盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳法分离血清蛋白实验的几点改进

对盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳法分离血清蛋白实验提出了几点改进,以满足本科生实验的要求。实验主要比较和分析了两种封胶方法（原胶布封胶与改进的琼脂糖封胶）和两种染色方法（原考马斯亮蓝染色法与改进的考马斯亮蓝染色法）对凝胶分离血清蛋白实验的影响。结果显示,改进的盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳法是一种灵敏、快速、简便、安全、分辨率高的实验方法。结论：改进的盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳法分离血清蛋白实验非常适合本科生实验。     

改进的鞭毛染色方法

细菌的鞭毛染色较困难。我们从目前已报道的几十种方法中,选出应用较多的Leifson氏法、Blenden氏法、Rhodes氏法和山口氏法进行了比较,认为在银染色法中,Blenden氏法     

SARS肺纤维化中胶原纤维组织化学染色方法的比较

为检测和探讨严重急性呼吸综合征（severs acute respiratonry syndronre SARS）病人肺纤维化中胶原纤维组织的变化规律及过程,应用Vangison染色法,Masson染色法,三联染色法,苦味酸天狼猩红偏振光法,四种方法。对4例SARS感染病人肺组织进行染色比较,比较几种组织化学染色的优缺点,发现苦味酸天狼星红偏振光法是较理想的染色方法,染色鲜艳、简便、效果好,并能对胶原纤维进行定性、定位、定量分析。     

Mallory氏胰岛细胞染色法的改良

目的:为了更清晰地显示胰岛的A细胞、B细胞和D细胞。方法:zenker液固定,分别用苏木精-伊红和改良的Mallory氏法染色。结果:苏木精-伊红染色法,不易区分胰岛内三种细胞,而采用改良的Mallory氏染色方法,能够清晰地显示A细胞、B细胞和D细胞。结论:改良的Mallory氏染色法能够清楚的显示胰岛内三种细胞结构,为实验教学提供了优良的切片标本。     

一种研究和鉴别悬浮培养红豆杉细胞凋亡与坏死的新方法

将在动物细胞凋亡研究中应用的Hoechst-PI双重荧光染色法与琥珀酸脱氢酶（SDH）染色法相结合,建立了一种更加完善、能同时鉴别和研究悬浮培养的植物细胞凋亡及坏死的新方法－Hoechst-PI-SDH三重染色法（H－P－S法）。该方法可直接用于红豆杉悬浮培养细胞,无需对细胞进行去壁、固定及切片等其它方法所必需的步骤,在荧光显微镜下可鉴别活细胞、死细胞及凋亡细胞,并可同时观测细胞凋亡的全部过程。该方法简单、快速、准确,而且克服了因细胞膜通透性差异引起的对死、活细胞判断的困难,可在植物细胞凋亡的研究中广泛应用。     

一种研究和鉴别悬浮培养红豆杉细胞凋亡与坏死的新方法

将在动物细胞凋亡研究中应用的Hoechst-PI双重荧光染色法与琥珀酸脱氢酶(SDH)染色法相结合,建立了一种更加完善的、能同时鉴别和研究悬浮培养的植物细胞凋亡及坏死的新方法——Hoechst-PI-SDH三重染色法(H-P-S法)。该方法可直接用于红豆杉悬浮培养细胞,无需对细胞进行去壁、固定及切片等其它方法所必需的步骤,在荧光显微镜下可鉴别活细胞、死细胞及凋亡细胞,并可同时观测细胞凋亡的全部过程。该方法简单、快速、准确,而且克服了因细胞膜通透性差异引起的对死、活细胞判断的困难,可在植物细胞凋亡的研究中广泛应用。     

植物细胞壁组织化学定位染色方法和技术的比较研究

利用光学和荧光显微镜比较研究几种植物细胞壁组织化学定位染色方法和技术,结果表明：（1）硫酸消化法和硫酸氢黄连素-苯胺兰对染法研究凯氏带,对取材时间和部位要求高,建议两种方法配合使用,可相互印证是否具凯氏带;（2）苏丹7B染色法,蓝色激发光下不染色和硫酸氢黄连素-苯胺兰对染研究细胞壁栓质层3种方法中,不染色蓝色激发光下结果比苏丹7B染色法敏感显色,但苏丹7B染色法在普通光学显微镜下观察较为便捷;（3）木质化细胞壁染色方法中硫酸氢黄连素-苯胺兰对染法比间苯三酚-盐酸染色法易显色观察;（4）甲苯胺兰快速染色细胞壁取代常规苏丹Ⅲ/Ⅳ法,细胞边界和层次更清楚。     

大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的原代分离

目的建立大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(alveolar epithelial cells typeⅡ,AECⅡ)分离、纯化、原代培养及鉴定的方法。方法用4.2U/ml的弹性蛋白酶通过气管插管注入肺泡内,消化分离AECⅡ。把细胞悬液接种到包被有大鼠IgG的塑料平皿中纯化细胞。用电镜、碱性磷酸酶显色法、改良巴氏染色法、单宁酸染色法、免疫组化染色法鉴定AECⅡ。结果细胞纯度达到90%以上,倒置显微镜下可见细胞呈岛屿状生长。电镜下可见细胞内有大量板层小体,包膜上有绒毛结构。碱性磷酸酶染色法(BCIP/NBT)可见胞浆内有蓝色颗粒。改良巴氏染色法、单宁酸染色法可见胞浆内有黑色颗粒。抗大鼠肺泡表面活性蛋白A(surfactant protein A,SP-A)免疫组化染色呈阳性反应。结论弹性蛋白酶作用温和,不损伤胞膜,分离所得细胞活力好;IgG免疫粘附纯化法操作简单,纯化效率高。电镜、BCIP/NBT、巴氏染色、单宁酸染色及免疫组化染色等鉴定方法稳定可靠,特异性高。     

荧光染色法与KOH湿片法在真菌直接镜检中的应用比较

目的探索一种结果更可靠的真菌直接镜检方法。方法对600例临床高度疑似真菌感染的标本分别采用荧光染色法和KOH湿片法进行真菌直接镜检。结果荧光染色法和KOH湿片法的真菌检出率分别为97%和88.5%。结论荧光染色法是一种适合临床的、快速有效的真菌镜检方法。     

小肠上皮分泌细胞特性的组织学观察

目的寻找一种可以替代人体消化管的动物标本,并通过特殊染色方法,使得小肠上皮分泌细胞的形态特征能够明显地显示出来。方法随机采集成年猫小肠的新鲜标本,经Bouin液灌注固定24h后,石蜡包埋切片脱蜡入水。分别采用Gomori染色法、PAS反应、Gomori＋PAS反应、阿利新蓝（alcian blue,AB）染色法、AB＋PAS反应、HE染色法和苏木精-焰红染色法进行染色。结果在各种染色的切片标本上,能够观察到杯状细胞的形态、分布和染色特性以及肠内分泌细胞的特点,并发现在它们之间还存在一种绿色颗粒细胞和嗜酸性颗粒细胞。结论通过特殊染色可以肯定猫的小肠杯状细胞合成的是中性粘蛋白和酸性粘蛋白;绿色颗粒细胞为未成熟杯状细胞;嗜酸性颗粒细胞为Paneth细胞,其特点是单个分散分布。肠内分泌细胞与周围其他上皮细胞的染色对比明显而容易识别。     

一种改良的肌细胞骨架染色方法

为了观察肌细胞骨架,对传统考马斯亮蓝染色法进行改良,并与免疫荧光染色法进行了比较。培养的血管平滑肌细胞先用多聚甲醛预固定后再进行考马斯亮蓝染色,可使细胞骨架非常清晰的显色,解决了传统考马斯亮蓝染色易使肌细胞变形、脱片的问题,其效果与免疫荧光染色相近。因此,多聚甲醛预固定．考马斯亮蓝染色法是一种适于肌细胞骨架染色的简便方法。     

4种碘化钾-过氧化氢法髓过氧化物酶染色结果比较

目的为了探讨较理想的髓过氧化物酶（MPO）染色方法。方法采用我室新建立的碘化钾-吡啰红B法（KI-PyB法）及碘化钾-吡啰红G法（KI-PyG法）,以及碘化钾-煌焦油蓝法（KI-BCB法）、碘化钾-wright-Giemsa法（KI-WG法）四种MPO染色法,同时对80例骨髓涂片标本进行了MPO染色。结果KI-PyB法MPO阳性产物呈鲜红色颗粒状,细胞核为蓝绿色;KI—PyG法MPO阳性产物呈棕黑色颗粒状,细胞核为浅红色;KI-BCB法阳性产物为蓝黑色颗粒状,细胞核为紫红色;KI-WG法阳性产物为深红色至棕黑色颗粒状,细胞核为浅蓝色或浅紫红色。4种碘化钾法MPO染色平均阳性率分别为60．9％、62．1％、56．3％及61．3％,差异无统计学意义（P〉0．05）。结论4种碘化钾法MPO染色中KI-PyG法的阳性率相对较高、且阳性反应易于判断,是较理想的MPO染色方法。     

荧光染色法和KOH湿片法在诊断浅部真菌感染中的效果比较

目的探讨荧光染色法在浅部真菌镜检中的应用价值。方法收集100例皮肤科门诊疑似真菌感染的患者标本,分别运用荧光染色法和KOH湿片法对这些标本进行检测,并对检测结果进行比较。结果荧光染色法共检出56例真菌阳性,而KOH湿片法只有39例阳性。荧光染色法的阳性检出率明显高于KOH湿片法(χ2=5.79,P0.05)。结论荧光染色法是一种快速、准确的真菌检测方法,值得在皮肤科对真菌感染早期诊断的推广使用。     

改良的Cajal金升汞染色法显示纤维性星形胶质细胞

目的探索一种快捷、简便、稳定的染色方法显示脑组织内纤维性星形胶质细胞。方法取猫、家兔、大鼠和豚鼠的大脑组织,部分组织采用传统的Cajal金升汞法制片。部分组织采用改良Cajal金升汞法制片。结果与传统Cajal金升汞法比,应用改良Cajal金升汞染色法,缩短了制片时间,纤维性星形胶质细胞染色均匀,结构清晰,胶质细胞纤维显现明显,分枝光滑,较长突起末端膨大的脚板终止于血管壁上。结论应用改良后的Cajal金升汞法染色显示纤维性星形胶质细胞效果明显优于传统Cajal金升汞法。     

3种快速诊断霍乱方法比较

应用SPA法、免疫微菌落染色法及进口试纸条法,对一起传久性食源性霍乱暴发进行了调查,采集大便标本176份。SPA快诊,1次增菌阳性5份,2次增菌阳性2份;免疫微菌落染色法快速诊断阳性8份,未进行2次快诊试验;试纸条法,1次性增菌阳性5份,2次增菌阳性1份。3种方法阳性年分别为3,97％、4．54％、3．41％。同时用经典方法增菌分高培养,分离出8株霍乱弧菌小川型,3种方法与经典方法相比较复合率分别为87．5％、100％、75％。3种方法阳性率最高的为免疫微菌落染色法。通过试验,免疫微菌落染色法快诊8例阳性者未出现假阳性,都能在6h内报…     

避免Golgi银染标本表层产生铬银沉淀的一个改进方法

经典的Golgi镀银染色法是神经组织研究和教学的重要技术。与其它几种银染技术相比,Golgi镀银染色法操作相对简便,能同时显示神经元与胶质细胞的整体形态,图像对比清晰,耐长久保存。但美中不足的是,标本表层易产生浓黑的铬银沉淀,影响某些重要结构的观察。     

介绍一种观察凋亡细胞形态学特征的染色方法--苏木素-伊红染色法(HE染色法)

就苏木素-伊红染色法用于观察与鉴别细胞凋亡与细胞坏死作了较详细的介绍。此染色法对凋亡细胞的形态学特征检测,既方便又可靠,在一般普通光学显微镜下就可进行观察与检测。此法不失于研究细胞凋亡的一种检测观察凋亡细胞形态学特征的简便方法。     

大鼠细小肺动脉平滑肌细胞原代培养和鉴定方法的研究

目的：建立一种重复性好、培养周期短及传代次数多的大鼠细小肺动脉平滑肌细胞（PASMCs）培养方法。方法：在无菌条件下,分离雄性SD大鼠肺细小动脉,剥离外膜和剔除内皮细胞,经胶原酶I消化,培养PASMCs。0.4%台盼蓝染色测定细胞活力;倒置相差显微镜观察;免疫细胞化学法和免疫荧光染色法,进行平滑肌α-肌动蛋白（α-SMactin）鉴定。结果：形态学观察、免疫细胞化学法及免疫荧光染色法鉴定表明培养细胞为PASMCs;细胞存活率在96.5%以上;原代培养后4～7d即可传代,并且生长特点、细胞形态不易发生改变。结论：采用胶原酶I消化法培养PASMCs,方法简单、酶消化时间易控制、培养周期短、重复性好,培养的原代PASMCs具有数量多和生长迅速的特点。     

淋病诊断试剂盒的研究

本文叙述了试剂盒的制备和考核的全过程,试剂盒用6个国际标准株、46个淋球菌临床株、32株不动杆菌和51株非淋球菌临床株对其敏感性、特异性进行了考核,并同革兰氏染色法和细菌培养法作了平行对比试验,结果表明本试剂盒具有敏感(O.3亿/ml)、特异(100%)、快速(3min)的特点.三种方法的比较研究证明革兰氏染色法的准确率为95.6%,培养法和试剂盒的准确率均为100%;与培养法的符合率革兰氏染色法为95.6%,试剂盒为100%.     

5 600例白带涂片镜检结果分析

目的：探讨线索细胞在白带清洁度划分的作用。方法：常规采样,新鲜标本分别用湿片法和革兰染色检查,以革兰染色检出为标准判断湿片中微生物检出及白带清洁度划分的准确性和可靠性。结果：湿片法对线索细胞的误辩率较高,清洁度划分难把握。结论：湿片法和革兰染色法两者相结合可较好地划分白带清洁度,明确阻道炎的性质。