水果中抗病原真菌物质成分的提取分离方法及应用前景

诱发因子如草酸,拮抗菌产生的抗素等,以及采后热处理,紫外线处理可以诱导水果产生抗病性,此外有的水果具有先天性抗病成分,对这些活性成分进行分析,并用之于水果采后病害的生物防治,为水果的防腐保鲜提供了新的方法,追踪这些抗病物质的产生和分布,需要采用一些专门的分析方法,目前采用的方法是将果实组织破碎,离心,通过萃取,层析或电泳技术进行纯化,然后用核磁共振,X－射线衍射及各种波谱分析技术进行结构鉴定,抗真菌物质的活性可以用薄层层层析生物学方法,孢子萌发或纸碟法进行鉴定,而抗真菌活性物质的定位则用组织化学法,电子显微术,放射自显著技术和免疫印迹技术也广泛用物于组织化学分析。     

植物中抗病原真菌的活性物质

综述了近十年国内外公开报道的部分植物抗病原真菌的活性物质,这些物质主要包括萜类、生物碱类、黄酮类、酚类、醌类、苯丙素类、香豆素类和木脂素类等.侧重介绍了禾本科、豆科、蔷薇科、菊科和十字花科植物中抗病原真菌的活性物质的特点.提出了一些看法与建议.     

植物中抗病原真菌的活性物质

综述了近十年国内外公开报道的部分植物抗病原真菌的活性物质, 这些物质主要包括萜类、生物碱类、黄酮类、酚类、醌类、苯丙素类、香豆素类和木脂素类等。侧重介绍了禾本科、豆科、蔷薇科、菊科和十字花科植物中抗病原真菌的活性物质的特点。提出了一些看法与建议。     

抗病原真菌药物的研究进展

本文概述了抗病原真菌药物的作用机制、研究现状和发展趋势。同时,结合本课题组的研究结果,对从甾体皂苷中寻找新型抗菌药物提出展望。     

覆盆子抗耐药真菌活性成分提取方法比较及活性部位初步筛选

目的 考察热回流法、超声法及冷浸法提取覆盆子抗菌活性成分的优劣,初步筛选覆盆子提取物中具有体外抗真菌活性的部位.方法 以覆盆子提取物联合氟康唑体外抗耐药真菌活性为主要指标,结合提取率评价三种提取覆盆子抗菌活性成分方法的优劣;依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯及正丁醇萃取覆盆子提取物,以所得部位联合氟康唑体外抗耐药真菌的活性为评价指标,初步筛选覆盆子提取物的抗菌活性部位.结果 热回流法、超声法及冷浸法三种提取方法的提取率分别为21.0％、16.8％及12.8％,所得提取物联合氟康唑对耐药菌株100的FICI值分别为0.035 2、0.032 2及0.046 9,所得提取物联合氟康唑对耐药菌株103的FICI值分别为0.033 2、0.031 7及0.039 1;覆盆子提取物的石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇及水部位对耐药菌株100的FICI值分别为＞1、0.502 0、0.507 8、0.033 2及＞1,对耐药菌株103的FICI值分别为＞1、0.531 3、0.507 8、0.033 2及＞1.结论 与热回流法及冷浸法相比,超声法提取覆盆子抗菌活性成分简便、稳定、高效,是一种较优的提取方法;覆盆子提取物的活性部位为其正丁醇部位.     

我国海南仙人掌的成分分析及开发前景

本文对我国海南省的野生仙人掌（仙人掌科Haw仙人掌）中的蛋白质、氨基酸、糖类、维生素、黄酮以及矿物质元素和SOD活属于性等进行了测定。对小鼠进行的急性毒性试验表明,仙人掌冻干粉没有任何毒副作用,而抑菌试验表明,仙人掌的水提物和醇提物均有比较明显的抑制细胞的作用。参考目前国际上对仙人掌的开发研究经验,认为应该对海南仙人掌的营养成分、果胶成分、抑菌成分和抗氧化成分（SOD）等,从食品、保健品、药品等不同层次,分近、中、长期进行有计划地开发研究。     

皂荚中一种杀鼠活性成分的分离鉴定

采用70%乙醇渗漉提取,正丁醇萃取,常压硅胶柱反复层析,结合杀鼠活性追踪的方法,从豆科植物皂荚(Gleditsia sinensis Lam.)的果实中分离到一个含有7个糖基的三萜皂苷,通过TLC、mp、IR、MS、1H-NMR和13C-NMR等方法鉴定为3-O-β-D-吡喃木糖基-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖基-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖基齐墩果酸28-O-β-D-吡喃木糖基-(1→3)-β-D-吡喃木糖基-(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-[(6S,2E)-6-羟基-2,6-二甲基-2,7-辛二烯醇-(1→6)]-β-D-吡南葡萄糖酯;对小鼠的毒性测定表明,试鼠经口灌胃的耐受量为200～800 mg/kg,LD50为508.31 mg/kg,95%可信区间为449.40～574.95 mg/kg.该三萜皂苷为皂荚杀鼠的活性成分.     

黄花夹竹桃内生真菌抗病原细菌的初步研究

从植物黄花夹竹桃 (Thevetiaperuviana)的根、茎、叶、果实中分离出内生真菌 10 1株。以鼠伤寒沙门氏菌 (Salmonellatyphimurium)、肺炎链球菌 (Streptococcuspneumoniae)、乙型溶血链球菌 (Streptococcushemolyticus)、金黄色葡萄球菌 (Staphyllococcusaureus) 4种人类病原菌为指示菌 ,对其进行抑菌活性筛选 ,结果有 17株内生真菌对 1株或 1株以上人类病原菌有抑菌活性 ,其中平板抑菌圈直径大于 2 0mm的菌株有9株。具有抗菌活性的内生真菌分别来自木霉属 (Trichoderma)、曲霉属 (Aspergillus)等 9个属。     

中华羊茅内生真菌Epichlo? sp.挥发性物质的抑菌活性及成分分析

为测定中华羊茅内生真菌Epichloe sp.挥发性物质的抑菌活性和成分,依次采用挥发油提取器和乙酸乙酯萃取Epichloe sp.菌株的发酵产物,再采用琼脂扩散法、悬滴法和滤纸片扩散法测定其抑菌活性;基于顶空固相微萃取和气相质谱联用法分析挥发性物质成分。结果表明:挥发性物质、乙酸乙酯提取物、水相部分和发酵液可以抑制小麦根腐离蠕孢(Bipolaris sorokiniana)、新月弯孢(Curvularia lunata)和黑曲霉(Aspergillus niger)菌丝生长。高浓度的挥发性物质对四种真菌孢子萌发和芽管长度抑制效果显著高于低浓度(P<0.05)。结果表明,随着挥发性物质浓度的增加对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和大肠杆菌(Escherichia coli)的抑菌作用增强,同一挥发性物质浓度对金黄色葡萄球菌的抑制作用强于大肠杆菌。此外,从挥发性物质中鉴定出32种具有较高质谱匹配度的化合物,其中主要成分包括异山梨醇(16.26%)、甲基叔丁基醚(8.18%)、二氢甘露醇(3.75%)、羟基丙酮(2.99%)、乙酸(1.22%)、己醇(1.20%)、3-糠醛(0.92%)、5-羟甲基二氢呋喃-2-酮(0.86%)、5-羟基戊酸-2,4-二叔丁基苯酯(0.86%)和棕榈酸甲酯(0.85%)。总之,中华羊茅内生真菌Epichlosp.挥发性物质具有拮抗细菌和真菌的作用。     

蝉蜕活性成分的提取及其抑菌活性的研究

本文报道了对传统中药蝉蜕抑菌活性成分提取与抑菌活性研究结果。对4种提取方法和7种提取溶剂的提取效果进行了平行比较研究,研究结果显示,以体积分数95%乙醇作为提取溶剂,4种提取方法中,以超声波法提取时的浸膏得率最高。采用超声波提取法时,在7种提取溶剂中,以95%乙醇提取浸膏的得率最高。抑菌试验结果表明,不同方法获得提取物与对照组相比对Escheridia coli均有明显的抑菌作用(P≤0.05),但不同提取方法得到的提取物之间,并无显著的抑菌活性差异。其中采用超声波提取法,以95%乙醇为提取溶剂时,所得提取物的抑菌活性最高,对E.coli的最小抑菌浓度为0.078 mg/mL。该研究结果是蝉蜕抑菌成分的首次报道。     

解淀粉芽孢杆菌抗菌活性物质的分离纯化及抑菌活性研究

植物真菌病害给农业生产带来了巨大损失,因此对生物农药的开发迫在眉睫。从堆肥中分离得到一株解淀粉芽孢杆菌,它具有强烈的抗真菌活性。其发酵液经硫酸胺沉淀得到粗提液,粗提液经Hiprep 26/10 Desalting,HiLoad 26/10 Q Sepharose和HPLC多步柱层析,分离纯化得到一种抗真菌活性物质。ESI-MS质谱法测得其分子量为1498 Da。经活性检测发现,该纯物质对尖孢镰刀菌、草莓蛇病菌等植物病原真菌具有很强的抑制作用,对毛霉、黑曲霉等食品腐败菌也有抑制作用。经过显微镜观测,该物质可造成草莓蛇病菌菌丝生长异常,表现在菌丝弯曲,顶端膨大,分生孢子数量减少。     

虎杖内生真菌的分离及产抗菌活性物质的筛选

从植物虎杖(Polygonum cuspidatum Sieb.et Zucc.)的根状茎中分离出24株内生真菌,分别对其液体发酵液进行抗菌活性检测,结果筛选出3株内生真菌具有抗菌活性,它们分别属于曲霉属、青霉属和无孢菌类。     

香菇活性成分提取工艺研究及药理学研究进展CSCD

香菇是一种具有丰富的营养价值同时兼有良好的药用价值的真菌,可食药两用。追溯到我国古代,就已有相关记载提示其有增强脑细胞功能的作用:服食饵菌类可以"增智慧""益智开心"(《神农本草》)。香菇作为亚洲传统医药,含有多种活性成分,如香菇多糖、香菇嘌呤、香菇蛋白等。这使得其在医学领域得到越来越多的应用,尤其在抗肿瘤、调节免疫力、抗氧化、抗病毒及降血脂等方面都具有较好的治疗效果。本文就香菇主要活性成分的提取方法、化学结构及药理作用作一综述。     

鬼臼类植物内生真菌的分离及其抗癌活性研究

通过对三属四种鬼臼类植物地下茎内生真菌的分离,发现鬼臼类植物地下茎中内生真菌的物种类型极其丰富,主要分布在地下茎的表皮层和维管组织中,来源于外界环境.通过对包括鬼臼类植物在内的7种植物内生真菌的抗癌活性测定,发现内生真菌的抗癌活性与宿主有密切有关系,鬼臼类植物地下茎内生真菌含有较高比例的抗癌活性菌株.宿主种类、地理位置都会影响内生真菌的分布,进而影响活性菌株出现的频率.通过对所有鬼臼类植物地下茎内生真菌次生代谢产物的深入分析,并没有发现产生鬼臼毒素的内生真菌,鬼臼类植物地下茎内生真菌的抗癌活性成分是独立产生的.     

紫藤瘤不同溶剂提取部位抗农作物病原真菌活性研究

采用十字交叉法测定紫藤瘤不同溶剂提取物对农作物病原真菌的抑制作用。结果表明:紫藤瘤水提取物在5 mg?mL 1浓度下几乎无抗真菌活性。石油醚、乙酸乙酯和正丁醇提取物在5 mg?mL 1浓度下对辣椒枯萎、小麦赤霉病菌的抑菌率在50%左右,对油菜菌核菌的抑菌效果显著,抑制率高达100%。     

大果沙枣活性成分的提取及体外抑菌活性的研究

目的：研究喀什地区大果沙枣的果皮、果肉、种子活性成分提取液在体外抑菌活性的强弱。方法：首先采用索氏抽提法分别提取大果沙枣果皮、果肉、种子并进行定性分析,再采用抑菌圈法研究3种提取液对4种指示菌的抑菌活性。结果：大果沙枣果皮、果肉、种子中均含有黄酮、多糖、脂肪、氨基酸、有机酸等活性成分,3种提取液对4种指示菌均有显著的抑菌效果,各原料活性成分提取液的抑菌活性也具有显著差异。结论：喀什生产的大果沙枣的种子提取物的抑菌活性最高,该研究为大果沙枣的药用研究提供参考依据。     

广谱抗真菌链霉菌HBERC-57169活性物质的分离鉴定

从我国云南楚雄地区采集的土样中分离到一株放线菌纲的链霉菌（Streptomyces sp.）HBERC-57169,农药活性测定发现其发酵粗提物对多种农作物病原真菌具有很强的抗菌活性。对HPLC半制备组分进行农药活性测定明确了活性物质的出峰时间及其紫外、质谱特征。根据UPLC-MS图谱特征确定了活性物质的分子离子峰及分子量,结合UV吸收光谱及文献数据,初步确定其为一大环内酯类化合物子囊霉素（ascomycin）。对发酵提取物进行HPLC制备后,获得了纯度在95%以上的纯品,农药活性测定结果显示,其对多种农作物病原真菌的抑制活性很强,MIC值达到1.56~25.0 μg/mL。     

牛奶菜中黄酮类成分的研究

从牛奶菜(Marsdenia sinensis Hemsl)根中分离得到6个黄酮类化合物,经光谱分析确定其结构为:芹菜素(1),(2S)-柚皮素(2),木犀草素(3),异牡荆素(4),8-C-β-D-Glucopyranosyl apigeninidin(5),5,7-二羟基色原酮(6)。所有化合物均为首次从该植物中分离得到,同时对分离得到的单体化合物进行细胞毒活性测试,化合物1～5均表现出较强的细胞毒活性。     

两种水溶性抗菌活性物质的分离提取

对水溶性、不解离的极性物质分离时,一般采用吸附层析和凝胶层析等途径。实验通过硅胶柱层析、葡聚糖凝胶柱层析以及硅胶ＧＦ２５４制备型薄板层析,从发酵液样品中分离出两种有抗菌活性的纯物质。薄层层析的展开剂为二氯甲烷－四氢呋喃－甲醇－水（２５：３０：２）,分离出的组分中Ｒｆ＝０．７和Ｒｆ＝０．８两种物质有抗菌活性。硅胶柱层析洗脱过程为梯度洗脱,先用１５０ｍｌ上述展开剂洗脱,再用二氯甲烷－甲醇（２０：８０）