树突细胞上Toll样受体的介导作用

树突状细胞是体内最重要的抗原提呈细胞,它表面表达多种Toll样受体。Toll样受体可通过多条途径来激活树突细胞,介导树突细胞对抗原的摄取,递呈及生存与凋亡,促进T细胞增值和分化并参与免疫反应。     

Toll样受体2和4在大鼠心肌缺血/再灌注损伤模型中的动态表达

目的:通过观察大鼠心肌组织缺血/再灌注(I/R)急性期Toll样受体2(TLR2)和4(TLR4)mRNA及蛋白质的表达,探讨TLR2和TLR4在心肌缺血/再灌注损伤中的作用。方法:雄性Wistar大鼠随机分为缺血/再灌注组(I/R组)和假手术组(sham组),建立大鼠心肌缺血/再灌注模型,按不同的再灌注时间(1、2、4、6、12、24 h和7 d)处死动物(n=42)。光镜下观察心肌组织形态改变。实时定量聚合酶链式反应(RT-PCR)定量心肌TLR2及TLR4mRNA水平。逆转录聚合酶链式反应(r-t PCR)测定心肌白介素-6(IL-6)和单核细胞趋化因子-1(MCP-1)的mRNA水平。结果:①随着再灌注时间的延长,心肌梗死面积逐渐增大,在再灌注4 h时达最大值,再灌注4 h、6 h、12 h、24 h,再灌注7 d已发生心室重塑。②在再灌注早期,sham组心肌组织形态未见明显改变,I/R组心肌结构有不同程度损伤,在复灌7 d时可见心室重塑,左室壁厚度明显变薄,大量成纤维细胞替代原有的心肌细胞。③sham组和I/R组TLR2、TLR4、MCP-1和IL-6mRNA水平均出现不同程度上调,其中TLR2和TLR4均在再灌注4 h时达高峰,随后逐渐下降,至再灌注7 d时TLR4水平再次升高。IL-6在6 h达到高峰后开始下降,到24 h时基本降至sham组水平,再灌注7 d时再次有升高趋势。MCP-1在缺血/再灌注后一直保持与sham组相当水平,在再灌注7 d时才有明显升高。结论:在心肌缺血/再灌注早期,心肌组织中TLR2和TLR4基因水平迅速上调,并促进下游炎症因子的产生造成心肌早期的损伤。在再灌注后期,TLR2和TLR4的再次升高使得炎症因子的表达再一次增加,从而影响心肌重塑,损伤心肌结构及功能。     

Toll样受体2及Toll样受体4在大鼠实验性变应性鼻炎中的表达

目的研究Toll样受体2（Toll-like receptor2,TLR2）及Toll样受体4（TLR4）在实验性变应性鼻炎大鼠鼻黏膜中的表达及脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）对其表达的影响。方法SD大鼠48只随机分为正常对照组（A组）;变应性鼻炎组（B组）：经腹腔注射及鼻腔滴入卵清白蛋白（Ovalbumin,OVA）建立变应性鼻炎（Allergic rhinitis,AR）模型;变应性鼻炎＋LPS刺激组（C组）：大鼠激发成变应性鼻炎模型后再以LPS滴鼻。用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测鼻黏膜中TLR2 mRNA、TLR4 mRNA的表达。结果B、C组大鼠均成功激发为AR动物模型;各组鼻黏膜中均有TLR2 mRNA、TLR4 mRNA表达;各组间TLR2 mRNA的表达差异无统计学意义（P〉0．05）。B、C组TLR4 mRNA的表达较A组高（P〈0．01）;C组TLR4 mRNA表达较B组增高（P〈0．01）。结论AR大鼠有TLLR4的表达增高;LPS刺激后TLR4表达进一步增高,说明TLR4可能参与AR的发病。TLR2在AR大鼠中的表达未见增高;LPS刺激后。TLR2表达未见进一步增高,TLR2与变应性鼻炎的关系有待进一步研究。     

Toll样受体在抗感染免疫中的作用

目前已确认的人类Toll样受体有10个,它们分别识 病原微生物不同的病原体相关分子特式结构,其中TLR9与细菌CpG-DNA关系的发现,受到人们普遍的重视和关注,本文简要地介绍细菌CpG基序与TLR9,鞭毛蛋白与TLR5和病毒与TLR5等的相互关系及其意义。     

天然免疫进化中的无脊椎动物Toll样受体

Toll样受体（Toll-like receptors,TLR）（或Toll）通过与各种病原相关分子模式（pathogen associated molecular patterns,PAMP）的识别和特异结合,广泛参与各种天然免疫应答,目前已在线虫类、软体动物、节肢动物、棘皮动物及低等脊索类的后口动物等多种无脊椎动物中发现大量的TLR及同源蛋白.TLR在进化中高度保守,其功能随着动物进化中免疫机能的复杂化而多样化.这些研究成果将会不断加深对无脊椎动物天然免疫系统的起源、进化路线及其信号转导机制的认识.     

Toll样受体激动剂对小鼠脾脏细胞中SARM蛋白表达的影响

目的探讨多种Toll样受体(toll-like receptor, TLR)激动剂分别刺激小鼠脾脏细胞后对SARM蛋白(sterile-α and armadillo motif-containing protein)表达的影响。方法无菌条件下收集小鼠脾脏并制成单细胞悬液,分别加入TLR1/2激动剂Pam3Cys、TLR2/6激动剂LTA、TLR3激动剂poly(I∶C)、TLR4激动剂LPS或TLR9激动剂CpG,终质量浓度均为20μg/mL,刺激时间分别为2、4、8、20和24 h,然后利用蛋白质印迹法(Western blot)检测SARM的表达。结果小鼠脾脏细胞中SARM的表达,Pam3Cys刺激后4~20 h持续上调,24 h后回落接近初始水平;LTA刺激后8~24 h持续下调;poly(I∶C)刺激后4~20 h持续上调,24 h后回落接近初始水平;LPS刺激后20~24 h持续上调;CpG刺激后24 h开始下调。结论小鼠脾脏细胞中SARM可能参与对TLR信号传导通路的调控。     

Toll样受体的发现者——布特勒

先天性免疫是高等动物感知外界感染后迅速启动机体防御反应的一种方式,对该过程机制的理解在临床方面具有非常广泛的应用。布特勒先后发现了介导多种炎症反应的肿瘤坏死因子、感知脂多糖的Toll样受体4等物质,这些进展拓宽了人们对先天免疫分子机制认识同时也得到广泛临床应用,布特勒也被认为是近几年诺贝尔生理与医学奖的热门人选之一。     

Toll样受体在肝脏疾病中的功能

Toll样受体(Toll-like receptors,TLR)是一类可以识别病原体并迅速启动天然免疫反应的跨膜蛋白,它们也可以调节机体的获得性免疫及组织的炎症反应,是机体感知、抵御及清除病原体的关键分子。近来发现TLR在多种肝脏疾病的发生、发展及恢复过程中起着重要的调节作用,这方面的研究为许多慢性肝病的治疗提供了新的线索。该文综述了TLR在酒精性肝病、脂肪肝、病毒性肝炎、肝硬化以及肝细胞癌的病理生理学中的作用,展望了将来需重点研究的问题。     

Toll样受体及其信号转导

Toll样受体(TLR)介导着绝大部分哺乳动物、昆虫及植物的宿主防御. TLR4与配体结合涉及膜抗原CD14和分泌蛋白MD-2的调节并一起形成受体复合物, 然后与接头分子MyD88结合, 使IRAK磷酸化, 再使TRAF6寡聚化, 随后激活控制着各种效应基因表达的转录因子NF-κB.     

Toll样受体介导的肠道免疫研究进展

黏膜免疫系统的第一道防线——肠黏膜上皮,不但能区分和识别致病菌和共生菌,而且能启动适当的免疫应答。在机体正常情况下,肠黏膜上皮细胞（IEC）对肠道共生菌持耐受状态,维持肠道内环境的稳定。IEC能识别致病菌的危险信号,激活派伊尔结节,启动免疫应答。有关实验已证实肠黏膜上皮针对肠腔细菌呈“耐受”或“非耐受”状态,主要依赖于Toll样受体（TLRS）介导的信号转导通路。     

大黄素抑制胃癌细胞糖酵解并促进凋亡

目的:探讨大黄素对人胃癌BGC-823细胞凋亡及糖酵解的影响。方法:采用不同浓度大黄素(30μmol/L、90μmol/L、180μmol/L)、磷脂酰肌醇3-激酶(Phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)抑制剂处理人胃癌BGC-823细胞,通过四甲基偶氮唑盐(MTT)检测细胞活力,采用试剂盒检测细胞葡萄糖消耗及乳酸水平,western blotting检测细胞己糖激酶Ⅱ、Bcl-2相关蛋白(Bcl-2 Associated X Protein,Bax)、PI3K、人低氧诱导因子1α(Human Hypoxia-inducible factor 1α,HIF-α)的表达。结果:大黄素能浓度依赖性的抑制BGC-823细胞增殖、葡萄糖消耗,降低乳酸水平;并降低己糖激酶Ⅱ的表达,促进凋亡蛋白Bax表达。PI3K抑制剂可抑制胃癌细胞糖酵解水平,而将大黄素与PI3K抑制剂联合使用后,与单一抑制剂组比,对细胞糖酵解抑制水平进一步加强,大黄素可下调PI3K下游蛋白及HIF-α的表达。结论:大黄素对人胃癌BGC-823细胞的增殖抑制作用其作用机制与调节PI3K途径及HIF-α,并抑制己糖激酶Ⅱ表达降低胃癌细胞糖酵解水平相关。     

Toll样受体调节树突状细胞中腺苷受体A2B亚型的表达及功能

树突状细胞（dendritic cell,DC）表面所表达的腺苷受体A2B亚型（ADOR-A2B）可促进DC对辅助性T淋巴细胞（T helper cell,Th）的激活,导致自身免疫性疾病的发生或加重. 本文旨在研究作为免疫反应的诱导分子Toll样受体（Toll-like receptors, TLRs）是否可调节ADOR-A2B在DC中的表达并籍此影响其功能. 体外诱导小鼠骨髓细胞分化为树突状细胞（BM-DC）,以多种TLRs的配体,Pam3csk4、polyIC、LPS及CpG进行干预. 提取细胞总RNA,real-time PCR测定ador-a2a、ador-a2b的表达;放射性配体结合实验测定BM-DC对3H 腺苷结合能力的变化.以LPS及选择性ADOR-A2B激动剂BAY 60-6583协同干预BM-DC,ELISA测定培养基中IL-1、IL-6及IL-12的含量. 以干预后的BM DC刺激naive CD4细胞,ELISA测定培养基中IL-17A、IFNγ的含量,荧光抗体染色及流式细胞仪分析检测CD4细胞的分化. 结果显示, TLR 4的配体LPS可显著提高BM DC中ador-a2b的表达及对腺苷的结合能力. BAY 60-6583与LPS相协同可刺激BM DC分泌多种致炎因子,并增加其诱导CD4细胞向Th1及Th17分化的能力. 由此可见,Toll样受体可上调ador-a2b在DC中的表达,并可籍此增加DC分泌促炎因子的能力及对CD4细胞的刺激作用.     

FPR2介导内外源性配体HP(2-20)/ANXA1促进胃癌细胞侵袭和转移

目的:分析FPR2在内外源性配体对胃癌细胞侵袭和转移影响中的作用。方法:采用构建成功的XN0422/SGC7901-mock细胞和XN0422/SGC7901-sh FPR2低表达细胞,通过划痕实验、transwell实验观察和比较FPR2的内外源性配体-HP(2-20)/ANXA1对XN0422/SGC7901迁移和增殖的影响。结果:HP(2-20)/ANXA1处理的XN0422/SGC7901-mock和XN0422/SGC7901-sh FPR2细胞侵袭和转移能力均相较于DMSO处理的XN0422/SGC7901-mock和XN0422/SGC7901-sh FPR2细胞明显增强(P0.05),且XN0422/SGC7901-mock组细胞的侵袭转移能力明显优于XN0422/SGC7901-sh FPR2组细胞(P0.05)。结论:HP2-20和Ac2-26可以促进胃癌细胞的侵袭和迁移,而这一作用与FPR2有关。     

循环肿瘤细胞在胃癌化疗预后评估中的临床意义

目的:探讨检测循环肿瘤细胞对评估胃癌患者化疗敏感性和预后的临床价值。方法:选取行根治术的胃癌患者112例,术前留取血液标本进行循环肿瘤细胞检测。选取病理分期为Ⅲ期的36位患者进行术后6周期Xelox化疗,在化疗前和化疗结束后检测循环肿瘤细胞。分析循环肿瘤细胞检测值和肿瘤分期、化疗预后的关系。结果:在胃癌患者中,循环肿瘤细胞阳性率(2)为39.29%(44/112),并且和肿瘤分期与淋巴结转移明显相关(P0.05)。在术后行辅助化疗的胃癌患者中,循环肿瘤细胞阳性率和化疗敏感性明显相关,循环肿瘤细胞检测值动态增高的患者比降低的患者预后差(P0.05)。结论:循环肿瘤细胞的动态监测有助于预测胃癌患者的化疗预后。     

miR-223促进人胃癌MGC-803细胞增殖的研究

目的:探讨miR-223的表达与胃癌细胞的增殖能力的关系.方法:采用实时定量PCR检测人胃癌组织及细胞系中miR-223的表达.采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和克隆形成实验测定转染miR-223 inhibitors前后的胃癌细胞增殖的变化.结果:相对于正常胃粘膜组织及细胞,在胃癌组织和细胞中miR-223的表达水平出现了显著的上调,MGC-803细胞中转染miR-223 inhibitors能显著抑制miR-223的表达水平.抑制miR-223能降低胃癌细胞的增殖能力.结论:miR-223对胃癌细胞增殖的调控至关重要.miR-223的表达降低能显著抑制胃癌细胞的增殖能力.     

羽扇豆醇介导MDM2-p53通路对胃癌细胞生物学行为的影响

目的:探讨羽扇豆醇介导鼠双微基因2(Mouse double microgene 2,MDM2)-p53通路对胃癌细胞生物学行为的影响及相关机制。方法:对数生长期的胃癌小鼠MFC细胞株随机分为三组。实验1组与实验2组给予10 mg/L和20 mg/L的羽扇豆醇处理,对照组以等体积的1×磷酸盐缓冲液处理。对比三组MFC细胞细胞增殖、凋亡、迁移与侵袭,及MDM2-p53通路蛋白表达。结果:细胞处理后6 h与12 h,实验1组与实验2组的细胞增殖指数、细胞迁移与侵袭指数、MDM2蛋白相对表达水平显著低对于对照组,实验2组也低于实验1组,对比差异都有统计学意义(P<0.05)。细胞处理后6 h与12 h,实验1组与实验2组的细胞凋亡指数、p53蛋白相对表达水平显著高于对照组,实验2组也高于实验1组,对比差异都有统计学意义(P<0.05)。结论:羽扇豆醇能促进胃癌细胞p53蛋白的表达,抑制MDM2蛋白的表达,从而促进细胞凋亡,抑制胃癌的增殖、侵袭与转移,且具有剂量依赖性。     

近端胃切除与全胃切除在治疗近端胃癌中的疗效比较

目的:观察近端胃切除和全胃切除对近端胃癌的疗效。方法:比较28例患有早期近端胃癌接受近端胃切除28例患者与100例患有早期近端胃癌接受全胃切除的患者,观察近端胃切除是否优于全胃切除。结果:两种治疗方法手术时间、术后并发症(包括吻合口瘘)没有差异。两组患者胃切除后的代谢变化结果相似,体重,血清血红蛋白以及血清总蛋白浓度变化相近。近端胃切除后腹泻(32%)和胃食管返流(28%)最为常见,而全胃切除后餐后腹胀(21%)最为常见。二者的术后5年生存率没有明显差别。结论:近端胃切除不会由于残余胃的生理优势而优于全胃切除术。     

完整胃系膜切除治疗胃癌的研究进展

目前胃癌的主要治疗方式仍是手术治疗,标准D2根治术已得到推广,但胃癌术后的局部复发仍是导致患者远期预后不佳的重要因素。早期胃癌患者的检出率低和手术淋巴结清扫的不规范及胃周软组织切除的不彻底是导致胃癌患者局部复发的重要因素。全直肠系膜切除(TME)和完整结肠系膜切除(CME)对降低结直肠癌术后局部复发效果明显,相同进展程度下远期预后明显好于胃癌。近年提出的完整胃系膜切除治疗胃癌可能会降低胃癌术后局部复发,改善患者预后,规范了完成胃癌根治术的完整流程标准,对于胃癌手术的规范化实施达到整块切除具有指导意义,随着微创理念不断的深入,腹腔镜的应用与发展使我们对系膜的认识更加深入,我们对完整胃系膜切除治疗胃癌的现状及研究进展进行综述如下。     

胃功能三项联合Hp抗体对胃癌及癌前病变的鉴别诊断价值

目的:探讨胃功能三项联合幽门螺杆菌(Hp)抗体对胃癌及癌前病变的鉴别诊断价值。方法:收集我院2014年5到2017年8月收治的胃癌患者34例(胃癌组)、癌前病变患者46例(癌前病变组),抽取研究对象空腹静脉血5 mL,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清胃蛋白酶原-I(PG-I)、血清胃蛋白酶原-II(PG-II),并计算PG-I/PG-II(PGR)值,采用胶体金法或胶乳免疫比浊法检测HP抗体,比较两组胃功能三项及HP抗体阳性率差异,分析胃功能三项联合HP抗体鉴别诊断价值。结果:胃癌组血清PG-Ⅰ和PGR水平低于癌前病变组(P0.05),胃癌组与癌前病变组血清PG-Ⅱ水平、HP抗体阳性率比较差异无统计学意义(P0.05)。胃癌组HP抗体阳性者和阴性者血清PG-Ⅰ、PG-Ⅱ、PGR水平比较差异均无统计学意义(P0.05),癌前病变组HP抗体阳性者血清PG-Ⅰ水平明显低于HP抗体阴性者,差异具有统计学意义(P0.05)。并联检查胃癌和癌前病变的准确度分别为67.6%(23/34)、43.5%(20/46),高于串联的14.7%(5/34)、6.5%(3/46),差异具有统计学意义(P0.05)。结论:Hp感染可能导致PG-Ⅰ降低,具有癌前病变风险,再降低可能具有胃癌风险,临床上根据胃功能三项筛检早期胃癌并且辅助HP检测可早期诊断胃癌。     

华蟾素通过下调PIM3的表达抑制高转移胃癌细胞的实验研究

目的:胃癌(GC)是全球第四大常见癌症.丁硫磷是华蟾酥的主要活性成分,从蟾蜍的皮肤和腮腺毒腺中提取,在体外具有抗癌活性.然而,丁硫磷是否对胃癌有抗癌作用尚不清楚.本研究旨在评价丁硫磷对GC的抑制作用.方法:以高转移性MKN28 GC细胞为细胞模型,研究华蟾素的抗癌作用.使用CCK-8测定细胞活力,LDH检测丁硫磷对细胞...