卫星搭载亚麻后代中PEG和NaCl

把空间生物学和细胞工程相结合,通过组织培养技术对其离体筛选,得到抗1.2% NaCl和35% PEG的愈伤组织。将所得抗性系愈伤组织在2.0 mg/L 6-苄基氨基嘌呤、0.5 mg/L吲哚乙酸的MS培养基上分化得到完整的植株。抗性系能在胁迫条件下保持高的生长速度和高效的脯氨酸合成能力。表明空间诱变与组织培养相结合有望可成为筛选抗胁迫变异系的有效途径。     

红豆草耐盐愈伤组织的筛选及植株再生

将红豆草种子在含１．２％ＮａＣｌ的ＭＳ培养基上萌发以消除盐敏感的幼苗,把存活的幼苗下胚轴切段在含１ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ、０．５ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ及１．２％ＮａＣｌ的ＭＳ培养基上诱导愈伤组织,通过连续筛选得到可耐受１．８％ＮａＣｌ的愈伤组织,在有０．２ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ和１ｍｇ／Ｌ ＩＡＡ存在下该愈伤组织分化出芽,待幼,待幼苗长至３ｃｍ左右时转至含２ｍｇ／ＬＮＡＡ和或ＩＢＡ的１／２ＭＳ培养基上生根。对对照     

药用植物红芽大戟的组织培养

针对药用植物红芽大戟结实率和种子萌发率较低的情况,探讨了利用组织培养方法解决生产中繁殖的问题。结果表明,在茎、叶和芽３种外植体中,芽的出愈率最高,愈伤组织褐化率低,生长最好,且易被诱导出不定芽,是较理想的快速繁殖材料;而茎和叶的愈伤组织褐化率高,难以诱导出不定芽。较适宜的诱导愈伤组织的激素组合是６－ＢＡ２．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．４ｍｇ／Ｌ,诱导不定芽的适宜激素组合是６－ＢＡ５．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．０５ｍｇ／Ｌ,根的诱导则在１／２ＭＳ＋ＮＡＡ０．２＋庶糖１．５％＋琼脂０．８％培养基上进行     

中麻黄悬浮培养体系的建立

本文用中麻黄无菌苗为外植体,其切段培养在附加２ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ和０．５ｍｇ／Ｌ　６　ＢＡ的ＭＳ培养基上,全部脱分化形成白色疏松愈伤组织。愈伤组织继代培养于ＭＳ＋０．５ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ＋０．２ｍｇ／Ｌ６ＢＡ＋０．２ｍｇ／Ｌ　ＮＡＡ＋４％蔗糖的培养某上。以继代培养愈伤组织为材料进行悬浮培养,培养基为附加０．２ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ＋０．１ｍｇ／Ｌ６ＢＡ＋０．１ｍｇ／ＬＮＡＡ＋２％蔗糖的ＭＳ液体培养基,得到分散性好,细胞形状接近圆形,细胞大小均一,细胞团多由２－３０个细胞组成的悬浮培养体系。第三代悬浮培养细胞增长率为０．３５ｇ·ｆｗ／２０ｍｌ·ｄ,细胞有丝分裂指数为１１．２％。条件培养和高密度接种可缩短延迟期,条件培养不能提高分裂指数,１ｇ／１０ｍｌ接种密度可使分裂指数提高至２１．２％。     

大叶紫花苜蓿愈伤组织原生质体再生植株

大叶紫花苜蓿下胚轴诱导的愈伤组织在继代培养基上生长快速,易于分散。继代第１２ｄ的愈伤组织原生质体的得率为６．５×１０７／ｇ鲜重。原生质体培养基为ＳＨ基本培养基,含有１．０ｍｇ／Ｌ２,４－０、０．５ｍｇ／ＬＢＡ、２．０ｇ／ＬＣＨ、２％蔗糖、６％葡萄糖、５ｍｍｏｌ／ＬＭＥＳ,培养密度为１．０×１０５／ｍＬ。培养至第１２ｄ时的原生质体再生细胞植板率为３．７％。由原生质体形成的小愈伤组织在含２．０ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ的ＭＳ固体培养基上大量增殖。增殖的愈伤组织转移至２．０ｍｇ／Ｌ２－ｉｐ＋０．１ｍｇ／ＬＮＡＡ的Ｂ５培养基上,形成体细胞胚并发育成完整植株。     

百脉根愈伤组织原生质体再生植株

百脉根无菌苗幼茎在含２．０ｍｇ／Ｌ－,２,４－Ｄ,０．１ｍｇ／Ｌ２－ｉｐ的ＭＳ培养基上诱导和继代培养愈伤组织。选取绿色松散颗粒愈伤组织分离原生质体。原生质体培养在调整珠ＫＭ８Ｐ,Ｖ－ＫＭ,ＭＳ和ＳＨ培养基上「含３００ｍｇ／Ｌ,ＣＨ,２％ＣＷ,２％蔗糖,６％葡萄糖,２．０ｍｇ／Ｌ,２,４－Ｄ,０．５ｍｇｇ／Ｌ,ＢＡ,５ｍｍｏｌ／Ｌ ＭＥＳ」,原生质体再生细胞均能分裂,并形成小愈伤组织,但以ＫＭ８０为     

杜仲愈伤组织超低温保存的研究

采用单因子比较、正交设计和均匀设计法,分别考察影响杜仲愈伤组织诱导、生长及其超低温保存的因素。试验表明：Ｂ５＋ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋６—ＢＡ１ｍｇ／Ｌ有利于意伤组织诱导。ＭＳ＋２．４—Ｄ３ｍｇ／Ｌ＋６—ＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ则有利于愈伤组织快速生长。超低温保存的最佳材料是２周龄的愈伤组织。愈伤组织超低温保存的较好冷冻保护剂是１２．５％Ｇｌｙ＋７．５％ＰＥＧ＋２．５ｇ／ＬＬＨ。     

枸杞髓组织离体培养及高频率植株再生的研究

枸杞髓组织在４种ＭＳ培养基上都能诱导出愈伤组织,诱导率５３．７％～１００％。在培养基ＭＳ＋６－ＢＡ０．１ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ获得的愈伤组织,呈颗粒状,分散性能好,胚性细胞多．将其转移到ＭＳ＋６－ＢＡ０．５ｍｍ／Ｌ＋ＮＡＡ０．０１ｍｇ／Ｌ的分化培养基上获得大量绿色小芽,小芽在ＭＳ＋６－ＢＡ０．２ｍｇ／Ｌ的培养基上得到快速繁殖,繁殖系数５０～１５０株／芽·月。丛生芽在ＭＳ＋ＮＡＡ０．２ｔｍｇ／Ｌ的培养基上形成完整植株     

蛇床幼茎离体培养中体细胞胚胎形成的观察

蛇床幼茎外植体经诱导产生了愈伤组织。在ＭＳ＋２,４－Ｄ,０．２ｍｇ／Ｌ＋ＺＴ０．４ｍｇ／Ｌ培养基中,愈伤组织转变成胚性愈伤组织。转入ＭＳ＋ＮＡＡ０．２ｍｇ／Ｌ＋ＺＴ０．８ｍｇ／Ｌ培养基以后,胚性愈伤组织分化出体细胞胚胎。体细胞胚胎在ＭＳ＋ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ培养基中可直接发育成为完整植析。显微观察表明,体细胞胚胎产生于愈伤组织的表层细胞或内部细胞。在鱼雷胚期已有螺纹导管的分化。子叶期的维管组织从两     

胡杨离体器官发生及试管无性系的建立

研究了离体条件下胡杨（Ｐｏｐｕｌｕｓ　ｅｕｐｈｒａｔｉｃａ　Ｏｌｉｖｅｒ）茎段、叶片及愈伤组织的器官发生和植株再生技术。离体培养以ＭＳ为基本培养基并附加４０ｍｇ／Ｌ腺嘌呤和５００ｍｇ／Ｌ水解乳蛋白。离体叶片和茎段在ＢＡ为０．５ｍｇ／Ｌ和ＮＡＡ为０．５ｍｇ／Ｌ的培养基上诱导产生愈伤组织,并在含０．２５ｍｇ／ＬＢＡ和０．５ｍｇ／ＬＮＡＡ的培养基上继代增殖。ＢＡ为０．５ｍｇ／Ｌ和ＮＡＡ为０．１ｍｇ／Ｌ可诱导叶片和愈伤组织发生不定芽,诱导频率分别为１００％和８２．９％,对于茎段,ＢＡ和ＮＡＡ分别为０．１ｍｇ／Ｌ和０．０１ｍｇ／Ｌ时诱导不定芽频率可达８３％。试管苗在大量元素减半并附加０．０１５ｍｇ／ＬＮＡＡ的ＭＳ培养基上诱导生根,生根率达８６．２％。     

卫星搭载红豆草后代中耐盐细胞系的筛选及鉴定

将红豆草种子搭载于940703返地卫星,经田间繁殖得后代种子,先将种子在1.5%NaCl上筛选、并在该盐浓度下诱导愈伤组织和筛选,在无盐培养基上恢复生长后再在1.2%NaCl上筛选得到耐盐变异系.变异系具有正常的分化能力并表现出对PEG胁迫的交叉抗性.变异系在无胁迫条件下脯氨酸含量较低但在有盐胁迫时具有高效积累脯氨酸的能力.后者可能对红豆草耐盐系更为重要.变异系中脯氨酸的这种合成机理可能是由于一些基因在调控中对水的敏感性改变引起.梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳表明耐盐系的SOD和酯酶分别出现175kD和75kD的新形式.说明空间诱变和组织培养相结合可以筛选耐盐变异系.     

农杆菌转化的小冠花发状根的诱导及其植株再生

利用野生型发根农杆菌15834菌株感染小冠花15日龄无菌苗子叶和下胚轴切段,建立了高效的发状根培养及其体细胞胚胎发生再生体系。发状根可直接从受伤的外植体表面产生,也能在外植体诱导的愈伤组织上发生,在无外源激素的MS固体和液体培养基上,转化根能自主生长,表现出典型的发根特征。用适宜浓度的乙酰丁香酮处理对数生长期的农杆菌菌液2h,感染预培养2d的子叶获得了最高的转化频率(87.4%)。在附加0.2mgL2,4_D,0.5mgLNAA和0.5mgLKT的MS培养基上,发状根能100%形成胚性愈伤组织,并于含0.5mgLKT,0.2mgLIBA和300mgL脯氨酸的MS培养基上顺序经过体细胞胚胎发育的各个典型时期,转换成完整植株。再生植株除具有发达的侧根外,其它形态特征与未转化植株未见明显的差异,但在获得的5个转化克隆中,其中1个的发状根及其再生植株叶片中有毒物质3_硝基丙酸的含量显著下降,分别为未转化对照的57.68%和58.17%。冠瘿碱纸电泳检测和rolB基因PCR扩增检测均证明农杆菌Ri质粒上的T_DNA已经整合到小冠花转化细胞的基因组中。     

草木樨状黄芪高频离体再生体系的建立

以草木樨状黄芪无菌苗茎切段为材料,在含１－２mg/L2,4-D和０－０．５mg/L６ＢＡ的MS培养基上培养获得大量愈伤组织,愈伤组织诱导率在９５％以上,愈伤组织在附加０．２mg/LＫＴ,１mg/L６ＢＡ,０或０．５mg/LＮＡＡ,５００mg/LＣＨ 和２００mg/L ＹＥ的ＭＳ培养基上诱导丛生芽,并进而发育成苗。苗的分化频率为１００％。分化苗或其茎的切段在不国源植物激素的１／２ＭＳ培养基上可出现根的分化,分化频率达９０％以上,再生植株经炼苗后移栽成活率达８０％以上。     

花榈木组培苗茎段低温胁迫培养及耐冷性诱导

以花榈木组培苗茎段为试材,在低温胁迫条件下进行耐冷性愈伤组织诱导培养。结果表明,5℃是花榈木茎段低温胁迫培养及耐冷性诱导的最适温度。经过5℃低温胁迫培养获得的耐冷性愈伤组织在分化培养基MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.25 mg/L上的分化率达70.0%,且再生植株的低温伤害率明显低于对照。     

深山含笑的组织培养和快速繁殖

组织培养深山含笑的实验结果表明：利用休眠芽和种子萌发时实生苗的上胚轴及下胚轴为外植体均能诱导出愈伤组织和不定芽,其中无菌实生苗的上胚轴最易诱导出不定芽,无菌实生苗的下胚轴最易诱导出愈伤组织。外体植体在ＭＳ＋１．０－２．０ｍｇ Ｌ＾－１ ２,４－Ｄ培养基上只产生愈伤组织;在ＭＳ＋３．０ｍｇ Ｌ＾－１ ＢＡ＋０．２ｍｇ Ｌ＾－１ ＮＡＡ培养基上产生较多的不定芽和较多的愈伤组织;在ＭＳ＋２．０ｍｇ Ｌ＾     

Selection of salt tolerant plants of Nicotiana tabacum L. through in vitro and its biochemical characterization

Sodium chloride tolerant organogenic callus lines of Nicotiana tabacum were developed in vitro on Murashige and Skoog [16] medium supplemented with BA, IAA and different concentration of NaCl. The maximum shoot bud regeneration was achieved from both tolerant and non-tolerant calluses on MS medium supplemented with 1.0 mg/l BA, 0.1 mg/l IAA with or without NaCl within 4 weeks of culture. Standard growth parameters such as fresh weight and dry weight of organogenic callus, growth tolerant index and enzyme activity (peroxidase and catalase) were used as indicators of salt tolerance. The growth tolerance index in the 4-week after the beginning of treatments yielded significant differences among the non-tolerant and tolerant organogenic callus lines. The regenerated shoots were rooted on half-strength MS basal salts supplemented with 2% sucrose but devoid of growth regulator. The regenerated plants from tolerant callus lines were capable of growing in vitro in presence of 175 mM NaCl. SDS-PAGE profile showed that the progenies derived from tolerant sources were tolerant to salt. This investigation may help in the selection and characterization of salt tolerance in plant improvement programme.     

冬凌草离体培养体系的建立及主要次生代谢产物的测定

以冬凌草叶片为外植体,研究不同浓度激素组合对冬凌草愈伤组织诱导及植株再生的影响,并对不同外植体(茎、叶)诱导愈伤、芽的分化能力及再生植株内主要次生代谢产物的含量进行了比较研究。结果表明:在MS 2.0 mg/L 6-BA 1.0 mg/L NAA培养基上诱导愈伤组织效果较好;在MS 2.0 mg/L 6-BA的培养基上诱导芽的效果较好;叶片和茎段在愈伤诱导培养基上均能产生大量的愈伤组织,但其再分化能力以茎段最好;再生苗生根培养基以0.3 mg/L IBA最好;以叶为外植体诱导的再生植株中冬凌草甲素、迷迭香酸的含量均高于以茎为外植体诱导的再生植株。