介绍一种自动转换式温度控制器

昆虫与温度关系的探讨,是昆虫生态学中的重要研究课题之一,一般研究中除需备有控制幅度较小的恒温设备外,尚需解决由于自动控制系统发生故障而突然增高温度现象的问题,才能保证试验正常进行。目前一般采用栅极电子管温度控制器,来控制试验用温度。为了说明问题,先将控制器的工作原理简单地介绍一下。 图1是普通电子管温度控制器线路图,当导电表有水银柱与白银丝断开时,电子管的栅极没有负电压,本身成一整流电路,屏流通过继电器y,吸动衔铁,断开或者接通受控器件的电源。当水银柱上升与白银丝接合时,就是说AB间短路,栅极即产生—个负电压Umc,使屏流切断截止。继电器由于拉簧的拉力而释     

可逆转的吸蚊器

蚊虫饲养室常需用吸蚊器将一批蚊子从一个故笼转移到另一个蚊笼。吸进吸蚊器里的蚊子常攀附于吸蚊器内壁或铜丝网上难以放出而给转移带来不便。笔者将吸蚊器（电筒改装的吸蚊器）电路稍加改进使吸蚊器电机可顺转,也可逆转。电机逆转时可将吸蚊器内蚊子轻易吹出。吸蚊器电机是由两节1号干电池驱动的直流电机。改变电机内电流方向可实现电机逆转。笔者在电路中加入一个双刀双投开关以控制电机旋转方向。改进前及改进后电路分别如图。改进后当开关K拨向“l”位时电机项转吸蚊,当开关K拨向“2”位时电机逆转将蚊吹出吸蚊器。开关可使用KNX22…     

基于PI3K/PKB通路研究EGCG对CVB3感染致病毒性心肌炎小鼠细胞凋亡的影响

细胞凋亡是造成病毒性心肌炎(VMC)发病过程中心肌损伤的重要因素;表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对缺血再灌注引起的细胞凋亡具有抑制作用,但是否抑制VMC发病过程中的心肌细胞凋亡尚不明确.因此,本研究将分析EGCG对VMC小鼠细胞凋亡的影响及分子机制.BALB/c小鼠随机分为对照组、VMC组(腹腔注射CVB3悬液造模)、VMC+EGCG组(腹腔注射CVB3悬液造模后腹腔注射EGCG)、VMC+EGCG+LY组(腹腔注射CVB3悬液造模后腹腔注射EGCG及P13K抑制剂LY294002).检测血清心肌损伤标志物肌钙蛋白I(cTnI)及乳酸脱氢酶(LDH),心肌中CVB3滴度及RNA表达、HE染色、凋亡基因及p-PI3K、p-PKB表达.结果显示,与对照组比较,VMC组血清cTnI、LDH含量、心肌中CVB3滴度及RNA表达、细胞凋亡率、cleaved caspase-3表达升高,心肌中Survivin、p-PI3K、p-PKB表达降低(P＜0.05);与VMC组比较,VMC+EGCG组血清cTnI、LDH含量及心肌中细胞凋亡率、cleaved caspase-3表达降低,心肌中Survivin、p-PI3K、p-PKB表达升高(P＜0.05),心肌中CVB3滴度及RNA表达无明显变化(P＞0.05);与VMC+EGCG组比较,VMC+EGCG+LY组血清cTnI、LDH含量、心肌中细胞凋亡率、cleaved caspase-3表达升高,心肌中Survivin、p-PI3K、p-PKB表达降低(P＜0.05),心肌中CVB3滴度及RNA表达无明显变化(P＞0.05).以上结果表明EGCG对VMC小鼠心肌细胞凋亡具有抑制作用且该作用与激活PI3K/PKB通路有关.     

脊椎动物雌激素对家蚕卵黄原蛋白基因表达的调控及其与蜕皮激素受体相互作用的MST分析

【目的】雌激素雌二醇(E_2)在脊椎动物中通过雌激素受体(ER)调节脊椎动物的生长发育和繁殖。昆虫中并没有ER,但有研究显示某些昆虫能对E_2产生一定的应答。本研究在明确E_2能影响家蚕Bombyx mori卵黄原蛋白基因(BmVg)表达的前提下,分析其对这一基因表达的调控机制。【方法】取BmVg高量表达时的家蚕雌性幼虫(上蔟后60 h)脂肪体,用不同浓度(0.001,0.05,0.5,5和50 nmol/L)E_2处理后,通过qRT-PCR检测BmVg表达的变化,分析家蚕对E_2的应答;克隆家蚕蜕皮激素受体基因(BmEcRB1),构建原核表达载体,表达并纯化BmEcRB1蛋白后与E_2体外孵育,通过微量热泳动仪(MST)分析E_2与BmEcRB1的结合情况。【结果】不同浓度E_2均显著抑制离体培养的雌蚕脂肪体中BmVg基因的表达。MST实验证实,E_2与BmEcRB1具有一定的亲和力,解离常数(Kd)为77.8±22μmol/L。【结论】结果说明,E_2对BmVg表达的影响是通过与蜕皮激素(20E)竞争性结合BmEcRB1实现的。     

电压钳控制电流钳的设计

研究证明,传统膜片钳放大器在电流钳模式下记录到的快速电压信号会存在失真,且造成失真的根本原因是由于膜片钳的探头电路设计.为了克服这些缺陷重新设计了一种探头,新探头电路不仅能像传统的电压跟随器一样测量瞬态电压,而且适用于传统的电压钳工作模式.此外,一种命名为电压钳控制的电流钳技术被应用来改进传统的膜片钳放大器.用可变的低通滤波器来调整电压钳模块的响应速度,从而在实现膜电位钳位的同时准确记录快速电压信号.桥平衡电路用来消除命令电流流过串联电阻时带来的电压误差.而传统膜片钳中的快电容补偿环节则被改进用来补偿电极分布电容和探头放大器输入电容并提高电流钳模式下系统的响应速度.细胞模型实验结果表明,改进后的膜片钳放大器能够满足电生理研究中快速电位变化测量的需要.     

长双歧杆菌NCC2705高效转化系统的建立及GFP表达

目的:建立长双歧杆菌NCC2705高效稳定的电转化系统,并以其为宿主表达绿色荧光蛋白(GFP),构建一个稳定的带报告基因的表达载体。方法:从双歧杆菌克隆载体pDG7中切取其在双歧杆菌中复制所必需的pMB1复制子插入质粒pUC19的多克隆位点区,并将gfp基因在双歧杆菌中进行表达;设计双歧杆菌电击转化体系,研究在不同电击电压条件下的电转效率。结果:首先构建了大肠杆菌-长双歧杆菌穿梭质粒pUB1和带有gfp基因的表达质粒pUB2,用电击法将之转化至双歧杆菌,当细菌生长到D600nm约为0.5时制备感受态细胞,在电容25μF、电阻200Ω、电压12.5 kV/cm的电击条件下进行完整质粒转化,可得到较高的转化率。结论:构建了以长双歧杆菌NCC2705为宿主的高效稳定的表达系统,为进一步研究益生菌的分子生物学和功能特性提供了基础。     

荧光光谱校正的原理和方法(下)

四、校正曲线的探测方法(一)激发光谱校正曲线(激发光强度-波长曲线)1.温差电偶由于温差电偶在一定波段内不存在光谱特性,可在荧光分光光度计样品室中放置一个很灵敏的、具有石英窗口的热电偶,热电偶的后面连接一个灵敏检流计,当改变激发光单色器波长时,检流计上面读数的变化便是光源-激发光单色器组合体的强度-波长曲线。然后将表观激发光谱每一波长上的读数乘以激发光强度-波长曲线同一波长上的数值,以所得的数值对波长作图,便可得到真实的荧光激发光谱。但利用热电偶的探测方法,只有在光通量较强时才是可以的。因热电偶的电输出信号微弱。容易受各种外界因素干扰。     

一株产电菌Nitratireductor sp. WJ5-4的筛选及产电分析

【目的】从生物垃圾燃料电池阳极淋洗液中分离一株产电菌WJ5-4,研究其产电特性。【方法】根据菌株的形态、生理生化性质及16S r RNA基因测序分析确定其种属,以该菌株为产电菌,以生物垃圾为底物,构建微生物燃料电池(Microbial fuel cell,MFC),研究在不同接种浓度和底物固含量条件下菌株的产电性能。【结果】菌株WJ5-4被初步鉴定属于Nitratireductor属,当接种量200 m L时可获得最大功率密度135.16 m W/m2、稳定电压370 m V和总有机碳(Total organic carbon,TOC)降解率41.46%。当底物固含量为23%时,可获得最大功率密度163.69 m W/m2、稳定电压434 m V和TOC降解率46.29%。【结论】WJ5-4菌能够利用较高固含量的生物垃圾产电,产电周期较长,为下一步微生物燃料电池处理生物垃圾提供科学依据。     

下调Perilipin 1基因表达对3T3-L1细胞脂解的影响

目的:研究下调围脂滴蛋白基因(PLIN1)表达对3T3-L1细胞脂解的影响。方法:采用RNA干扰技术,构建3组阳性及1组阴性sh-PLIN1重组载体,并进行菌液PCR和DNA测序鉴定。Western blot测定PLIN1A蛋白表达,评价载体下调效果。细胞转染有效载体2天后,Bodipy 493/503染色脂滴;酶学方法测定细胞中甘油三酯和甘油含量;Western blot检测甘油三酯脂肪酶(ATGL)、激素敏感性脂肪酶(HSL)及其磷酸化蛋白(p-HSL)的表达。酶联免疫吸附法(ELISA)测定细胞中环磷酸腺苷(c AMP)和蛋白激酶A(PKA)的浓度。结果:各sh-PLIN1干扰载体构建成功,且3组阳性载体均能显著下调PLIN1A蛋白的表达(P0.05)。转染有效载体后,与阴性转染组相比,sh-PLIN1转染组细胞中脂滴减小,甘油三酯含量降低,甘油含量升高,ATGL和HSL相对表达量显著升高(P0.05),p-HSL相对表达量及c AMP、PKA的浓度无显著性差异(P0.05)。结论:下调PLIN1基因表达可加快3T3-L1细胞脂解速率,其可能通过上调ATGL和HSL的表达而实现,c AMP/PKA信号通路对其无明显调节作用。     

核酸及蛋白质合成、提取、纯化

931521闭合环状质垃DNA的羽备[专,英3/Hyman,E.…,W09213—963 l 30.01.91-US.647789(20.08.92)22.01.92 as U 00540.92—300048/36(20页)[译自DBA,1992,11(23),92-12897~ 从细胞成细胞器中纯化闭合环状(cc)DNA的新方法是· (1)用溶菌酶酶解细胞或细胞器I(2)用蛋白酶处理DNA, (3)加热使所有非环状DNA变性成单链(ss)形式,(4)用内切酶(I)类处理,消化RNA和染色体DNA, (5)回收ccDNA。最好由大肠杆菌纯化ccDNA,并用蛋白酶一K。当ccDNA是双链时,制备时在用核酸酶处理前用DNA一局部异构酶处理,释放出超螺旋质粒DNA。 (朱遐)93152…     

团头鲂血清中雌二醇含量测定方法的改进和周年变化规律的研究

采用加热处理的方法代替了用有机溶剂进行血清样品抽提的繁琐步骤,为鱼类血清雌二醇(E_2)放射免疫测定摸索了一种简单易行的方法。对团头鲂(Megalobrama arablycephala)雌鱼血清中E_2含量的周年变化进行了测定。1—4月血清E_2含量逐渐上升,1月份为全年最低值(0.61±0.28ng/ml),4月份达到最高值(5.63±0.85ng/ml),之后,血清E_2含量明显下降。10—12月E_2水平维持在1.62±0.20ng/ml左右,形成一个持续三个月的小峰。卵巢成熟系数与血清E_2含量的变化,两者之间呈正相关,r=0.6089。并呈现出E_2含量的升高先于成熟系数的增长,E_2含量在产卵季节前一个月达到高峰值。表明血清E_2含量的变化与性腺在早春的发育生长密切相关,而与性腺晚期的发育成熟关系不大。10—12月的一个小峰与产后性腺的复发,即性腺再度进入卵黄发生期有关。     

双氢青蒿素对人白血病细胞K562增殖及凋亡的影响

目的:研究双氢青蒿素对人白血病细胞增殖及凋亡的作用,探讨其对白血病的作用机制,为进一步研究提供依据。方法:体外培养K562细胞,用细胞计数法绘制生长曲线;流式细胞仪及荧光显微镜检测药物作用前后细胞凋亡作用;Western-blot测定药物作用前后线粒体、细胞浆细胞色素c的表达。结果:双氢青蒿素的浓度为1×10~(-4),1×10~(-5),1×10~(-6)l/L时,细胞生长受到显著抑制,并呈剂量依赖性;流式细胞仪检测出凋亡峰;Hoechst33342/PI双荧光染色可观察到明显的核浓缩、凝集等细胞凋亡表现;Western-blot检测1×10~(-5)mol/L药物处理细胞后线粒体细胞色素c表达水平下调1,细胞浆出现明显细胞色素c蛋白奈带。结论:双氢青蒿素能显著抑制人白血病细胞K562的生长,并诱导其凋亡,可能与线粒体途径有关。     

高比活力大肠杆菌磷酸转乙酰酶的纯化

从国内大肠杆菌菌株1.505提取磷酸转乙酰酶(PTA),经数步纯化荻得了高比活力酶制品。该酶制品比粗酶纯化了61倍,比活力达1040单位/mg,经聚丙烯酰胺凝胶电泳检查,仅有两条蛋白质区带。用经过纯化的酶测定辅酶A,其结果6.75单位/10微升酶液在光径1cm时,233nm的吸收值△E_(PTA)<0.009。     

关于单个种群的随机模型的周期解

1.引言众所周知,单个种群的Logistic模型为 dN/dt=N(b-cN), (1.1) 其中,N是种群密度,b和c均为正常数,b/c称为容纳量。(1.1)的平衡点是N=0和N=b/c。其中人们感兴趣的是平衡点N=b/c,它是渐近稳定的。即每个具有初值N(0)>0的解N(t)→b/c,当t→ ∞时。在[1]中,讨论了具有周期性的环境中的Logistic模型(1.1),这时b和c均为周期T的周期函数,[1]给出了存在唯一正周期解的充分条件。在自然界中,一般地说,种群赖以生活的环境都具有随机性。May考虑到环境的随机性提出了一     

一种切合实用的墨水描记笔尖

在生理学、病理生理学、药理学、公共卫生学和生物学实验室中,经常要用记纹器或其他相类似的仪器来连续描记各种曲线,以将各种活动记录下来。历来的描记方法通常大多应用熏烟法,熏烟法有其缺点,如熏上烟以后的记录纸易被碰上不必要的痕迹,并且在固定以后,上面即不能再写字。而且手续较繁也不经济,所以近年来应用墨水描记法逐渐通行,并有各种墨水描记笔尖被设计出来。有的墨水描记笔尖是金属的,有的是轻金属的,有的是硬纸片,有的是赛璐珞的(薛士良),有的是玻璃毛细管(孙瑞元).     

单种群生长的广义Logistic模型

描述单种群生长的一般Logistic模型其中r>0为种群的内禀生长率,K>0为环境容纳量。它通常被称为Verhulst-Pearl模型,其基本特征是描述了种群的S型生长(如图1),当种群的初始值x_o相似文献   

细胞外Ba~(2 )对内向整流钾通道的阻断作用

实验采用双微电极电压箝 (TEV)法研究Ba2 对非洲爪蟾卵母细胞表达的内向整流钾通道 (IRK1)的阻断作用。细胞外Ba2 浓度分别为 0 ,1,3 ,10和 10 0 μmol/L ,K 浓度分别为 10和 90mmol/L ,可见快速开通道阻断剂Ba2 对IRK1的瞬间电流 (施加电压后 1ms)的阻断作用依赖Ba2 、K 、时间和电压 ;但对IRK1的开关特性几乎无影响 ,IRK1对之不通透。三级指数拟合的结果表明 :细胞外Ba2 低浓度 ( 1和 3 μmol/L)时 ,Ba2 与K 相互竞争同一结合位点 ,随着Ba2 浓度的增加 ,时间常数不增加但拟合的权数却呈浓度依赖性增加 ,所以失活过程随Ba2 浓度的增加越来越快 ;细胞外Ba2 高浓度 ( 10和 10 0 μmol/L)时 ,时间常数随Ba2 浓度的增加而减少 ,拟合的权数却呈浓度依赖性减少 ,失活过程也越来越快 ,说明Ba2 作用位点由通道的表面进入了通道更深的部位。上述结果提示 ,Ba2 对IRK1的阻断存在两种不同的机制。细胞外K 浓度为 90mmol/L和Ba2 浓度为 3 0 μmol/L时 ,Mg2 或Mn2 可与Ba2 争夺结合位点 ,随着Mg2 或Mn2 浓度增加 ,失活过程逐渐减缓 ,Ba2 在通道中的结合点也逐渐离开通道 ,Mg2 能而Mn2 不能进入通道较深处阻断通道 ,说明IRK1中有多离子阻断形式     

细胞外Cs~+对内向整流钾通道(IRK1)的作用

采用双微电极电压箝(TEV)法研究Cs 对非洲爪蟾卵母细胞表达的内向整流钾通道(IRK1)的作用及其机制。细胞外Cs 造成的IRK1内向电流的失活是Cs 浓度、K 浓度、时间和电压依赖性的,因此Cs 一直被认为是IRK1的一种效率最大的快速通道阻断剂之一 ;当细胞外K 浓度为10mmol/L和90mmol/L时 ,电场分数δ分别为0.912±0.065和0.833±0.062 ,说明Cs 的作用位点随K 浓度的减少进入通道更深的地方。细胞外Cs 浓度增加或K 浓度减少可加快失活过程。因此只有在细胞外Cs 浓度减少至10μmol/L与K 浓度增加至90mmol/L时 ,Cs 造成的IRK1内向电流的失活程度最小 ,只有此时才可观察到细胞外Cs 时间依赖性和电压依赖性增加IRK1的瞬间内向电流(施加电压后1ms)的作用。使用三个指数拟合外推的分析结果表明 :细胞外Cs 对IRK1的瞬间内向电流(施加电压后0.5ms)增加作用更明显。细胞外Cs 对IRK1的外向电流几乎无作用 ;因为在细胞外加入Cs 后反转电位仅变化0.367±1.167mV ,所以IRK1对Cs 不通透。结论 :Cs 不只是IRK1的一快速的通道阻断剂 ,细胞外Cs 还可在增大IRK1内向电流的同时使作用的时程缩短。     

一个玉米矮秆突变体K123d的遗传鉴定

矮秆已被广泛用于改良作物的抗倒伏性状,培育理想株型,从而提高作物产量。玉米矮秆突变体K123d由自交系K123自然突变产生。本研究比较该突变体与野生型主要农艺性状差异及其对赤霉素的敏感性;用K123d与株高不同的3个自交系分别构建F1、BC和F2群体,分析矮秆性状的遗传模式;以K169/K123d-F2为定位群体,采用集团分离分析法(BSA),运用SSR标记定位矮秆基因d123;参照br-2序列信息分段设计特异引物,同源克隆d123。结果表明,与野生型相比K123d株高降低35.59%,穗位高降低、节间缩短、叶片较直立,但结实率差,对赤霉素敏感;在F2群体和BC1群体中,正常植株与矮秆植株分离比例分别符合3∶1和1∶1,说明矮秆性状受1对隐性基因控制;其矮秆基因d123定位于第一条染色体上SSR标记umc1278和bnlg1564之间,遗传距离分别为12.8 c M和7.3 c M;同源克隆显示d123与br-2存在12个碱基替换,其中第4个外显子编码的一个谷氨酸被替换为赖氨酸。由此可见,矮秆突变体K123d为br-2的一个突变类型,对矮化育种具有进一步研究利用价值。     

鸡胚视网膜发育中花生凝集素结合糖蛋白的图谱

我们应用微量(1—3微克蛋白)等电点聚焦和SDS双向电泳对鸡胚视网膜发育的第4天(E_4)到第16天(E_(16))总蛋白图谱进行分析,并结合印迹的PNA免疫酶标反应,分析了总蛋白中与PNA结合的糖蛋白图谱的变化。E_4时没有看到PNA结合糖蛋白的任何阳性反应的斑点,E_6时这种糖蛋白的种数突然增加,约占总蛋白数的20%。新的糖蛋白增加的速率在E_6时最快,存其后的发育阶段(E_8—E_(16))慢于总蛋白增加的速率。这种糖蛋白大都是等电点在中性pH范围内,中等大小分子量的糖肽。视神经的总蛋白中含PNA结合糖蛋白数的比例高于同一发育年龄视网膜中的比例,这说明糖蛋白可能主要存在于质膜上。视网膜的总蛋白图谱相似于前脑的,但与视顶盖的更相近。本文对这种能与PNA结合,即含有D-半乳糖残基的糖蛋白在视网膜发育中的意义进行了讨论。