观察酵母菌子囊孢子及其形成过程的简易方法

以美蓝作染色亮剂,采用单染色的水浸片法观察酵母菌的子囊孢子,方法简便;观察子囊孢子形成过程中处于不同阶段的细胞形态,效果良好;可使生孢率的计算得以改进。     

酿酒酵母菌耐热性快速鉴别的方法研究

目的:找出快速有效的鉴别酵母耐热性的方法。方法:酿酒酵母菌经过不同温度热激处理后,用美兰染色计数、稀释平板计数、发酵活力直接测定法和浊度测定法对酿酒酵母菌耐热性进行了测定,同时对酵母菌的形态也进行了观察。结果:表明浊度测定的结果和发酵活力直接测定法测定的结果关系没有相关性,不便用来测定酵母菌的活力。用美兰染色计数、稀释平板计数和发酵活力直接测定法所得的结果有同样的趋势,通过相关性分析,这些方法都可以表示酵母菌的活力,但各有其特点。其中,美兰染色计数是鉴别酵母耐热性的快速有效的方法。     

健康动物肠道正常菌群的分离与鉴定

本文采用多种选择培养基,从健康动物猪、鸿、兔、鱼肠道中分离培养出２２株正常菌群,经过菌落形状、革兰染色、美兰染色镜检及生化反应,初步鉴定为链球菌８株、孔杆菌２株、双歧杆菌４株、芽胞杆菌５林、酵母菌３株。此为优选菌种、制备微囊及生产生态制剂等奠定了良好的基础．     

伊犁黑蜂蜂胶对不同生长状态白假丝酵母菌抑菌作用的体外研究

目的探究伊犁黑蜂蜂胶对白假丝酵母菌游离状态及其生物膜状态的影响。方法采用NCCLS M27-A2酵母微量稀释法结合平板法测定蜂胶对游离状态下白假丝酵母菌的最小抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC);玻片法在体外构建白假丝酵母菌生物膜模型,采用MTT法检测蜂胶对白假丝酵母菌生物膜状态下的最低生物膜清除浓度(MBEC)及抑制作用;激光共聚焦显微镜(CLSM)观察不同浓度蜂胶醇提取物对同一时间白假丝酵母菌生物膜的抑菌效果,并进行红蓝荧光染色定量分析。结果伊犁黑蜂蜂胶对浮游白假丝酵母菌的MIC为4mg/mL,MBC为8mg/mL;伊犁黑蜂蜂胶对生物膜状态下白假丝酵母菌的MBEC为16mg/mL,随着药物浓度的增加抑菌性逐渐增大,差异具有统计学意义(P0.05);CLSM观察,伊犁黑蜂蜂胶作用于白假丝酵母菌生物膜后可使生物膜内活菌比例降低,生物膜活性减弱,生物膜内实验菌死亡率随蜂胶浓度增加呈上升趋势,与阴性对照组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论伊犁黑蜂蜂胶在体外对不同状态下的白假丝酵母菌均起到了明显的抑制作用。     

酵母菌原生质体融合研究进展

自从由酵母菌制备分离原生质体的首篇报道问世以来,研究者们对酵母菌原生质体的制备、分离、再生、融合等课题进行了系统的研究。近年来又利用这一技术进行了酵母菌的转化;种内、种间和属间融合;核、线粒体等转移的研究;业已取得可喜的结果,并探     

健康人群口腔酵母菌的分离及菌种分布

目的调查健康人群口腔酵母菌的分布。方法将来源于健康人的口腔拭子接种于改良SDA培养基,37℃培养14d,分到的酵母菌通过菌落形态、革兰染色作初步鉴定．芽管形成试验、厚膜孢子生成及假菌丝产生试验、YBC酵母鉴定卡作菌种鉴定。结果酵母菌在健康人口腔中总分离率为8．78％(86／979),其中较多的为白色假丝酵母菌37株,占43．02％,近平滑假丝酵母菌和季也蒙假丝酵母菌各9株,各占10．47％,葡萄牙假丝酵母菌6株,占6．98％,其他25株。结论健康人口腔中有多种条件致病酵母菌的寄生。     

大黄素对白假丝酵母菌抑菌作用的体外实验研究

目的研究大黄素对白假丝酵母菌的活性及其产生的生物膜的抑菌作用。方法将滴有不同浓度的大黄素药液的滤纸片放在长有白假丝酵母菌的固体培养基上,观察抑菌效果的区别。在体外建立白假丝酵母菌生物膜模型,用浓度为2.500、1.250、0.625、0.312和0.165mg/mL的大黄素溶液分别作用于已建立好的白假丝酵母菌生物膜模型,观察5个浓度的大黄素对白假丝酵母菌的抑菌效果。利用激光共聚焦显微镜(CLSM)观察各个浓度下的生物膜。结果随着大黄素浓度的增加,抑菌环直径增大,抑菌率升高。CLSM观察:大黄素作用于白假丝酵母菌生物膜,使生物膜活性降低。结论大黄素对白假丝酵母菌及其生物膜有抑制作用。     

三株酵母菌子囊孢子形成条件及染色方法的比较

本文对八孢裂殖酵母、酿酒酵母和异常汉逊酵母等三株酵母菌的子囊孢子形成条件及染色方法进行了对比试验。结果认为,八孢裂殖酵母在麦芽汁琼脂培养基、马铃薯琼脂培养基和醋酸钠琼脂培养基上均能产孢,而且在接种8小时以后就能产生孢子。酿酒酵母和异常汉逊酵母只在醋酸钠琼脂培养基上产孢,而且在接种24小时以后才能产生孢子。三种酵母菌的子囊孢子用碘液浸片法染色后着色效果不同,对八孢裂殖酵母的孢子染色是成功的,对酿酒酵母和异常汉逊酵母则不理想。     

大口黑鲈外周血细胞显微结构、细胞化学特征及吞噬作用的研究

通过对大口黑鲈外周血细胞的显微结构及细胞化学染色特征和吞噬作用的研究,为大口黑鲈免疫学研究积累资料。Wright's染色表明:大口黑鲈外周血细胞分为红细胞、粒细胞、单核细胞、淋巴细胞和血栓细胞,其中粒细胞又分为Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型。外周血中成熟红细胞最多,占血细胞总数的98.12%,其次为淋巴细胞和血栓细胞,占白细胞中的比例分别为60.92%和22.99%;单核细胞最大,大小为(9.89±0.70)μm×(8.72±0.68)μm;小淋巴细胞最小,大小为(3.88±0.46)μm×(3.48±0.40)μm。大口黑鲈外周血细胞的免疫相关酶ACP、AKP、PO、POX及细胞成分PAS反应、SBB染色的结果表明,所有红细胞的细胞化学染色均呈阴性,不同白细胞的细胞化学染色特征存在差异。其中所有白细胞的AKP、POX染色均呈阴性,PAS反应均呈阳性,除Ⅱ型粒细胞外所有白细胞的PO、ACP染色均呈阳性,除单核细胞外所有白细胞的SBB染色均呈阳性。大口黑鲈外周血细胞吞噬酵母菌的实验表明,红细胞能够吞噬酵母菌,其吞噬率为(15.70±1.07)%,也观察到部分白细胞吞噬酵母的现象。PO和ACP及脂类和糖类可能是大口黑鲈外周血细胞吞噬作用的重要酶类和能量来源。     

海南岛4市县人群口腔假丝酵母菌分布情况的初步调查

目的：调查海南岛海口、三亚市、五指山市和保亭县四市县人群口腔假丝酵母菌的分布情况,为口腔假丝酵母菌分子生物学和遗传学特点研究提供基础资料。方法：分离出的假丝酵母菌经过菌落特征、制片乳酸酚棉蓝染色、芽管形成试验、厚膜孢子形成试验等初步鉴定,并用科玛嘉显色培养基培养确定。结果：海口、三亚市、五指山市和保亭县人群口腔假丝酵母菌总分离率为25．23％．其中白假丝酵母菌占54．48％,光滑假丝酵母菌占14．04％,热带假丝酵母菌占11．06％,克柔假丝酵母菌占9．36％。住院病人和健康人口腔假丝酵母菌的分离率分别为39．95％和11．61％,差异有统计学意义（P〈0．01）,结论：海南地区人群口腔假丝酵母菌的总分离率高于国内其它省份,分离出的假丝酵母菌以白假丝酵母菌为首位,病人口腔假丝酵母菌分离率明显高于健康人。     

发面是观察酵母菌的好材料

用发面观察酵母菌的方法是：取少量的发面放入小烧杯内,倒入适量的温开水,搅拌均匀,静放５ｍｉｎ左右,用吸管从液面上吸取,滴一滴在载玻片上,盖上盖玻片。先用低倍镜观察,然后换高倍镜,就能看到一个个椭圆形的酵母菌,有的酵母菌上长出各种大小不同的突起,这就是酵母菌在进行出芽繁殖。如果在盖玻片的一边加一滴碘液,而在另一边放一小块吸水纸,就能看到酵母菌细胞的内部结构。若要培养酵母菌,可在供观察酵母菌用的小烧杯内加入适量面粉,搅拌成面团（水少了可加入适量的冷开水）,盖上培养皿盖,放在温暖的地方,１ｄ（天）左右…     

灵芝孢子粉在真菌性肠炎所致腹泻中的应用

目的了解真菌性肠炎所致腹泻的菌种分布特点,探索灵芝孢子粉对其的治疗效果。方法将110例腹泻患者的粪便直接涂片革兰染色镜检。查见较多真菌孢子和菌丝者进行分离鉴定,并采用灵芝孢子粉治疗。结果110例腹泻患者中查见真菌孢子及菌丝者62例;真菌分布白色假丝酵母菌占56．45％,克柔假丝酵母菌占16．13％,热带假丝酵母菌占14．52％,近平滑假丝酵母菌占6．45％,季也蒙假丝酵母菌占6．45％,用灵芝孢子粉治疗真菌性肠炎所致腹泻21d后有效率为96．77％。结论真菌性肠炎所致腹泻以白色假丝酵母菌感染为主,应用灵芝孢子粉治疗方法简单、安全、有效。     

穿心莲内酯对白假丝酵母菌菌丝的影响

目的探讨中药有效成分穿心莲内酯（Andrographolide,AG）对白假丝酵母菌菌丝的影响。方法利用稀释涂布法观察AG对固体培养基上白假丝酵母菌菌落形态的影响;倒置显微镜观察AG对白假丝酵母菌芽管及菌丝形态的影响;采用xTT还原法评价AG对白假丝酵母菌菌丝活性的影响;采用实时荧光定量PCR（qRT—PCR）检测白假丝酵母菌菌丝形成相关基因SUN41、CSHl以及CaPDE2表达量变化。结果AG能影响白假丝酵母菌菌落的形态;倒置显微镜观察表明AG能够抑制白假丝酵母菌菌丝及芽管的形成;qRT-PCR检测显示AG能使SUN41和CSHl基因表达下调和使CaPDE2上调。结论穿心莲内酯可能通过影响SUN41、CSHl与CaPDE2基因的表达而抑制白假丝酵母菌菌丝的形成。     

2种X染色质体标本片制备方法的探讨

探讨2种较好的制备人类X染色质体标本的方法。取正常女性口腔黏膜细胞涂片,分别采用硫堇染色和甲苯胺蓝染色,油镜下观察。硫堇染色法中,染液配制耗时长,容易受温度影响,染液易结晶,且染色标本片易出现硫堇结晶形成的杂质从而影响观察,染色标本片杂质较多,X染色质体检出率为20.3%~42.2%;甲苯胺蓝染色法中,染液配制简单,耗时短,且不易受环境温度影响,染色标本片镜下标本清晰,杂质少,X染色质体检出率为19.8%~43.6%。甲苯胺蓝染液染色观察X染色质体耗时短,成本低,操作简单,优于硫堇染色法。     

不同生理阶段、避孕方式和感染状态对阴道乳酸杆菌影响的研究

目的调查不同生理阶段、避孕方式、感染因素对女性阴道乳酸杆菌数量的影响。方法收集南昌大学第二附院妇产科就诊的176例妇女的主要资料并采用qPCR方法定量分析阴道分泌物中乳酸杆菌数量,分泌物涂片和革兰染色后在显微镜下观察记录其感染状态。结果非绝经期组不同年龄段乳酸杆菌数量差异无统计学意义,绝经期组乳酸杆菌数量减少;不同避孕方式组的阴道乳酸杆菌数量差异无统计学意义;细菌性阴道病和假丝酵母菌感染组阴道乳酸杆菌数量较正常组差异均有统计学意义。结论生理阶段、细菌性阴道病和假丝酵母菌感染是影响女性阴道乳酸杆菌数量的主要因素。     

活性玫红染料对组织切片染色的观察

[目的]找到苏木精和伊红以外其它染色效果良好的组织切片染色剂。[方法]应用27种直接服装染料对小鼠肝脏组织切片进行染色效果观察。发现其中的活性玫红染料染色能够清晰显示中央静脉和肝细胞核等结构。再用活性玫红染料对小鼠心脏、肾脏、睾丸和肺组织切片进行染色效果观察,同时用伊红进行染色对比观察。[结果]活性玫红染料用蒸馏水溶解后即可使用,配制简单,在5 min之内完成。对心脏、肾脏、睾丸和肺组织切片染色后,肾小囊腔、生精细胞等结构清晰可辨,与HE染色结果类似。心肌横纹也可辨认。活性玫红处理的肝脏、肾脏和睾丸组织切片染色清晰度,高于伊红的染色效果。[结论]找到活性玫红染料这种染色效果良好的红色组织切片染色剂,其制备简单,来源丰富。     

植入了骨修复材料的小型猪腰椎椎体不脱钙病理组织切片制备方法

摘要 目的：建立植入了骨修复材料小型猪腰椎椎体骨组织标本的不脱钙病理组织切片制备方法。方法：将含骨修复材料的腰椎椎体骨组织标本进行分割暴露组织切面,梯度浓度乙醇脱水后经Technovit 7200 VLC光聚树脂浸润,经黄蓝光共同辐照进行光聚合包埋,借助硬组织病理切磨系统制备含骨修复材料不脱钙病理组织切片。结果：结果显示通过上述方法制备的病理组织切片,经苏木精-伊红（HE）染色及甲苯胺蓝染色后光学显微镜下观察能较好地显示骨的各种组织细胞结构,可清晰的观察到骨小梁的走向及连接情况。结论：研究建立了含骨修复材料骨组织标本病理组织切片制备方法,实现了含骨修复材料不脱钙骨组织病理切片的制备,经病理染色后实现了带植入物的组织学观察,为生物材料及医疗器械动物试验研究提供了新的病理检测手段及组织学评价途径。     

龙血素A对白色假丝酵母菌毒力因子ALS3、SAP4作用的体外研究

目的研究龙血素A对白色假丝酵母菌生物膜的抑菌作用,并初步研究龙血素A是否通过影响或干扰白色假丝酵母菌毒力因子的转录和表达实现的。方法建立白色假丝酵母菌生物膜体外模型,MTT法计算龙血素A对白色假丝酵母菌生物膜的抑制率;激光共聚焦观察龙血素A对不同时间白色假丝酵母菌生物膜的抑菌效果;RT-PCR技术检测药物作用下白色假丝酵母菌毒力因子表达水平的变化。结果随着药物浓度的增加,龙血素A对白色假丝酵母菌生物膜的抑菌作用增强。激光共聚焦观察显示龙血素A使白色假丝酵母菌生物膜内活菌死菌比例下降。RT-PCR结果表明龙血素A抑制了毒力因ALS3、SAP4的表达。结论龙血素A对白色假丝酵母菌生物膜有抑制作用,并在毒力因子ALS3、SAP4的表达过程中起到明显的抑制作用。     

提高酵母菌原生质体制备与再生的方法研究

研究了提高酵母菌原生质体制备与再生率的技术路线:选用酵母菌对数生长中期,约培养9～12h(A600为0.5～1.0)的细胞,采用1.5%蜗牛酶和1.0%纤维素酶的混合酶液水解去除细胞壁,经特定条件,可获得98%的原生质体制备率,通过分离到含有0.01mol/LCaCl2和15%蔗糖的YEPDS再生培养基上培养,再生率可达95%以上。     

防霉剂P作用于皮肤癣菌的电镜观察

前人曾报道天然植物香原料香叶油制备的防霉剂P对36种霉菌、酵母菌具有不同程度的抑制作用;在光学显微镜下观察了菌体生长繁殖及细胞学的变化。众所周知,真菌是一大类缺乏叶绿素的真核有机体,除少数外,都具有细胞壁。超显微结构的研究证明,它们的原生质体与其他真核生物结构相同,细胞核具有核膜,核