P0.05)。饥饿后C57BL/6小鼠原始卵泡比例为(47±2.966)%,APN+/-原始卵泡比例为(36.5±1.555)%(P0.05),APN-/-原始卵泡比例为(36.8±2.200)%(P0.05);C57BL/6闭锁卵泡比例为(12±1.225)%,APN+/-闭锁卵泡比例为(19.75±1.887)%(P0.01),APN-/-闭锁卵泡比例为(20±0.8367)%(P0.001),与野生型闭锁卵泡比例比较差异有统计学意义。结论:饥饿刺激下脂联素缺失小鼠原始卵泡消耗增加,而闭锁卵泡的发生增加,处于生长状态的卵泡减少,提示在应激状态下脂联素水平的下降可导致卵泡成熟的过程受阻。     

介绍几个简单的生殖生理实验(二)

三、家兔诱发排卵实验实验目的和原理雌性的生殖细胞称为卵子。卵子在卵巢中生长、发育,发育成熟时则由卵巢排出。卵子和其外所附着的透明带及放射冠等一起从卵巢排出的过程称为排卵。排出的卵子被输卵管伞端捡拾进输卵管,一般经过2—3天后进入子宫。受精卵进入子宫后,经过几天即可植入到子宫内膜中,称为着床。若卵子未受精,则被吸收或排出体外。有些动物(如大鼠、小鼠、猴等)以及人类,具有周期性的排卵;但也有的动物,如家兔,需经刺激(如交配)才发生排卵。因此,常用人工方法诱发家兔排