常温条件下三倍体毛白杨的愈伤组织诱导和保存

在MS附加 0 .5mg·L-16 BA和 0 .15mg·L-1NAA的培养基上 ,三倍体毛白杨幼叶的愈伤组织诱导率可达 87.6 %。蔗糖浓度大小与愈伤组织增长量成正比 ,与褐变开始时间成反比 ,2 %蔗糖下 ,继代周期可长达 6 1d。每日光照 12h的愈伤组织褐化时间可延长至 82d ;少于 12h ,愈伤组织松散 ,褐变开始时间缩短。愈伤组织开始褐化后 ,再分化时间延长 ,分化率降低。不同继代周期对再生试管苗生根无影响。     

火龙果愈伤组织诱导与植株再生

为了建立火龙果愈伤组织诱导与植株再生体系,以火龙果茎段、幼苗和子叶为外植体进行离体培养试验。结果表明：茎段诱导愈伤组织的最优培养基为1／2MS＋2,4-D2．0mg·L^-1＋6-BAO．5mg·L^-1,诱导子叶愈伤组织的最适培养基是1／2MS＋2,4-D2．0mg·L^-1＋6-BA1．0mg·L^-1,诱导愈伤组织分化的最优培养基为1／2MS＋6-BA4．0mg·L^-1＋NAA0．5mg·L^-1,最佳生根培养基为1／2MS＋6．BA1mg·L^-1＋NAA0-3mg·L^-1。     

三倍体毛白杨组织培养再生系统的建立

初步建立了三倍体毛白杨（Populus tomentosa Carr.）组织培养再生系统。组织培养时,外植体最好选用在弱光下从休眠芽上萌发的幼芽或嫩茎,经HgCl2溶液表达消毒后,接种到大量元素减兰、含0.25mg/L吲哚乙酸和1.00mg/L玉米素的MS培养基上。试管苗的生根可采用含0.25mg/L吲哚丁酸的10mg/L维生素B1的MS培养基。试管苗茎段的分化依无性系和外源激素条件的不同而异。无性系B19的茎段较易分化,而无性系B304和B331分化较难。最适的分化培养基为大量元素减半、含0.05-0.10mg/L吲哚乙酸和1.00mg/L玉米素的MS培养基。     

沙枣组织脱分化培养与快繁体系建立的研究

研究了以沙枣的种子为外植体诱导形成愈伤组织以及植株再生的过程,对培养中出现的愈伤组织和不定芽的类型进行了探讨。通过正交试验及单因素试验方法,确定了沙枣快繁体系的最适培养方案：①诱导材料：苗期为10 d的沙枣无菌苗子叶;②有效愈伤组织诱导培养基：MS+NAA 0.5 mg·L^-1+BA 2.0 mg·L^-1+3%蔗糖;③有效芽的分化培养基：MS+NAA 0.1 mg·L^-1+BA1.0 mg·L^-1+3% 蔗糖;④壮苗培养基：MS+NAA 0.1mg·L^-1+BA 1.0 mg·L^-1+GA 30.2 mg·L^-1+3%蔗糖;⑤生根培养基：1/2MS+ABT生根粉（1号）1.0 mg·L^-1+1.5%蔗糖。     

大叶秦艽的组织培养与植株再生

以秦艽的叶和下胚轴为外植体,成功地诱导出愈伤组织和再生植株.诱导愈伤组织最合适的培养基为附加2 m g·L- 1 2 ,4 - D和0 .5 mg·L- 1 6 - BA的MS培养基,诱导率可达到10 0 % .愈伤组织转移到附加2 mg·L- 12 ,4 - D和0 .5 mg·L- 1 KT和5 0 0 m g·L- 1 L H的MS培养基上进行继代培养,增殖后的愈伤组织转移到附加0 .1mg·L- 1 2 ,4 - D和0 .5 m g·L- 1 6 - BA的MS分化培养基上进行分化,其分化率可达到86 .6 7% ,将分化出的芽转接到不加激素的MS上,结果可生长出大量的分化苗.     

Ca2+、Mg2+对籼稻幼苗分化及生根的影响

以籼稻愈伤组织为材料,研究了Ca2+、Mg2+对愈伤组织分化成苗及其生根的影响.结果表明在一定的浓度范围内,Ca2+、Mg2+对籼稻愈伤组织芽分化有很好的促进作用.Ca2+浓度为6×103mol/L,Mg2+浓度为1.5 × 103mol/L时,分化效果较佳.而不同浓度的Ca2+、Mg2+对籼稻生根影响不明显,生根效果均较好.     

添加有机质对籼稻分化和生根的影响

以籼稻愈伤组织为材料,研究了添加有机质于培养基中对诱导愈伤组织分化、生根的影响,有机质材料为香蕉泥、土豆汁、椰汁。结果表明,添加某些有机质能明显促进分化、壮苗和生根;其中添加香蕉泥对促进分化、壮苗效果较好。浓度为2.0g／L最隹,椰汁50ml／L次之。香蕉泥的生根效果也最好,土豆汁对促分化有一定辅助作用,却对生根有抑制作用。     

软枣猕猴桃叶片愈伤组织分化再生植株

1植物名称软枣猕猴桃Q如动九面tyHna）。2材料类别组培苗叶片。3培养条件叶愈伤组织诱导培养基为MS＋ZT2rug·I，’（单位下同）＋NAA0．3。分化培养基有10个：（1）MS＋NAAO．05＋ZT15；（2）加ZTIO，余同培养基（1）；（3）加ZT5，余伺（l）；（4）加ZT2，余同（1）；（5）MS＋NAA01＋ZT15；（6）加ZT10，余同（5）；（7）加ZT5，余同（5）；（8）加ZT2，金同（5）；（9）加ABA1，余同（3）；（10）加ABA0．1，余同（3）。生根培养基为1／2MS＋IBA05。以上培养基中均加入3％蔗糖、肌醇100、0．75％琼脂，PH5so分化培…     

大葱成熟胚离体培养植株再生

以大葱成熟胚为外植体,就激素浓度对其愈伤组织和不定芽的诱导情况进行了初步探讨。结果表明,2,4-D(1.0mg/L-2.0mg/L) 6-BA(0.5mg/L-2.0mg/L)为诱导愈伤组织的适宜组合范围,不定芽的诱导以6-BA（1.0mg/L-2.0mg/L) NAA)65mg/L效果最好,不定芽在MS0上可正常生根,发育成完整植株。     

药用植物金荞麦愈伤组织诱导与植株再生

目前转基因技术已成为植物定向遗传改良的重要手段,而建立稳定高频的离体再生系统是实现遗传转化的基础和前提.本试验以25 ～30 d苗龄的金养麦(Fagopyrum dibotrys)无菌苗叶片、茎节间、叶柄为外植体进行愈伤组织诱导与植株再生研究.结果表明:叶片在MS +2,4-D 4.0 mg/L +6-BA 1.0 mg/L培养基上愈伤组织诱导率达到89％.茎节间在MS +2,4-D 2.0 mg/L +6-BA 2.0 mg/L培养基上愈伤组织诱导率为87％.叶柄在MS +2,4-D 4.0 mg/L +6-BA 2.0 mg/L+ IBA 0.2 mg/L培养基上的最高诱导率仅为54％.愈伤组织分化不定芽的适宜培养基为MS +6- BA2.0 mg/L +TDZ0.2 mg/L +NAA0.2 mg/L;金荞麦不定芽在1/2 MS +NAA 0.5 mg/L的培养基上生根效果最好.组培再生植株经炼苗后移栽到田间成活率达80％以上,且生长表现正常.高频完整再生体系的建立,为金荞麦进一步遗传操作和扩大药材资源奠定了基础.     

毛白杨非转化组培根及Ri质粒转化植株的根切段在培养中分化的比较(简报)

毛白杨(Populus tomentosa)是我国特有的树种,适应性强,枝叶茂盛,防护性能好,且材质轻软,纹理细致。既是重要的速生用材树种,又是防护林和行道绿化的重要树种,它也是造纸、火柴、纤维工业的重要原料。虽然毛白杨能通过扦插等技术进行繁殖,但毛白杨扦插时生根比较困难。通过导入外源的与激素合成有关的基因来调节再生植株在组织培养中的分化在草本植物中已有不少报道,见许智宏等。本研究试图通过比较正常植株与发根农杆菌Ri质粒转化的再生植株的根切段在培养中分化的差异,以期能建立一种有效的毛白杨的遗传转化系统。     

青杨的遗传分化

分析了10个省市自治区的30个群体的青杨(Populus cathayana Rehd.),共169株,用RAPD方法分析群体间和群体内的DNA多态性。结果显示群体间的DNA多态度远高于群体内的,而且东部群体与西部群体间存在较大的遗传差异,相邻产地之间的遗传差异相对较小。聚类分析结果表明,东、西部群体已出现明显分化。整个聚类图与青杨的地理分布区大致相对应。西部群体内DNA多态性比东部群体高,因此西部群体在研究青杨的起源与演化中将显得更为重要。按照多样性中心与起源中心的关系,青杨可能起源于我国西北部,逐渐向东扩散,形成现代分布格局。     

一种以黄化法为基础提高毛白杨快速繁殖效率的新方法

本文报道以黄化法为基础的毛白杨(Populus tomentosa)快速繁殖方法的初步研究结果。它包括1.用低浓度的先锋霉素(cefotaxime 2.5ppm)抑制快速繁殖过程中的细菌污染和用低浓度 HgCl_2灭菌的方法恢复经长期继代培养后被污染的试管植物;2.用极低浓度的 TDZ(thidiazuron 0.005ppm)替代价格昂贵的玉米素(zeatin,Z),促进毛白杨叶外植体上芽的分化和增殖;3.用黄化的方法促使芽的伸长以增加可被用于生根的嫩枝的数量。用这种方法可在一个100ml 的三角瓶中得到约50个黄化的嫩枝,比在光下培养得到的嫩枝多3—5倍;4.黄化嫩枝直接扦插或经光下转绿后扦插于经灭菌的基质中,生根率均可达到90%以上。这一方法可以节省人力和能耗,提高培养室的利用效率,大幅度地提高快速繁殖的效率。     

丽江山慈姑愈伤组织的诱导和植株再生的研究

本文初次报道了含秋水仙碱植物——丽江山慈姑(Iphigenia indica Knuth)愈伤组织的诱导和植株再生的研究工作。从而解决了这种临危稀少植物的繁殖再生问题。丽江山慈姑愈伤组织的诱导需在弱光下进行,苗的分化需在较强的光下培养。NAA既影响愈伤组织的生长,又影响出苗。诱导愈伤组织的pH值为5.8,诱导苗的pH值为5.4。     

陆地棉胚性愈伤组织原生质体的制备,培养及植株再生

以陆地棉栽培品种“鲁棉６号”下胚轴的胚性愈伤组织为材料,制备并培养原生质体。采用继代培养７￣９ｄ、活力旺盛的胚性愈伤组织,在１％纤维素酶、１％果胶酶、０．７ｍｍｏｌ／Ｌ ＫＨ２ＰＯ４、２．５ｍｍｏｌ／Ｌ Ｃａ＾２＋、０．５ｍｏｌ／Ｌ甘露醇、ｐＨ５．８、３０℃的条件下,具活力的原生质体得率最高。经分离纯化后,原生质体在含有０．４５ｍｏｌ／Ｌ葡萄糖的Ｋ３无机盐、ＮＴ有机物并附加０．１ｍｇ／Ｌ,２,４－     

小麦叶片愈伤组织及其再生植株的诱导

小麦幼苗基部外植体在补加２,４－Ｄ的ＭＳ、Ｎ６、ＢＡ１（３）培养基上均可诱导出愈伤组织,２,４－Ｄ的最适浓度为２．０ｍｇ／Ｌ;愈伤组织的增殖速度与切段部位及基本培养基有关,其中在以ＭＳ补加２．０ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ的培养基上诱导出的愈伤组织增长速度最快;最后讨论了小麦愈伤组织幼苗诱导率低的原因及可能解决的方法。     

软枣猕猴桃试管苗叶片和茎段的愈伤组织诱导及植株再生

从软枣猕猴桃试管苗茎段和叶片诱导出愈伤组织并得到再生植株。茎段外植体容易愈伤化,但其愈伤组织难以分化,叶片外植体不易愈伤化,但其愈伤组织容易分化。ＭＳ培养基分别附加ＢＡＰ、Ｋｉｎ、ＴＤＺ或ＣＰＰＵ都不能诱导芽的分化,而ＭＳ附加玉米素能有效地诱导芽分化,其中以２．０ｍｇ／Ｌ玉米素效果最好。     

杜仲叶片和叶柄愈伤组织的诱导和植株再生

本实验以5~6年生杜仲叶片及叶柄为外植体,研究了杜仲愈伤组织诱导及植株再生的方法。结果表明:接种于补加NAA(2.0~4.0 mg/L)或BA(1.0 mg/L)+NAA(2.0~4.0mg/L)的MS培养基上的叶片和叶柄,经21~28d培养后,脱分化形成绿色或浅绿色致密愈伤组织,频率达到70%以上。绿色致密愈伤组织在补加BA(2.25~2.75 mg/L)+NAA(0.15 mg/L)的MS培养基上经过1~2次继代之后,即出现茎芽分化,频率在15%以上,只是其中许多都是畸形苗,正常苗频率较低。此问题尚在研究之中。选择生长健壮的再生植株,切除其基部愈伤组织,然后将切口浸泡在250mg/L无菌ABT生根粉溶液中3~5sec,再插入1/4强度无激素MS培养基中, 2~3周后,在苗基部长出1~3条白色粗壮的不定根,生根频率在60%以上。     

魔芋属植物愈伤组织的诱导和再生植株的研究

用云南魔芋(Amorphophallus yunnanensis)、白魔芋(A.albus)、花魔芋(A.revieri)和勐海魔芋(A.bannaensis)等四个种的叶、鳞叶、花序、匍匐茎、块茎和茎尖为外植体,诱导产生小植物。可通过三种途径获得魔芋再生植株:(1)由外植体诱导愈伤组织,再分化小植株:在添加0.5—1.0mg/1 NAA和BA或KT、ZT的MS培养基上,高频率地诱导瘤状愈伤组织形成,发现NAA对愈伤组织的诱导是必不可少的,而细胞分裂素与之组合,促进瘤状愈伤组织的形成和发育,在无激素或低浓度激素的培养基上,瘤状愈伤组织分化出小植物;(2)茎尖和鳞叶、块茎切块培养,诱导形成多芽苗,产生再生植株;(3)块茎切块诱导产生微型小块茎,然后分化芽和根,长成小植物。本研究为魔芋的快速繁殖提供了新的手段。     

毛白杨叶外植体的遗传转化

参考 Horsch 等(1985)建立的叶圆片转化法,建立了一个适合于杨树的遗传转化系统。本文所用的根癌农杆菌菌株含有一个经过改建的 Ti 质粒,这个质粒载有 T-DNA 的4号基因和 CAT 基因。利用毛白杨(Popular tomentosa)的叶外植体经该菌株感染后,培养3-4个星期后,在没有外源激素的 MS_u 培养基上,从叶外植体的边缘处再生出一些不正常的苗。这种苗呈典型的畸胎芽,把这种苗从外植体上切下并转到生根培养基上,在苗的基部生成大量的愈伤组织,但并不形成根,同时在愈伤组织上产生大量的芽。气相色谱法测定内源细胞分裂素的结果表明,转化苗的异戊烯基腺苷的含量是正常苗的14倍。纸电泳结果表明,转化苗均含有特异的胭脂碱。在加有60-100μg/ml 氯霉素的培养基上,转化苗可以正常生长,而未转化的苗在培养约40天后变白死去。用酚类物质水杨酸预处理农杆菌有助于提高转化频率。